2.10 RESUME JURNAL 1.

Isolasi dan karakterisasi sebuah ekstraselluler lipase dari konidia pada neurospora crassa Hidrolisis enzim essensial pada penggunaan sumber karbon selama pengecambahan fungal konidia. Dalam konidia pada neurospora crassa terdapat tiga enzim, dengan nama trehalase (Hanks & sussman, 1969), invertase dan B-arylglucosidase (Eberhart & Beck, 1970,1973), yang dapat mempermudah pengecambahan. Trigliserida (TGs) memperhatikan energi penyimpangan bentuk, laju selama pengecambahan dari fungal konidia dan biji2 tanaman, oleh karena itu penting untuk mengerti sifat dan properti lipase. Sebuah lipase trigliserida (EC 3.1.1.3) dari konidia pada neurospora crassa dimurnikan dan dikarakterisasi. Enzim ini dimurnikan oleh sephadex G-100 kromatografi kolom. Kehomogenan dicek oleh PAGE, dan pusat isoelektrik mempunyai sebuah single band yang sesuai untuk sebuah pI dari 6-4. Enzim ini mempunyai sebuah sifat nyata yaitu Mr 54000 1000 sebagai penentu dari filtrasi gel. SDS-PAGE dapat menyumbangkan sebuah single band dari Mr 27000, usulan itu hadir dari dua subunit yang sama. Lipase ini lebih menyukai trigliserida dengan C16 dan C18 rantai asil lemak. Itu memecah hanya kelompok utama dari trigliserida. Lipase juga memperlihatkan sebuah pilihan dari substrat yang berisi endogin menjadi asam lemak dan mungkin ternyata berguna dalam studi rinci pada hubungan fisiologi dari kekhususan asil lemak lipase. Enzim ini tidak dibuat detergen, atau agen pengikat thiol. Modifikasi kelompok amino bebas menyebabkan 90% hambatan, usulan sebuah peran dari kelompok ini dalam aktifitas lipase. 2. Isolasi dan Karakeristik dari Lepidopteran khusus Bacillus thuringiensis Tujuan galur bacillus thuringiensis yang terisolasi dan dipilih berdasarkan uji toksisitas primer dari 22 perwakilan contoh tanah dari

gujarat tengah wilayah india. Karakteristik strain disediakan berguna untuk menginformasikan mengenai distribusi dengan menganalisis gen pribumi.analisis SDS-PAGE isolat ini menunjukan adanya jenis pola,yang sebanding dengan memeriksa standar B thuringiensis var.kurstaki. Hanya 1 mengisolasi memberikan pola yang berbeda. Karakteristik strain didasarkan pada prnggunaan primer anlisisnya bahwa sebagian aktivitas mereka terhadap hama. Sementara Lepidoteran menggunakan dominan gen Cry1 A dan Cry1 Ac dan beberapa mengisolasi menginformasikan adanya gen Cry1 Ab,Cry1 B,Cry1 Ddan Cry1 9. Hasil SDS-PAGE seluruh sel protein menunjukan bahwa semua isolat dari satu sama lain termasuk standar,yang menunjukan keanekaragaman manfaatnya. (Manikuntala kudu,1986)

3. Isolasi dan karakterisasi Bacillus sp. BP-6 LipA, sebuah Enzim Lipase yang memiliki sifat-sifat spesifik antara spesies Bacillus mesofilik. Pada percobaan ini yaitu Isolasi dan karakterisasi sebuah bakteri Bacillus SP dilakukan dengan tujuan untuk mempelajari proses isolasi bakteri yang memiliki stuktur meso, mengkloning, kemudian memahami karakter dari bakteri tersebut tak jauh kaitannya dalam pentingnya suatu boteknologi untuk kelompok-kelompok enzim. Metode percobaan yang digunakan adalah Isolasi dan pengklonan untuk karakterisasi bakteri Bacillus tersebut. Telah dijelaskan dalam percobaan ini bahwa dalam Bacillus sp, BP-6 menunjukkan aktivitasnya pada plat tributyrin yang digunakan untuk isolasi enzim lipase dengan kode gen LipA. Nukleotida ORF 663 yang sudah terisolasi kemudian diklon dalam bakteri Escherichia colli untuk mengetahui karakteristiknya lebih lanjut. Hasil yang diperoleh pada percobaan ini adalah bahwa kode gen untuk Bacillus sp, BP-6 LipA ditemukan dalam Spesies Bacillus mesofilik yang kemudian menunjukkan sifat-sifat spesifiknya dalam gen tersebut. Enzim yang terklon juga memiliki sifat sama sehingga dapat disebut sebagai enzim lipase homogen.

