OBJETIVOS:

Estimular el inters de los jovenes hacia la Biologa Molecular y sus aplicaciones en la Biotecnologa. Promover en los educandos el espritu crtico hacia el potencial de la investigacin biotecnolgica para el desarrollo de la humanidad. Presentar elementos de juicio que permitan comprender la importancia de que se haga investigacin en biologa molecular.
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Transferencia de genes en animales

Cultivo de Clulas Vegetales

Frmacos Anti-cncer Diagnsticos

Solucin de crimenes Tecnologa del ADN Bancos de ADN, ARN Protenas Mapas de Genomas completos Sntesis de Nuevas Protenas Nuevas Plantas y Animales Nuevos Alimentos Nuevos Antibiticos

Biologa Molecular
Ingeniera Gentica
Clonacin Produccin de Protenas humanas Recursos humanos qumicos raros Terapia Gnica

Marcadores

Sntesis de Sondas de ADN

Localizacin de desrdenes genticos

BIOLOGA MOLECULAR

HUELLA GENETICA (DNA fingerprinting)

En investigacin criminal y medicina forense, antropologa y manejo de vida silvestre. Esto tambin puede ser usado para detectar secuencias que pueden predisponer a un individuo a enfermedades genticas tales como muchas formas de cncer, una forma de HIV (el virus que causa el SIDA), Alzheimer, fibrosis cstica, Corea de Huntington y otras condiciones.

HUELLA GENETICA (DNA fingerprinting)

Prueba Forense. Usada en 1980 en GranBretaa como refuerzo de la ley. En USA hasta 1987. En Virginia, Minnesota, Illinois y Florida, ha exonerado a individuos acusados de asaltos sexuales. Establecimiento de la paternidad. Los patrones de ADN son heredados, la mitad de la madre y la mitad del padre. Para establecer la paternidad, la huella digital gentica de la madre, nio y padre alegado son comparadas.

BIOINFORMATICA
Es la concertacin de tecnologas de informacin con biotecnologa y tecnologas relacionadas, que son vitales para competir. Estas nuevas tecnologas y mtodos estn cambiando procedimientos y prcticas comunes de investigacin en farmacutica, biotecnologa y ciencias mdicas.

GENOMICA
El Proyecto Genoma Humano se inici en 1990 previsto para el 2007, se termin el 26 de Junio de 2000, con la secuenciacin de todo el genoma humano de unos 30,000 genes y 3 mil millones de pares de bases (pb). Con la secuenciacin completa del genoma humano, los investigadores pueden mover su enfoque del hallazgo de genes, el cual puede ser manejado a travs de la base de datos, hacia el entendimiento de la funcin de dichos genes y luego a la PROTEMICA.

GENMICA

GENOMICA
El genoma humano es 10 veces mas pequeo que el genoma de la salamandra Bolitoglossa subpalmata y 200 veces menor que el de la Ameba
Entre una persona y otra el ADN solo difiere en 0.2% 20% idntico 60% idntico De 289 genes humanos implicados en enfermedades, hay 177 cercanamente similares a los genes de Drosophila.

70% idntico

98% idntico

Humanos 30,000 genes

Chimpanc 30,000 genes

Ratn 30,000 genes

A. thaliana 25,000 genes

C. elegans 19,000 genes

D. melanogaster 13,000 genes

GENOMAS VEGETALES
El 14 de Diciembre de 2000, se present la secuencia del genoma del primer vegetal Arabidopsis thaliana. El 26 de Enero de 2001, la secuencia del arroz (Orizae sativa). El funcionamiento de los genes en el arroz se aplicara a cultivos principales, tales como trigo (Triticum spp) y maz (Zea mays). El arroz tiene 50,000 genes, dos veces el de Arabidopsis, y 12 cromosomas comparado con cinco de Arabidopsis. El arroz es el genoma mas simple y pequeo de los genomas de todos los cereales.

