A.

LATAR BELAKANG
1. Tujuan Penelitian

Menentukan kadar dan kandungan dari Hidroklorida cyclobenzaprine di Powder Murni, Tablet, dan Plasma. 2. Teori Dasar Cyclobenzaprine hidroklorida [3 - (5H-dibenzo [a, d] cyclohepten-5-ylidene)-NNdimetil-1-propanamine hidroklorida, CZ] adalah terpusat bertindak relaksan otot dan totricyclic antidepressent terkait. Tampaknya untuk bertindak terutama pada batang otak, daripada sumsum tulang belakang, tingkat. Hal ini digunakan sebagai tambahan dalam pengobatan gejala dari kondisi muscloskeletal terkait dengan kejang otot yang menyakitkan (1). Penentuan CZ dijelaskan dalam US Pharmacopeia (2) dengan metode titrasi berair. Hal itu juga ditentukan oleh beberapa metode yang melibatkan spektrofotometri, dengan absorbansi diukur pada 290 nm (3). Sebuah metode KLT digunakan untuk membedakan antara CZ dan amitriptyline struktural mirip (4), dan metode HPLC untuk cairan biologis, seperti plasma, darah, dan urin, menggunakan kolom yang berbeda, fase gerak, dan detektor dilaporkan (5-13). Penentuan CZ dengan GC / MS metode yang berbeda telah dilakukan (14-20). CZ juga ditentukan oleh dye transfer analisis (21). Metode yang dilaporkan dalam makalah ini adalah sederhana, cepat, selektif, lebih murah, dan kurang memakan waktu daripada metode lainnya diterbitkan TLC dan HPLC. Fokus dari penelitian ini adalah untuk mengembangkan dan memvalidasi metode potensiometri untuk penentuan CZ dalam bentuk murni, dengan adanya produk degradasi, dalam bentuk sediaan tablet, dan dalam plasma darah manusia. Microelectrodes telah menjadi subyek banyak penelitian dalam beberapa tahun terakhir (22). Keuntungan yang mereka menawarkan lebih dari elektroda konvensional dikenal (23). Ukuran fisik kecil mereka memungkinkan eksplorasi domain mikroskopis, seperti sistem biologi. Waktu respon yang cepat mereka, karena lapisan difusi berkurang, memungkinkan tingkat scan cepat yang akan digunakan (24). Konduktor logam dan grafit berbasis banyak bentuk geometris telah diusulkan, seperti kawat, cakram, dan silinder (25-27). Elektroda ini berperilaku sebagai perangkat dua antarmuka, membran / elektrolit antarmuka dan membran / antarmuka (28) logam. Dengan demikian, potensi membran (EMF) dalam sel adalah perbedaan potensial listrik antara dua antarmuka.

Membran telah dibuat dari polimer, ionofor, dan plasticizer (24). Peran polimer adalah untuk memberikan dukungan struktur yang solid lembam di mana sisa komponen

yang tertanam. Ionofor ini dapat dilihat sebagai reseptor molekul, karena struktur kimianya menyediakan rongga inklusi yang jelas dengan fungsi reseptor spesifik (29). Para ionofor dapat menampung berbagai macam organik, anorganik, dan biologi molekul tamu untuk membentuk stabil host-tamu kompleks inklusi atau majelis supramolekul struktur nano dalam rongga hidrofobik mereka, menunjukkan selektivitas molekul tinggi dan enantioselectivity (30). Plasticizer plasticizes membran dan mempengaruhi Tabel 1. Karakteristik respon sensor selektif diselidiki dan parameter validasi respon dan persamaan regresi Parameters Slope, mV/decadea Intercept, mV Correlation coefficient Concentration range, M LOD, Mb Response time, s Working pH range Stability, range Accuracy (mean SD)a RSD, % Repeability, %c Intermediate precision, %d
a b

Sensor 1 Validasi Persamaan Regresi 58.60 22.50 1 Validasi tanggapan 1 X 10-5 1 X 10-2 6.50 x 10-6 30 2-4 6 99.95 0.23 0.23 Ketelitian 101.22 0.21 98.99 0.41

Sensor 2 55.50 8.67 1 1 X 10-4 1 X 10-2 5.50 x 10-5 40 2-4 6 99.61 0.34 0.34 98.90 0.51 99.76 0.17

Average of five determinations. LOD defined as drug concentration obtained at the intersec- tion of the extrapolated high concentration (linear segment) with the low concentration (zero slope segment) of the calibration plot. n = 3 3 (1 102, 1 103, 1 104 M). n = 3 3 (1 102, 1 103, 1 104 M).