2003)

(C.Ruiz,F.I.Javier Pastor and P.Diaz,

4. isolation and purification of carotenoids from marigold flower Dalam jurnal internasional yang berjudul isolation and purification of carotenoids from marigold flower menjelaskan penemuan masa kini yang realistis dan proses efektif untuk mengisolasi dan memurnikan karotenoid yang mengandung yang mengandung konsentrasi yang lebih tinggi karotenoid seperti luteintrans, trans-zeaxanthin, cis lutein, -karoten, dan cryptoxantin dari kelopak bunga marigold di bawah kondisi yang terkendali tanpa meninggalkan jejak apapun pelarut organik berbahaya. Proses ini melibatkan ensilaging bunga marigold, dehidrasi, ekstraksi pelarut, hidrolisis alkali karotenoid ester dengan alkohol absolut, kristalisasi/pemurnian dengan menggunakan air, alkohol absolut campuran diikuti oleh filtrasi dan pengeringan hingga kristal yang jauh bebas dari kelembaban dan benar benar bebas dari residu berbahaya pelarut. Kristal ini cocok untuk produk makanan nutraceutical dan sebagai suplemen. 5. ISOLASI DAN IDENTIFIKASI MOMORDICIN I DARI EKSTRA DAUN MOMORDICA CHARANTIA L Senyawa momordicin I telah berhasil diisolasi dari ekstrak diklorometana daun pare, momordica charantina L. isolasi dilakukan dengan memfraksinasi ekstrak klorometana yang diikuti dengan biossay menggunakan larua udang artemia salina L. untuk mendapatkan fraksi paling aktif. Fraksionasi dilakukan dengan kolom kromatografi phase terbaik menggunakan 1 seri eluen MeOH H 2O (0100% MeOH) sselanjutnya dimurnikan dengan rekristalisasi menggunakan kloroform sehingga dihasilkan kristal berwarna putih dengan titik leleh 125-1280C. Dari hasil data spektra IR, 1HNMR,

13

CNMR, DEPT, HCOST, HMCQC, HMBC dan MS, struktur isolat

aktif dielusidassi sebagai 3,7,2,3-trihydroxycucurbitan-5,25-diena-19al yang lebih dikenal dengan senyawa momordicin I Momordica charantina L. ditemukan di daerah tropis dan daerah yang aktif subur ditanami sayuran, buah buahan, daun dan akar dari M charantia disgunakan untuk campuran penyembuh bebrapa penyakit, misalnya obat pencuci perut di India, keseluruhan sari buah dapat digunakan sebagai obat penyakit limpa, hati, encok, dll. Di filipina dilaporkan bahwa kepada penderita radang usus besar yang kronis. Sedangkan sari buah daun daun digunakan dalam jumlah sedikit yaitu satu sendok teh untuk anak anak batuk. Benih dari tumbuhan ini juga dilaporkan dapat digunakan untuk penyakit diabetes karena mempunyai aktivitas potensi antidiabetes. 6. Pengasingan, pemurnian, dan NMR tugas yang penuh dari cyclopamine dari Veratrum californicum Hedgehog jalan kecil pemberian isyarat adalah penting bagi embryogenesis dan untuk jaringan/tisu homeostasis di orang dewasa [itu]. Bagaimanapun, mungkin mempengaruhi penyakit berbahaya brown jumlah jaringan/tisu ketika menurut Undang-Undang Dasar diaktipkan, dan mungkin juga mempunyai suatu peran dalam bentuk lain dari normal dan maladaptive pertumbuhan. Cyclopamine, suatu secara alami terjadi steroidal alkaloida, [yang] secara rinci menghalangi Hedgehog jalan kecil dengan bungkus secara langsung Melancarkan, suatu Hedgehog yang penting menanggapi unsur. Untuk menggunakan cyclopamine sebagai alat untuk menyelidiki dan/atau menghalangi Hedgehog jalan kecil di (dalam) vivo, suatu kwantitas yang substansiil diperlukan, dan sebagai cyclopamine perihal yang praktis telah (menjadi) secara efektif yang tak tersedia untuk pemakaian di (dalam) binatang lebih besar dari tikus-tikus. Mengakibatkan catatan/kertas ini, kita melaporkan suatu pemurnian

