IDENTIFIKASI MONOSAKARIDA

Dengan pilihan lain,menggunakan Cara kimia

Jenis Monosakarida
1.

Monosakarida yang mempunyai lima atom karbon disebut pentosa, seperti ribosa dan arabinosa Glukosa, dinamakan juga dekstrosa atau gula anggur, terdapat luas di alam dalam jumlah sedikit, yaitu di dalam sayur, buah, sirup jagung, sari pohon, dan bersamaan dengan fruktosa dalam madu. Glukosa memegang peranan sangat penting dalam ilmu gizi. Glukosa merupakan hasil akhir pencernaan pati, sukrosa, maltosa, dan laktosa pada hewan dan manusia. Dalam proses metabolisme, glukosa merupakan bentuk karbohidrat yang beredar di dalam tubuh dan di dalam sel merupakan sumber energi.

2.

Fruktosa, dinamakan juga levulosa atau gula buah, adalah gula paling manis. Fruktosa mempunyai rumus kimia yang sama dengan glukosa, C6H12O6, namun strukturnya berbeda. Susunan atom dalam fruktosda merangsang jonjot kecapan pada lidah sehingga menimbulkan rasa manis.
Galaktosa, tidak terdapat bebas di alam seperti halnya glukosa dan fruktosa, akan tetapi terdapat dalam tubuh sebagai hasil pencernaan laktosa. Manosa, jarang terdapat di dalam makanan. Di gurun pasir, seperti di Israel terdapat di dalam manna yang mereka olah untuk membuat roti. Pentosa, merupakan bagian sel-sel semua bahan makanan alami. Jumlahnya sangat kecil, sehingga tidak penting sebagai sumber energi.

3. 4. 5.

Analisis monosakarida
Untuk analisis kuantitatif monosakarida

dapat dilakukan dengan cara : a. KLT b. KCKT c. Kromatografi gas d. Elektroforesis kertas e. gula pospat.

Preparasi sampel
Sebelum dilakukan analisis kuantitatif monosakarida,

terlebih dahulu dilakukan perlakuan terhadap sampel yang akan di uji. misalnya, kacang-kacangan, sereal, buah, roti dan sayuran. Dalam makanan ini biasanya diperlukan untuk mengisolasi karbohidrat dari sisa makanan sebelum dapat dianalisis. Metode isolasi karbohidrat yang tepat tergantung pada jenis karbohidrat, matriks jenis makanan dan tujuan analisis, bagaimanapun, ada beberapa prosedur yang umum untuk teknik isolasi banyak. Misalnya, makanan biasanya dijemur dibawah vakum (untuk mencegah degradasi termal), tanah untuk menjadi bubuk halus (untuk meningkatkan ekstraksi pelarut) dan kemudian dihilangkan lemaknya dengan cara ekstraksi pelarut.

Metode kromatografi

metode kromatografi merupakan teknik analisis yang paling kuat untuk analisis jenis dan konsentrasi monosakarida dan oligosakarida dalam makanan. kromatografi lapis tipis (KLT), kromatografi gas (GC) dan kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC) yang umum digunakan untuk memisahkan dan mengidentifikasi karbohidrat Karbohidrat dipisahkan berdasarkan karakteristik adsorpsi mereka diferensial dengan memberikan solusi untuk dianalisa melalui kolom. Karbohidrat dapat dipisahkan berdasarkan partisi koefisien mereka, polaritas atau ukuran, tergantung pada jenis kolom yang digunakan. HPLC saat ini metode kromatografi paling penting untuk menganalisis karbohidrat karena mampu pengukuran yang cepat, spesifik, sensitif dan tepat. Selain itu, GC mensyaratkan bahwa sampel bersifat labil, yang biasanya mengharuskan mereka akan derivitized, sedangkan pada sampel HPLC sering dapat dianalisis secara langsung.

HPLC dan GC biasanya digunakan dalam hubungannya dengan spektrometri NMR atau massa sehingga struktur kimia dari molekul yang membentuk puncak juga dapat diidentifikasi.

Metode elektroforesis
Karbohidrat juga dapat dipisahkan dengan elektroforesis setelah mereka telah derivitized untuk membuat mereka bermuatan listrik, misalnya, melalui reaksi dengan Borat. Suatu larutan karbohidrat derivitized diterapkan pada gel dan kemudian tegangan diterapkan di

atasnya. Karbohidrat yang kemudian dipisahkan berdasarkan ukuran mereka. semakin kecil ukuran molekul karbohidrat, semakin cepat bergerak dalam medan listrik.

Metode gula pospat

Metode ini menggunakan serangkaian langkah-langkah

untuk menentukan kadar glukosa dan fruktosa dalam sampel. Pertama, glukosa dikonversi menjadi glukosa-6fosfat (G6P) oleh hexakinase enzim dan ATP. Kemudian, G6P dioksidasi oleh NADP + di hadapan G6Pdehydrogenase (G6P-DH) G6P + NADP + gluconate-6-phosphate + NADPH + H + G6P + NADP + glukonat-6-fosfat + NADPH + H + Jumlah NADPH terbentuk sebanding dengan konsentrasi G6P dalam sampel dan dapat diukur pada 340nm Konsentrasi fruktosa kemudian ditentukan dengan mengkonversi fruktosa menjadi glukosa, menggunakan enzim lain yang spesifik, dan mengulangi prosedur di atas.