Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein A. Judul Percobaan B. Hari, Tanggal Percobaan C. Selesai Percobaan D.

Tujuan Percobaan : Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein : Kamis, 4 April 2013 : Kamis, 4 April 2013 :

1. Membedakan sifat kelarutan protein secara reversibel dan irreversibel 2. Membedakan reaksi antara denaturasi protein yang disebabkan oleh asam, garam dan garam dari logam berat, serta pemanasan berdasarkan pengamatan 3. Memahami penyebab terjadinya pengendapan pada protein 4. Mengidentifikasi adanya protein melalui reaksi warna

E. Dasar Teori Protein adalah molekul raksasa yang terdiri dari satuan-satuan kecil penyusunnya yang disebut asam amino yang tersusun dalam urutan tertentu, dengan jumlah dan struktur tertentu. Molekul-molekul ini merupakan bahan pembangun sel hidup. Protein yang paling sederhana terdiri atas 50 asam amino, tetapi ada beberapa protein yang memiliki ribuan asam amino. Hal yang terpenting adalah ketidakhadiran, penambahan, atau penggantian satu saja asam amino pada sebuah struktur protein dapat menyebabkan protein tersebut menjadi gumpalan molekul yang tidak berguna. Setiap asam amino harus terletak pada urutan yang benar dan struktur yang tepat (Poedjiadi, 1994). Protein yang terdapat dalam makanan kita dicernakan dalam lambung dan usus menjadi asam-asam amino, yang diabsorsi dan dibawa oleh darah ke hati. Sebagian asam amino diambil oleh hati, sebagian lagi diedarkan ke dalam jaringan-jaringan di luar hati. Protein dalam sel-sel tubuh dibentuk dari asam amino. Bila ada kelebihan asam amino dari jumlah yang digunakan untuk biosintesis protein, kelebihan asam amino akan diubah menjadi asam keto yang dapat masuk kedalam siklus asam sitrat atau diubah menjadi urea. Hati merupakan organ tubuh dimana terjadi reaksi katabolisme maupun anabolisme. Asam amino yang dibuat dalam hati, maupun yang dihasilkan dari proses katabolisme protein dibawa oleh darah ke dalam jaringan untuk digunakan. Asam amino yang terdapat dalam darah berasal dari tiga sumber, yaitu absorpsi melalui dinding usus, hasil penguraian protein dalam sel dan hasil sintesis asam amino dalam sel (Poedjiadi, 1994). Asam amino adalah monomer protein yang mempunyai dua gugus fungsi yaitu gugus amino dan gugus hidroksil. Jumlah asam amino yang terdapat di alam ada beratus ratus jumlahnya, namun yang diketahui ikut membangun protein hanya sekitar 20 macam.

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein Sifat asam amino antara lain memiliki titik leleh di atas 200 C, larut dalam senyawa polar dan tidak larut dalam senyawa nonpolar serta memiliki momen dipol yang besar (Anonim a, 2011). Jenis-jenis Protein Protein menurut komposisi dapat dibagi, diantaranya: a.Protein sederhana Albumin Albumin merupakan golongan protein yang paling penting dan banyak dijumpai Globulin Globulin tidak larut dalam air tetapi larut dalam larutan garam enes. Histon Histon merupakan protein penting, karena mengandung proporsi yang tinggi asam amino essensial yaitu lisin dan arginin. Skieroprotein (Albuminoid) Skleroprotein mempunyaibentuk dan fungsi pelindung dan dicarikan oleh ketidak larutannya dalam air dan dalam kebanyakan pelarut. b.Protein terkonjugasi Fosfoprotein Glikoprotein Kromoprotein Nucleoprotein Lipoprotein Protein menurut pembagian fungsi: Protein struktur Protein kotraktil Enzim Hormon Anti bodi

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

Sifat-sifat protein Protein kadang-kadang diperkenalkan sebagai molekul makro pemberi keterangan, karena urutan asam amino dari dalam urutan basa dari bagian yang bersebgketa dalam DNA yang mengarahkan biositesa protein. Tiap jenis protein ditandai sifat-sifat:

1. Susunan kimia yang khas. Setiap protein individual merupakan senyawa murni 2. Babul molecular yang khas semula dalam satu contoh tertentu dari protein mempunyai bobot moleculer yang sama. Jenis polimer ini disebut monodispers. Suatu contoh acak dari polimer yang polidispenser mencakup berbagai plastic buatan maupun polisakarida alam seperti kanji dan selulosa. 3. Urutan asam amino yang khas. Urutan asam amino dari protein tertentu adalah terinci secara genetik. Akan tetapi, perubahan-perubahan kecil dalam urutan asam amino dari protein tertentu dapat menjadi melalui hasil-hasil yang diinginkan jika protein yang diperbaiki, diciptakan melalui proses pemilikan alamiah pada tingkat molecular. Mutasi dapat juga mempunyai akibat-akibat yang mencelakakan, seperti yang kita lihat apabila kita meninjau (anonymous, 2009) Beberapa Reaksi Uji Protein (Page, 1989) : A. Percobaan berdasarkan reaksi warna: 1) Percobaan kadar-N Kapur natron, yaitu campuran NaOH dan Ca(OH)2 dalam tabung reaksi dengan larutan protein dipanaskan. Keluarlah Amoniak dan Amina.Lakmus merah yang dibasahi menjadi biru. 2) Reaksi Xantoprotein Larutan asam nitrat pekat ditambahkan dengan hati-hati ke dalam larutan protein. Setelah dicampur terjadi pengendapan putih yang dapat berubah menjadikuning apabila dipanaskan.. reaksi yang terjadi ialah nitrasi pada inti Benzen yang terdapata pada molekul protein. Jadi, reaksi ini positif untuk protein, fenilalanin dan triptofan. Kulit kita bila kena asam nitrat berwarna kuning, itu juga karena terjadi reaksi xantoprotein ini. anemia sel sabit.