c d

lipophilicity dari membran polimer. Hal ini juga mengubah koefisien (K) nilai distribusi spesies yang berbeda, sehingga mempengaruhi karakteristik kinerja elektroda (31). Selektivitas tinggi elektroda ini menanamkan keuntungan besar dibandingkan teknik lainnya (32). Analit dalam berwarna, keruh, dan kental sampel dapat ditentukan secara akurat. Mereka menunjukkan respon yang cepat terhadap perubahan konsentrasi. Selain itu, mereka dapat digunakan untuk pengukuran pada rentang konsentrasi yang luas. Elektroda selektif ion umumnya toleran terhadap perubahan kecil pH. Keuntungan selanjutnya adalah bahwa mereka relatif sederhana dan tidak untuk mengembangkan, mengatur, dan menjalankan mahal. Selain itu, desain kimia dari elektroda telah dikembangkan untuk memberikan selektivitas yang unggul dan respon (32). Karya ini mencakup microsized sensor desain grafit yang didasarkan pada teknik ionofor. 2-Hydroxy propil -siklodekstrin (2HP -CD) digunakan untuk pembuatan membran sensor 1 dan 2 untuk obat dipelajari. Batang grafit microsized yang dilapisi dengan film tipis polyvinyl chloride carboxylated (PVC-COOH) / 2HP -CD/dibutyl sebacate (DBS) dalam kasus sensor 1, atau amonium reineckate (R) / -CD/DBS 2HP di kasus sensor 2, dan digunakan sebagai sensor potensiometri untuk CZ. Setelah merendam sensor ini di larutan uji CZ, elektroaktif lapisan homogen terdiri dari PVC-COOH/2HP -CD/DBS/drug atau R/2HP CD/DBS/drug terbentuk, yang menyebabkan respon potensiometri untuk obat dipelajari.

B. TINJAUAN PUSTAKA
Dua cyclobenzaprine hydrochloride (CZ) microsized sensor selektif grafit diselidiki dengan dibutylsebacate sebagai plasticizer dalam matriks polimer dari carboxylated polyvinyl chloride (PVC-COOH) dalam kasus sensor 1, didasarkan pada interaksi antara obat dan kelompok COOH terpisahkan dalam PVC-COOH. Sensor 2 didasarkan pada interaksi antara reineckate obat dan amonium, yang bertindak sebagai bahan elektroaktif anion di hadapan polyvinyl chloride matriks. Kedua sensor dibangun dengan menggunakan 2hidroksi propil -siklodekstrin sebagai ionofor, yang memiliki pengaruh signifikan pada peningkatan sensitivitas dan selektivitas membran dari kedua sensor. Cepat dan stabil tanggapan dari Nernstian 1 10-5-1 10-2 dan 1 10-4-1 10-2 M untuk dua sensor, masingmasing, dengan kemiringan 58,6 dan 55,5 mV / dekade, masing-masing, selama rentang pH 2-4 diperoleh. Metode yang diusulkan ditampilkan karakteristik analitis yang berguna untuk penentuan CZ dalam bentuk bubuk murni dengan rata-rata 99,95 0,23 pemulihan dan 99,61 0,34% untuk sensor 1 dan 2, masing-masing, dan dalam plasma dengan pemulihan yang baik. Sensor juga digunakan untuk menentukan obat utuh di hadapan mendegradasi dan, dengan demikian, dapat digunakan sebagai stabilitas menunjukkan metode. Hasil yang diperoleh dengan metode-metode yang diusulkan dianalisis secara statistik dan dibandingkan dengan yang diperoleh dengan metode US Pharmacopeia, tidak ada perbedaan yang signifikan baik untuk keakuratan atau presisi diamati. Hasil yang diperoleh dengan dua elektroda mengungkapkan karakteristik kinerja mereka, yang dievaluasi menurut International Union of Pure and Applied Chemistry rekomendasi.
3

C. METODELASI
1. Alat dan Bahan Alat: Bahan: CZ Multi-Relax tablet, Batch No 0620309 Aquadest ganda suling PVC-COOH 2HP -CD Tetrahidrofuran (THF) DBS Natrium hidroksida Sitrat penyangga (acid monohydrate sitrat dan trisodium sitrat monohydrate, El-Nasr Kimia Farmasi Co, Abu-Zabaal, Kairo, Mesir) Antrakuinon JENWAY digital ion analyzer Model 3330 (Spectronic Camspec Ltd, Garforth, Inggris) Elektroda No Z113107-1EAPW (Aldrich Chemical Co, St Louis, MO) Elektroda pH kaca (JENWAY No 924005-BO3-Q11C) Pengaduk magnetik (Bandelin Sonorox, Rx510S, Budapest, Hongaria)

2. Cara Kerja (a) CZ standar larutan stok (0,1 M).-Disiapkan dengan mentransfer 3,119 g CZ menjadi 100 mL labu ukur dan menyelesaikan volume untuk menandai dengan pH 3 penyangga sitrat. (b) standar CZ bekerja solusi (1 10-2 - 1 10-5 M).-Disusun oleh pengenceran yang sesuai dari larutan stok menggunakan pH 3 penyangga sitrat. Persiapan Electroactive Solusi Coating Membran: 2-HP -CD/DBS/PVC-COOH dan 2-HP CD/DBS/R Dalam piring kaca Petri (diameter 5 cm), 0,9 g PVC-COOH telah dicampur dengan 0,35 g DBS dan 0.30 g 2-HP -CD, kemudian dilarutkan dalam 15 mL THF. The cawan petri ditutupi dengan Whatman No kelas 3 kertas saring (Whatman International Ltd, Maidstone, Inggris) dan dibiarkan selama 1 jam untuk memungkinkan penguapan pelarut lambat. Solusi homogen tebal yang dihasilkan digunakan untuk persiapan sensor 1.

