Preguntas abiertas
Eucarionte Procarionte
1. Exon-intron-exon
2. 5’ cap
3. 3’ poli AAAA
4. Núcleo-citoplasma
5. 3 tipos de RNA polimerasa
Composición RNA y plegamiento
Mecanismo de transcripción
Producto
RNA polimerasa y definición de elmentos
ME síntesis rRNA
Globalidad del proceso
Factores Sigma
• Escherichia coli
• sigma70/D
• sigma24/E: ECF
• sigma28: flagelo
• sigma38/S:fase estacionaria,stress
• fecI: hierro
• Pseudomonas putida: > 15
• Streptomyces: > 30
Inicio de la Transcripción
Elongación de la Transcripción
Dirección de síntesis mRNA
Transcripción en Bacterias: Operones
Operón Inducible: Lactosa
Operón Represible: Triptofano
Tipos de RNA polimerasas en Eucariontes
• RNA polimerasa I: sintetiza el ARN de la subunidad grande
de los ribosomas, en el nucleolo.
• RNA polimerasa II : transcribe todos los genes que codifican
para proteínas.
• RNA polimerasa III: sintetiza el ARN de la subunidad
pequeña del ARN ribosomal 5S y todos los ARN de
transferencia.
Maquinaria Transcripcional en Eucariontes
(B)
Composición y estructura tridmensional
yRNAPII
(A)
(C)
LeRoy, G. et al (1998)
Science 282, 1900-1904.
Cramer, P., Bushnell, D.A., Kornberg, R.D. (2001) Science
Esquema del sitio activo de RNAPII, presente
en un complejo en transcripción
(a) (b)
(c)
Motivos de secuencias consenso que contribuyen
a la transcripción basal de un promotor tipo II
Smale, S.T, Kadonaga, J.T. (2003) Annual Review of Biochemistry 72, 449-479.
Caracterización de los
Factores Generales de Transcripción
(GTFs) Humanos
Complejos remodeladores de cromatina- enancers
Modelo de formación de PIC.
Transición entre la etapa de iniciación y elongación
y reciclaje de la maquinaria basal de transcripción de RNAPII
IIF
+1 5’
GMP
Rpb1
TATA
FCP1
~-26
AAAAn
TBP
5’
GMP
FCP1
IITBP
F IIE IIF
IIB TATA Rpb1
IIH
Rpb1 +1 P
P P
Ribonucleósidos trifosfatos P P
P P
P P
Mg+2, GTP
ATP
IIB IIE IIH
>+1/+2 +10 >+30
Modificaciones que sufre el transcrito primario
Capping en extremo 5’
Maduración Transcrito primario:
remoción exones y empalme de intrones
Modificaciones que sufre el transcrito primario
Regulación de la expresión por “splicing” alternativo