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Dra.

: SARA GARCA JIMENEZ BIOQUMICA CLNICA ALUMNO: ANBAL ABDIEL BUSTAMANTE ROS TEMA DE EXPOSICIN: LIPOPROTENAS (VLDL, LDL, HDL)

DEFINICION ES una estructura globular con una cubierta soluble exterior de protena y fosfolpido y un interior hidrofbica, ncleo neutro de triglicrido y colesterol. La protena y los fosfolpido imparten solubilidad a los lpidos insolubles.

CLASIFICACIN
NOMBRE QUILOMICRONES *VLDL IDL *LDL *HDL DENSIDAD (g / ml) <1.006 <1.006 1.006-1.019 1.019-1.063 1.063-1.21

Very Low Density Lipoproten

VLDL
Se compone principalmente de: 52% de triglicridos 18% de fosfolpidos 22% de colesterol 8% de protenas FUNCIN: Transportar triglicridos sintetizados en el hgado principalmente al tejido adiposo

VLDL

Low Density Lipoproten

LDL
Se compone principalmente de 40% de colesterol 20% de protenas El 40% restante es correspondiente en triglicridos y colesterol. Dimetro = (21 a 25 nm) FUNCIN. Transportan fosfolpidos y colesterol desde el hgado a tejidos perifricos o desde la periferia al hgado

LDL

High Density Lipoproten

HDL
Se componen principalmente de 50% de protenas. 50% de lpido. Dimetro = (9 a 12 nm) FUNCIN: Tiene un importante rol funcional como reactante en la esterificacin del colesterol del plasma, la cual es catalizada por la enzima lecitin-colesterol-acil-transferasa (LCAT).

HDL

FUNDAMENTO PARA LA CUANTIFICACION DE LIPOPROTEINAS La colesterol esterasa hidroliza los esteres de colesterol presentes en la muestra dando colesterol libre y cidos grasos, una posterior oxidacin enzimtica mediante la colesterol oxidasa se forma H2O2 y la colesterolona. El H2O2 se valora por la reaccin de Trinder, mediante un cromgeno, fenol y 4-Aminoantipirina, en presencia de peroxidasa, formando una quinonimina cuya coloracin, encarnada, es proporcional a la concentracin de colesterol presente en la muestra.

Esteres de colesterol + H2O

CHE

Colesterol + c. Grasos

CHOD Colesterol + O2 4-colesterolona + H2O2

POD

H2O2 + 4-AF + Fenol

Quinonimina + H2O

METODOS PARA LA CUANTIFICACION DE HDL TIPO DE MUESTRA:


El suero y el plasma son aceptables para el anlisis de concentraciones de HDL. Si se usa plasma, el anticoagulante de opcin es EDTA

METODO El mtodo de referencia para


las determinaciones de HDL emplea centrifugacin. Con esta tcnica la muestra a ser analizada es ajustada a una densidad de 1.063 g/mL

Este ajuste se realizada aadiendo al suero o plasma (200 L)


un volumen ( 500 L aprox.) de precipitante (bromuro de potasio, cido fototngstico, cloruro de magnesio). Posteriormente la muestra se por 10 min a temperatura ambiente. Centrifuga a 4000 rpm durante 10 minutos.

Las fracciones de LDL y VLDL irn

a la fraccin sobrenadante, por tener una menor densidad que el HDL, mientras que estas ultimas mas un % pequeo de lipoprotenas con densidad mayor se encontraran en el infranadante. (el estudio debe de realizarse antes de que transcurran dos horas)

Se le agrega al precipitado (100 L) reactivo de colesterol HDL (1 ml) Se mezcla y se incuba 10 min a una temperatura de 15 a 25oC o 5 min a una temperatura de 37oC La muestra se lee en el espectrofotmetro a una longitud de onda = 546nm El valor que se determina sirve para calcular el HDL que se obtiene. Mediante la siguiente formula: HDL = (Abs Muestra / Abs del patrn) x 175 = mg / dl HDL

Determinacin de la Absorbancia del patrn


Colocar 100 L del patrn en un tubo de

ensaye

Adicionarle 1 ml de reactivo de colesterol HDL Mezclar e incubar durante 10 minutos a una temperatura de 15 a 25 oC Leer la muestra a 546 nm El resultado obtenido se utiliza para la determinacin de HDL

DETERMINACION DE LDL Y VLDL La determinacin de esta lipoprotena se puede realizar utilizando la formula siguiente: Colesterol LDL = Colesterol total (colesterol VLDL + colesterol HDL) = mg / dl LDL La cantidad de VLDL se obtiene mediante el valor de obtenido de triglicridos / 5 y esto da como resultado = mg /dl VLDL

VALORES DE REFERENCIA

HDL-colesterol 29 77 mg/dl* LDL-colesterol 62 185 mg/dl VLDL-colesterol 40 - 50 mg/dl

ENFERMEDADES ASOCIADAS AL AUMENTO Y DISMINUCION DE LOS VALORES NORMALES DE LIPOPROTEINAS

HIPERLIPOPROTEINEMIA: Es una elevacin de las concentraciones de lipoprotena del suero. Donde uno puede observar que tres de las cuatro familias de lipoprotena sirven como determinantes. Estas tres familias son (1) quilomicrones, (2) VLDL, y (3) LDL (incluyendo IDL.) La clasificacin fenotpica original de Fredrickson no consider la importancia de las HDL y otras lipoprotenas.

CLASIFICACION DE LAS HIPERLIPOPROTEINEMIAS Hiperquilomicronemia: Los quilomicrones se encuentran elevados, las LDL y HDL estn frecuentemente bajas, mientras que las VLDL pueden estar ligeramente elevadas. Desorden lipoproteico caracterizado por la elevacin de triglicridos en sangre (mayores a 1000 mg/dl). Hipercolesterolemia primaria (familiar): causada por (1) sobreproduccin de VLDL, (2) aumentada velocidad de conversin de VLDL en LDL, (3) LDL enriquecida con colesterol esterificado, (4) estructura defectuosa de LDL, y (5) disminucin del nmero de receptores de LDL o en la actividad de cada clula.

Disbetalipoproteinemia: Caracterizada por una elevacin de las concentraciones plasmticas de colesterol y triglicrido y una LDL anormal (mas especficamente IDL), la cual flota en la fraccin de una densidad menor que 1.006 g/mL. Hiperbetalipoproteinemia: Es una elevacin de niveles de VLDL (y triglicridos) por encima del arbitrario punto de corte en ausencia tanto de quilomicrones o VLDL anormal de la disbetalipoproteinemia. Los niveles de LDL son normales y la medida de Colesterol-LDL es normal.

Los niveles elevados de LDL aumentan el riesgo de arterioparia coronaria. Niveles altos de HDL indican menor frecuencia a sufrir la cardiopata antes sealada, pero tambin pueden denotar hepatitis crnica, cirrosis biliar o alcoholismo.