Di lain kaca cawan petri (diameter 5 cm), 0,01 g R adalah benar-benar dicampur

dengan 0,35 g dan 0,30 g DBS 2-HP -CD, kemudian dilarutkan dalam 10 mL THF. The cawan petri ditutupi dengan kertas saring dan dibiarkan selama 1 jam untuk memungkinkan penguapan pelarut lambat. Solusi homogen tebal yang dihasilkan digunakan untuk persiapan sensor 2. Sensor 1 dan 2 fabrikasi (elektroda grafit CZ berlapis) Sebuah batang grafit spectrographic (5 mm dan 15 mm) dimasukkan dalam kantong polietilen; tentang 3 mm yang berlawanan menonjol ujung batang (Timur Tengah Company, Kairo, Mesir) menjabat sebagai permukaan ukur. Ini ujung batang dicuci dengan aseton, dikeringkan di udara selama 3 jam, dan mencelupkan cepat ke disiapkan sebelumnya PVCCOOH/2-HP -CD/DBS solusi dalam kasus sensor 1, dan ke disiapkan sebelumnya R / 2 HP solusi -CD/DBS dalam kasus sensor 2. Pelarut dibiarkan menguap di udara setelah setiap mencelupkan, dan proses dipping diulang 6-8 kali untuk menghasilkan membran yang seragam pada permukaan batang grafit. Tetes merkuri yang ditambahkan dalam lengan polietilen untuk memastikan kontak listrik dengan kabel sambungan. The dilapisi batang grafit dikondisikan oleh berendam dalam 1 10-2 M CZ solusi selama 2 jam dalam kasus sensor 1, dan 4 jam dalam kasus sensor 2. Kedua sensor disimpan dalam larutan yang sama bila tidak digunakan. Gambar 4. Pengaruh pH pada respon sensor 2 (CZ/2-HP -CD/DBS/R).

Tabel 2. Koefisien selektivitas potensiometri (Kpotprimary ion, interferent) dari dua elektroda yang diusulkan oleh SSM (ref. 35) Selectivity coefficienta Interferentb Anthraquinone NH4Cl KCl CaCl2 Urea Glucose Lactose Magnesium stearate Talc Starch NaCl a Average of three determinations
b

Sensor 1 3,29 X 10-4 2.33 X 10-4 3.34 X 10-5 6.72 X 10-4 4.31 X 10-4 3.59 X 10-4 2.64 X 10-4 4.33 X 10-5 1.66 X 10-5 4.26 X 10-5 3.55 X 10-5

Sensor 2 1.54 X 10-3 6.03 X 10-3 7.320 X 10-3 6.15 X 10-3 8.32 X 10-3 5.87 X 10-3 4.23 X 10-3 1.55 X 10-4 9.03 X 10-4 1.43 X 10-4 5.09 X 10-4

All interferents are in the form of 1 x 10-3 M solution

Penentuan Langsung CZ di Murni bubuk nya Elektroda disiapkan dalam hubungannya dengan elektroda referensi Ag / AgCl persimpangan ganda direndam dalam larutan air dari CZ di kisaran 1 10 -5 - 1 10-2 M dalam kasus sensor 1, dan 1 10-4 - 1 10-2 M dalam kasus sensor 2. Mereka diizinkan untuk menyeimbangkan sambil diaduk, dan nilai-nilai EMF dicatat dalam 1 mV. Membran sensor dicuci dengan air suling ganda antara pengukuran. Kalibrasi grafik yang diplot terkait rekaman potensi dibandingkan konsentrasi obat log. Grafik ini kalibrasi atau persamaan regresi dihitung digunakan untuk pengukuran selanjutnya konsentrasi diketahui CZ. Penentuan Lereng tersebut, Waktu Respon, dan Hidup operasi dari Elektroda pemantauan Kinerja elektrokimia dari dua sensor yang diusulkan dievaluasi sesuai dengan rekomendasi IUPAC (34). Dinamis respon kali untuk elektroda untuk mencapai nilai-nilai dalam 1 mV potensi keseimbangan final setelah meningkatkan konsentrasi obat 10 kali lipat diukur. Pengaruh pH Pengaruh pH pada nilai-nilai potensial dari dua elektroda dipelajari selama rentang 1-11 dengan menambahkan tetes 1 M HCl dan 1 M NaOH. Potensi diperoleh pada setiap nilai tercatat.

