BAB III FISIOLOGI LEPTIN

3.1

Leptin Leptin adalah hormon yang mempunyai efek penting dalam pengaturan berat badan,

metabolisme, dan fungsi reproduksi. Massa leptin adalah sekitar 16 kDa dan dikodekan oleh gen obesitas (ob)8. Leptin, ditemukan 15 tahun lalu dengan metode posisional kloning, diidentifikasikan sebagai hormon yang disekresikan oleh jaringan adiposa dan memegang pernan utama dalam homeostasis tubuh9.

3.1.1

Biosintesis dan Sirkulasi Leptin adalah protein asam amino 167 yang termasuk dalam sitokin10. Gen leptin

manusia terletak pada kromosom 7

11

. Leptin diproduksi terutama di jaringan adiposa

putih,sehingga tingkat sirkulasi leptin berbanding lurus dengan jumlah total lemak dalam tubuh. Selain jaringan adiposa putih, sumber utama leptin, juga dapat diproduksi oleh jaringan adiposa coklat, plasenta (syncytiotrophoblasts), ovarium, otot rangka, perut (dibawah kelenjar fundus), sel epitel susu, sumsum tulang, hipofisis , dan hati. Leptin memegang peranan utama dalam intake makanan, keseimbangan energi, jaringan adiposa serta dalam sistem kekebalan tubuh dan endokrin. Leptin juga berfungsi sebagai umpan balik untuk mempertahankan simpanan lemak tubuh12.

Tingkat konsentrasi leptin naik turun (pulsatile) mengikuti irama jantung, dengan tingkat tertinggi antara tengah malam dan dini hari dan tingkat terendah pada sore hari. Secara khusus, konsentrasi leptin yang ada mungkin sampai 75,6% lebih tinggi pada malam hari dibandingkan dengan konsentrasinya pada sore hari. Karakteristik leptin yang naik turun (pulsatile) berdenyut sekresi leptin terdapat pada orang gemuk dan kurus, tetapi perbedaannya adalah pada orang gemuk (obesitas) memiliki amplitudo yang lebih tinggi. Konsentrasi leptin menggambarkan jumlah energi yang tersimpan dalam lemak tubuh. Tingkat sirkulasi leptin secara langsung sebanding dengan jumlah lemak tubuh dan berfluktuasi dengan adanya perubahan akut pada asupan kalori. Sistem leptin ini sangat sensitif terhadap kekurangan energi. Perempuan cenderung memiliki kadar leptin yang lebih tinggi daripada pria, meskipun wanita mengalami penurunan yang signifikan dalam jumlah yang beredar leptin setelah menopause. Hal ini umumnya tidak bergantung pada indeks massa tubuh (BMI), sebagian karena perbedaan hormon seks, massa lemak dan distribusi lemak tubuh. Lemak tubuh wanita terakumulasi pada perifer sedangkan lemak tubuh laki-laki terdistribusi pada abdomen atau lemak android. Lemak subkutan mengekspresikan mRNA leptin lebih tinggi daripada lemak omentum, oleh karena itu konsentrasi leptin lebih tinggi pada wanita dibandingkan pria. Hormon dan sitokin selain hormon steroid seks juga mempengaruhi sekresi leptin tetapi untuk tingkat yang lebih rendah (Tabel 2) 13.

Tabel 2. Faktor-Faktor Regulasi Sirkulasi Level Leptin13

Faktor yang meningkatkan sekresi leptin Obesitas Terlalu banyak makan (overfeeding)

Faktor yang menginhibisi sekresi leptin Keadaan rendah energi dengan penurunan simpanan lemak Puasa

Glukosa Katekolamin dan agonis adrenergik Insulin Hormon tiroid Glukokortikoid Agonis Peroxisome ProliferatorEstrogen Sitokin inflamasi, yaitu Tumor Necrosis Factor and Interleukin-6 (efek akut) activated Receptor- (PPAR) Sitokin inflamasi, yaitu Tumor Necrosis Factor (efek jangka panjang)