dan pengasingan yang efisien dan cepat dari jumlah yang besar tentang cyclopamine dari akar dan batang yang tumbuh mendatar dari Veratrum californicum Dur. ( Corn/Jagung Lily/Bunga Bakung atau Hellebore yang sumbang/palsu barat). Kita juga menyediakan tugas yang terang dari karbon dan resonansi satuan listrik positif dengan penggunaan multinuclear spectra dan putaran yang menggabungkan jaringan. Kesimpulan Ini metoda bisa temu suatu kebutuhan sangat riil di dalam masyarakat ilmiah berbeda dengan membiarkan cyclopamine untuk menjadi lebih siap yang tersedia 7. Hidrolisis untuk Asam Miristat. Senyawa kompleks yang memiliki struktur molekul dapat dipisahkan dari bahan-bahan alami. Trimiristin dapat diekstraksi dari biji pala. Kristalisasi dari aseton dapat menghasilkan senyawa murni. Sebagian besar senyawa yang terdapat pada pala larut dalam eter, akan tetap dalam larutan aseton. Trimiristin, terdapat asam karboksilat dan mengandung 14 atau lebih atom karbon, juga di kenal sebagai lemak atau trigliserida dan komponen makanan. Ketika trimiristin di refluks dengan NaOH dalam etanol berair dan kemudian di asamkan. Percobaan ini lamanya 4 jam. Pertama ekstraksi. Pemanasan yang berlebihan dapat menyebabkan beberapa campuran hancur keluar. Panaskan hanya pada titik didih. Dibilas hanya untuk memastikan bahwa trimiristin yang tertinggal maksimal. Pelarut menguap, yang kenyal padat kekuningan akan tetap. Ini adalah trimiristin mentah. Rekristalisasi dari trimiristin. Jika kristal tidak muncul setelah pendinginan, menggores permukaan kaca dengan pengaduk untuk mendorong kristalisasi. Hidrolisis terlalu panas akan menyebabkan etanol menguap. Filtrasi kristal yang bagus adalah lambat. Menggunakan banyak air untuk bilasan akan memperlambat proses limbah filtrate dari hidrolisis adalah asam.

8. Isolasi Glikosida Triterpenoid dari batang Terminalia Arjuna menggunakan Farmakologi Penelitian ini melaporkan isolasi dan karakterisasi pembuatan Glikosida Triterpenoid dari ekstraksi Terminalia Arjuna. Terminalia Arjuna adalah sejenis pohon besar yang biasa tumbuh di India. Mengandung zat kimia seperti :hydrolysable tannins3, triterpenoid acids and their glycosides 4,5, flavonoids6, Phenolics7, phytosterol. Terminalia Arjuna telah digunakan di India sebagai agen dalam hipertensi dan kanker hati. Tanaman ini kaya akan zat kimia yang sangat berguna dalam penyembuhan asma dan anemia. Isolasi senyawa organic di dalam nya menggunakan teknik Kromatografi. Karakterisasi senyawa menggunakan teknik spektroskopi khusus yang menemukan hasil akhir berupa Olean-3b,22b-diol-12-en-28b-Dglucopyranoside-oic acid. Metode isolasi ini sederhana, harga terjangkau dan efisien. Penelitian ini sangat membantu dalam pengembangan obat tradisional, karena dengan sukses dapat memanfaatkan kayu dan batang yang kering. (TANUSHREE ,2007) 9. isolation and purification glycoside from trollius ledebouri using high-speed counter-currentchromatography by stepwise increasing the flow-rate of the mobile phase Dari jurnal yang berjudul isolation and purification glycoside from trollius ledebouri using high-speed counter-currentchromatography by stepwise increasing the flow-rate of the mobile phase dikatakan bahwa tiga flavonoid glikosida termasuk orientin, vitexin, quarcetin-3o-neohesperidoside dan satu komponen yang tidak diketahui diisolasi dan dimurnikan dengan counter current kromatografi dengan Teknik Kromatografi dan Penyelidikan

