1

I. JUDUL USULAN SKRIPSI Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol dan Fraksi Etil Asetat Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa L.) dengan Metode DPPH (1 1!di"enil!#! $ikril%idra&il) 'eserta uji kandungan ki(ian)a. II. INTISARI USULAN SKRIPSI Rosella (Hibiscus sabdariffa L.) diketa%ui (engandung sen)a*a "lavonoid karena kelo$ak 'unga tana(an ini 'er*arna (era% )ang (engandung $ig(en antosianin di(ana antosianin (eru$akan golongan "lavonoid. +ala% satu e"ek dari "lavonoid adala% se'agai antiradikal 'e'as. Penelitian ini 'ertujuan untuk (engeta%ui aktivitas antioksidan kelo$ak 'unga rosella (Hibiscus sabdariffa L.) dengan (etode DPPH (1 1!di"enil!#!$ikril%idra&il) dan untuk (engeta%ui golongan sen)a*a akti" )ang terkandung di dala(n)a. Penelitian ini dilakukan dengan (e('agi (asing!(asing ekstrak etanol dan "raksi etil asetat dala( 'er'agai konsentrasi. Pe('anding )ang digunakan dala( $engujian aktivitas antioksidan adala% vita(in ,. Proses ekstraksi dilakukan dengan (etode (aserasi (enggunakan $elarut etanol. Fraksinasi ekstrak dilakukan dengan (etode $artisi -air!-air (enggunakan $elarut se(i $olar )aitu etil asetat. Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan (etode DPPH. Data )ang di$erole% di%itung untuk (engeta%ui aktivitas antioksidann)a. Analisa $ro'it antara log konsentrasi larutan uji dengan $ersentase aktivitas antioksidan digunakan untuk (engeta%ui .,/0 dan untuk (engeta%ui kandungan sen)a*a akti" )ang terkandung dala( kelo$ak 'unga rosella digunakan reaksi ki(ia dan kro(atogra"i la$is ti$is.

III.LATAR BELAKANG MASALAH +eiring dengan 'erke('angn)a &a(an $olusi ter%ada$ lingkungan

se(akin (eningkat dan (enjadi "aktor uta(a $en)e'a' gangguan kese%atan. +eiring dengan 'erta('a%n)a u(ur kondisi tu'u% akan (enjadi tua dan (en)e'a'kan terjadin)a $enurunan $roduksi &at antioksidan dala( tu'u%. Dengan de(ikian tu'u% akan kekurangan tenaga sering sakit!sakitan terkena stroke 'a%kan terjadi $engerasan $e('ulu% dara% dan $en)akit lain. Pada u(ur 10 ta%un $roduksi antioksidan dala( tu'u% %an)a /0 2 dan $ada u(ur 30!40 ta%un akan turun (enjadi /!10 2 (Hernani dan Ra%arjo #003). +etia$ %ari dala( tu'u% kita akan terle$as &at oksigen )ang tidak sta'il )ang da$at (engoksidasi jaringan. Unsur oksigen tak sta'il ini dida$at dari %asil (eta'olis(e )ang dilakukan tu'u% ter%ada$ (akanan )ang (asuk. 5at!&at oksidan inila% )ang dise'ut radikal 'e'as (Ala( +)a% #00/). Radikal 'e'as (eru$akan sala% satu 'entuk sen)a*a oksigen reakti" )ang (e(iliki elektron tidak 'er$asangan. Radikal 'e'as )ang 'an)ak dala( tu'u% (engaki'atkan kerusakan sel dan gangguan (eta'olis(e )ang $ada ak%irn)a (e(i-u ti('uln)a $en)akit se$erti jantung koroner kanker art%erosklerosis katarak dan $enuaan dini (6inarsi #004). Antioksidan (eru$akan &at )ang da$at (enetralkan radikal 'e'as se%ingga da$at (elindungi siste( 'iologi tu'u% dari 'er'agai (a-a( $en)akit degenerati" $enuaan dan kanker. Antioksidan juga (eru$akan sen)a*a )ang da$at (eng%a('at reaksi oksidasi dengan (engikat radikal 'e'as dan (olekul )ang sangat reakti" aki'atn)a kerusakan sel da$at di%a('at. +e'agai 'a%an