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

3) Reaksi Millon Pereaksi Millon adalah larutan merkuro dan merkuri nitrat dalam asam nitrat, apabila pereaksi ini ditambahkan pada larutan protein, akan menghasilkan endapan putih yang dapat berubah menjadi merah oleh pemanasan. Pada dasarnya reaksi ini positif untuk fenol-fenol, karena terbentuknya senyawa merkuri dengan gugus hidroksifenil yang berwarna. Protein yang mengandung tirosin akan memberikan reaksi positif. 4) Reaksi Biuret Larutan Protein + NaOH + CuSO4 lembayung Berlaku

untuk senyawaan yang mempunyai jumlah ikatan peptida > 1. Reaksi ini dapat dipakai untuk penentuan protein secara kualitatif dan kuantitatif. Beberapa reaksi uji terhadap protein, tes biuret merupakan salah satu cara untuk mengidentifikasi adanya protein, dalam larutan basa biuret memberikan warna violet dengan CuSO4 karena akan terbentuk kompleks Cu2+ dengan gugus CO dan gugus NH dari rantai peptida dalam suasana basa. Pengendapan dengan logam diketahui bahwa protein mempunyai daya untuk menawarkan racun. Salting out, apabila terdapat garam-garam anorganik alam presentase tinggi dalam larutan protein, maka kelarutan protein akan berkurang, sehingga mengakibatkan pengendapan. Pengendapan dengan alkohol, penambahan pelarut organik seperti aseton atau alkohol akan menurunkan kelarutan protein pada kedudukan dan distribusi dari gugus hidrofil polar dan hidrofob polar di dalam molekul hingga menghasilkan protein yang dipol (Tim Dosen Kimia, 2011). F. Alat dan Bahan Alat : 1. Gelas kimia 2. Gelas ukur 3. Pipet tetes 4. Tabung reaksi 5. Pembakar spirtus 6. Kasa dan kaki tiga

Bahan : 1. 2. 3. Telur Susu segar Aquades 9. HCl pekat

10. CuSO4 11. PbSO4

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein 4. 5. 6. 7. 8. Asam asetat 1N Asam asetat pekat Formaldehid Amonium sulfat HNO3 pekat 12. NaOH 13. Ninhidrin 14. Pereaksi merkuri sulfat

G. Prosedur Percobaan 1. Denaturasi Protein a. Denaturasi karena penambahan asam asetat

5mL protein susu Dimasukkan tabung reaksi Ditambah 2 tetes CH3COOH 1N Dikocok

5mL protein telur Dimasukkan tabung reaksi Ditambah 2 tetes CH3COOH 1N Dikocok

Endapan / Flak Dipanaskan dalam penangas air selama 5 menit Diamati perubahannya

Endapan / Flak Dipanaskan dalam penangas air selama 5 menit Diamati perubahannya

Hasil Pengamatan

Hasil Pengamatan

b. Denaturasi karena pemanasan

2-3mL protein susu Dimasukkan tabung reaksi Dipanaskan selama 1 menit

Endapan / Flak Endapan

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Didinginkan Dibagi menjadi dua Ditambah 1-2 tetes amonium sulfat dipanaskan Didinginkan

Endapan

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

2-3mL protein telur Dimasukkan tabung reaksi Dipanaskan selama 1 menit

Endapan / Flak Endapan Didinginkan Dibagi menjadi dua Ditambah 1-2 tetes amonium sulfat dipanaskan Didinginkan

Endapan

c. Denaturasi karena penambahan formaldehid

1-1.5mL formaldehid Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah 2mL akuades Ditambah protein telur Diamati

Endapan

1-1.5mL formaldehid Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah 2mL akuades Ditambah protein susu Diamati

Endapan

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

2. Sifat Amfoter Protein

3mL akuades Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah 2 tetes HCl 1N Ditambah beberapa tetes indikator kongo

Larutan biru Ditambah 2-3mL protein susu Dicatat perubahan warna Warna

3mL akuades Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah 2 tetes HCl 1N Ditambah beberapa tetes indikator kongo

Larutan biru Ditambah 2-3mL protein telur Dicatat perubahan warna Warna

3mL larutan NaOH encer Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah beberapa tetes indikator pp

Larutan merah jambu

2-3mL protein susu Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah bertetes-tetes NaOH Dicatat perubahan warna

Warna

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

2-3mL protein telur Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah bertetes-tetes NaOH Dicatat perubahan warna

Warna

3. Pengendapan Protein a. Pengendapan protein dengan ammonium sulfat

3-4mL protein susu Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah 3-4mL larutan ammonium sulfat jenuh Dikocok pelan pelan Larutan keruh Diambil 1mL Ditambah 2-3mL akuades dikocok Larutan jernih

3-4mL protein telur Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah 3-4mL larutan ammonium sulfat jenuh Dikocok pelan pelan Larutan keruh Diambil 1mL Ditambah 2-3mL akuades dikocok Larutan jernih

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

b. Pengendapan protein dengan asam mineral

1mL HNO3 pekat Dimasukkan tabung reaksi Dimiringkan Ditambah 1-1.5 protein susu lewat dinding tabung Ditegakkan kembali

Cincin putih Dikocok Ditambah HNO3 pekat

Endapan lebih banyak

1mL HNO3 pekat Dimasukkan tabung reaksi Dimiringkan Ditambah 1-1.5 protein telur lewat dinding tabung Ditegakkan kembali

Cincin putih Dikocok Ditambah HNO3 pekat

Endapan lebih banyak

1mL HCl pekat Dimasukkan tabung reaksi Dimiringkan Ditambah 1-1.5 protein susu lewat dinding tabung Ditegakkan kembali

Cincin putih Dikocok Ditambah HCl pekat

Endapan lebih banyak

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

10

1mL HCl pekat Dimasukkan tabung reaksi Dimiringkan Ditambah 1-1.5 protein telur lewat dinding tabung Ditegakkan kembali

Cincin putih Dikocok Ditambah HCl pekat

Endapan lebih banyak

c. Pengendapan protein dengan logam berat

1-1.5mL Larutan protein Dimasukkan tabung reaksi Ditambah CuSO4 tetes demi tetes dikocok

Endapan biru Ditambah CuSO4 sampai endapan larut

Endapan lebih banyak

1-1.5mL Larutan protein Dimasukkan tabung reaksi Ditambah PbSO4 tetes demi tetes dikocok

Endapan biru Ditambah PbSO4 sampai endapan larut

Endapan lebih banyak

Diulangi untuk garam dari Zn, Fe dan Hg

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

11

4. Reaksi Warna Protein a. Reaksi Biuret

3mL protein susu Ditambah 1mL NaOH 40% Ditambah bertetes tetes larutan CuSO4 0.5%

Warna merah / ungu

3mL protein telur Ditambah 1mL NaOH 40% Ditambah bertetes tetes larutan CuSO4 0.5%

Warna merah / ungu

b. Reaksi Xantho Protein

3mL protein susu Ditambah 1mL HNO3 pekat Dipanaskan

Larutan kuning Didinginkan Ditambah amonia melalui dinding tabung

Larutan jingga 3mL protein telur Ditambah 1mL HNO3 pekat Dipanaskan

Larutan kuning Didinginkan Ditambah amonia melalui dinding tabung

Larutan jingga

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

12

c. Reaksi Ninhidrin
1mL protein susu Diatur pH sampai 7 Ditambah 10 tetes larutan ninhidrin 0.2% Dipanaskan pada suhu 100C selama 10 menit Diamati perubahan yang terjadi