Tabel 3. Penentuan CZ dalam plasma manusia berduri dengan metode potensiometri diusulkan Recovery, % RSD, %a Concentration, M 1 x 10-3 1 x 10-4 1 x 10-5 Pengaruh Suhu Potensi respon ditampilkan oleh elektroda diteliti sebagai fungsi temperatur dalam kisaran elektroda sebagai fungsi temperatur dalam kisaran 20-40 C pada interval 5 C dipantau dan dicatat. Pengaruh Mengganggu Senyawa pada Elektroda Selektivitas Respon potensial dari dua sensor dipelajari di hadapan obat dan sejumlah zat terkait dipelajari, dan koefisien selektivitas potensiometri, -Log (KPOT ion primer, interferent), digunakan untuk mengevaluasi sejauh mana ion asing akan mengganggu respon dari elektroda ion utamanya. Koefisien selektivitas dihitung dengan metode solusi terpisah (SSM, 35), di mana potensi diukur selama 1 10-3 M larutan obat dan 1 10-3 M solusi interferent terpisah. Koefisien selektivitas potensiometri dihitung menggunakan persamaan berikut: -Log (KPOT ion primer, interferent) = E1 - E2 / S dimana E1 adalah potensi diukur dalam larutan ion utama 10-3 M, E2 adalah potensi diukur dalam 1 10-3 M solusi dari interferent, dan S adalah kemiringan dihitung. Analisis Laboratorium Campuran Disiapkan Sebuah volume mL 10 dari CZ solusi (1 10-2 M) adalah kuantitatif ditransfer menjadi serangkaian 100 mL volumetrik termos. Aliquots dari solusi yang sesuai produk degradasi (1 10-2 M) ditambahkan, dan volume selesai dengan penyangga sitrat untuk mempersiapkan campuran mengandung 10:02, 10:03, 10:04, 10:05, 10:06, 10:07, dan 10:08 CZ: degradasi ransum produk. Sensor 1 99.64 0.55 98.91 0.34 99.93 0.14 Sensor 2 101.95 0.11 101.13 0.32 ---

Gambar 5. Mekanisme Degradasi CZ.

Tabel 4. Penentuan utuh CZ dalam campuran laboratorium disiapkan dengan metode potensiometri diusulkan Recovery, % Ratio drug:degradate 10.2 10.3 10.4 10.5 10.6 10.7 10.8 Mean RSD, % a Nilai ditolak. Sensor 1 99.16 100.36 98.99 99.91 98.95 101.01 100.65 99.86 0.85 Sensor 2 99.93 101.17 101.98 110.15a 112.89a 116.65a 109.56a 100.82 1.36

Penerapan Metode Usulan untuk Penentuan Simultan CZ di Multi-Relax Tablet Sepuluh tablet akurat ditimbang dan bubuk. Banyaknya bubuk tablet setara dengan 0,03119 dan 0,003119 g CZ yang akurat ditransfer ke dua 100 mL volumetrik termos. Volume diselesaikan untuk menandai untuk menyiapkan solusi 10-4 1 10-3 dan 1 M CZ berair. Nilai EMF yang dihasilkan dengan cara merendam elektroda disiapkan dalam hubungannya dengan referensi elektroda Ag / AgCl persimpangan ganda dalam solusi siap direkam. Konsentrasi CZ kemudian ditentukan dari grafik kalibrasi obat atau dari persamaan regresi yang sesuai. Penentuan Potensiometri Langsung CZ di Spiked Sampel Plasma Manusia A 9 mL jumlah plasma manusia ditempatkan menjadi tiga tabung gemetar tutup (10 mL), 1 mL 1 10-2, 1 10-3, dan 1 10-4 CZ ditambahkan secara terpisah dan terguncang. Itu sensor membran direndam dalam hubungannya dengan referensi elektroda Ag / AgCl dalam solusi ini. Membran sensor dicuci dengan air antara pengukuran. Potensi pembacaan yang dihasilkan oleh merendam elektroda disiapkan dalam hubungannya dengan referensi elektroda Ag / AgCl persimpangan ganda dalam solusi disiapkan dicatat dan dibandingkan dengan plot kalibrasi. Tidak ada efek buruk pada respon dari elektroda diamati ketika plasma manusia dibubuhi dengan sampel obat tanpa pengangkatan sebelumnya dari protein.

Tabel 5. Penentuan CZ di Multi-Relax tablet dengan metode potensiometri yang diusulkan Recovery, % RSD, %a Multi-Relax tablets Batch No. 0620309 1 x 10-3 M 1 x 10-3 M Sensor 1 98.69 0.16 100.05 0.14 Sensor 2 100.31 0.55 101.29 0.44