$enetral dari radikal 'e'as antioksidan ada )ang 'eru$a en&i( (su$eroksida dis(utase (+7D) katalase reductase glutathione peroxidase) dan ada )ang 'eru$a (ikronutrien (!karoten vita(in , dan vita(in E) (6inarsi #004). Antioksidan (eru$akan sen)a*a $enting dala( (enjaga kese%atan tu'u% karena 'er"ungsi se'agai $enangka$ radikal 'e'as )ang 'an)ak ter'entuk dala( tu'u%. +elain dikonsu(si dala( 'entuk (akanan antioksidan juga di(an"aatkan untuk 'agian luar tu'u% )aitu se'agai kos(etik dala( $era*atan ke-antikan (Hernani 8 Ra%arjo #003). 9e'an)akan tana(an rosella (Hibiscus sabdariffa L.) di$ergunakan se'agai tana(an %ias dan se-ara tradisional di(an"aatkan se'agai 'a%an (inu(an )ang 'erk%asiat (enurunkan tekanan dara%. Periset .l(u dan :eknologi Pangan .r. Dida% ;ur"arida M.+i. .nstitut Pertanian Bogor (ene(ukan kandungan antioksidan $ada te% kelo$ak (era% ju(la%n)a 1 4 (((ol<$rolo= le'i% tinggi di'anding ku(is ku-ing )ang antioksidann)a teruji klinis (eluru%kan 'atu ginjal. Berdasarkan $enelitian .( Mlati dkk )ang 'erjudul .solasi Flavonoid dari Fraksi Etil Asetat 9aliks Rosel (Hibiscus sabdariffa L.) (enunjukkan adan)a golongan sen)a*a "lavonoid tanin galat dan steroid atau triter$enoid (Mlati dkk #004). Flavonoid (engandung -in-in aro(atik )ang terkonjugasi dan karena itu
(enunjukkan $ita sera$an )ang kuat $ada daera% s$ektru( U> (ultra violet) dan

s$ektru( ta($ak. Flavonoid u(u(n)a terda$at dala( tu('u%an terikat $ada gula se'agai glikosida dan aglikon "lavonoid )ang (ungkin terda$at dala( satu tu('u%an dala( 'e'era$a 'entuk ko('inasi glikosida (Har'orne 1?@4).

+ala% satu uji untuk (enentukan aktivitas antioksidan $enangka$ radikal adala% (etode DPPH (1 1 Di$%en)l!#!$i-r)l%idra&)l). Metode DPPH di$ili% karena seder%ana (uda% -e$at dan $eka serta %an)a (e(erlukan sedikit sa($el. +en)a*a antioksidan akan 'ereaksi dengan radikal DPPH (elalui (ekanis(e donasi ato( %idrogen dan (en)e'a'kan terjadin)a $eluru%an *arna DPPH dari ungu ke kuning )ang diukur $ada $anjang gelo('ang /14 n( (Hanani dkk #00/). Dari uraian di atas (aka $erlu juga dilakukan $enelitian (engenai aktivitas antioksidan ekstrak etanol dan "raksi etil asetat kelo$ak 'unga rosella (Hibiscus sabdariffa L.) )ang dilakukan dengan (etode DPPH (1 1!di"enil!#! $ikril%idra&il). IV. PERUMUSAN MASALAH Dari latar 'elakang di atas (aka da$at diru(uskan $er(asala%an se'agai 'erikut B 1. A$aka% ekstrak etanol dan "raksi etil asetat kelo$ak 'unga rosella ( Hibiscus sabdariffa L.) (e($un)ai aktivitas antioksidan dengan (etode DPPH C #. Bera$aka% $otensi antioksidan dari ekstrak etanol dan "raksi etil asetat kelo$ak 'unga rosella (Hibiscus sabdariffa L.) )ang ditunjukkan dengan nilai .,/0 C A. 9andungan sen)a*a akti" a$aka% )ang terda$at dala( ekstrak etanol dan "raksi etil asetat kelo$ak 'unga rosella (Hibiscus sabdariffa L.) C