Hasil pengamatan

1mL protein telur Diatur pH sampai 7 Ditambah 10 tetes larutan ninhidrin 0.2% Dipanaskan pada suhu 100C selama 10 menit Diamati perubahan yang terjadi

Hasil pengamatan

d. Reaksi Millon
2mL protein susu Ditambah 1mL HgSO4 Dipanaskan Endapan Didinginkan dengan air Ditambah 1 tetes NaNO2 1% Dipanaskan

Endapan merah

2mL protein telur Ditambah 1mL HgSO4 Dipanaskan Endapan Didinginkan dengan air Ditambah 1 tetes NaNO2 1% Dipanaskan

Endapan merah
LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

13

e. Reaksi Hopkin-Cole
1mL protein susu Ditambah 1 tetes formaldehid encer Ditambah 1 tetes HgSO4 Ditambah 1mL H2SO4 pekat melalui dinding tabung

Terbentuk 2 lapisan Dikocok Larutan ungu

1mL protein telur Ditambah 1 tetes formaldehid encer Ditambah 1 tetes HgSO4 Ditambah 1mL H2SO4 pekat melalui dinding tabung

Terbentuk 2 lapisan Dikocok Larutan ungu

5. Hidrolisis Protein dan Tes Adanya Belerang

1mL protein susu Ditambah 1mL NaOH 40% Dipanaskan selama 1 menit Ditambah 1 tetes Pb asetat Endapan PbS

1mL protein telur Ditambah 1mL NaOH 40% Dipanaskan selama 1 menit Ditambah 1 tetes Pb asetat Endapan PbS
LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein H. Hasil Pengamatan Alur Kerja Hasil Pengamatan Sebelum Sesudah Dugaan / reaksi Kesimpulan

14

1. Denaturasi Protein

a. Denaturasi karena penambahan asam asetat

5mL protein susu - Dimasukkan tabung reaksi - Ditambah 2 tetes CH3COOH 1N - Dikocok Endapan / Flak Dipanaskan dalam penangas air selama 5 menit Diamati perubahannya

Protein susu: putih Protein telur: kuning jernih

Susu +
CH3COOH: putih keruh Dipanaskan: putih +++ (endapan +) Telur + CH3COOH: endapan Dipanaskan: endapan ++

Protein akan terdenaturai dengan adanya penambahan asam.

Asam dapat

asetat

menyebabkan protein terdenaturasi yang ditandai dengan adanya endapan saat ditambahkan asam asetat.

Hasil Pengamatan

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

15

b. Denaturasi Karena Pemanasan

2-3mL larutan protein Dimasukkan tabung reaksi Dipanaskan selama 1 menit NH4SO4: tidak berwarna Susu dipanaskan: endapan + NH4SO4: endapan

Pemanasan dapat menyebabkan denaturasi protein.

Pemanasan menyebabkan protein terdenaturasi yang ditandai dengan adanya endapan saat dipanaskan.

Endapan / Flak Telur Didinginkan Dibagi menjadi dua Ditambah 1-2 tetes amonium sulfat dipanaskan Di din gin kan dipanaskan: endapan + NH4SO4: endapan +

Endapan Endapan

c. Denaturasi Karena Penambahan Formaldehid

Formaldehid: 1-1.5mL formaldehid Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah 2mL akuades Ditambah larutan protein Diamati tidak berwarna

Susu + H2O + formaldehid: endapan putih

Formaldehid dapat mendenaturasi protein karena

Protein terdenaturasi setelah ditambah formaldehid yang ditandai adanya endapan.

Akuades: tidak berwarna

Telur + H2O + formaldehid: endapan kuning

mengikat gugus amino.

Endapan

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

16

2. Sifat Amfoter Protein

3mL akuades Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah 2 tetes HCl 1N Ditambah beberapa tetes indikator kongo

HCl: tidak berwarna

Protein dapat bersifat asam apabila

Indikator pp: tidak berwarna

ditambahkan dengan asam dan daat bersifat basa

Larutan biru Ditambah 2-3mL protein Dicatat perubahan warna Warna

NaOH: tidak berwarna

apabila ditambah basa. Sifat ini disebut sifat amfoter protein. Protein bersifat basa saat ditambah NaOH yang ditunjukkan hasil larutan merah jambu saat ditambah indikator pp.

3mL larutan NaOH encer Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah beberapa tetes indikator pp

Larutan protein + NaOH: tidak berwarna + indikator pp: larutan merah jambu

Larutan merah jambu

2-3mL protein susu Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah bertetes-tetes NaOH Dicatat perubahan warna

Warna

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

17

3. Pengendapan Protein a. Pengendapan protein dengan ammonium sulfat

3-4mL larutan protein Dimasukkan dalam tabung reaksi Ditambah 3-4mL larutan ammonium sulfat jenuh Dikocok pelan pelan Larutan keruh Diambil 1mL Ditambah 2-3mL akuades dikocok Larutan jernih

NH4SO4: tidak berwarna

Susu + NH4SO4: putih + akuades: endapan larut

Pengendapan protein dengan ammonium sulfat dapat larut kembali atau bersifat reversibel.

Pengendapan yang terjadi bersifat reversibel karena larut kembali setelah ditambahkan akuades.

Akuades: tidak berwarna

Telur + NH4SO4: hablur, jernih + akuades: endapan larut

b. Pengendapan protein dengan asam mineral

1mL HNO3 pekat Dimasukkan tabung reaksi Dimiringkan Ditambah 1-1.5 larutan protein lewat dinding tabung Ditegakkan kembali

HNO3: tidak Susu + HNO3: berwarna cincin putih + HNO3: endapan ++

Reaksi antara asam dan protein akan menghasilkan garam dan

Pengendapan protein karena penambahan HNO3 bersifat irreversibel.

Telur + HNO3: cincin putih + HNO3: endapan +

endapan. Endapan yang diperoleh sifatnya mudah larut saat protein direaksikan dengan HCl

Cincin putih Dikocok Ditambah HNO3 pekat

Endapan lebih banyak

1mL HCl pekat Dimasukkan tabung reaksi

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

HCl: tidak Susu + HCl: cincin putih + HCl: endapan + Telur + HCl: cincin putih + HCl: endapan +

18

pekat atau reversibel.