PROTEOMICA
PROTEMICA: describir y conocer la funcin de las protenas (clave para entender y tratar las enfermedades)

Al entender a las protenas, los cientficos consideran que finalmente podrn resolver los mecanismos bioqumicos bsicos fundamentales de las enfermedades y la salud. The Wall Street Journal

BASES DE LA PROTEMICA

INGENIERA GENTICA
Inici su desarrollo en la dcada de los 70s. Con esta tecnologa, se pueden aislar los genes, manipularlos, introducirlos a nuevos hospederos, y clonarlos para obtener una ventaja novedosa sobre el organismo natural. Estas tecnologas son intensivas en conocimiento dependen principalmente del recurso humano calificado, para utilizar adecuadamente la informacin disponible y requieren infraestructura instalada e inversiones de capital que estn al alcance de pases como el nuestro.

QUE SE NECESITA EN INGENIERA GENTICA

Polticas Nacionales.

Identificacin de usuarios y problemas a resolver con tecnologas del ADN recombinante. Infraestructura instalada, que requiere inversiones de capital al alcance de pases como el nuestro.

Recurso humano a nivel doctoral.

METODOS PARA HACER INGENIERA GENTICA

1. Agrobacterium. Uso de la bacteria Como "Ingeniero Gentico". La bacteria conteniendo el inserto, infecta las clulas de la planta produciendo la recombinacin gentica. 2. Acelerador de Partculas (Gene Gun). Un can artificial bombardea micropartculas con el inserto, sobre la clula. 3. Electroporacin. Uso de carga elctrica para que el ADN atraviese la membrana nuclear. 4. Polietilenglicol. Exposicin de las membranas al PEG, facilita el movimiento de las molculas de ADN. 5. Silicon Wiskers. Inyeccin con fibras microscpi-cas, que atraviesan las membranas con los insertos.

MODIFICACIONES GENETICAS EN ANIMALES

Xenotransplantes en cerdos: inactivacin del gen 1,3 galactosil transferasa, disminucin de la expresin del gen antiVCAM, y transferencia del gen humano de anticoagulacin. Produccin de protena C humana en leche de cerdos, para tratar desrdenes como hemofilia. Expresin de precursor de la hormona de crecimiento proteasa resitente en tejido de msculo de cerdo. Secresin de hormonas de crecimiento humano en tejido seminal de cerdo. Produccin de lisostafina en glandulas mamarias de ratones que previene mastitis por S. aureus.

MODIFICACIONES GENETICAS EN ANIMALES

Transgnesis del gen de la protena verde fluorescente de la medusa del Pacfico en el gusano rosado del algodn Pectinophora gossypiella, para servir como marcador visible y el transposn piggyBac de la mariposa nocturna Trichoplusia ni, para combinar con la estrategia de irradiacin para esterilizacin. Para el futuro control de insectos y reduccin de pesticidas se realiza Ingeniera Gentica en colonias de insectos para que sean frtiles en el laboratorio y estriles al ser liberados en el campo.

MODIFICACIONES GENETICAS EN VEGETALES (Primera Generacin)

Se limitan principalmente a la resistencia a herbicidas o a determinados patgenos y pestes. En varios pases hay millones de hectreas cultivadas con plantas modificadas genticamente, tales como: frijol de soya (Glycine max), algodn (Gossypium hirsutum), tabaco, papa y maz, en Estados Unidos (en 1999, 8.7 millones de hectreas), Argentina (6.7 millones de hectreas), Canad (4 millones de hectreas), China (0.3 millones de hectreas).

ALIMENTOS DE MEJOR CALIDAD

2a. GENERACIN DE TRANSGNICOS

ARROZ con beta caroteno de genes de narciso y de Erwinia uredovora. ARROZ fortificado con un gen de la ferritina del frijol de soya. TOMATE Flavr Savr (ADN antisentido en gen de la poligalacturonasa que degrada las pectinas en la maduracin). TOMATE con tres veces y medio de beta caroteno.

APLICACIONES MDICAS

2a. GENERACIN DE TRANSGNICOS

Frutas y vegetales, bananos (Musa paradisiaca) y papa, para producir vacunas comestibles orales:
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Antgenos de virus de hepatitis B y txina del clera, para inmunizacin oral. Expresin de protena de cpside del virus Norwalk, contra la gastroenteritis viral. Expresin de las porinas (protenas de membranas externas) de la Salmonella tiphi para inmunizar contra estas bacterias.

