Anda di halaman 1dari 20

Nama : Yulia Andriyani NIM : E1F108042

Judul Jurnal :
Lactic Acid Production By New Lactobacillus plantarum LMISM6 Grown In Molasses : Optimization Of Medium Composition
Brazilian Journal of Chemical Engineering Vol. 28, No. 01, pp. 27-36, January-March, 2011

Abstract
y Model eksperimen A Plackett-Burman telah digunakan untuk mengevaluasi tujuh komponen media yang ditambahkan pada molase (corn steep liquor, sodium asetat, magnesium sulfat, mangan sulfat, amonium sitrat, potasium fosfat dan tween 80). CSL, K2HPO4 dan tween 80 meningkatkan produksi asam laktat. y Konsentrasi dari ketiga komponen ini sama baiknya dengan molase dimana dalam optimalisasi penggunaan metode respon permukaan. y Produksi maksimal asam laktat yaitu sebesar 94.8 g/L dihasilkan ketika konsentrasi dari molase, CSL, K2HPO4 dan tween 80 yaitu 193.50 g/L, 37.50 ml/L, 2.65 g/L dan 0.85 g/L.

Introduction
y Asam laktat adalah asam organik dengan berbagai

aplikasi dalam makanan, farmasi dan industri kosmetik (Datta et al., 1995).
y Asam Laktat baru-baru ini telah dipelajari dengan minat

yang besar sebagai biodegradable polylactic acid (PLA) yang dapat digunakan untuk memperbaiki sifat fisik dalam produksi kemasan makanan, peralatan plastik, kantong sampah dan terpal plastik pertanian, sehingga menggantikan produk yang dibuat dari minyak bumi (Ohara, 2003).

Lanjutan
y Asam laktat dapat diperoleh dengan cara fermentasi mikroorganisme atau sintesis

kimia.

y Proses fermentasi memiliki keuntungan yang lebih yaitu hemat biaya (Silva dan

Mancilha, 1991). Sekitar 90% dari semua asam laktat di seluruh dunia diproduksi oleh bakteri fermentasi (Zhou et al., 2006).

y Bakteri asam laktat secara tradisional mikroorganisme dan memiliki nutrisi yang

kompleks karena kemampuan mereka yang terbatas untuk kebutuhan biosynthesize Bvitamin dan asam amino (Fitzpatrick dan Keeffe, 2001). karbon untuk menghasilkan asam laktat dari substrat baku tepung-tepungan, seperti seperti barley, jagung, atau gandum (Hofvendahl dan Hahn-Hgerdal, 1997).

y Gula halus, seperti glukosa atau sukrosa, telah digunakan lebih sering sebagai sumber

y Selain itu, dalam jumlah yang cukup sumber nitrogen yang mahal yang kompleks,

seperti ekstrak ragi, harus ditambahkan ke medium dalam rangka untuk memproduksi asam laktat dalam jangka waktu tertentu. Namun, dalam hal ini ekonomi tidak menguntungkan. Menurut Tejayadi dan Cheryan (1995), perhitungan bahan baku untuk 68% dari keseluruhan biaya produksi asam laktat dari whey dan ragi ekstrak menggunakan Lactobacillus bulgaricus.

y Sejumlah industri, limbah telah dievaluasi sebagai substrat untuk

produksi asam laktat dengan tujuan menurunkan biaya proses, seperti tebu (Calabia dan Tokiwa, 2007), molase (Dumbrepatil et al., 2008) dan whey (Buyukkileci dan Harsa, 2004) sebagai sumber karbon dan CSL (Bustos dkk., 2004) sebagai sumber nitrogen. dari mikroorganisme asam amino dan polipeptida, dengan cukup jumlah vitamin B kompleks (Kardinal dan Hedrick, 1948). dari pengolahan gula dan alkohol dan kaya gula difermentasi (Lima dkk., 1975), nitrogen dan vitamin. produksi 17,9 juta ton selama proses manufaktur gula .

y CSL adalah sumber nitrogen untuk sebagian karena konsentrasi tinggi

y Molase tebu adalah industri oleh-produk atau limbah

y Substrat ini adalah murah dan banyak tersedia di Brazil, dengan tahunan y Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengoptimalkan asam

laktat Lactobacillus plantarum produksi LMISM6 tumbuh di molase.