Pengendapan protein karena penambahan HCl bersifat reversibel.

berwarna

c. Pengendapan protein dengan logam berat

1-1.5mL Larutan protein Dimasukkan tabung reaksi Ditambah CuSO4 tetes demi tetes dikocok CuSO4: tidak Susu + 2 tetes berwarna CuSO4: endapan biru + 15 tetes CuSO4: endapan larut

Protein dapat mengendap apabila ditambahkan dengan garam dari logam

Cu, Fe, Zn, Pb dan Hg merupakan logam berat karena dapat meng endapkan protein. Pengendapan yang terjadi akibat penambahan garam-garam tersebut bersifat reversibel.

Endapan biru Ditambah CuSO4 sampai endapan larut

Endapan lebih banyak

Telur + 2 tetes CuSO4: endapan biru + 6 tetes CuSO4: endapan larut

berat.

1-1.5mL Larutan protein Dimasukkan tabung reaksi Ditambah PbSO4 tetes demi tetes
LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

19

PbSO4: tidak berwarna

Susu + 1 tetes
PbSO4: endapan putih + 40 tetes PbSO4: endapan larut Telur + 1 tetes PbSO4: endapan

Diulangi untuk garam dari Zn, Fe dan Hg

putih + 40 tetes PbSO4: endapan larut ZnSO4: tidak Susu + 4 tetes berwarna ZnSO : endapan
4

putih + 15 tetes ZnSO4: endapan larut Telur + 2 tetes ZnSO4: endapan putih + 5 tetes ZnSO4: endapan larut FeSO4: tidak berwarna Susu + 1 tetes FeSO4: endapan coklat + 22 tetes FeSO4: endapan larut Telur + 1 tetes FeSO4: endapan

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

coklat + 8 tetes FeSO4: endapan larut

20

HgSO4: tidak berwarna

Susu + 2 tetes HgSO4: endapan + 22 tetes HgSO4: endapan larut Telur + 2 tetes HgSO4: endapan + 22 tetes HgSO4: endapan larut

4. Reaksi Warna Protein

a. Reaksi Biuret
3mL larutan protein Ditambah 1mL NaOH 40% Ditambah bertetes tetes larutan CuSO4 0.5%

Telur: jernih Susu: larutan putih NaOH: tidak berwarna CuSO4: biru jernih

Susu + NaOH + CuSO4: ungu

Makin banyak / makin panjang ikatan peptida dalam

Protein susu dan telur memiliki ikatan peptida karena terbentuk warna ungu pada reaksi biuret.

Warna merah / ungu

Telur + NaOH + CuSO4: ungu (-)

protein warna ungu makin kuat intensitasnya begitu juga makin sedikit maka semakin merah muda.

b. Reaksi Xantho Protein

Protein susu

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

3mL larutan protein Ditambah 1mL HNO3 pekat Dipanaskan

21

HNO3 berwarna

Susu + HNO3 dua lapisan,

Reaksi xantho protein digunakan untuk meng identifikasi adanya nitrasi cincin benzena yang ditandai dengan terbentuknya warna kuning

dan telur mengandung gugus benzena karena terbentuk warna kuning sebagai indikator reaksi xantho protein.

pekat: tidak dipanaskan:

NH3: tidak kuning berwarna + NH3 dipanaskan: dua lapisan, jingga,

Larutan kuning Didinginkan Ditambah amonia melalui dinding tabung

Larutan jingga

endapan +++ Telur + HNO3 dipanaskan: dua lapisan, kuning + NH3 dipanaskan: 2 lapisan, jingga, endapan

c. Reaksi Ninhidrin Protein susu

1mL larutan protein Diatur pH sampai 7 Ditambah 10 tetes larutan ninhidrin 0.2% Dipanaskan pada suhu 100C selama 10 menit Diamati perubahan yang terjadi

Ninhidrin: kuning, jernih Susu + ninhidrin: putih kebiruan Dipanaskan: ungu

Larutan jika dipanaskan akan menghasilkan warna abu-abu atau ungu maka terdapat Telur + ninhidrin: keruh Dipanaskan: ungu ++ asam alfa amino.

dan telur mengandung asam amino.

Hasil pengamatan

d. Reaksi Millon

Protein susu
LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

2mL larutan protein Ditambah 1mL HgSO4 Dipanaskan Endapan
Didinginkan dengan air Ditambah 1 tetes NaNO2 1% Dipanaskan

22

HgSO4: tidak berwarna NaNO2: tidak berwarna

Susu + HgSO4 dipanaskan: endapan kuning + NaNO2: endapan merah kecoklatan Telur + HgSO4 dipanaskan: endapan kuning + NaNO2 dipanaskan: endapan merah kecoklatan ++

Endapan merah pada reaksi millon terbentuk sebagai indikator adanya tirosin atau triptofan yang bereaksi dengan Hg.

dan telur mengandung tirosin dan triptofan karena menghasilkan endapan merah pada reaksi millon.

Endapan merah

e. Reaksi Hopkin-Cole Terbentuk

1mL protein susu Ditambah 1 tetes formaldehid encer - Ditambah 1 tetes HgSO4 - Ditambah 1mL H2SO4 pekat melalui dinding tabung Terbentuk 2 lapisan Dikocok Larutan ungu HgSO4: tidak berwarna H2SO4: tidak berwarna

Protein yang Susu + formaldehid + millon: putih + H2SO4: dua lapisan Dikocok: larutan kuning Telur + formaldehid + millon: endapan putih + H2SO4: dua lapisan Dikocok: gumpalan putih positif mengandung tirosin indol akan menghasilkan warna ungu.

cincin berwarna ung yang menunjukkan hasil positif uji hopkincole.

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein 5. Hidrolisis Protein dan Tes Adanya Belerang S2- + 2H2O + PbO22- PbS + 4OHEbdapan PbS berwarna Telur + NaOH: tidak berwarna + Pb asetat: endapan abuabu. hitam.

23

1mL protein susu Ditambah 1mL NaOH 40% Dipanaskan selama 1 menit Ditambah 1 tetes Pb asetat Endapan PbS

NaOH: tidak berwarna

Susu + NaOH: putih (-) + Pb asetat: hitam

Adanya perubahan warna endapan hitam menunjukkan asam amino mengandung belerang. Kemungkinan asam amino tersebut adalah methionine dan cysteine.

