Mikroskop
cahaya
cermin electric
Jenis mikroskop cahaya paling banyak
digunakan siswa di sekolah karena
harganya paling murah
Kekurangan mikroskop cahaya adalah
penggunaanya sangat bergantung pada
intensitas sinar matahari. Jika kondisi
ruangan gelap, maka mikroskop ini tidak
dapat digunakan. Sekarang berkembang
dengan adanya mikroskop cahaya electric,
dengan sumber cahaya listrik.
Mikroskop stereo ialah untuk melihat
suatu benda/spesimen dengan realistis
gambar tiga dimensi.
Mikroskop stereo ini bisa melihat
keseluruhan permukaan objek dengan
kedalaman perspektif
Microscope Fluorescense
Microscope Fluorescense adalah jenis
mikroskop cahaya yang digunakan untuk
mengamati obyek yang memiliki
karakteristik fluoresensi. Fluoresensi
artinya menyerap cahaya pada panjang
gelombang tertentu dan meng-emisi lainnya.
Bagian sel atau jaringan yang secara alami
tidak memiliki karakteristik fluoresensi
perlu diberi pewarna fluoresensi sebelum
diamati dengan mikroskop
Sel endothelium di bawah mikroskop
flourescense. Nukleus diwarnai biru dengan DAPI,
mikrotubulus ditandai hijau oleh antibodi yang
terikat pada FITC dan filamen aktin diberi label
merah dengan phalloidin yang terikat dengan TRITC
Mikroskop Fase-kontras adalah mikroskop
optik yang mengubah pergeseran fasa dalam
cahaya yang melewati spesimen transparan
menjadi kecerahan pada gambar. Pergeseran
fase sendiri tidak terlihat, tetapi menjadi
terlihat ketika ditampilkan sebagai variasi
kecerahan
Teknik optik dengan cara meningkatkan kontras
untuk menghasilkan gambar kontras tinggi pada
spesimen yang transparan. Contohnya spesimen
adalah sel hidup (biakan), mikroorganisme, potongan
jaringan, pola litografi (lithographic pattern), serat,
dispersi lateks, pecahan kaca, dan partikel
subseluler (termasuk nukleus dan organel lainnya).
Mikroskop Inverted
Mikroskop Inverted atau terbalik, adalah mikroskop
dengan lensa objektif menghadap wadah preparat
yang berada diatasnya. Sumber cahayanya berada
diatas meja preparat. Mikroskop inverted digunakan
untuk mengamati specimen yang besar dan dipengaruhi
oleh gravitasi seperti mengamati
kultur sel dan specimen air.
Staurastrum Navicula
2. Mikroskop elektron
Mikroskop yang mampu melakukan pembesaran objek
sampai 2 juta kali, menggunakan elektro statik dan
elektro magnetik untuk mengontrol pencahayaan dan
tampilan gambar, serta memiliki kemampuan pembesaran
objek dan resolusi yang jauh lebih bagus daripada
mikroskop cahaya
Transmission Electron Microscope (TEM), untuk
mengamati detail struktur internal sel
Scanning Electron Microscope (SEM), untuk studi detil
arsitektur permukaan sel
Perbedaan mikroskop cahaya
dan mikroskop elektron
Mikroskop cahaya
memiliki perbesaran maks 1000 kali
memiliki tiga dimensi lensa yaitu lensa
objektif, lensa okuler dan lensa kondensor
menggunakan energi jauh lebih sedikit dan
radiasi elektromagnetik yang lebih panjang
dibandingkan mikroskop elektron
Sumber cahaya matahari atau sinar lain
Sistem lensa pada mikroskop memiliki daya
resolusi, atau mampu menunjukkan detail obyek
yang berdekatan satu sama lain
Mikroskop cahaya memiliki kemampuan resolusi sampai 0,1
µm. Artinya mampu membedakan 2 titik yang berjarak 0,1
µm.