V. PENTINGNYA SKRIPSI DIUSULKAN

Penelitian ini di%ara$kan da$at (e('erikan in"or(asi il(ia% (engenai $e(an"aatan Rosella (Hibiscus sabdariffa L.) )ang (e($un)ai aktivitas antioksidan se'agai alternati" untuk (engendalikan dan (en-ega% terjadin)a 'er'agai $en)akit degenerati" dan kanker 'agi (as)arakat serta se'agai re"erensi 'agi $enelitian sejenis )ang akan dilakukan ole% $eneliti lain dan (enguji aktivitas antioksidann)a se-ara in vivo. VI. TUJUAN PENELITIAN 1. Mengeta%ui ada tidakn)a aktivitas antioksidan ekstrak etanol dan "raksi etil asetat kelo$ak 'unga Rosella (Hibiscus sabdariffa L.) dengan (etode DPPH. #. Mengeta%ui $otensi antioksidan dari ekstrak etanol dan "raksi etil asetat kelo$ak 'unga Rosella (Hibiscus sabdariffa L.) )ang ditunjukkan dengan nilai .,/0. A. Mengeta%ui golongan sen)a*a akti" )ang terda$at dala( ekstrak etanol dan "raksi etil asetat kelo$ak 'unga Rosella (Hibiscus sabdariffa L.). VII. TINJAUAN PUSTAKA A. Tanaman Rosella (Hibiscus sabdariffa L.) 1. Klas ! "as 9ingdo( Divisi +u' D Divisi 9elas Bangsa +uku B Plantae (tu('u%an) B Spermatophyta B Angiospermae B Dicotyledonae B Malvaceales B Malvaceae

+u' D 9ingdo( B Tracheobionta ('er$e('ulu%)

Marga Eenis >arietas

B Hibiscus B Hibiscus Sabdariffa L. B Hibiscus Sabdariffa var. +a'dari""a L. Hibiscus Sabdariffa var. Ultissi(a 6ester (Mardia% dkk. #00?).

#. $ % &' % Hibiscus Sabdariffa varietas +a'dari""a L. (eru$akan tana(an se(usi( )ang tu('u% tegak 'er-a'ang!-a'ang dengan tinggi tana(an da$at (en-a$ai A / (. Batangn)a 'ulat dan 'erka)u 'er*arna (ulai dari %ijau tua sa($ai (era%. Daunn)a tunggal 'er'entuk 'ulat telur $ertulangan (enjari dan letakn)a 'erseling ter'agi ke dala( A!4 -u$ing dan $inggiran daun 'ergerigi. Panjang daun (en-a$ai 3!1/ -( dan le'arn)a /!@ -( tangkai daun 'er'entuk 'ulat 'er*arna %ijau dengan $anjang 1!4 -( sedangkan Hibiscus Sabdariffa varietas Ultissi(a 6ester juga tergolong tana(an se(usi( )ang tu('u% tegak tidak 'an)ak 'er-a'ang dengan tinggi (en-a$ai 1 @ (. Batangn)a 'er*arna %ijau atau (era%. Daunn)a 'er*arna %ijau dan kadang!kadang 'ertulang daun (era%. Bunga 'er*arna kuning dengan kelo$ak 'er*arna %ijau atau (era% tidak 'erdaging 'erduri dan tidak 'isa di(akan (Mardia% dkk. #00?).

Gam(a% 1. Tanaman %osella (Hibiscus Sabdariffa L.)

). Jen s Rosella (Hibiscus Sabdariffa L.) Ada 'e'era$a jenis rosella )ang 'eredar di$asaran diantaran)a rosella +udan atau A"rika )ang 'er*arna (era% $ekat ke%ita(an disana rosella di$roses (enjadi (inu(an tradisional 'erna(a 9arkade% )ang (eru$akan (inu(an ke'angsaan orang +udan. Eenis )ang lain adala% Rosella ,ran'err) )ang 'an)ak terda$at di Belanda dengan kelo$ak 'er*arna (era% (en)eru$ai kotak dan ujung kelo$akn)a 'er'entuk oval serta rosella :ai*an )ang 'er*arna (era% dengan $anjang sekitar / -( dan ujung kun-u$n)a agak (ereka% (A-%(ad #00?). *. Kan+,n-an K m a Dala( 100 gra( rosela kering (engandung seju(la% asa( a(ino dan (ineral )ang di$erlukan tu'u% )aitu $rotein le(ak serat kalsiu( 'esi karoten t%ia(ine ri'o"lavin dan niasin sedangkan asa( le(akn)a ada 1@ )aitu asa( askor'at arginin sistein %istidin isoleusin leusin lisin (etionin "enilalanin t%reonine tr)$to$%an valine asa( as$artat asa( gluta(at alanin glisin $roline dan serin. 5at akti" )ang $aling 'er$eran dala( kelo$ak 'unga Rosella (eli$uti goss)$etin antosianin dan glu-oside %i'is-in selain itu kelo$ak 'unga rosela (era% juga (engandung asa( organik $olisakarida dan "lavonoid. Antosianin (eru$akan $ig(en ala(i )ang (e('eri *arna (era% $ada sedu%an kelo$ak 'unga Rosella dan 'ersi"at antioksidan (Dar)anto dan Agrina #00@).

