INTRODUCCIN
Las plantas son una fuente de innumerables recursos tiles para el desarrollo de la ciencia, entre los ms importantes estn los conocidos principios activos o metabolitos secundarios. Los compuestos fenlicos son un grupo muy comn de metabolitos secundarios presentes en las plantas, estos incluyen a los fenoles simples, polifenoles, flavonoides, taninos, entre otros. Los flavonoides son el mayor grupo de fenoles vegetales y los ms estudiados.
OBJETIVOS
General
Extraer componentes activos de las brcteas de alcachofa para elaborar un extracto con propiedades antioxidantes y antibacterianas que sirva como conservante de alimentos.
Especficos
Aplicar tcnicas de extraccin slido-lquido que sirvan para obtener extractos de compuestos fenlicos a partir de brcteas de alcachofa. Caracterizar los extractos obtenidos mediante tcnicas cromatogrficas para determinar la presencia de compuestos fenlicos. Determinar la actividad antioxidante de los extractos mediante la prueba de actividad con el radical libre DPPH para probar su eficacia como captador de radicales libres, y tambin en pruebas con alimentos. Determinar la actividad antibacteriana de los extractos mediante la medicin del halo de inhibicin en dos cultivos bacterianos que comnmente contaminan alimentos (Gramnegativo: Salmonella spp., y Gram-positivo: Staphylococcus aureus), para probar su utilidad como conservante natural de alimentos.
METODOLOGA
Obtencin y Preparacin de los extractos
Pruebas de actividades
Determinacin de la humedad
MTODOS
Obtencin y preparacin de la muestra
Las muestras de brcteas de alcachofa fueron obtenidas de la empresa INAEXPO, perteneciente a PRONACA, en Puembo, Pichincha-Ecuador. La preparacin de las muestras consisti en secarlas a una temperatura menor a 40C para evitar la alteracin de los principios activos y, finalmente fueron pulverizadas.
Determinacin de la humedad en las Brcteas
Se realiza el proceso en cpsulas de porcelana previamente taradas. Pesar las cpsulas vacas y luego adicionar aproximadamente 2 3 g de brcteas de alcachofa. Secar las muestras en la estufa durante 4 horas a una temperatura de 105-110C. Sacar las cpsulas y dejarlas en desecador durante 30 minutos. Pesar las cpsulas con la muestra seca hasta peso constante
PRUEBAS DE ACTIVIDADES
Actividad Antioxidante
Para la determinacin de la actividad antioxidante de los extractos de brcteas de alcachofa se us una curva de calibracin con concentraciones conocidas del radical libre DPPH (2,2-difenil-1-picrilhidracilo) a 517m de absorbancia en el espectrofotmetro para comparar con los valores de absorbancia de los extractos.
Actividad Antibacteriana
La actividad Antibacteriana de los extractos de brcteas de alcachofa se realiz mediante el mtodo de difusin en agar por discos, a travs de este se determin la presencia de un halo de inhibicin en el cultivo bacteriano demostrando que el extracto es un agente antibacteriano. Las bacterias utilizadas para el ensayo fueron Staphylococcus aureus y Salmonella spp.,obtenidas del laboratorio de microbiologa de la Universidad San Francisco de Quito.
RESULTADOS
TAMIZAJE O SCREENING FITOQUMICO
RESULTADOS
REACCIN CON FeCl3
RESULTADOS
CROMATOGRAFA EN CAPA FINA
RESULTADOS
CROMATOGRAFA HPLC
RESULTADOS
ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE
RESULTADOS
ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA
Las brcteas de alcachofa de la variedad Imperial Star tienen 85,07% (0,646) de humedad
CONCLUSIONES
Las brcteas de alcachofa contienen compuestos fenlicos como: fenilpropanoides, taninos catquicos, flavonoides y cumarinas adems saponinas, carotenoides, azcares reductores y esteroles
La caracterizacin cualitativa (cloruro frrico y cromatografa en capa fina) y cuantitativa (FolinCiocalteu y HPLC) demostr que los extractos alcohlico e hidroalcohlico y el hidrolizado sin calor contienen compuestos fenlicos en su composicin.
CONCLUSIONES
La cromatografa en capa fina de los extractos, hidroalcohlico y alcohlico, basada en los valores del Rf (0,52 - 0,59), determin que estos contienen cido clorognico (Rf 0,54)
La actividad antioxidante de los extractos de alcachofa se debe a la presencia de compuestos fenlicos como flavonoides y cido clorognico, y tambin a la de otros como son los carotenoides.
Los extractos alcohlico e hidroalcohlico, poseen actividad antibacteriana frente a Staphylococcus aureus y Salmonella spp.