D. PEMBAHASAN DAN KESIMPULAN

1. Pembahasan Penggantian solusi mengisi internal yang klasik di sensor potensiometri ini penting karena desain yang menawarkan sejumlah keunggulan, seperti kesederhanaan, biaya rendah, fleksibilitas mekanik yang lebih baik, dan kemungkinan miniaturisasi. Dalam penelitian elektroda selektif ion ada banyak upaya untuk menggantikan konvensional menggunakan solusi internal yang mengisi dengan kontak padat (36). Sensor Fabrikasi Pada penelitian ini, batang grafit microsized dilapisi dengan film tipis -CD/DBS PVCCOOH/2-HP untuk sensor 1 dan R/2-HP -CD/DBS untuk sensor 2, dan digunakan sebagai sensor potensiometri untuk CZ. Setelah merendam sensor ini dalam 1 10-2 M larutan uji CZ, sebuah lapisan elektroaktif homogen dari PVC-COOH/2-HP -CD/DBS/CZ dalam kasus sensor 1 dan R/2-HP -CD / DBS / CZ dalam kasus sensor 2 dibentuk, yang memicu potensiometri Respon untuk obat dipelajari. DBS.-DBS, plasticizer nonpolar, ditemukan untuk menjadi mediator tersedia optimal untuk salah satu dari dua sensor membran. Ini plasticizes membran dan menyesuaikan permitivitas membran untuk memberikan tertinggi selektivitas dan sensitivitas. Cyclodextrins.-Dalam beberapa tahun terakhir, pengakuan molekul pada permukaan bahan padat telah menarik minat para peneliti yang mencoba untuk mewujudkan bahan fungsional untuk sensor kimia. Penggunaan selektif inklusi kompleksasi dan ikatan ionik atau hidrogen pelengkap dua strategi utama untuk mempersiapkan molekul tuan sintetis yang mengenali struktur molekul tamu (37-39). Alam dan dimodifikasi secara kimia siklodekstrin (Gambar 1) dapat dilihat sebagai reseptor molekul karena struktur kimianya menyediakan didefinisikan dengan baik rongga inklusi dengan fungsi reseptor spesifik (40). Mereka dapat menampung berbagai macam organik, anorganik, dan biologi molekul tamu untuk membentuk stabil host-tamu kompleks inklusi atau majelis supramolekul struktur nano dalam rongga hidrofobik mereka, menunjukkan selektivitas molekul tinggi dan enantioselectivity (41). Siklodekstrin sebelumnya digunakan sebagai sensor ionofor terhadap

Tabel 6. Analisis statistik antara hasil yang diperoleh untuk penentuan CZ dalam sampel murni dengan metode yang diusulkan dan yang diperoleh dengan metode Pharmacopeial Official method Sensor 3 99.90 0.33 0.33 0.11 5

Item Mean SD RSD, % Variance n F-test Studentss t-test

Sensor 1 99.95 0.23 0.23 0.05 5 2.20 (6.39)b 0.28 (2.306)b

Sensor 2 99.61 0.34 0.34 0.12 5 1.09 (6.39)b 1.36 (2.306)b

ion elektroda potensiometri selektif untuk penentuan ion onium (42), molekul kiral menggabungkan cincin aril (43), dan amina terprotonasi (44). Meskipun ukuran dan geometri tamu terutama mengatur kekuatan mengikat, adalah mungkin untuk mempengaruhi interaksi inang-tamu oleh modifikasi dari tiga gugus hidroksil pada setiap unit glukosa, karenanya, penggunaan 2-HP -CD terbukti mengoptimalkan sifat interaksi antara host dan molekul tamu (45). Kemungkinan menggunakan lipofilik derivatif CD difungsikan (2-HP -CD) sebagai ionofor sensor dalam penyusunan elektroda selektif CZ (sensor 1 dan 2) dengan baik PVCCOOH atau R untuk melumpuhkan sensor dan untuk mencapai formasi kompleks sangat stabil dievaluasi. 2-HP -CD memiliki kelarutan air yang lebih baik (sampai 0,7 M) dari -CD, yang kurang larut dalam air (0,02 M; 46). Hasil penelitian menunjukkan bahwa dengan menggunakan 2-HP -CD sebagai ionofor yang memberikan stabilitas tinggi dari kompleks antara molekul dan hadir obat kationik dalam larutan, selektivitas membran dan sensitivitas secara substansial meningkat. PVC-COOH.-senyawa ini memiliki dua sifat yang direkomendasikan, yaitu, parsial disosiasi dan adhesi tinggi (47). Sensor 1 itu hanya dibuat tanpa memerlukan sebuah kompleks asosiasi ion. Itu hanya aspal dengan perendaman dalam larutan obat yang sesuai selama 2 jam, di mana interaksi asam-basa terjadi antara dipisahkan COO-kelompok dari PVC dan gugus amino tersier obat dalam larutan uji sampai kesetimbangan kimia tercapai. PVC-COOH juga bertindak sebagai matriks dukungan reguler, sebagai perangkap bagi ion, dan sebagai matriks polimer untuk melumpuhkan sensor dan mencapai pembentukan kompleks yang sangat stabil. R.-Karya ini berasal dari fakta bahwa CZ dapat berperilaku seperti kation, fakta ini menunjukkan penggunaan penukar ion. Telah ditemukan bahwa R adalah penukar anion optimal untuk obat dipelajari karena kelarutan rendah dan ukuran butir yang cocok (48, 49). Sensor 2 itu aspal dengan perendaman dalam larutan obat, di mana ion asosiasi kompleksasi
10