Sumber : Dubuc G, Phinney S, Stern J, Havel P. Changes of serum leptin and endocrine and metabolic parameters after 7 days of energy restriction in men and women. Metab. Clin. Exp. 1998 ;47 (4): 42934. Konsentrasi leptin dalam cairan peritoneal berkorelasi secara signifikan dengan BMI6,14. Tingkat sirkulasi hormon ini sebanding dengan massa lemak tubuh 15,14. Hal ini sangat menunjukkan bahwa massa tubuh dapat menjadi salah satu faktor yang menentukan tingkat konsentrasi leptin cairan peritoneal pada pasien endometriosis dan bukan endometriosis saja15. Sejak telah dilaporkan juga bahwa leptin diekspresikan dan diproduksi oleh sel-sel endometrium dan endometriosis, sumber leptin dari cairan peritoneal juga dapat dipertimbangkan15,14. Selain itu, ditemukan bahwa produksi leptin dapat distimulasi oleh faktor-faktor proinflamasi, dan dengan demikian dapat dimengerti bahwa perubahan pada konsentrasi leptin dalam cairan peritoneal juga dapat secara langsung atau tidak langsung mencerminkan status imunitas dari pasien 14.

Selain itu, TNF dan IL-1 diketahui meningkatkan produksi leptin15,16. Peningkatan IL-1 dan TNF- pada perempuan dengan endometriosis dapat berhubungan dengan temuan ini, mengingat bahwa sitokin inflamasi dapat menstimulasi sekresi leptin. Sitokin inflamasi telah dilaporkan dapat menstimulasi sekresi leptin sehingga terjadi peningkatan konsentrasi serum leptin yang diamati setelah pemberian IL-1 atau TNF- pada tikus. Sebuah korelasi positif antara kadar leptin dan aktivasi sistem TNF- juga telah ditemukan pada manusia dengan konsentrasi peningkatan sirkulasi leptin yang diobservasi selama demam dan inflamasi sistemik. Telah ditunjukkan bahwa leptin memiliki efek yang jelas dan spesifik pada CD4 + limfosit T dan profil sitokin mereka, yang menunjukkan hubungan lebih jelas antara leptin, inflamasi , dan imunitas15.

3.1.2

Mekanisme Leptin

Leptin binds to leptin receptors (ObRs) located throughout the central nervous system and several peripheral tissues. At least six variations or isoforms of the leptin receptor have been identified (ObRa, ObRb, ObRc, ObRd, ObRe, and ObRf). These isoforms have homologous extracellular domains but distinct intracellular domains, which vary by length and sequence due to alternative mRNA splicing. The short isoforms ObRa and ObRc are thought to play important roles in transporting leptin across the bloodbrain barrier (BBB). The long leptin receptor isoform ObRb is primarily responsible for leptin signaling12. The long leptin receptor isoform is expressed abundantly in the hypothalamus and activates the Janus kinase signal transducer and activator of trascription (JAK-STAT) system to alter the expression of hypothalamic neuropeptides. This functional leptin receptor ObRb, expressed in several organs, is strongly expressed throughout the central nervous system but particularly in the hypothalamus, where it regulates energy homeostasis and neuroendocrine function described further below. In the db/db mouse model, the ObRb is dysfunctional, resulting in obesity and the metabolic syndrome13. Leptin mengikat reseptor leptin (ObRs) di seluruh sistem saraf pusat dan jaringan perifer beberapa. Setidaknya enam variasi atau isoform dari reseptor leptin telah diidentifikasi (Obra, ObRb, ObRc, ObRd, ObRe, dan ObRf). Ini isoform memiliki domain homolog ekstraseluler tetapi domain intraseluler yang berbeda, yang bervariasi dengan panjang dan urutan karena mRNA splicing alternatif. Para isoform pendek dan Obra ObRc diperkirakan memainkan peran penting dalam transportasi leptin melintasi penghalang darah-otak (BBB). Para leptin isoform panjang reseptor ObRb terutama bertanggung jawab untuk signaling12 leptin. Isoform reseptor leptin panjang dinyatakan subur di hipotalamus dan mengaktifkan Janus kinase transduser sinyal dan penggerak trascription (JAK-STAT) untuk mengubah ekspresi neuropeptida hipotalamus. Ini ObRb reseptor leptin fungsional, dinyatakan dalam beberapa organ, sangat mengungkapkan seluruh sistem saraf pusat tetapi terutama di hipotalamus, di mana ia mengatur homeostasis energi dan fungsi neuroendokrin dijelaskan lebih lanjut di bawah ini. Dalam model tikus db / db, ObRb adalah disfungsional, mengakibatkan obesitas dan syndrome13 metabolik.