+en)a*a "lavonoid (eru$akan sala% satu golongan "enol ala( ter'esar. Flavonoid (engandung 1/ ato( kar'on dala( inti dasarn)a )ang tersusun dala( kon"igurasi ,3!,A!,3 )aitu dua -in-in aro(atik )ang di%u'ungkan ole% satuan tiga ato( kar'on )ang da$at atau tidak da$at (e('entuk -in-in ketiga (Mark%a( 1?@@). Flavonoid terse'ar luas dala( 'er'agai 'a%an (akanan dan konsentrasi. Ber'agai tana(an (au$un 'ua%!'ua%an )ang da$at di(akan juga (engandung seju(la% "lavonoid di(ana konsentrasi )ang le'i% tinggi 'erada $ada daun dan kulit ku$asann)a. Flavonoid da$at (eng%a('at $enggu($alan ke$ing!ke$ing sel dara% (erangsang

$roduksi nitrit oksida )ang da$at (ele'arkan (relaksasi) $e('ulu% dara% dan (eng%a('at $ertu('u%an sel kanker disa($ing 'er$otensi se'agai antioksidan dan $enangka$ radikal 'e'as "lavonoid juga (e(iliki 'e'era$a si"at se$erti %e$ato$rotekti" antitro('otik antiin"la(asi dan antivirus (6inarsi #004). Flavonoid (eru$akan sen)a*a $olar karena (e($un)ai seju(la% gugus %idroksil )ang tak tersuli% atau suatu gula (aka u(u(n)a "lavonoid larut dala( $elarut $olar se$erti etanol (etanol 'utanol aseton di(etilsul"oksida (DM+7) di(etil"or(a(ida (DMF) dan air. Adan)a gula )ang terikat $ada "lavonoid ('entuk u(u( )ang dite(ukan) (en)e'a'kan "lavonoid le'i% (uda% larut dala( air se%ingga -a($uran $elarut di atas dengan air (eru$akan $elarut )ang le'i% 'aik untuk glikosida. +e'alikn)a aglikon )ang kurang $olar se$erti

iso"lavon "lavanon "lavonol dan "lavon -enderung (uda% larut dala( $elarut se$erti eter dan kloro"or( (Mark%a( 1?@@). .. Ke-,naan 9elo$ak 'unga Rosella da$at (engatasi 'er'agai (a-a( $en)akit diantaran)a (enurunkan asa( urat (gout) (eredakan $eradangan sendi (art%ritis) (erangsang selera (akan kandungan glycosides!n)a se'agai $ena*ar luka (eningkatkan siste( s)ara" dan da$at (eningkatkan da)a ingat (akanan otak da$at (e('antu (enurunkan tekanan dara% tinggi (%i$ertensi) (elan-arkan 'uang air ke-il (diuretik) se'agai anti

in"la(asi )ang kuat (e($un)ai unsur anti$iretik )ang (enurunkan $anas dala( (e($er-e$at $e(e-a%an dara% 'eku di otak kandungan asiaticoside (triterpene glycoside) dala( (erangsang $e('entukan li$id dan $rotein )ang a(at 'erguna untuk kese%atan kulit da$at (eredakan dan (eng%ilangkan 'atuk kronis (enurunkan kolesterol

(eng%an-urkan le(ak (elangsingkan tu'u% (engurangi e"ek 'uruk (iras (engurangi ke-anduan (erokok (en-ega% stroke dan %i$ertensi (engurangi stress (e($er'aiki $en-ernaan (eng%ilangkan *asir (enurunkan kadar gula 'ersi"at $enetral ra-un (en-ega% kanker tu(or kista dan sejenis (aaF (ena%un (igrain de(a( tinggi -o-ok untuk i'u %a(il guna (e('entuk ke-erdasan otak anak di dala( kandungan dan (a($u (eningkatkan gaira% se= serta ta%an la(a (dengan tera$i rutin) (A-%(ad #00?).