terjadi antara penukar ion anion (R) dan kelompok amino tersier obat dalam larutan uji sampai kesetimbangan kimia dicapai karena interaksi ionik antara situs positif dan negatif membentuk kompleks ion exchanger. Sensor Kalibrasi dan Response Time Karakteristik kinerja elektrokimia sensor yang diusulkan secara sistematis dievaluasi sesuai dengan standar IUPAC (34). Tabel 1 menunjukkan hasil yang diperoleh selama 6 minggu untuk dua majelis yang berbeda dari masing-masing sensor. Kalibrasi plot khas ditunjukkan pada Gambar 2. Sensor ditampilkan pembacaan potensial konstan dalam 2 mV dari hari ke hari, dan lereng grafik kalibrasi tidak berubah oleh lebih dari 2 mV / dekade selama 6 minggu untuk kedua sensor. Waktu yang diperlukan untuk sensor untuk mencapai nilai-nilai dalam 2 mV potensi kesetimbangan final setelah konsentrasi obat meningkat 10 kali lipat ditemukan menjadi 30 dan 40 s untuk sensor 1 dan 2, masing-masing. Lereng plot kalibrasi adalah 58.60 dan 55.50 mV / dekade konsentrasi untuk sensor 1 dan 2, masing-masing. Ini adalah nilainilai khas zat monovalen, karena obat ini berperilaku sebagai kation monovalen melalui gugus amino tersier. Penyimpangan dari yang ideal Nernstian kemiringan (60 mV / dekade) untuk sensor 1 dan 2 berasal dari fakta bahwa elektroda menanggapi kegiatan obat daripada konsentrasi nya. Pengaruh pH dan Suhu Dalam pengukuran dengan dua sensor diselidiki, berbagai faktor yang mempengaruhi respon dari elektroda (EMFs) dipelajari untuk mencapai kondisi percobaan optimum. Sebuah nilai pH dalam kisaran 2-4 ditemukan menjadi optimal dari sudut pandang dari kedua fungsi sensor dan bentuk kimia dari larutan uji, CZ adalah dalam bentuk kationik dalam media asam. Gambar 3 dan 4 menunjukkan profil potensi-pH selama 1 10-3 dan 1 10-4 M larutan obat, di atas pH 4, potensi ditampilkan oleh sensor menurun karena pembentukan obat nonprotonated. PH di bawah 2, potensi ditampilkan oleh sensor yang berisik dan tidak seimbang. Hal ini jelas bahwa respon sensor 'yang cukup konstan dalam larutan pH 2-4. Obat-obatan dilarutkan dalam buffer sitrat pH 3. Setelah mempelajari pengaruh suhu, sensor yang diusulkan dipamerkan meningkat secara bertahap sedikit dalam potensi mereka karena suhu meningkat di kisaran 20-40 C. Namun, grafik kalibrasi yang diperoleh pada temperatur yang berbeda yang paralel, kemiringan dan waktu respon tidak secara signifikan berbeda dengan variasi temperatur, menunjukkan stabilitas termal yang wajar dari sensor yang diusulkan hingga 40 C. Sensor Selektivitas Pengaruh zat mengganggu pada kinerja sensor dipelajari oleh SSM (35). Kinerja dari dua sensor di hadapan tablet eksipien, zat terkait organik dan anorganik, dan produk
11

degradasi obat dinilai dengan mengukur dan membandingkan koefisien selektivitas potensiometri. Hasil penelitian menunjukkan bahwa membran sensor yang diusulkan ditampilkan selektivitas tinggi, dan tidak ada gangguan yang signifikan diamati dari campur spesies (Tabel 2). Analisis Plasma Tabel 3 menunjukkan hasil yang diperoleh untuk penentuan CZ dalam plasma manusia berduri. Hal ini terlihat bahwa akurasi tinggi (pemulihan) dan presisi (RSD) diberikan oleh kedua sensor, tapi sensor 1 diperbolehkan rentang konsentrasi yang lebih luas dari obat yang akan dianalisis. CZ Degradasi CZ terdegradasi melalui oksidasi dan pembelahan selanjutnya dari rantai sisi alifatik membentuk antrakuinon, sesuai dengan mekanisme yang ditunjukkan pada Gambar 5 (50). Analisis Campuran Sintetis Tabel 4 menunjukkan hasil yang diperoleh pada analisis campuran sintetis yang mengandung rasio yang berbeda obat utuh untuk sampel terdegradasi bervariasi 10:0210:08. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sensor 1 dapat berhasil digunakan untuk penentuan selektif obat utuh di hadapan hingga 80% dari mendegradasi, sementara sensor 2 menderita gangguan besar ketika konsentrasi mendegradasi adalah 50% atau lebih tinggi. Dengan demikian, sensor 1 direkomendasikan untuk digunakan dalam stabilitas menunjukkan metode. Analisis Tablet Tabel 5 menunjukkan hasil yang diperoleh untuk penentuan CZ di Multi-Relax tablet yang membuktikan penerapan metode, tanpa pengobatan sebelumnya atau ekstraksi, menggunakan dua sensor. Penerapan untuk penentuan CZ ditunjukkan oleh hasil yang akurat dan tepat diperoleh. Hasilnya juga dibandingkan dengan yang diperoleh dengan menggunakan metode resmi (2). Tidak ada perbedaan yang signifikan dalam hasil ditemukan (Tabel 6). Pengesahan Linearitas dinilai dengan penentuan rentang konsentrasi yang sama dengan grafik kalibrasi. Rata-rata akurasi diberikan dalam Tabel 1. Untuk mengevaluasi presisi dan akurasi, tiga konsentrasi CZ dalam rentang linier (1 10 , 1 10-3, dan 1 10-2 M) dipilih. Tiga solusi masing-masing konsentrasi disiapkan dan dianalisa dalam rangkap tiga (assay pengulangan). Uji ini diulangi pada tiga hari yang berbeda (assay reproduktifitas, Tabel 1).
-4