Pb asetat: tidak berwarna

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein I. Analisis dan Pembahasan Percobaan 1 Pada percobaan pertama, dilakukan pengujian beberapa faktor yang

24

menyebabkan denaturasi pada protein. Denaturasi protein adalah hilangnya sifat-sifat struktur lebih tinggi oleh terkacaunya ikatan hidrogen dan gaya-gaya sekunder lain yang memutuskan molekul protein. Akibat dari suatu denaturasi adalah hilangnya banyak sifat-sifat biologis suatu protein. Faktor-faktor yang

mempengaruhi denaturasi protein ada berbagai macam. Diantaranya denaturasi protein karena pemanasan, penambahan asam asetat dan formalin Denaturasi karena penambahan asam asetat

Pada percobaan pertama dilakukan percobaan pada 5mL larutan protein baik protein susu maupun protein telur dengan prosedur sebagai berikut. Pertama 5mL larutan protein dimasukkan pada tabung reaksi kemudian ditambah dengan 2 tetes larutan asam asetat 1N sehingga diperoleh endapan atau flake. Tabung reaksi selanjutnya dipanaskan dalam penangas air selama 5 menit dan diamati perubahannya. 5mL protein susu ditambah dengan 2 tetes asam asetat 1N menghasilkan larutan putih keruh dan setelah dipanaskan menjadi larutah yang lebih putih (+++) disertai endapan (+). 5mL protein telur ditambah dengan 2 tetes asam asetat 1N menghasilkan endapan dan setelah dipanaskan menghasilkan endapan lebih banyak (++). Penambahan asam/basa akan menyebabkan denaturasi protein yang ditandai dengan meningkatnya kekeruhan larutan dan timbulnya gumpalan (koagulasi). Asam dan basa akan mengacaukan jembatan garam dengan adanya muatan ionik. Pada

percobaan ini reaksinya adalah sebaagai berikut: Putih telur + CH3COOH = terbentuk gumpalan Susu + CH3COOH = putih Dari hasil tersebut dapat diketahui bahwa protein susu dan telur yang ditambahi dengan asam asetat mengalami denaturasi yang ditandai dengan adanya endapan. Karena yang ditambahkan adalah asam lemah, maka pengaruhnya terhadap denaturasi protein tidak akan sekuat asam kuat. Sehingga kebanyakan hanya melembekkan saja. Penambahan asam lemah ini juga menunjukkan denaturasi protein karena perubahan pH. Secara teori, denaturasi dapat bersifat reversibel, jika suatu protein hanya dikenai kondisi denaturasi yang lembut seperti perubahan pH.

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein Setelahnya dilakukan pemanasan, susu yang semula berwarna putih keruh (-) berubah kembali menjadi keadaan awalnya yaitu putih susu. Sedangkan pada putih telur, gumpalan yang dihasilkan tadi larut namun dihasilkan larutan putih keruh. Hal ini menunjukkan bahwa denaturasi protein bersifat reversibel atau dapat kembali ke keadaan semula saat pemanasan namun terdenaturasi kembali saat suhunya cukup rendah.

25

Denaturasi karena pemanasan Pada percobaan ini 2-3mL larutan protein baik protein susu maupun telur

dimasukkan ke dalam

tabung reaksi kemudian dipanaskan selama 1 menit dan

menghasilkan endapan atau flake. Setelah itu tabung reaksi didinginkan lalu dibagi menjadi dua bagian. Bagian pertama ditambah dengan 1-2 tetes ammonium sulfat lalu dipanaskan dan menghasilkan endapan. Sementara bagian kedua dipanaskan tanpa ditambah ammonium sulfat dan menghasilkan endapan. Endapan yang dihasilkan bagian kedua lebih banyak daripada bagian pertama. Pemanasan dapat menyebabkan denaturasi karena kemampuan protein untuk mengikat air menurun dan menyebabkan terjadinya koagulasi. Pada percobaan ini, protein susu dan telur saat dipanaskan masing-masing menimbulkan endapan. Sehingga dapat dikatakan bahwa protein telur dan susu telah terdenaturasi. Kemudian masingmasing larutan dibagi 2, dimana bagian I ditambahkan (NH4)2SO4. Pada protein susu maupun telur didapatkan endapan yang lebih banyak pada bagian I atau larutan yang ditambah dengan ammonium sulfat((NH4)2SO4). Penambahan garam (NH4)2SO4 ini akan menyebabkan terjadinya dehidrasi protein sehingga molekul protein yang mempunyai kelarutan paling kecil akan mudah mengendap. Kesimpulan dari percobaan ini adalah pemanasan dapat menyebabkan denaturasi protein yang ditandai dengan adanya endapan yang dihasilkan.

Denaturasi karena penambahan formaldehid Pada percobaan ini dilakukan mengujian pada larutan protein susu dan telur

dengan prosedur sebagai berikut: beberapa tetes larutan protein susu dan telur dimasukkan ke dalam tabung reaksi lalu ditambah dengan 2mL akuades dan ditambah dengan 1-1.5mL larutan formaldehid kemudian diamati perubahannya.

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein Pada protein susu setelah ditambahkan akuades dan formaldehid terbentuk endapan putih sedangkan pada protein telur setelah ditambahkan akuades dan formaldehid terbentuk endapan kuning. Penambahan formaldehid akan menyebabkan reaksi pada gugus amino protein dengan asam amino dimetil. Hasil reaksi ini memberikan endapan yang tidak larut dalam air dan mengeras. Pada percobaan ini kedua larutan protein membentuk endapan setelah ditambahkan dengan akuades dan formaldehid. Sehingga dapat dikatakan bahwa protein telah terdenaturasi karena penambahan formaldehid. Kesimpulan dari percobaan ini dalah formaldehid dapat menyebabkan denaturasi terhadap protein. Percobaan 2 Pada percobaan kedua, seharusnya dilakukan pengujian sifat amfoter protein dengan menguji larutan protein susu dan telur dengan hipotesis semakin banyak atau panjang ikatan peptida dalam protein maka warna ungu yang dihasilkan akan semakin kuat intensitasnya begitu pula sebaliknya apabila ikatan peptida dalam protein sedikit maka warna ungu tidak terlalu kuat dan cenderung menjadi merah muda. Percobaan 3 Pengendapan protein dapat disebabkan adanya berbagai gugus fungsional (NH2, NH, OH, CO) dan bentuk ion ganda (zwitter ion) yang terdapat dalam struktur protein. Gugus-gugus tersebut mampu mengikat molekul air melalui pembentukan ikatan hidrogen. Reaksi pengendapan dapat terjadi dikarenakan penambahan bahan-bahan kimia seperti garam-garam dan pelarut organik yang dapat merubah sifat kelarutan protein dalam air. Pengendapan dengan ammonium sulfat Pada percobaan ini dilakukan pengujian terhadap 3-4mL larutan protein susu dan telur dengan prosedur sebagai berikut: 3-4mL larutan protein susu dan telur dimasukkan dalam tabung reaksi kemudian ditambah dengan 3-4mL larutan ammonium sulfat jenuh lalu dikocok sehingga terbentuk larutan keruh. Larutan keruh yang dihasilkan diambil sebanyak 1mL kemudian ditambah akuades sebanyak 2-3mL dan dikocok kembali.