Materials and Methods


1.

Mikroorganisme

Lactobacillus plantarum LMISM6 diisolasi dari air limbah singkong. Media tumbuh yang digunakan yaitu Man, Rogosa and Sharpe (MRS) dengan 20% (v/v) Gliserol pada suhu -20 derajat celcius. Media MRS telah ditambahkan komposisi (g/L): glukosa (20.0), peptone (10.0), sodium asetat (5.0), amonium sitrat (2.0), K2HPO4 (5.0), MgSO4.7H2O (0.1) dan MnSO4.4H20 (0.05). pH yang digunakan 6.0 untuk strelisasi pada suhu 121 derajat celcius selama 15 menit.

Preparasi Inoculum
y Inoculum dipersiapkan melalui transferensi dari 2% kultur

persediaan pada labu erlenmeyer yang mengandung media tumbuh (MRS).


y Temperatur inkubasi sebesar 35 derajat celcius selama 18

jam pada 150 rpm.

Substrate
y Molase dari gula tebu dihasilkan dari tumbuhan santa lucia berlokasikan di brazil. y Dan substrat ini telah dihidrolisis dengan ditambahkan 1 ml dari asam sulfat (20%) ke dalam 100 ml larutan molase. y Larutan molase yang telah diasamkan dipanaskan dalam pemanas air (water bath) selama 20 menit. y pH dari media yaitu 6.0 dengan lebih dulu 4.0 M KOH untuk sterilisasi. y Molase dari gula tebu mengandung100% gula pereduksi.

Analysis
y Konsentrasi asam laktat ditentukan dengan sistem peralatan HPLC,

dengan UV detektor dengan panjang gelombang 210 nm.

y Kolom A rezex ROA (300 x 7.8 mm, Phenomenex) dielusi (proses

ekstraksi zat padat dengan menggunakan zat cair) dengan 5 mM H2SO4 dengan laju aliran dari 0.4 mL/min dan temperatur kolom berkisar antara 60 derajat celcius. (Miller, 1959).

y Takaran pengurangan gula menggunakan metode 3.5-dinitrosalicylic-acid y Pertumbuhan sel ditentukan menggunakan spektrofotometer pada suhu

650 nm (OD650) diikuti dengan proses sentrifugasi dan pencucian dari sel-sel tersebut. masa kering.

y Masa basah ditentukan dari kurva standar antara densitas optical dengan

Plackett-Burman Experimental Design


y Tujuan dari langkah pertama dari optimalisasi adalah mengidentifikasi dampak

signifikan komponen media pada produksi asam lactic oleh Lactobacillus plantarum LMISM6 menggunakan molase.

y Konsentrasi gula dari molase adalah konstan (150 g/L) dan 20 percobaan

dihasilkan dari 7 faktor yatu CSL, sodium asetat, magnesium sulfat, mangan sulfat, amonium sitrat, potasium fosfat dan tween 80. pengaruh signifikan pada produksi asam laktat. iterasi antara faktor.

y Dengan tingkat kepercayaan variabel sebesar 95% dianggap memberikan y Desain percobaan PB, didasarkan pada urutan pertama model dengat tanpa y Konsentrasi yang digunakan untuk setiap variabel akan ditampilkan pada tabel.1

Lanjutan
y Percobaan itu dilakukan pada labu erlenmeyer 125 mL

mengandung 20 mL dari media produksi dan 100 g/L dari kalsium karbonat pada 150 rpm selama 48 jam.

Proses Pembuatan Asam Laktat dengan Menggunakan Metode Fermentasi


1. Tahap Fermentasi y C6H12O6 + Ca(OH)2 (2CH3CHOHCOO-)Ca2+ + 2H2O y Karbohidrat Kalsium Hidroksida Kalsium Laktat Air 2. Tahap Hidrolisis dengan Asam kalsium laktat disaring untuk memisahkan sel. Selanjutnya dilakukan proses pemurnian menggunakan karbon, evaporasi dan pengasaman untuk mendapatkan asam laktat y (2CH3CHOHCOO-)Ca2+ + H2SO4 2CH3CHOHCOOH + CaSO4 y Kalsium Laktat Asam Sulfat Asam Laktat KalsiumSulfat

