UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE NICARAGUA

UNAN-LEN

FACULTAD DE CIENCIAS MDICAS DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGA Y PARA SITOLOGA ESCUELA DE BIOANALISIS CLINICO
Pruebas de Tamizaje Empleadas en la Deteccin de Agentes Hemotransmisibles en Nicaragua
AUTORES:

Br. Luis Carlos Caballero Maltez Br. Lisseth Carolina Gutirrez

TUTORA:

Dra. Teresa de Jess Alemn Rivera M.s.C Octubre, 2011

Introduccin
La transmisin de infecciones por va transfusional es una de las complicaciones ms importantes en receptores de sangre
Siendo un desafo no slo para quienes desenvuelven sus actividades en el campo de la medicina, sino tambin para quienes se encuentran comprometidos con la salud de un pas. El nmero de pruebas utilizadas para el tamizaje se ha incrementado y su calidad ha mejorado considerablemente logrando pruebas mucho ms sensibles, especficas y confiables.

Objetivos
Objetivo General Describir las pruebas de tamizaje empleadas en la deteccin de agentes hemotransmisibles en Nicaragua Objetivos Especficos: Puntualizar las pruebas de tamizaje para agentes hemotransmisibles. Conocer los procedimientos y criterios para el control de calidad en las pruebas de inmunoserologa.

Planteamiento Del Problema

Cules son las pruebas de tamizaje empleadas en la deteccin de agentes hemotransmisibles en Nicaragua?

Generalidades De Los Principales Agentes Hemotransmisibles

Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH): Los virus de la inmunodeficiencia humana (VIH-1 y VIH-2) son retrovirus ARN con envoltura, se transmiten por va sexual, sangunea y perinatal, primariamente infectando a los linfocitos. El tamizaje para VIH tiene por objetivo la deteccin de anticuerpos y/o antgenos de este virus en el donante. Las pruebas de tamizaje con resultados reactivos indican la probabilidad de que la sangre est infectada.

Generalidades De Los Principales Agentes Hemotransmisibles

Treponema Pallidum (Sfilis) La Sfilis, es una infeccin producida por Treponema pallidum, bacteria en forma espirilada, distribuida en el mundo. El hombre es el nico husped para esta bacteria la cual produce lesiones ulcerativas indoloras de evolucin crnica
Trypanosoma Cruzi (Enfermedad de Chagas) El parsito Tripanosoma cruzi es el agente causal de la enfermedad de Chagas Tripanosomiosis Americana. La enfermedad afecta diversos rganos, sistemas y aparatos, especialmente el corazn y tubo digestivo

Generalidades De Los Principales Agentes Hemotransmisibles

Marcador de tamizaje

Genoma

Tamao

Perodo de incubaci n

Va de Transmisin

en Centro de Hemoterapi a y Banco de Sangre

Virus

Familia

VHA VHB

Picornavirus Hepadnavirus

RNA DNA

27 42

4 sem 1-6 sem

Fecal-oral Parenteral,

No Si

No HBsAg. Anti-HBC

sexual, vertical Parenteral, VHC Flavivirus Satlite VHD animal RNA 22 2-6 sem Parenteral Si RNA <60 1-5 sem sexual, vertical Si

Anti-VHC

Hepatitis Virales (HV): Se han descrito cinco virus denominados con las primeras letras del alfabeto A, B, C, D, E, los cuales son capaces de producir una infeccin selectiva en clulas hepticas humanas

Cronicidad

No

VHE

Calicivirus

RNA

32-34

6 sem

Fecal-oral

no

No

Virus Linfotrpico de las Clulas T Humano (HTLV I/II): El virus linfotrpico de clulas T humano es un retrovirus que pertenece a la familia Oncovirinae. El HTLV-I fue el primer retrovirus oncgeno humano conocido. Provoca una hemopata maligna denominada leucemia/linfoma de clulas T del adulto (ATL)

