Pemeriksaan Metode Bakteriologi

Air

Kelompok: A5
Pemeriksaan Angka Kuman

o Berdasarkan Permenkes RI No 907/menkes/SK/VII/2002 tentang Syarat dan pengawasan kualitas air minum,
pada lampiran 1 di nyatakan bahwa : Persyaratan bakteriologis Air minum adalah kandungan bakteri Escherichia
coli atau Faecal coli yang diperbolehkan adalah 0 / 100 ml air.

o Angka kuman pada makanan dan minuman (mami) digunakan untuk mengetahui seberapa jauh pencemarannya
oleh mikroba.
Parameter Pengujian Kualitas Air

Air minum : MPN Coliform, Identifikasi Escherichia coli

Air Bersih : MPN Coliform, Pemeriksaan kimia air

Makanan basah: MPN Coliform, MPN Escherichia coli, ALT, Salmonella

Metode pemeriksaan MPN(Most Probable Number)

o Metode MPN(Most Probable Number) MPN adalah suatu metode enumerasi mikroorganisme yang
menggunakan data dari hasil pertumbuhan mikroorganisme pada medium cair spesifik dalam seri tabung yang
ditanam dari sampel padat atau cair yang ditanam berdasarkan jumlah sampel atau diencerkan menurut tingkat
seri tabungnya sehingga dihasilkan kisaran jumlah mikroorganisme yang diuji dalam nilai MPN/satuan volume
atau massa sampel

o Prinsip MPN: Prinsip dari metode ini adalah melihat sifat bakteri Coliform yaitu mampu memfermentasi
Lactosa menjadi asam dan gas, sehingga digunakan media lactose Broth
 Cara kerja
Pedugaan / Presumptive Test

Persiapan Sampel:

1)Untuk sampel yang padat atau cair tapi pekat, dilarutkan dulu dengan aquadest atau NaCl Fisiologis steril. 10 gr atau10 ml sampel
ditambahkan pelarut sampai 100 ml

2) Sedangkan sampel cair dapat langsung diperiksa

Siapkan 7 tabung yang berisi 10 ml media Lactose Broth (LB) yang telah diisi tabung durham (Ragam 5 x 10 ml, 1 x 1 ml, 1 x 0,1 ml) 1)

• 5 tabung berisi 10 ml sampel → termasuk kelompok I

• 1 tabung berisi 1 ml sampel→ termasuk kelompok II

• 1 tabung berisi 0,1 ml sampel → termasuk kelompok III

Pipet sampel sebanyak :

• 10 ml sampel dimasukkan dalam masing-massing tabung kelompok I

• 1 ml sampel dimasukkan dalam masing-massing tabung kelompok II

• 0.1 ml sampel dimasukkan dalam masing-massing tabung kelompok III

• Inkubasi pada suhu 37 selama 48 jam

• Amati jumlah tabung yang positif (warna keruh dan terdapat gas atau rongga kosong pada tabung durham)

 Uji Penegasan

• Dari tabung yang positif, ditanam kedalam tabung yang berisi 10 ml media BGLB secara aseptik dan inkubasi
37 selama 48 jam untuk bakteri coliform dan 44 selama 24 jam untuk E.coli

• Amati jumlah tabung BGLB yang positif

• Hasil pengamatan dirujuk pada tabel MPN untuk menentukan jumlah bakteri coliform atau E.coli dalam 100 ml
atau gram sampel
Pembacaan Hasil
Contoh pembacaan hasil
• Hasil pengamatan dirujuk pada tabel MPN menurut Formula Thomas
• 1) Tabung 5 x 10 ml, BGLB (+) gas : 3
• 2) Tabung 1 x 1 ml, BGLB (+) gas : 1
• 3) Tabung 1 x 0,1 ml, BGLB (+) gas : 1
• Index MPN per 100 ml: 16
• Perhitungan index MPN dapat dilakukan dengan formula Thomas: ( 𝐴 + 𝐵 + 𝐶) 𝑥(√( 𝑆𝑥𝑁))−1 𝑥100 =
• A = Jumlah tabung (+) gas penanaman kelompok pertama.
• B = Jumlah tabung (+) gas penanaman kelompok kedua
• C = Jumlah tabung (+) gas penanaman kelompok ketiga
• S = Jumlah ml sampel yang ditanam
• N = jumlah ml sampel yang negative
• Contoh: (3 + 1 + 1)𝑥(√(51,1𝑥20))−1𝑥100 = 15,64
REFERENSI

• Iskamto, Bambang. 2009. Bakteriologi Kesehatan. UNS Press. Surakarta

• Kuswiyanto, 2015. Bakteriologi 3: Buku Ajar Analis Kesehatan. Penerbit Buku Kodekteran EGC. Jakarta
• Aryanta, N, dkk, 2001, Penuntun Praktikum Mikrobiologi, Institut Teknologi Bandung, Jurusan Biologi, FMIPA.
Bandung.