Activation of ObRb sets off a cascade of several signal transduction pathways of which the best studied pathway is the Janus kinase 2/signal transducer and activator of transcription 3 (JAK2/STAT3) pathway. STAT3 has been shown to mediate the transcription of several genes that affect a number of cellular processes. Leptin controls energy homeostasis and body weight primarily by activating ObRb in the hypothalamus. The ObRb activate numerous JAK2/STAT3-dependent and -independent signaling pathways that act in coordination as a network to fully mediate leptin's action. The activation of individual pathways in the leptin signaling network appears to be differentially regulated in discrete subpopulations of ObRb-expressing neurons. These pathways are also likely to be regulated by various other hormonal, neuronal, and metabolic signals that cross-talk with leptin. Hence, it is important to fully determine whether and how positive and negative regulators of ObRb signaling, metabolic state, and/or neuronal activity regulate leptin signaling networks in a cell/tissue type-specific manner and how activation of these signaling pathways mediates leptin's effects in humans13. Aktivasi ObRb set off riam jalur transduksi sinyal beberapa jalur yang dipelajari terbaik adalah Janus kinase 2/signal transduser dan aktivator transkripsi 3 (JAK2/STAT3) jalur. STAT3 telah ditunjukkan untuk menengahi transkripsi beberapa gen yang mempengaruhi sejumlah proses seluler. Leptin kontrol homeostasis energi dan berat badan terutama dengan mengaktifkan ObRb di hipotalamus. ObRb Para mengaktifkan jalur banyak sinyal JAK2/STAT3-dependent dan-independen yang bertindak dalam koordinasi sebagai suatu jaringan untuk sepenuhnya memediasi tindakan leptin itu. Pengaktifan jalur individu dalam jaringan sinyal leptin tampaknya diferensial diatur pada sub-populasi diskrit ObRb-mengekspresikan neuron. Jalur ini juga cenderung diatur oleh berbagai sinyal hormonal, saraf, dan metabolisme lain yang lintas berbicara dengan leptin. Oleh karena itu, penting untuk sepenuhnya menentukan apakah dan bagaimana regulator positif dan negatif dari ObRb sinyal, negara metabolik, dan / atau aktivitas neuronal mengatur jaringan sinyal leptin dalam aktivasi sel / jaringan jenis spesifik cara dan bagaimana ini menengahi jalur sinyal efek leptin yang di humans13.
6

CHAPTER IV LEPTIN ON REPRODUCTIVE SYSTEM AND FERTILITY

4.1

Leptins effect on reproductive system A component of the lipostat theory years ago was the hypothesis that some biochemical

signal from adipose tissue serves as the feedback regulator to tell the brain the status of peripheral body nutrition. This signal is now understood to be leptin, which feeds back to the arcuate nucleus in the regulation of neuropeptide Y (NPY), as the most important molecule involved in appetite regulation. The arcuate nucleus is also the site of key reproductive control as the origin of GnRH. Early studies tested the hypothesis that leptin may be involved in both hypothalamic and pituitary gonadotropin regulation. McCann and his colleagues incubated hemianterior pituitaries of adult male rats with increasing concentrations of leptin for 3 hours and observed a dose dependent stimulation of FSH and LH release. 4 Prolactin secretion was also increased in a dose dependent manner, but only at higher leptin concentrations. These studies were the first to demonstrate a direct in vitro effect of leptin on pituitary LH, FSH, and prolactin secretion17. Sebuah komponen dari lipostat tahun lalu adalah teori hipotesis bahwa beberapa sinyal biokimia dari jaringan adiposa berfungsi sebagai regulator umpan balik untuk memberitahu otak status gizi tubuh perifer. Sinyal ini sekarang dipahami sebagai leptin, yang feed kembali ke inti arkuata dalam regulasi neuropeptide Y (NPY), sebagai molekul paling penting yang terlibat
7

dalam pengaturan nafsu makan. Inti arkuata juga merupakan situs kontrol reproduksi kunci sebagai asal dari GnRH. Studi awal menguji hipotesis bahwa leptin mungkin terlibat dalam kedua hipotalamus dan hipofisis regulasi gonadotropin. McCann dan rekan-rekannya diinkubasi kelenjar pituitari hemianterior dari tikus jantan dewasa dengan peningkatan konsentrasi leptin selama 3 jam dan mengamati stimulasi tergantung dosis FSH dan LH release.4 sekresi Prolaktin juga meningkat secara dosis tergantung, tetapi hanya pada konsentrasi leptin lebih tinggi. Studi ini adalah yang pertama untuk menunjukkan langsung berlaku vitro leptin terhadap hipofisis LH, FSH, dan prolaktin secretion17.