10

B. E"s/%a"s Ekstraksi adala% kegiatan $enarikan kandungan ki(ia )ang da$at larut se%ingga ter$isa% dari 'a%an )ang tidak da$at larut dengan $elarut -air. +i($lisia )ang diekstrak (engandung sen)a*a akti" )ang da$at larut dan sen)a*a )ang tidak da$at larut se$erti serat kar'o%idrat $rotein dan lain! lain. +en)a*a akti" )ang terda$at dala( 'er'agai si($lisia da$at digolongkan ke dala( golongan (in)ak atsiri alkaloid "lavonoid dan lain! lain dengan diketa%uin)a sen)a*a akti" )ang dikandung si($lisia akan (e($er(uda% $e(ili%an $elarut dan -ara ekstraksi )ang te$at (De$kes #000). Ekstrak adala% sediaan kering kental atau -air di'uat dengan (en)aring si($lisia na'ati dan %e*ani (enurut -ara )ang -o-ok di luar $engaru% (ata%ari )ang langsung. Ekstrak kering %arus le'i% (uda% digerus (enjadi ser'uk (De$kes 1?4?). Ekstraksi dengan (enggunakan $elarut di'edakan (enjadi dua (a-a( )aitu -ara dingin dan -ara $anas. ,ara dingin terdiri dari (aserasi dan $erkolasi. +edangkan -ara $anas terdiri dari re"luks so=%letasi digesti in"us dan dekok. Maserasi 'erasal dari istila% maceration )ang artin)a (erenda( (aka $rinsi$ (aserasi adala% $erenda(an si($lisia )ang (e($un)ai derajat ke%alusan tertentu dengan -airan $en)ari. ,airan $en)ari akan (ene('us dinding sel ke(udian (asuk kedala( rongga sel )ang (engandung &at akti" se%ingga (elarutkan &at akti". Adan)a $er'edaan konsentrasi antara larutan &at akti" di dala( dan di luar sel!sel akan

11

(endesak keluar larutan &at akti" di dala( sel )ang le'i% $ekat. Peristi*a ini 'erulang se%ingga terjadi kesei('angan konsentrasi antara larutan di luar dan di dala( sel. Ekstraksi dengan -ara (aserasi (e($un)ai 'e'era$a keuntungan antara lain -ara (elakukan (uda% alat )ang digunakan seder%ana dan da$at digunakan untuk si($lisia dengan kandungan &at akti" tidak ta%an $anas. +edangkan kerugian -ara (aserasi )aitu $en)arian kurang se($urna dan *aktu $engerjaann)a la(a (De$kes 1?@3). $. 0%a"s nas Fraksinasi adala% $rosedur $e(isa%an )ang 'ertujuan (e(isa%kan golongan uta(a kandungan )ang satu dari golongan uta(a )ang lain. Pe(isa%an ju(la% dan jenis sen)a*a (enjadi "raksi 'er'eda )ang tergantung $ada jenis tu('u%an. +en)a*a!sen)a*a )ang 'ersi"at $olar akan (asuk ke $elarut $olar 'egitu $ula sen)a*a )ang 'ersi"at non $olar akan (asuk ke $elarut non polar (Harborne, 1987). :eknik )ang la&i( digunakan untuk ta%a$ "raksinasi adala% kro(atogra"i atau bisa juga partisi. Kromatografi adalah teknik
yang lebih dapat diandalkan karena partisi kemampuannya sangat terbatas. dalam ekstrak artisi dilakukan apabila jumlah komponen di terdapat puluhan senya!a. "asar dari

pemisahan dengan #ara partisi adalah perbedaan kelarutan dan syarat yang harus dipenuhi untuk melakukan hal ini adalah bah!a dua pelarut yang digunakan tidak saling ber#ampur,

1#

sedangkan teknik kromatografi dilakukan jika komponen utama di dalam suatu ekstrak hanya sekitar sepuluh atau belasan ($uhtadi, %&&9).