26

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein Larutan protein susu ditambah dengan ammonium sulfat menghasilkan larutan putih, setelah ditambah akuades endapannya larut. Larutan protein telur ditambah dengan ammonium sulfat menghasilkan larutan jernih disertai hablur. Saat ditambakan akuades larutan jernih terdapat gel dan endapannya larut. Pengendapan yang diakibatkan ammonium sulfat menyebabkan terjadinya dehidrasi protein sehingga molekul protein yang mempunyai kelarutan paling kecil akan mudah mengendap. Pada percobaan ini larutan protein telur dan susu masing masing ditambahkan larutan ammonium sulfat menghasilkan endapan berwarna putih. Endapan berwarna putih terbentuk karena ammonium sulfat dapat menyebabkan dehidrasi air, sehingga kelarutannya berkurang. Kemudian endapan ini larut pada penambahan air. Berarti dalam protein telur dan susu mengandung gugus amino yang memiliki kelarutan yang rendah yang menyebabkannya mengendap dan endapan yang terbentuk bersifat reversible karena dapat dilarutkan kembali.

27

Pengendapan protein dengan asam mineral pekat Pada percobaan ini dilakukan pengujian terhadap 1-1.5mL larutan protein susu

dan telur dengan penambahan asam mineral pekat yaitu HNO3 dan HCl dengan prosedur sebagai berikut: 1. 1mL HNO3 pekat dimasukkan ke dalam tabung reaksi kemudian tabung reaksi dimiringkan. Ditambahkan 1-1.5mL larutan protein susu / telur melalui dinding tabung sehingga didapatkan cincin putih. Tabung reaksi kemudian dikocok dan kembali ditambahkan dengan HNO3 pekat hingga diperoleh endapan yang lebih banyak. 2. 1mL HCl pekat dimasukkan ke dalam tabung reaksi kemudian tabung reaksi dimiringkan. Ditambahkan 1-1.5mL larutan protein susu / telur melalui dinding tabung sehingga didapatkan cincin putih. Tabung reaksi kemudian dikocok dan kembali ditambahkan dengan HCl pekat hingga diperoleh endapan yang lebih banyak. Larutan protein susu ketika ditambahkan dengan HNO3 pekat menghasilkan cincin putih dan ketika ditambah kembali dengan HNO3 pekat diperoleh endapan yang lebih banyak. Larutan protein telur ketika ditambahkan dengan HNO3 pekat menghasilkan cincin putih dan ketika ditambah kembali dengan HNO3 pekat diperoleh

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein endapan yang lebih banyak. Endapan yang dihasilkan larutan protein susu lebih banyak daripada endapan yang dihasilkan oleh protein telur. Larutan protein susu ketika ditambahkan dengan HCl pekat menghasilkan cincin putih dan ketika ditambah kembali dengan HCl pekat diperoleh endapan yang lebih banyak. Larutan protein telur ketika ditambahkan dengan HCl pekat menghasilkan cincin putih dan ketika ditambah kembali dengan HCl pekat diperoleh endapan yang lebih banyak. Endapan yang dihasilkan larutan protein susu sama banyak dengan endapan yang dihasilkan oleh protein telur. Pengendapan yang terjadi dikarenakan adanya reaksi antara asam kuat dengan gugus amino dari protein yang menyebabkan terbentuknya endapan. Baik larutan protein telur maupun susu saat ditambah larutan HNO3 membentuk endapan yang berupa cincin putih saat penambahan HNO3 berlebih endapan putih yang terbentuk semakin banyak. Hal ini menunjukkan bahwa pengendapan dengan HNO3 pekat bersifat ireversibel. Larutan protein susu dan telur direaksikan dengan menggunakan HCl membentuk endapan yang berupa cincin putih saat penambahan HCl berlebih endapan putih yang terbentuk semakin banyak tetapi mudah larut. Hal ini menunjukkan bahwa pengendapan dengan HCl pekat bersifat reversibel. Pengendapan protein dengan logam berat Pada percobaan ini dilakukan pengujian terhadap 1-1.5mL larutan protein susu dan telur dengan prosedur sebagai berikut: 1. 1-1.5mL larutan protein susu atau telur dimasukkan dalam tabung reaksi dan ditambah dengan CuSO4 tetes demi tetes kemudian dikocok sehingga didapatkan endapan biru. Endapan yang didapatkan ditambah kembali dengan CuSO4 hingga endapannya larut. 2. 1-1.5mL larutan protein susu atau telur dimasukkan dalam tabung reaksi dan ditambah dengan PbSO4 tetes demi tetes kemudian dikocok sehingga didapatkan endapan putih. Endapan yang didapatkan ditambah kembali dengan PbSO4 hingga endapannya larut. 3. 1-1.5mL larutan protein susu atau telur dimasukkan dalam tabung reaksi dan ditambah dengan ZnSO4 tetes demi tetes kemudian dikocok sehingga didapatkan endapan putih. Endapan yang didapatkan ditambah kembali dengan ZnSO4 hingga endapannya larut.

28

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein 4. 1-1.5mL larutan protein susu atau telur dimasukkan dalam tabung reaksi dan ditambah dengan FeSO4 tetes demi tetes kemudian dikocok sehingga didapatkan endapan coklat. Endapan yang didapatkan ditambah kembali dengan FeSO4 hingga endapannya larut. 5. 1-1.5mL larutan protein susu atau telur dimasukkan dalam tabung reaksi dan ditambah dengan HgSO4 tetes demi tetes kemudian dikocok sehingga didapatkan endapan. Endapan yang didapatkan ditambah kembali dengan HgSO4 hingga endapannya larut. Larutan protein susu + 2 tetes CuSO4 membentuk endapan biru dan ketika ditambah 15 tetes CuSO4 endapannya larut kembali. Larutan protein telur + 2 tetes CuSO4 membentuk endapan biru dan ketika ditambah 6 tetes CuSO4 endapannya larut kembali. Larutan protein susu + 1 tetes PbSO4 membentuk endapan putih dan ketika ditambah 40 tetes PbSO4 endapannya larut kembali. Larutan protein telur + 1 tetes PbSO4 membentuk endapan putih dan ketika ditambah 40 tetes PbSO4 endapannya larut kembali. Larutan protein susu + 4 tetes ZnSO4 membentuk endapan putih dan ketika ditambah 15 tetes ZnSO4 endapannya larut kembali. Larutan protein telur + 2 tetes ZnSO4 membentuk endapan putih dan ketika ditambah 5 tetes ZnSO4 endapannya larut kembali. Larutan protein susu + 1 tetes FeSO4 membentuk endapan coklat dan ketika ditambah 22 tetes FeSO4 endapannya larut kembali. Larutan protein telur + 1 tetes FeSO4 membentuk endapan coklat dan ketika ditambah 8 tetes FeSO4 endapannya larut kembali. Larutan protein susu + 2 tetes HgSO4 membentuk endapan dan ketika ditambah 22 tetes HgSO4 endapannya larut kembali. Larutan protein telur + 2 tetes HgSO4 membentuk endapan dan ketika ditambah 22 tetes HgSO4 endapannya larut kembali.

