Endah Wahyurini

Rati Riyati
 Laboratorium kultur jaringan sebaiknya
mempunyai pembagian ruangan yang diatur
sedemikian rupa sehingga setiap kegiatan
terpisah satu sama lainnya, tetapi juga saling
berhubungan dan mudah dicapai
 R. Persiapan
 R. Transfer
 R. Kultur
 R. Stok
 R. Mikroskop/ R. Analisa
 Alat-alat lab yang penting
Kegiatan kultur jaringan di dlm lab :
 Persiapan (media, bahan tanam)
 Isolasi dan penanaman
 Inkubasi dan penyimpanan kultur
Ruangan :
ruang persiapan; ruang transfer; ruang kultur;
ruang stok; ruang mikroskop/ ruang analisa
Ukuran tiap ruangan tergantung :
 Alat-alat yg dipergunakan; jumlah
personalia yg terlibat; tujuan
pekerjaan; besarnya unit produksi;
biaya yang tersedia
Sarana dasar :
 Aliran listrik yg cukup, air yg lancar,
gas
Persiapan media :
 Penimbangan bahan, pembuatan media,
penuangan ke wadah kultur, sterilisasi

Persiapan bahan tanaman :

 Pencucian kotoran dari lapangan
pembuangan/pemotongan bagian yg tdk
perlu, perlakuan awal utk mengurangi
sumber kontaminasi
PERSIAPAN EKSPLAN
Peralatan :
 timbangan analitik;
 lemari es (larutan stok, garam2 anorganik,
vitamin dan hormon)
 hot plate & magnetic stirrer
 bunsen burner dengan kaki tiga
 oven; pengukur pH
 autoklaf
 berbagai alat gelas standart ( labu takar, pipet,
erlenmeyer, gelas piala
 pengaduk gelas
 wadah kultur(petridish)
 alat untuk mencuci
 rak-rak pengering
 lemari untuk alat-alat
 bahan kimia serta bahan2 lain (aluminium foil,
kertas timbang, karet gelang dll.)
 alat-alat diseksi (spatula, pisau, scalpel, pinset),
centrifuge, dan
 kereta dorong (cart)
Bebas debu & hewan kecil, tersekat di ruangan lain,


AC
 Pintu penghubung dg ruang stok, ruang
mikroskop, ruang kultur
 Selalu dibersihkan dg desinfectant
Alat-alat :
laminair air flow cabinet;
 dissecting microscope;
cart ;
alat-alat diseksi;
 filter milipore;
hand sprayer untuk alkohol;
 bunsen burner/bactinicerator/lampu alkohol
lemari tempat alat-alat steril
AUTOKLAF
ENT KAS SHAKER
TIMBANGAN
BUNSEN BURNER
ANALITIK
CENTRIFUGE
 Kebersihan dijaga
 Dihindari terlalu banyak orang keluar
masuk
 Botol kultur diatur pd rak-rak terbuka yg
bersusun (jarak lapisan rak 40 – 50 cm)
 Lingkungan fisik diatur agar pertumb
optimal
 Pengaturan temperatur dan cahaya harus
ada
LAMINER AIR FLOW
 Kualitas cahaya
o Cahaya putih
o Lampu fluorescent lbh baik drpd lampu
pijar
o Pd kultur tertentu, campuran cahaya
lampu pijar dan fluorescent memberi
pertumbuhan lebih baik
Panjang penyinaran
o Tergantung jenis tnm & respon yg
diinginkan
o Pengatur : automatic time switch (timer)

Intensitas cahaya
o 100 – 400 ft-c (1000 – 4000 lux)
o Asparagus, gerbera, saxifraga: 1000 ft-c
(multiplikasi tunas);
o 300-1000 ft-c (perakaran tunas)
Alat-alat dlm ruang kultur :
 Rak-rak kultur 3-4 tingkat dg lampu fluorescent
 Timer
 AC
 Mikroskop binokuler
 Alat2 penunjang (kertas milimeter, penggaris,
alat pembesar dsb)
 Shaker
 Tangga-tangga pendek
Persiapan media tumbuh min 3 hari sebelum
diperlukan
Media disimpan di ruang dingin dan gelap

 Berhubungan dg ruang persiapan &

ruang transfer
 Kebersihan harus dijaga
 Hanya ada rak2 untuk media
 Reaksi kultur harus diikuti sejak awal
inisiasi

Alat-alat :
 Mikroskop
 Gelas preparat & penutup
 Microtome
 Laminair Air Flow Cabinet
 Entkas
 Rotating Shaker (Penggojok)
 Autoklaf
 Timbangan Analitik
 Stirrer
 Centrifuge
 Erlenmeyer
 Gelas ukur
 Gelas piala
 Alat pembangkit medan listrik untuk fusi
protoplas
 blender untuk melumatkan bahan organik
untuk membuat media
 refrigerator
 freezer
 homogenizer,
 mikroskop
 kamera
 keranjang botol eksplan dan meja dorong (cart)
 Petridish
 Jarum injeksi
 pipet dan pengaduk
 Pinset dan skalpel
 Lampu spiritus
 boks alkohol dan sprayer
 Tabung reaksi dan corong.
 Dalam biologi, propagule adalah bahan yang
digunakan untuk menyebarkan organisme ke
tahap berikutnya dalam siklus kehidupan
mereka melalui penyebaran. Propagule
biasanya berbeda dalam bentuk dari
organisme orangtua. Wikipedia
 1.Setiap dari berbagai struktur yang dapat menimbulkan
organisme individu baru, terutama bagian tanaman yang
berfungsi sebagai alat reproduksi vegetatif, seperti umbi-
umbian. Bibit dan spora juga propagul.
2. Sebuah memanjang, bibit panah berbentuk berbagai jenis
mangrove yang tumbuh di habitat berawa. Sebuah propagul
berkembang dari benih yang berkecambah sementara masih
melekat pada pohon induknya. Orangtua memasok bibit
dengan nutrisi dan air sampai menjadi berat dan menurun.
Ujung runcing yang menempel di lumpur atau mengapung
pergi untuk menjajah daerah lain.