4.1.1

Leptin and central regulation of the gonadotropin-gonadal axis The role of leptin in regulating reproduction and the hypothalamic-pituitary-

gonadal (HPG) axis is a crucial, permissive one. 4,18 Congenital leptin deficiency and/or loss of leptin function due to leptin or leptin receptor mutations leads to hypogonadotropic hypogonadism with low levels of follicle stimulating hormone and luteinizing hormone, complete loss of luteinizing hormone pulsatility, lack of pubertal growth spurt, reduced expression of secondary sexual characteristics, and primary amenorrhea.18 The clinical features of hypothalamic hypogonadism and associated disturbances can be restored by leptin administration in replacement doses. On the other end of the spectrum, elevated leptin levels due to increased body fat mass associated with obesity may also have an inhibitory effect on the HGP axis. Leptin may thus serve as a signal to convey information to the reproductive system that the amount of energy stored in the body as fat is adequate not only for the survival of the individual but also for carrying a pregnancy to term. Because a certain threshold level of energy and body fat mass, which may vary from individual to individual, seems to be necessary for the onset of puberty and normal fertility, leptin has been proposed to be a permissive signal, which can activate the reproductive axis and maintain normal reproductive function by conveying needed information on available energy reserves in the adipose tissue. Moreover, in states of secondary failure of the HPG axis associated with loss of fat mass,

such as in exercise-induced amenorrhea or anorexia nervosa, exogenously administered leptin may fully normalize the function of the HPG axis.18 Peranan leptin dalam mengatur reproduksi dan hipotalamus-hipofisis-gonad (HPG) sumbu adalah, penting permisif one.4, 18 defisiensi leptin kongenital dan / atau hilangnya fungsi leptin karena mutasi reseptor leptin atau leptin menyebabkan hipogonadisme hipogonadotropik dengan rendahnya tingkat hormon perangsang folikel dan hormon luteinizing, kehilangan lengkap luteinizing hormon pulsatility, kurangnya percepatan pertumbuhan pubertas, mengurangi ekspresi dari karakteristik seksual sekunder, dan primer amenorrhea.18 Gambaran klinis hipogonadisme hipotalamus dan gangguan terkait dapat dikembalikan dengan administrasi leptin dalam dosis pengganti. Di ujung lain spektrum, kadar leptin tinggi karena massa lemak tubuh meningkat terkait dengan obesitas juga mungkin memiliki efek penghambatan pada sumbu HGP. Leptin dengan demikian dapat berfungsi sebagai sinyal untuk menyampaikan informasi kepada sistem reproduksi bahwa jumlah energi yang tersimpan dalam tubuh sebagai lemak adalah cukup tidak hanya untuk kelangsungan hidup individu tetapi juga untuk membawa kehamilan untuk jangka. Karena tingkat ambang batas tertentu dari energi dan massa lemak tubuh, yang mungkin berbeda dari individu ke individu, tampaknya diperlukan untuk masa pubertas dan kesuburan normal, leptin telah diusulkan untuk menjadi sinyal permisif, yang dapat mengaktifkan sumbu reproduksi dan mempertahankan fungsi reproduksi normal dengan menyampaikan informasi yang dibutuhkan pada cadangan energi yang tersedia di jaringan adiposa. Selain itu, dalam keadaan kegagalan sekunder dari sumbu HPG berhubungan dengan hilangnya massa lemak, seperti dalam latihaninduced amenorrhea atau anoreksia nervosa, eksogen diberikan leptin penuh bisa menormalkan fungsi dari HPG axis.18 Some of the reproductive dysfunction resulting from states of leptin deficiency and excess, leptin appears to play a key role in proper functioning of the reproductive system. It is well known that the reproductive system is highly sensitive to states of energy deficit, which likely provides an efficient mechanism to prevent the energy demands of pregnancy and lactation under unfavorable conditions. At the other extreme, excessive energy storage i.e. obesity also appears to interfere with proper regulation of
9