APLICACIONES MDICAS

2a. GENERACIN DE TRANSGNICOS Papa con la vacuna que previene la insulina dependencia de la diabetes mellitus 100 veces ms poderosa que la actual vacuna. Papa con la sub-unidad B antignica de la enterotoxina del Vibrio cholerae causante del clera). Frijol de soya con anticuerpos que protegen contra el virus 2 de Herpes simplex (HSV). Tabaco con anticuerpos que previenen la caries dental producida por Streptococcus mutans.

PLANTAS MS PRODUCTIVAS
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2a. GENERACIN DE TRANSGNICOS Arroz con tres genes de enzimas de maz: Fosfoenolpiruvato carboxilasa (PEPC), Piruvato ortofosfato dikinasa (PPDK), y NADP enzima malica (ME) que codifican la va fotosinttica C4 aumentaron la produccin de arroz. Estudios de campo preliminares hechos en China y en Corea mostraron respectivamente incrementos de granos de 10-30% y de 30-35% de plantas transgnicas con PEPC y PPDK.

INDUSTRIA Y MEDIO AMBIENTE

Produccin de polmeros de cidos grasos (estlidos), componentes de fluidos hidrulicos, epoxy o derivados acetilnicos, componentes de pinturas y recubrimientos. Canola con detergente (de alto cido larico) para uso industrial y otras variedades para producir polihidroxibutirato para plsticos biodegradables. Frijol de soya con cido oleico incrementado para huevo de gallina. Maz con aprotinina para la industria farmacutica..

2a. GENERACIN DE TRANSGNICOS

PLANTAS TRANSGNICAS CUESTIONADAS

El cultivo de plantas transgnicas como alimentos es enfrentado a nivel mundial, principalmente en Europa, en donde los gobiernos haciendo eco a activistas ambientalistas, de Defensa de los Consumidores, de entidades poderosas de agricultores y otras ONGs, generaron una vasta oposicin poltica que ha legislado en contra de la experimentacin, introduccin y comercializacin de alimentos transgnicos, no as para la utilizacin de estas tecnologas en la produccin de plantas que produzcan frmacos.

INFORME DE LA UE SOBRE OMGs

El Informe de BIOSEGURIDAD de la Unin Europea (UE) no encontr ningn riesgo para la salud humana o el medio ambiente ms all de las habituales incertidumbres de la produccin de plantas convencionales. Resume 81 proyectos de investigacin financiados por la UE durante los ltimos 15 aos a un costo de US $ 64 millones sobre cultivos de Organismos Genticamente Modificados (OGMs) y productos fabricados a partir de ellos. No han aparecido efectos ambientales no previstos, pero an si los hubiera, ellos sern rpidamente detectados por los sistemas de control existentes (EUR 19884 - European Communities, 2001).

CLONACION
Trmino genrico para la replicacin en un laboratorio de genes, clulas u organismos de una entidad original, con copias genticas exactas del gen, clula u organismo original. Esta tcnica ha producido avances sensacionales en medicinas y vacunas. Tambin hay investigacin en clonacin de clulas humanas, rganos y otros tejidos. Esto puede producir el reemplazo de piel, cartilagos y hueso para victimas de quemaduras y accidentes, o de rganos.

COMO CLONARON A DOLLY

1- Clulas de una oveja adulta son extradas y se llevan a un estado de latencia. 2- El ncleo es removido del huevo infertilizado de otra oveja y el ncleo de la oveja donadora es colocado en su lugar. 3- Una pequea corriente elctrica sobre el huevo manipulado inicia los mecanismos de fertilizacin. 4- Hay divisin celular y comienza el crecimiento y el huevo es implantado en la madre nodriza similar a una fertilizacin in vitro. 5- El clon es llevado a trmino y nace la oveja.

Las clulas del embrin donador son separadas La clula donadora se adjunta al oocito

METODO DE CLONACION
es fusionada por una corriente elctrica

Embrin se desarrolla como un nuevo huevo fertilizado

El huevo infertilizado es enucleado

CULTIVO DE CELULAS MADRES

Consiste en tomar el ncleo de una clula del paciente adulto y transferirlo a un vulo humano cuyo ncleo se ha eliminado previamente. El resultado sera un embrin humano clnico (un clon del paciente). Sin embargo, el embrin no se implantara en una mujer (lo que dara lugar a un hijo clnico del paciente). Slo se le dejara desarrollarse unos das. Luego se elimina para obtener de l las clulas madre.