Daya resolusi mikroskop tergantung pada numerical
aperture (NA), panjang gelombang ( )גּpenyinaran yang
digunakan dan komponen fisik lensa mikroskop (yang
terbuat dari gelas pada mikroskop cahaya),
Batasan kemampuan resolusi (D) dapat dihitung dengan
rumus:
D = 0,61 גּ
NA
Jika NA meningkat karena pengaruh sudut masuknya
cahaya oleh lensa gelas, maka kemampuan lensa
mengumpulkan sinar, juga meningkat
panjang gelombang pendek (misalnya sinar
biru ungu) akan memberikan resolusi yang
lebih baik daripada sinar dengan panjang
gelombang lebih panjang (misalnya sinar
tampak merah)
elektron memiliki panjang gelombang yang
jauh lebih pendek dibandingkan dengan foton,
sehingga tidak heran kalau kemampuan
resolusi mikroskop elektron ribuan kali jauh
lebih tinggi dibanding dengan mikroskop
cahaya
A Light microscope.
Diagram showing the
light path in a
compound
microscope. Light is
focused on the
specimen by lenses
in the condenser.
A combination of
objective lenses and
eyepiece lences are
arranged to focus an
image of the
illuminated specimen
in the eye.
B. A modern
research light
microscope
Mikroskop Elektron
mampu untuk melakukan pembesaran objek sampai 2
juta kali, memp. bentuk yang lebih besar daripada
mikroskop cahaya
menggunakan elektro statik dan elektro magnetik
untuk mengontrol pencahayaan dan tampilan gambar.
memiliki kemampuan pembesaran objek serta resolusi
yang jauh lebih bagus daripada mikroskop cahaya
menggunakan jauh lebih banyak energi dan radiasi
elektromagnetik yang lebih pendek dibandingkan
mikroskop cahaya
Resolving power. Sizes of cells and their component are
drawn on logaritmic scale. Indicating the range of
object that can be readily resolved by the naked eye
and in the light and electron microscope.
Living cells
Sel hidup dapat terlihat jelas dengan menggunakan Phase-
contrast Microscope atau Differential-Interference-Contrast
Microscope.
Four images are shown of the same fibroblast cell in culture. All images
can be obtained with most modern microscopes by interchanging
optical components. (A) Bright-field microscopy. (B) Phase-contrast
microscopy. (C) Nomarski differential-Interference-contrast
microscopy. (D) Dark-field microscopy.
Cellular Staining?
Mikroskop cahaya tidak dapat menghasilkan
kontras yang baik pada spesimen segar, oleh
karena itu untuk memperoleh kontras yang lebih
baik digunakan pewarna jaringan spesimen
Pewarnaan sel adalah teknik yang dapat
digunakan untuk lebih memvisualisasikan sel dan
komponen sel di bawah mikroskop
Sel juga dapat diwarnai untuk mempelajari proses
metabolisme atau untuk membedakan antara sel
hidup dan mati dalam sampel
Teknik pewarnaan sel dan persiapan tergantung
pada jenis pewarna dan analisis yang digunakan.
Tingkatan resolusi tergantung tidak hanya pada sistem
optik, tapi juga faktor lain seperti ketebalan spesimen
Untuk meningkatkan resolusi atau ketajaman obyek yang
diamati seringkali mikroskop juga dilengkapi dengan
filter.
Untuk specimen tebal, maka harus dilakukan pengirisan
jaringan/organ. Specimen disiapkan dengan Metode
Embedding (penyelubungan)
• Making tissue sections. This
illustration shows how an
embedded tissue is sectioned
with a microtome in
preparation for examination in
the light microscope
Staining of cellular components
Pengamatan dengan mikroskop cahaya
Hasil penelitian menggunakan SEM
Strutur anatomi dapat
untuk menunjukkan adanya
pembentukan polisakarida
pada talus batang, daun,
vesikel rumput laut S.
polycystum
Korteks informasi
adanya polisakarida,
mengandung alginat