MEDIOS DE CULTIVO Y PRUEBAS BIOQUIMICAS

Ortiz Gomez, Tamin Nohely

Medio de Cultivo
Conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos.

Clasificacin:
COMUNES MEDIOS ARTIFICIALES ESPECIFICOS

o Enriquecidos o Selectivos o Diferenciales

Medios Enriquecidos
Medio Comn + Elementos nutritivos elegidos

Agar Sangre

Agar Chocolate

Medios Selectivos
Desarrollo de determinadas especies y al mismo tiempo inhiben la proliferacin de flora acompaante.

Selectivos para enriquecimiento

Selectivos para aislamiento

Caldo selenito

Medios Diferenciales
Destinados a facilitar la discriminacin de microorganismos de una mezcla por sus propiedades diferenciales de crecimiento en dichos medios.

McConkey

Preparacin:

AGAR NUTRITIVO
Utilizado para el aislamiento de microorganismos poco exigentes en requerimientos nutritivos.

Formula:
oPeptona
oExtracto de carne
Fuente de nitrgeno, vitaminas y carbono

oAgar bacteriolgico

BASE AGAR SANGRE

Aislamiento y cultivo de una amplia variedad de microorganismos. Puede ser suplementado con SANGRE DE CARNERO para aislar, cultivar y estudiar reacciones hemolticas.

Formula:
o Infusin de musculo de corazn. o Extracto de levadura.

o Digerido pancretico de casena. o Cloruro de sodio. Balance osmtico

o Agar bacteriolgico.

BASE AGAR CHOCOLATE

Aislamiento y cultivo de Neisseria gonorrhoeae y otros microorganismos fastidiosos.

Utilizada para preparas Agar chocolate cuando es suplementada con hemoglobina al 2% que provee la hemina (Factor X) requerida para el crecimiento de Haemophilos y mejor desarrollo de Neisseria.

AGAR MacConkey
Aislamiento de BACILOS GRAM NEGATIVOS. Permite diferenciar a las bacterias que utilizan lactosa o no.

Formula:
o Peptona o Lactosa

o Mezcla de sales biliares o Cristal violeta

o Cloruro de sodio o Rojo Neutro

INHIBIDORES

INDICADOR

o Agar bacteriolgico

LACTOSA POSITIVOS COLOR ROSA

LACTOSA NEGATIVOS
INCOLOROS

Formula:
AGAR SALMONELLA SHIGELLA
Aislamiento de especies de salmonella y shigella.
o Peptona
o Lactosa o Mezcla de sales biliares o Verde brillante

INHIBIDORES

o Citrato de sodio o Rojo Neutro

o Tiosulfato de Sodio o Citrato Frrico

INDICADOR
DETECCION DE PRODUCCION DE H2S

o Agar bacteriolgico

AGAR MUELLER HILTON

AGAR TCBS

Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana. Por su alta reproductibilidad y su bajo contenido en sustancias inhibidoras.
Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa. Crecen todas las especies de Vibrio.

PRUEBAS BIOQUMICAS

TSI AGAR
Universalmente empleado para la diferenciacin de enterobacterias en base a la fermentacin de glucosa, lactosa, sacarosa y la produccin de acido sulfhdrico.

Hidratos de carbono fermentables: lactosa,

sacarosa y glucosa. Tiosulfato de sodio. Indicador de pH : Rojo fenol.

1. 2. 3. 4. 5.

Sin inocular ( control ) P. aeruginosa: Glc (-), Lac/Suc (-), H2S (-), Gas (-) E. coli: Glc (+), Lac/Suc (+), H2S (-), Gas (+) Salmonella Typhimurium: Glc (+), Lac/Suc (-), H2S (+), Gas (+) Shigella flexneri: Glc (+), Lac/Suc (-), H2S (-), Gas (-)

LIA AGAR
Es un medio que sirve para demostrar la produccin de dos enzimas: la lisina descarboxilasa y la lisina desaminasa. Adems de la produccin de acido sulfhdrico.

o Hidratos de carbono

fermentable: glucosa. o Tiosulfato de sodio y citrato de hierro. o Indicador de pH : Purpura de bromocresol.

A: Reaccin acida. Color amarillo K: Reaccin alcalina. Color violeta R: Reaccin alcalina: color rojo K/K: Descarboxilacion lisina K/A: Fermentacin glucosa. Descarboxilacion lisina R/A: Desanimacin lisina. Fermentacin glucosa.

SIMMONS

CITRATO
AGAR
Medio utilizado para la diferenciacin de enterobacterias, en base a la capacidad de usar citrato como nica fuente de carbono y energa.

o Hidratos

de

carbono fermentable: citrato. o Indicador de pH : Azul de bromotimol.

Positivo: crecimiento y color azul

en pico, alcalinidad. Negativo: el medio permanece de color verde.

MIO AGAR
Medio usado para la identificacin de enterobacteriacea en base a su movilidad, actividad de ornitina descarboxilasa y produccin de indol.

o Triptfano, sustrato para la enzima triptofanasa produce indol. o Dextrosa, hidrato fermentable. o Ornitina, sustrato para detectar la enzima ornitina descarboxilasa. o Indicador: purpura de bromocresol.

1 Movilidad Descarboxilacion de ornitina Produccin de indol Especie tpica negativa negativa Positiva Klebsiella

2 positiva positiva negativa Enterobacter

3 positiva positiva positiva E. coli

GRACIAS !!!!