29

Pada percobaan ini dapat disimpulkan bahwa penambahan logam berat dapat menyebabkan terjadinya pengendapan pada larutan protein baik protein susu maupun telur. Pengendapan yang terjadi bersifat reversibel karena dapat larut kembali ketika ditambahkan logam berat yang sama dengan jumlah yang lebih banyak. Percobaan 4 Percobaan keempat dilakukan untuk menguji adanya protein melalui reaksi warna. Percobaan yang dilakukan meliputi reaksi Biuret, Xantho Protein, Ninhidrin, Millon dan Hopkin-Cole.
LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

30

Reaksi Biuret Pada percobaan ini dilakukan pengujian terhadap 3mL larutan protein susu atau

telur dengan prosedur sebagai berikut: 3mL larutan protein dimasukkan dalam tabung reaksi lalu ditambah dengan larutan NaOH 40% dan bertetes-tetes larutan CuSO4 0.5% hingga diperoleh warna ungu. Warna ungu yang dihasilkan oleh larutan protein telur lebih pudar dibandingkan dengan warna ungu yang dihasilkan larutan protein susu. Reaksi biuret merupakan reaksi warna yang umum digunakan untuk menguji adanya ikatan peptida (-CO-NH-) dan protein. Reaksi positif ditandai dengan terbentuknya warna ungu karena terbentunya senyawa kompleks antara Cu2+ dan N dari molekul ikatan peptide. Pada uji ini, larutan susu dan putih telur berturut-turut menunjukkan warna ungu dan ungu (-), sehingga kedua larutan positif mengandung ikatan peptida. Karena warna ungu yang dihasilkan larutan protein telur lebih lemah, maka dapat disimpulkan bahwa ikatan peptida pada protein susu lebih panjang daripada protein telur. Reaksi Xantho Protein Pada percobaan ini dilakukan pengujian pada 3mL larutan protein susu atau telur dengan prosedur sebagai berikut: 3mL larutan protein susu atau telur dimasukkan ke dalam tabung reaksi lalu ditambah dengan 1mL HNO3 pekat kemudian dipanaskan hingga terbentuk larutan kuning. Larutan kuning yang dihasilkan kemudian didinginkan dan ditambah dengan NH3 melalui dinding tabung hingga terbentuk larutan berwarna jingga. Larutan protein susu + HNO3 pekat dan dipanaskan membentuk dua lapisan berwarna kuning. Kemudian ditambah NH3 dan dipanaskan kembali membentuk dua lapisan berwarna jingga dengan endapan yang banyak (+++). Larutan protein telur + HNO3 pekat dan dipanaskan membentuk dua lapisan berwarna kuning. Kemudian ditambah NH3 dan dipanaskan kembali membentuk dua lapisan berwarna jingga dengan endapan yang tidak terlalu banyak dibandingkan dengan protein susu.

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein Reaksi ini dapat digunakan untuk mengidentifikasi adanya senyawa poli nitro benzene dari gugus gugus amino. Uji ini menghasilkan warna kuning. Warna kuning terjadi akibat reaksi dari gugus poli nitro benzena yang terdapat dalam gugus amino. Kemudian jika ditambah larutan alkali warna kuning akan hilang dan diganti dengan larutan berwana jingga yang menunjukkan sifat keasaman dari fenol. Pada uji ini baik larutan protein telur maupun susu memberikan hasil yang positif saat penambahan HNO3 pekat terbentuk larutan dengan endapan berwarna kuning dan saat ditambah dengan NH3 terbentuk cincin kuning dengan disertai adanya warna jingga. Hal ini berarti bahwa dalam protein telur maupun susu mengandung gugus senyawa poli nitro benzena misalnya tirosin, fenilalanin, atau triptofan. Reaksi Ninhidrin Pada percobaan ini dilakukan pengujian terhadap 1mL larutan protein susu atau telur dengan prosedur sebagai berikut: 1mL larutan protein susu atau telur dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan diatur pHnya sampai 7 kemudian ditambah 10 tetes larutan ninhidrin 0.2% lalu dipanaskan pada suhu 100C selama 10 menit dan diamati perubahan yang terjadi. Larutan protein susu + larutan ninhidrin menghasilkan larutan putih kebiruan dan setelah dipanaskan warnanya berubah menjadi ungu. Larutan protein telur + larutan ninhidrin menghasilkan larutan keruh dan setelah dipanaskan warnanya berubah menjadi ungu yang lebih pekat ++ jika dibandingkan dengan larutan protein susu. Ninhidrin adalah suatu reagen berguna untuk mendeteksi asam amino dan menunjukkan uji positif bila memberikan warna biru atau ungu. Senyawa ini

31

merupakan hidrat dari triketon siklik, dan bila bereaksi dengan asam amino menghasilkan zat berwarna ungu

Struktur ninhidrin: (2,2-Dihydroxyindane-1,3-dione)

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein Pada uji ini, larutan putih telur dan susu berturut-turut menunjukkan warna biru kehitaman dan biru keunguan. Sehingga dapat disimpulkan bahwa kedua larutan tersebut positif terhadap uji ninhidrin dan keduanya sama-sama mengandung asam amino dalam molekulnya.