Mtodos Serolgicos Para El Tamizaje

TCNICA ELISA ELISA (Enzyme Linked Inmuno Sorbent Assay) se basa en el uso de antgenos o anticuerpos marcados con una enzima, de forma que los conjugados resultantes tengan actividad tanto inmunolgica como enzimtica
H2O2 + OPD/TMB (sustrato) (cromgeno) Peroxidasa de rbano (enzima) H2O + O(agua) (radical)

O- + OPD/TMB (radical) (cromgeno oxidante)

Producto coloreado
Conjugado y muestras agregados simultaneamente

ELISA Directo ELISA Indirecto ELISA Competitivo ELISA de Captura de Anfgeno

Conjugado

Anticuerpo presente en el suero

Sustrato

Anticuerpo del paciente

Conjugado

Produce poca o ninguna coloracin RESULTADO REACTIVO

Produce coloracin RESULTADO NO REACTIVO

PRINCIPIO DE LA PRUEBA DE ELISA TIPO COMPETITIVO

Mtodos Serolgicos Para El Tamizaje

TECNICA RPR El RPR es una prueba diseada para detectar reagina en el suero de manera rpida, no requiere inactivacin por calor. La muestra se mezcla con una suspensin que posee cardiolipina, lecitina y colesterol en partculas de carbn Los falsos negativos se pueden producir por errores tcnicos y los falsos positivos son los mismos que para la prueba de VDRL. Se ha desarrollado variantes de esta prueba en las que la muestra puede ser plasma sin que se pierda su sensibilidad y especificidad

Control de Calidad en los Mtodos de Inmunoserologa

A. Control de calidad Actividades y tcnicas operativas aplicadas para calidad del producto o servicio 1. Procedimientos generales Obtencin , mtodo de anlisis de la muestra Normas de bioseguridad, control interno y externo 2. Fuentes de variacin Variacin biolgica variacin analtica Error sistemtico (error aleatorio, exactitud y precisin) B. Evaluacin de los mtodos serolgicos 1.Indicador del valor de la pruebas de tamizaje Sensibilidad Especificidad Valor predictivo positivo y negativo C.Estudio estadstico de los datos serolgicos

1. Medidas de posicin y variabilidad de los datos. Media Desviacin estndar Coeficiente de variacin

Control de Calidad en los Mtodos de Inmunoserologa

D. Control de calidad de la prueba ELISA Inserto del kit No material reciclado, burbujas, puntas usadas y reactivos vencido. validacin de prueba E. 1. 2. 3. 4. 5. Control de calidad del RPR. rea de trabajo Antgeno RPR y almacenamiento. frasco y agujas para repartir el antgeno Rotador y lectura de la prueba Errores de la prueba RPR (falso negativo y falso positivo) F. Mantenimiento y calibracin de los equipos Es el mantenimiento del equipo para asegurar un desempeo optimo 1.Analizador de ELISA (lector de microplacas) 2.Lavador de microplacas ELISA 3.Equipos automatizados Incubadora, rotador serolgico y micropipetas G.Recomendaciones generales de las micropipetas Verificacin diaria Limpieza y descontaminacin

Legislacin Vigente En El Pas Para La Practica Transfusional

EL REGLAMENTO DE LA LEY No. 369 "LEY SOBRE SEGURIDAD TRANSFUSIONAL" DECRETO A.N. No. 5917, Aprobado el 03 de Diciembre del 2009. Publicada en La Gaceta No. 61 del 5 de Abril del 2010. Establece en su capitulo VI del Procesamiento y Conservacion de la sangre: Art. 29 Los bancos de sangre y centros transfusionales contarn con el equipamiento requerido para realizar tamizaje y pruebas inmunolgicas de forma oportuna y eficiente.

Art. 31 Los reactivos que se empleen para la deteccin de infecciones transmitidas por transfusin sern validados y controlados por el Ministerio de Salud.

Muchas Gracias Por su Atencin.!!!