TECNOLOGA BIOCHIP DE ADN

Las mutaciones, o alteraciones en el ADN de los genes, resultan en ciertas enfermedades, y frecuentemente es difcil de identificar y caracterizar esas mutaciones a causa de que los genes mas grandes tienen muchas regiones en donde las mutaciones pueden ocurrir y causar enfermedad (www.nhgri.nih.gov). Ejemplo, mutaciones en los genes BRCA1 y BRCA2, son factores de riesgo de 50-85% de cncer de mama en la mujer. Hedenfalk et al, usando la tecnologa de microarreglos, de 5361 genes identificaron 176 genes que se expresaban diferente en dos tipos de tumor. BRCA1 y BRCA2, expresan diferente tipo de genes, sugiriendo que una mutacin heredable influencia el perfil de la expresin gnica del cncer (Genome Biology, vol 2, no. 4, 2001).

TECNOLOGA BIOCHIP DE ADN

El microarreglo gnico est basado en una base de datos de mas de 40,000 fragmentos de genes llamados Secuencias Expresadas Marcadoras (ESTs). Cientos o miles de ESTs son arregladas en una lmina de microscopio. Los ARNm de una clula particular son marcados con marcas tags fluorescentes que se hibridizan, a los ESTs en la lmina cuando estas secuencias son complementarias a aquellas del ARNm. Un escaner mide la fluorescencia de cada muestra sobre la lmina, para determinar la actividad de los genes representados por los ESTs que estn en la clula (www.nhgri.nih.gov).

TECNOLOGA BIOCHIP DE ADN

ECONOMIA DE LA INFORMACION (1947-2020)

La economa de la informacin es la base de los negocios mundiales. Tuvo su gestacin y crecimiento con las industrias de los semiconductores y el software, y actualmente con Internet como acontecimiento central de su madurez y cuya etapa final se espera para el 2020 caracterizada por el uso generalizado de chips de bajo costo y de la tecnologa inalmbrica que conectar todo.

TECNOLOGAS EMERGENTES
Adicionalmente a las tecnologas de informacin estn las altas tecnologas (high tech) emergentes la Biotecnologa, con la Ingeniera Gentica como su mxima expresin y la Nanotecnologa (nanomtrica) que consiste en modificar tomos o molculas para fabricar productos (10 tomos caben en un nanmetro, mil millonsima parte de un metro).

HABITAR MAS ALLA DE LA TIERRA. La NASA busca

combinar avances en biotecnologa y nanotecnologa para modificar los genes de las plantas de manera bioregenerativo para que sus clulas produzcan micro sensores, transmisores y receptores moleculares, que supervisen funciones internas de las plantas e informen sobre su salud, para garantizar una buena cosecha de manera controlable y que produzcan flores y frutos bajo comando. Una idea paralela es disear plantas que produzcan sustancias qumicas que las protegan del aumento de radiacin en el espacio y en planetas con atmsferas poco densas tales como Marte.

BIOECONOMIA
Davis y Meyer (2000) consideran que la era de la Bioeconoma, la cual predominar en el siglo XXI como la principal economa global, inici su gestacin en 1953 cuando se identific por Watson y Crick, la estructura de la doble hlice del ADN y su nacimiento fue el 26 de Junio de 2000 con la presentacin del mapa descodificado del genoma humano.

BIOTECNOLOGA PARA PASES EN DESARROLLO

La investigacin de nuevas biotecnologas se lleva a cabo principalmente en los pases industrializados y se concentra en sus necesidades por lo que pases en desarrollo no obtendrn necesariamente un beneficio pleno de ellas. Las tecnologas estn disponibles en primer lugar en los pases desarrollados.

BIOTECNOLOGA PARA PASES EN DESARROLLO

Los tomadores de decisin poltica consideran que: Los pases desarrollados pueden hacer investigacin, por que sta es cara y pases como el nuestro, usar el conocimiento que esta disponible a nivel mundial.

BIOTECNOLOGA PARA PASES EN DESARROLLO

El que investiga genera nuevos CONOCIMIENTOS, disponibles como INFORMACIN, que puede llegar a ser CONOCIMIENTO til, apropiado o adaptado, por la infraestructura de investigacin de C&T que posea un pas.