kecepatan tinggi (HSCCC) dan semi preparatif HPLC daritrollius ledebouri reichb, pengobatan tradisional China. Persiapan HSCCC dengan sistem dua fase solven yang terdiri dari etil asetat-n-butanol-air (2:1:3, v/v/v) yang berhasil disususn dengan menaikkan flow-rate fase gerak dari 1,5 sampai 2,5 ml/min setelah 190 menit. Konsekuensiynya 95,8 mg orientin, 11,6 mg fitexin, 9,3 mg komponen tak diketahui dengan kemurnian sampai 97% dan 1 fraksi kemurnian fraksial (berisi quarcetin-3-o-neohesperidoside pada kemurnian 85,1%), yang diperoleh dari 500 mg ekstrak bahan mentah. Kemudian kemurnian parsial tadi lebih dimurnikan lagi menggunakan reserved-phase semipreparative high-performance liquid chromatography. Strukturnya diidentifikasi dari semua fraksi murni dengan menggunakan UV, MS, H NMR, C NMR.

2.11 Analisa Bahan 1. Biji Buah Pala Mengandung unsur-unsur psikotropik Mempunyai daya bunuh terhadap serangga. Mengakibatkan muntah-muntah, kepala pusing. Komposisi biji buah pala : 2. Minyak atsiri 2-16 % , rata-rata 10 %. Minyak kental 25-40 % terdiri atas beberapa asam seperti asam polimetrik, asam stearat dan asam miristat. Karbohidrat 30 %, protein 60 %. Miristat 48 %. (Arsyad, 2001) Aseton (CH3COCH3) Sifat fisik : Berat molekul : 58,08 Densitas : 0,792 g/cm3 Titik lebur : -94,60C Titik didih : 56,50C

Sifat kimia : Senyawa organik yang mudah menguap, mudah terbakar, berbau khas, dan agak manis.

Merupakan gugus fungsi keton, larut dalam air, alkohol, eter, kloroform, dan minyak. Biasa digunakan sebagai pelarut lemak, minyak, plastik, dan lilin. (Pudjaatmaka, 1993)

3.

Eter Sifat fisik : Titik didih 356 C,

titik beku 11,3 C, densitas 0,708 g/cm3 cairan encer tidak berwarna, jernih, berbau, rasanya aneh. mudah menguap dan mudah terbakar, mudah meletus sifat kimia: bereaksi dengan HI bereaksi dengan PCl5 pada pemanasan tidak bereaksi dengan logam Na (Wilcox, 1995)

I.

r Pustaka

Arsyad, M. Natsir. 2001. Kamus Kimia. PT. Gramedia Pusaka Utama : Jakarta. Fieser, Louis. F. 1957. Experiment in Organic Chemistry, 3nd edition, Revised, D. C. Heath and Company : Boston. Gibson, Cha rles, S. 1956. Essential Principles of Organic Chemistry. Chambridge of The University Press : London.

Mulyono. 2002. Kamus Kimia. Ganesha Silatama : Bandung. Wilcox, C.F. 1995. Experimental Organic Chemistry, 2nd edition. Prentice Hall : New Jersey.

LAMPIRAN Pertanyaan: 1. Sebutkan danjelaskan cra-cara laindari isolasi trimiristin dalam biji buah pala! 2. Tuliskan struktur dari senyawa trimiristin! 3. Bagaimana cara saudara dapat mengetahui bahwa produk hasil isolasi adalah senyawa trimiristin?

Jawaban: 1. Cara lain untuk mengisolasi trimiristin adalah metode ekstraksi lanjutan dari senyawa material padat dengan pelarut panas ( metode sokhletasi ). Dengan metode ini trimiristin dapat diperoleh dalam waktu 4 hari. Penggunaan pelarut yang terbatas dan hasil yang maksimum membuat metode ini lebih menguntungkan dan dipandang sebagai metode yang paling tepat dalam isolasi trimiristin. 2. Struktur trimiristin:
O H2C O C (CH2 )12 CH3

HC

(CH2 )12 (CH2 )12

CH3

H2C

CH 3

Trimiristin

3. Cara untuk mengetahui bahwa produk hasil isolasi adalah senyawa trimiristin yaitu dengan pengujian titik leleh produk. Jika titik leleh produk mendekati 56,50C maka senyawa tersebut merupakan trimiristin.

Semarang, 23 Januari 2009 Praktikan,

Ika Pratiwi K A J2C008026

Ina Noprastika J2C008027

Khairun Nisa J2C008028

Laelatri A J2C008029

Latifah Hauli J2C008030

Lilis A J2C008031

Lina R J2C008032

Dewi Permata S J2C008086

Diah Kurnia S J2C008087

Mengetahui, Asisten

Ditya Putri S J2C006021