12

Tabel 1 menunjukkan semua parameter validasi metode yang diusulkan, termasuk linearitas, jangkauan, akurasi, dan presisi. 2. Kesimpulan Sensor dijelaskan yang cukup sederhana dan selektif untuk penentuan kuantitatif CZ dalam bentuk murni, dalam plasma dan farmasi formulasi, dan di hadapan mendegradasi nya. Pemanfaatan PVC-COOH sebagai polimer memiliki pengaruh yang signifikan pada peningkatan kedua sensitivitas dan selektivitas membran sensor 1. Penggunaan sensor yang diusulkan menawarkan keuntungan dari respon yang cepat dan penghapusan pretreatment obat atau pemisahan langkah. Mereka bisa, karena itu, digunakan untuk analisis rutin CZ di laboratorium QC.

13

DAFTAR PUSTAKA
(1) Martindale: The Complete Drug Reference (2002) 33rd Ed., Pharmaceutical Press, London, UK, p. 1328 (2) U.S. Pharmacopeia (2007) 25th Ed., U.S. Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, MD, p. 1846 (3) U.S. Pharmacopeia (1995) 21st Ed., U.S. Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville, MD, p. 259 (4) Tasset, J.J., Schroeder, T.J., & Pesce, A.J. (1986) J. Anal. Toxicol. 10, 258 (5) Herrin, G.L., McCurdy, H.H., & Wall, W.H. (2005) J. Anal. Toxicol. 29, 599606 (6) Feibush, B. (1996) J. Liq. Chromatogr. Relat. Technol. 19, 23152328. doi:10.1080/10826079608017159 (7) Lin, C.C., Kim, H.K., & Parker, D. (1996) J. Chromatogr. B 682, 309313. doi:10.1016/03784347(96)00089-8 (8) Wong, E.C.C., Koenig, J., & Turk, J. (1995) J. Anal. Toxicol. 19, 218224 (9) Constanzer, M., Chavez, C., & Matuszewski, B.K. (1995) J. Chromatogr. B 666, 117126. doi:10.1016/0378-4347(94)00556-K (10) Holeman, J.A., & Danielson, N.D. (1995) J. Chromatogr. Sci. 33, 297302 (11) Ryan, T.W. (1993) J. Liq. Chromatogr. 16, 15451560. doi:10.1080/10826079308020972 (12) Hwang, P.T.R., Young, D.A., Straughn, A.B., & Meyer, M.C. (1993) J. Liq. Chromatogr. 16, 11631171. doi:10.1080/10826079308019578 (13) Fisher, A.L., Bayne, W.F., & Musson, D.G. (1989) J. Pharm. Sci. 78, 971974. doi:10.1002/jps.2600781119 (14) Stanley, S.D., Mckemie, D., & Skinner, W. (2003) J Anal. Toxicol. 27, 325331 (15) Hsu, R., & Au, A.M. (2001) Bull. Environ. Contam. Toxicol. 66, 178183. doi:10.1007/s001280000222 (16) Au, A.M., Ko, R., Boo, F.O., Hsu, R., Perez, G., & Yang, Z. (2000) Bull. Environ. Contam. Toxicol. 65, 112119. doi:10.1007/s001280000102 (17) Huebschmann, H.J. (1998) LaborPraxis 22, 6668 (18) Rifai, N., Howlett, C.M., Levtzow, C.B., Philips, J.C., Parker, N.C., & Cross, R.E. (1988) Ther. Drug Monit. 10, 194196. doi:10.1097/00007691-198802000-00014 (19) Schroeder, T.J., Pesce, A.J., & Tasset, J. (1987) J. Anal. Toxicol. 11, 235236 (20) Piotr, A., & Maria, K. (2010) Forensic Sci. Int. 198, 3945. doi:10.1016/j.forsciint.2010.02.012 (21) Matsui, F., & French, W.N. (1971) J. Pharm. Sci. 60, 287291 (22) Sideris, E.E., Valsami, G.N., Koupparis, M.A., & Macheras, P.E. (1999) Eur. J. Pharm. Sci. 7, 271278. doi:10.1016/S0928-0987(98)00035-9 (23) Stanley, M.S., Busch, K.L., & Vincze, A. (1988) J. Planar Chromatogr.-Mod. TLC 1, 7678 (24) Abdelrahman, M.K. (2008) Master s Thesis, Cairo University, Cairo, Egypt, available at e-mail: khaled20m20@hotmail.com (25) Shamsipur, M., Mizani, F., Mousavi, M.F., Alizadeh, N., Alizadeh, K., Eshghid, H., & Karami, H. (2007) Anal. Chim. Acta 589, 2232. doi:10.1016/j.aca.2007.02.030 (26) Ji, X., Jin, B., Ren, J., Jin, J., & Nakamura, T. (2005) J. Electroanal. Chem. 579, 2531. doi:10.1016/j. jelechem.2005.01.020 (27) Peng, W., & Wang, E. (1993) Anal. Chim. Acta 281, 663671. doi:10.1016/0003-2670(93)85028-I (28) James, H.J., Carmack, G., & Freiser, H. (1972) Anal. Chem. 44, 856857. doi:10.1021/ac60312a046 (29) Bender, M., & Komiyama, M. (1978) in Cyclodextrin Chemistry, Springer-Verlag, Berlin, Germany, pp 6 10 (30) Kieser, B., Fietzek, C., Schmidt, R., Belge, G., Weimar, U., Schurig, V., & Gauglitz, G. (2002) Anal. Chem. 74, 30053012. doi:10.1021/ac015689k (31) Diamond, D. (1998) in Chemical Analysis, Wiley & Sons, New York, NY, p. 19 (32) Conway, B.A. (1995) Ion Selective Electrodes, Ottawa Press, Ottawa, Canada, p. 41 (33) Bassett, J., Denney, R.C., Jasser, G.H., & Mendhan, J. (1978) Textbook of Quantitative Inorganic Analysis Including Elementary Instrumental Analysis, 4th Ed., ELBS, Longmen, London, UK, p. 330 (34) IUPAC Analytical Chemistry Division, Commission on Analytical Nomenclature (2000) Pure Appl. Chem. 72, 1851. doi:10.1351/pac200072101851 (35)Ma, T.S., & Hassan, S.S.M. (1982) Organic Analysis Using Ion Selective Electrodes, Vols 1 and 2, Academic Press, London, UK, p. 7 (36) El-Kosasy, A.M., Salem, M.Y., El-Bardicy, M.G., & Abdel-Rahman, M.K. (2008) Chem. Pharm. Bull. 56, 753757. doi:10.1248/cpb.56.753

