Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca Facultad de Ciencias de la Salud Programa de Bacteriologa y Laboratorio Clnico Bioqumica General Recoleccin y separacin

de muestras de sangre. Manejo de pipeta, centrifugas y bao serolgico. Jenny Paola Celis Rodrguez Kelly Elizabeth Guerrero Cuervo Johanna Lizeth Gonzlez Devia 31 de Agosto, 2009

Realizar la toma de muestras y separacin de componentes sanguneos. Desarrollar habilidades en el manejo de equipos de laboratorio. Desenvolver destrezas en la toma de muestras.

Protocolo de preparacin de muestras el tiempo de aplicacin del torniquete la postura la temperatura transporte y almacenamiento. Los datos obtenidos de sangre venosa no pueden compararse con los obtenidos de sangre de capilares. Los 3 mtodos ms importantes para obtenerlo son:

1) Puncin venosa 2) Puncin capilar 3) Puncin arterial.

En algunas ocasiones, tan solo se colocan unas pequeas gotas de sangre en lminas portaobjetos de vidrio

MANIPULACION DE LA MUESTRA

Temperatura

pH

Preservativos Qumicos

ambiente (1830 C)

nevera (4C)

congelacin (5 C)

Evitan transformaciones bioqumicas

Evitan la proliferacin microbiana

Fna

El timol, antibiticos, etc.

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SUERO No es aconsejable desprender el cogulo del tubo con un aplicador. Si el tiempo de coagulacin no es el adecuado, se puede acelerar la coagulacin utilizando un activador.

PLASMA Se utiliza un tubo que contiene un anticoagulante, el cual puede ser centrifugado inmediatamente. ANTICOAGULANTE Citrato; EDTA; heparina sdica y heparina de litio

VENTAJAS

DESVENTAJAS
1) En electroforesis de protenas se altera. 2)Interferencia mtodo-dependiente, los anticoagulantes pueden llevar a la Interferencia del mtodo. 3) Interferencia del catin, cuando se usan heparina de litio o amonio.

1) Economa de tiempo. 2) Rendimiento mas alto, en sangre total. 3) Puede ocurrir coagulacin en suero, postcentrifugacin. 4) El resultado del plasma es mas representativo. 5) Riesgo bajo de hemlisis y trombocitlisis y no hay seudohiperkalemia

La centrifugacin es una tcnica que utiliza la fuerza homnima para separar fases de distinta densidad.

Lim iar, li re de muestras

Ta ar los tu os durante la centrifugacin o utilizar tu os con ta a hermtica. Se de e ermitir un ni el de tolerancia del ni el del liquido a centrifugar, dos (2) cm del orde su erior del tu o al ni el del liquido. No a rirla antes de que cese de girar. La centrifugacin se iniciara lenta gradualmente

as mismo se terminara.

Lim iar con un desinfectante o germicida, si ocurre alguna rotura de tu os con li eracin de material infeccioso. No se de e utilizar la misma centrfuga ara se arar muestras de sangre, de otros lquidos cor orales. Controlar trimestralmente el nmero de re oluciones Se de e re isar el motor or minuto .

sus artes mensualmente.

Anotar cualquier correccin o mantenimiento realizado.

ol o

TD (vidrio) para dispensar o de transferencia: Las serolgicas (graduadas hasta la punta) Las volumtricas ( con bulbo central) Mohr (mide la regin graduada solamente). Estas son calibradas con agua y por lo tanto son utilizadas para medir soluciones acuosas.

TC utilizadas para contener. Son llamadas pipetas capilares y son especialmente utilizadas para volmenes muy pequeos.

Seleccionar la pipeta que mas se acerque al volumen que se va a medir. Verificar la limpieza, ausencia de humedad y rupturas antes de tomar el liquido. Con pipetas TD utilizar bombas de caucho, dispensadores mecnicos o elctricos. Secar la parte externa de la punta de la pipeta, con papel absorbente, utilizando uno diferente para cada muestra. Dispensar libremente el liquido de la pipeta en posicin vertical La pipeta tienes dos topes, el primero define la cantidad a medir y el segundo es usado para expulsar la ultima gota de muestra. Cada muestra debe ser trabajada con una punta diferente. Deben ser calibradas: por gravimetra o por colorimetra.

Existen de diferentes medidas, tambin sirve para separar los sueros o plasmas

Equipo utilizado para mantener una temperatura especfica que puede ser entre 25 a 100C. Lo ideal es mantenerlo a una sola temperatura generalmente es 37C.

Llenar el bao serolgico nicamente con agua desmineralizada con unos pocos ml de solucin bactericida.

Dedicar especial cuidado al aseo y limpieza semanal del bao serolgico.

Controlar diariamente la temperatura con un termmetro calibrado. Realizar las correcciones necesarias.

Jams dejarlo encendido sin agua.

El nivel del agua no deber ser inferir de las resistencias. Debe estar por encima de ellas mnimo 2cm. Para mantener las muestras adecuadamente estables en temperatura, el nivel del agua deber estar a la altura de los tubos.

LIBROS Devlin, T. Bioqumica. Libro de Texto con aplicaciones clnicas. 3 ed. Editorial Revert,. Espaa. Vol. 1 y 2. 1999 Castaeda de Gmez M, Len Mara R, Zambrano F. Manual del programa de garanta de calidad en qumica clnica. 1995 Moreno E, Ballesteros V. Moreno A. Manual de garanta de calidad en qumica clnica y hematologa del INAS. 2005 Slockbower, J. et. al. Toma de muestras para anlisis clnicos. 1 ed. Editorial Albor, 1986. Espaa. pp. 15-32 . INTERNET http://www.u-cursos.cl/medicina/2007/2/.../1/material.../141112 servicio.cid.uc.edu.ve/fcs/vol4n2/5prepa.pdf , Agosto 6 del 2009 http:// www.bio.us.es/Departamentos/.../Neubauer.htm -, Agosto 6 del 2009 http:// www.patentesonline.com.mx/metodo-para-separar-unamuestra-de-sangre-que-contiene-bacterias-en-una-porcion-de-7192.htp, Agosto 6 del 2009