Proses Fermentasi Asam Laktat

Plackett-Burman Desain Eksperimental


Tabel 3 menampilkan desain Plackett-Burman matriks (nilai nyata dan dikodekan) dari 12 percobaan dengan tujuh variabel ditambahkan ke molase (X1 = Asetat, X2 = MgSO4, X3 = MnSO4, X4 = Sitrat, X5 = K2HPO4, X6 = Tween 80, X7 = CSL) dan masing hasil (asam laktat). CSL adalah variabel yang paling berpengaruh dalam produksi asam laktat, diikuti oleh K2HPO4 dan Tween 80. Semua tiga variabel memiliki signifikan positif efek pada produksi asam laktat pada 95% tingkat kepercayaan. Gambar 1 (Pareto chart) menggambarkan efek dari variabel-variabel, yang karenanya digunakan untuk mengoptimalkan produksi asam laktat. K2HPO4 memiliki efek positif pada asam laktat produksi (Gambar 1). Menurut Honorato et al.(2007), penambahan fosfat ke media meningkatkan pertumbuhan mikroorganisme dan meningkatkan produksi asam laktat, karena komponen ini mempertahankan nilai pH mendekati pertumbuhan optimal, sehingga memungkinkan konduksi fermentasi untuk waktu yang lama.

y Desain Plackett-Burman adalah tingkat dua multifaktorial desain

berdasarkan pemikiran yang dikenal sebagai seimbang tidak lengkap blok (Stanbury et al., 1986). Kunci untuk teknik ini adalah membentuk berbagai kombinasi (yang disebut majelis) dari komponen dengan jumlah yang bervariasi. Plackett-Burman desain adalah cara yang efisien untuk faktor penting antara sejumlah besar variabel. Karena ada tujuh parameter yang akan dievaluasi untuk produksi asam laktat, Plackett-Burman adalah desain yang paling sesuai. Ada sejumlah laporan di mana Plackett-Burman desain telah digunakan untuk layar faktor dalam media fermentasi yang akan dioptimalkan di percobaan berikutnya (Krishnan et al, 1998.; Reddy et al, 1999;. Putra et al, 1998;. Srinivas et al,.1994; Yu et al, 1997)..

Permukaan Respon Metodologi


Tiga komponen yang disebutkan di atas dan molase yang lebih dioptimalkan menggunakan respon permukaan optimasi. Tabel 4 menampilkan desain matriks dari variabel dalam unit kode dan nilai-nilai yang nyata dengan hasil masing-masing. Produksi asam laktat tertinggi adalah 90,2 g L-1, diperoleh dari 220 g L1 dari molase, 45 mL L-1 dari CSL, 3 g L-1 dari K2HPO4 dan 1,5 ml L1 dari Tween 80 (Tabel 4). Penerapan regresi berganda metode analisis regresi menghasilkan berikut Eq. (3) untuk data eksperimental.
y

Result and Discussion


y Produksi asam laktat tertinggi yaitu sebesar 90.2 g/L,

dihasilkan dari 220 g/L dari molase, 45 mL/L dari CSL, 3 g/L dari K2HPO4 dan 1.5 mL/L dari tween 80.

Conclusion
y Dalam kondisi optimal, hasil terbaik untuk produksi asam laktat (94,8 g/L)

diperoleh setelah 48 jam dengan 193,50 g L-1 dari molase, 37,50 mL L-1 CSL, 2,65 g L-1 dan 0,83 mL K2HPO4 L-1 dari Tween 80.
y Dengan demikian, penggunaan molase oleh fermentasi

L. plantarum LMISM6 layak dan hasil produksi asam laktat yang cukup besar, membutuhkan suplementasi murah hanya dengan sumber nitrogen (CSL), dan Tween 80 K2HPO4. Kerja ini difokuskan pada titer tinggi, namun di kedua, shaker dan bioreaktor, sekitar seperempat (50 g L-1) gula yang ditambahkan awalnya tidak dimanfaatkan. dalam produk akhir serta produktivitas volumetrik yang tinggi diperlukan untuk meningkatkan proses fermentasi dan untuk mengurangi biaya hilir.

y Masa depan penelitian yang menganggap konversi gula yang tinggi ke