the reproductive system. Since leptin conveys a signal of the amount of energy stores to the brain, a logical hypothesis would be that leptin is the link between energy reserves and neural networks controlling reproduction. Recent studies have shed more light on how leptin may convey this signal to the reproductive axis (Figure 1). In healthy women who underwent frequent blood sampling every 7 minutes for 24 hours, the pulsatile release of leptin showed a significant pattern synchrony with serum LH and estradiol levels, especially at night when leptin levels reached their peak. This suggested that leptin may regulate the physiologic levels and rhythmicity of reproductive hormones. Taken together, this evidence suggests that either leptin regulates LH release4. Beberapa disfungsi reproduksi yang dihasilkan dari negara defisiensi leptin dan kelebihan, leptin tampaknya memainkan peran penting dalam berfungsinya sistem reproduksi. Hal ini juga diketahui bahwa sistem reproduksi sangat sensitif terhadap keadaan defisit energi, yang mungkin menyediakan mekanisme yang efisien untuk mencegah kebutuhan energi kehamilan dan menyusui dalam kondisi tidak menguntungkan. Pada ekstrem yang lain, penyimpanan energi obesitas berlebihan yaitu juga tampaknya mengganggu regulasi yang tepat dari sistem reproduksi. Sejak leptin menyampaikan sinyal dari jumlah menyimpan energi ke otak, suatu hipotesis yang masuk akal adalah bahwa leptin adalah hubungan antara cadangan energi dan jaringan saraf mengendalikan reproduksi. Penelitian terbaru telah menjelaskan lebih lanjut tentang bagaimana leptin dapat menyampaikan sinyal ini dengan sumbu reproduksi (Gambar 1). Pada wanita sehat yang menjalani darah sering sampling setiap 7 menit selama 24 jam, rilis berdenyut leptin menunjukkan sinkroni pola yang signifikan dengan serum LH dan estradiol tingkat, terutama pada malam hari ketika tingkat leptin mencapai puncaknya. Hal ini menunjukkan bahwa leptin dapat mengatur tingkat fisiologis dan rhythmicity hormon reproduksi. Secara bersama-sama, bukti ini menunjukkan bahwa baik leptin mengatur LH release4. Figure 1. Leptin and the hypothalamic-pituitary regulation of the gonadotropingonadal axis4.

10

Leptin is secreted from adipose tissue and induces gonadotropin secretion from the hypothalamus and pituitary as well as gonadal steroid output from the gonads. Solid arrows indicate established interactions whereas dotted arrows indicate potential interactions. +or - signs indicate stimulatory or inhibitory effects, respectively, and both together indicate evidence for both stimulatory and inhibitory effects. FSH, follicle stimulating hormone; GnRH, gonadotropin stimulating hormone; LH, luteinizing hormones.

Leptin disekresi dari jaringan adiposa dan menginduksi sekresi gonadotropin dari hipotalamus dan output steroid hipofisis serta gonad dari gonad. Panah padat menunjukkan interaksi didirikan sedangkan panah putus-putus menunjukkan potensi interaksi. "+" Atau "-" tanda-tanda menunjukkan stimulasi atau efek hambat, masingmasing, keduanya bersama-sama menunjukkan bukti untuk kedua stimulasi dan 4.1.2 dan Leptin and the Hypothalamus efek penghambatan. FSH, folikel stimulating hormone; GnRH, gonadotropin hormon

A number of studies hormon. have been performed which provide evidence that leptin may perangsang; LH, luteinizing influence gonadotropin release at the level of the hypothalamus (Figure 2). Leptin
Source from: . LC Jean, SM Christos. Leptin and the hypothalamic-pituitary regulation of the gonadotropin gonadal axis. Kluwer Academic Publishers 2001; 4: 87-92.

administered peripherally to adult ovariectomized estrogen-treated rats during a 48-hour fast prevented the suppression of LH pulse frequency that occurs during fasting, providing evidence that leptin may regulate GnRH since changes of LH pulse frequency reflect timing of GnRH release. To more directly investigate leptins effect at the hypothalamic level, Yu et al. performed an experiment in which proved that leptin at the lowest concentrations (10-12 and 10-11 mol) produced a significant increase in GnRH

release within 30 to 60 minutes, an effect that was not seen at higher concentrations (10 6

mol) and was in fact associated with a significant decrease in GnRH compared to

controls. Further experiments suggested that this effect was mediated by nitric oxide
11

since the stimulatory effect of leptin on GnRH release was completely inhibited by a competitive inhibitor of nitric oxide synthase4.

12