14

(37) Yang, X., Jonson, S., Shi, J., Hoesinder, T., & Swanson, B. (1997) Sensor Actuat. B 45, 8793. doi:10.1016/ S0925-4005(97)00274-8 (38) Tomoki, O., & Yoshiki, C. (2003) Macromelecules 36, 654662. doi:10.1021/ma0213089 (39) Liu, Y., Han, B.H., Sun, S.X., Wada, T., & Inoue, Y. (1999) J. Org. Chem. 64, 14871494. doi:10.1021/ jo981891k (40) El-Kosasy, A.M., Salem, M.Y., El-Bardicy, M.G., & Abd El-Rahman, M.K. (2009) J. AOAC Int. 92, 1631 1637 (41) Samuel, P.K., Kimio, S., Toshiyuki, K., Takashi, I., & Toshio, S. (2004) J. Membr. Sci. 230, 171180. doi:10.1016/j.memsci.2003.11.017 (42) Bates, P., Kataky, R., & Parker, D. (1994) Analyst 119, 181186. doi:10.1039/an9941900181 (43) Lima, J., Montenegro, M., & Silva, M. (1990) J. Pharm. Biomed. Anal. 8, 701705. doi:10.1016/07317085(90)80106-Y (44) Lima, J., & Montenegro, M. (1999) Mikrochim. Acta 131, 187190. doi:10.1007/PL00010030 (45) Fink, S., Van Veggel, F.C.J.M., & Reinhoudt, D.N. (2000) Adv. Mater. 12, 13151328 (46) asantha, V.S., & Phani, K.L.N. (2002) J. Electroanal. Chem. 520, 22832288 (47) Hassan, S.S., Amer, M.M., Abd El-Fatah, S.A., & El-Kosasy, A.M. (1998) Talanta 46, 13951403. doi:10.1016/S0039-9140(98)00008-3 (48) Hassan, S.S., Abou-Sekkina, M.M., El-Ries, M.A., & Wassel, A.A. (2003) J. Pharm. Biomed. Anal. 32, 175180. doi:10.1016/S0731-7085(03)00015-3 (49) El-Saharty, Y.S., Metwaly, F.H., Refaat, M., & El-Khateeb, S.Z. (2006) J. Pharm. Biomed. Anal. 41, 720724. doi:10.1016/j.jpba.2005.11.045 (50) Cotton, M.L., & Brian Down, G.R. (1998) Analytical Profile of Drug Substance, Vol. 17, Academic Press, Inc., London, UK, pp 4172

15