32

Reaksi Millon Pada percobaan ini dilakukan pengujian terhadap 2mL larutan protein susu atau

telur dengan prosedur sebagai berikut: 2mL larutan protein susu atau telur dimasukkan ke dalam tabung reaksi lalu ditambah 1mL HgSO4 dan dipanaskan hingga membentuk endapan. Kemudian tabung reaksi didinginkan dengan air lalu ditambah 1 tetes NaNO2 1% dan dipanaskan kembali hingga terbentuk endapan merah. Larutan protein susu + HgSO4 dan dipanaskan menghasilkan endapan kuning. Setelah ditambah NaNO2 dan dipanaskan kembali menghasilkan endapan merah kecoklatan. Larutan protein telur + HgSO4 dan dipanaskan menghasilkan endapan kuning. Setelah ditambah NaNO2 dan dipanaskan kembali menghasilkan endapan merah kecoklatan yang lebih banyak daripada larutan protein susu. Reaksi millon ini dapat menunjukkan adanya kondensasi dua indol dari triptofan (senyawa fenol) dengan aldehid yang dapat ditunjukkan dengan terbentuknya warna merah. Larutan protein telur dan susu saat ditambah dengan larutan HgSO4 membentuk endapan yang kemudian saat dipanaskan larutan menjadi berwarna merah dan saat penambahan NaNO2 dan dipanaskan kembali warna merahnya semakin terlihat

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein semakin jelas. Hal ini membuktikan bahwa dalam larutan protein telur maupun susu asam amino penyusunnya mengandung senyawa fenolik seperti tirosin atau triptofan. Reaksi Hopkin-Cole

33

Pada percobaan ini dilakukan pengujian terhadap 1mL larutan protein susu atau telur dengan prosedur sebagai berikut: 1mL larutan protein susu atau telur dimasukkan pada tabung reaksi kemudian ditambah 1 tetes larutan formaldehid, 1 tetes larutan HgSO4 dan 1mL larutan H2SO4 pekat melalui dinding tabung kemudian membentuk 2 lapisan. Setelah dikocok akan menghasilkan larutan berwarna ungu. Larutan protein susu + formaldehid + HgSO4 menghasilkan larutan putih, ketika ditambah dengan H2SO4 pekat terbentuk 2 lapisan dan terdapat warna ungu. Larutan protein telur + formaldehid + HgSO4 menghasilkan endapan putih, ketika ditambah dengan H2SO4 pekat terbentuk 2 lapisan dan terdapat warna ungu. Reaksi warna protein ini menunjukkan positif apabila ditandai terbentuknya cincin ungu pada bidang batas antara larutan protein dengan pereaksi. Pembentukan cincin ini dikarenakan terbentuknya kondensasi 2 inti aldol dari triptofan dengan aldehid. Pada uji ini, larutan protein susu dan telur masing-masing menunjukkan adanya warna ungu ditengah endapan berwarna kuning, namun tidak membentuk suatu cincin. Hal ini mungkin dikarenakan saat penambahan H2SO4 pekat, tabung tidak berada dalam posisi miring yang seharusnya sehingga larutan tidak menetes melalui dinding melainkan langsung jatuh ke dalam tabung. Namun, karena sudah dihasilkan warna ungu maka kedua larutan positif terhadap uji Hopkin-Cole yang artinya kedua larutan mengandung indol. Percobaan 5 Pada percobaan ini dilakukan pengujian terhadap 1mL larutan protein susu atau telur dengan prosedur sebagai berikut: 1mL larutan protein susu atau telur dimasukkan ke dalam tabung reaksi kemudian ditambah 1mL NaOH 40% dan dipanaskan selama 1 menit lalu ditambah dengan 1 tetes Pb asetat hingga menghasilkan endapan.

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein Larutan protein susu + NaOH + Pb asetat menghasilkan endapan hitam. Larutan protein telur + NaOH + Pb asetat menghasilkan endapan abu-abu. Kedua endapan adalah endapan PbS yang secara teori berwarna hitam. Percobaan ini adalah uji adanya belerang dengan jalan hidrolisis pada larutan protein. Pada uji ini larutan protein susu dan telur direaksikan dengan NaOH kemudian menunjukkan warna hitam setelah penambahan Pb(CH3COO)2. Reaksinya ditunjukkan sebagai berikut :

34

Warna hitam tersebut menunjukkan endapan PbS yang dihasilkan. Sehingga kedua larutan positif mengandung atom belerang (S) seperti sistein dan sistin dalam molekulnya. Kepekatan warna hitam yang dihasilkan putih telur lebih kuat dibanding susu, sehingga dapatdisimpulkan bahwa putih telur mengandung lebih banyak sistein dan sistin dalam molekulnya.

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein J. Kesimpulan Pada percobaan yang telah dilakukan dapat disimpulkan: 1. Protein dapat terdenaturasi karena penambahan asam asetat, formaldehid dan pemanasan. 2. Protein dapat mengendap dengan adanya penambahan ammonium sulfat, asam mineral dan logam berat. 3. Pengendapan protein dapat bersifat reversibel dan irreversibel. 4. Protein susu dan telur memiliki ikatan peptida karena terbentuk warna ungu pada reaksi biuret. 5. Protein susu dan telur mengandung gugus benzena karena terbentuk warna kuning pada reaksi xantho protein. 6. Protein susu dan telur mengandung asam amino karena menghasilkan warna ungu pada reaksi ninhidrin. 7. Protein susu dan telur mengandung tirosin dan triptofan karena menghasilkan endapan merah bata pada reaksi millon. 8. Protein susu dan telur mengandung tirosin dan indol karena menghasilkan warna ungu pada reaksi hopkin-cole. 9. Protein susu dan telur mengandung asam amino metionin dan sistein karena menghasilkan endapan hitam PbS pada tes belerang.

35

K. Daftar Pustaka

Fessenden, Ralph. J dan Joan S. Fessenden. 1982. Kimia Organik Jilid 2 Edisi Ketiga. Jakarta: Erlangga. Tim Dosen Kimia Organik. 2013. Penuntun Praktikum Kimia Organik 2. Surabaya: Universitas Negeri Surabaya Vandef. 2009. Laporan Praktikum Kimia Dasar. http://vandef.blogspot.com/2009/12/ laporan-praktikum-kimia-dasar-protein.html

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein Lampiran

36

1. Denatrurasi protein a. Denaturasi karena penambahan asam asetat

b. Denaturasi karena pemanasan

c. Denaturasi karena penambahan formaldehid

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein 2. Pengendapan Protein a. Pengendapan protein dengan ammonium sulfat

37

Telur

Susu

b. Pengendapan protein dengan asam mineral

HCl pekat

HNO3 pekat

c. Pengendapan protein dengan logam berat

CuSO4 dan PbSO4

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein

38

FeSO4

3. Reaksi Warna Protein a. Reaksi Biuret

b. Reaksi Xantho Protein

c. Reaksi Ninhidrin

LAPORAN KIMIA ORGANIK

Mempelajari Sifat-Sifat dan Warna dari Protein d. Reaksi Millon

39

e. Reaksi Hopkin-Cole

4. Hidrolisis protein dan tes belerang

LAPORAN KIMIA ORGANIK