Fraksinasi ekstrak dilakukan dengan (etode $artisi -air!-air (enggunakan $elarut se(i $olar )aitu etil asetat. Etil asetat adala% sen)a*a organik dengan ru(us ,HA,H#7,(7),HA. +en)a*a ini (eru$akan ester dari etanol dan asa( asetat )ang 'er*ujud -airan tak 'er*arna dan (e(iliki aro(a k%as. +en)a*a ini sering disingkat Et7A- dengan Et (e*akili gugus etil dan 7A- (e*akili asetat. Berdasarkan si"at "isika ki(ia etil asetat adala% $elarut $olar (enenga% )ang volatil atau (uda% (engua$ tidak 'era-un dan tidak %igrosko$is. Etil asetat (e(iliki titik le'ur G@A.3 H, dan titik didi% 44.1 H,. D. Ra+ "al Be(as Radikal 'e'as da$at dide"inisikan se'agai suatu (olekul ato( atau 'e'era$a ato( )ang (e($un)ai satu atau le'i% elektron tidak 'er$asangan $ada or'ital luarn)a se%ingga 'ersi"at sangat reakti". Radikal 'e'as da$at (en)e'a'kan kerusakan sel karena da$at (eni('ulkan kerusakan $ada $rotein (aktivitas en&i( terganggu) asa( nukleat (kerusakan D;A (utasi sel) dan kerusakan $ada li$id ("luiditas (e('ran terganggu) (Iuniastuti #00@). E. An/ o"s +an 1. Des"% 1s an/ o"s +an

1A

Antioksidan adala% sen)a*a )ang (e($un)ai struktur (olekul )ang da$at (e('erikan elektronn)a dengan -u(a!-u(a ke$ada (olekul radikal 'e'as tan$a terganggu sa(a sekali "ungsin)a dan da$at (e(utus reaksi 'erantai dari radikal 'e'as (9u(alaningsi% #003). Radikal 'e'as terse'ut da$at (engoksidasi asa( nukleat $rotein le(ak. Radikal 'e'as )ang 'an)ak dala( tu'u% (engaki'atkan kerusakan sel dan gangguan (eta'olis(e )ang $ada ak%irn)a (e(i-u ti('uln)a $en)akit se$erti jantung koroner kanker art%ersklerosis katarak dan $enuaan dini (6inarsi #004). Ato( ini -enderung untuk (enga('il $artikel dari (olekul lain )ang ke(udian (eng%asilkan sen)a*a 'aru )ang tidak nor(al. Pasangan atau elektron )ang dijadikan $asangan 'aru itu 'isa dia('il dari deoxyribo nucleic acid (D;A) (e('ran atau sela$ut sel (e('ran li$oso( ('agian sel )ang (engandung en&i( %idrolitik) (itokondria (te($at $roduksi energi sel) en&i(!en&i( le(ak $rotein serta

ko($onen jaringan lainn)a. Artin)a dala( $roses $enga('ilan terse'ut jaringan!jaringan )ang di-uri 'isa (enjadi rusak dan (eni('ulkan 'er'agai kelainan serta $en)akit (:a$an #00/). #. Ma'am an/ o"s +an :erda$at tiga (a-a( antioksidan )aitu antioksidan )ang di'uat ole% tu'u% kita sendiri antioksidan ala(i dan antioksidan sintetik.

11

Antioksidan )ang di'uat ole% tu'u% kita sendiri )aitu 'eru$a en&i( antara lain su$eroksida dis(utase glutathione peroxidase peroxidase dan katalase. Antioksidan ala(i )ang da$at di$erole% dari tana(an dan %e*an )aitu toko"erol vita(in , 'etakaroten "lavonoid dan sen)a*a "enolik. Antioksidan sintetik )ang di'uat dari 'a%an!'a%an ki(ia )aitu utylated Hroxyanisole (BHA) BH: :BHJ PJ dan ;DKA )ang dita('a%kan dala( (akanan untuk (en-ega% kerusakan le(ak (9u(alaningsi% #003). ). 0,n-s an/ o"s +an Berdasarkan "ungsin)a antioksidan di'edakan (enjadi li(a )aitu antioksidan $ri(er antioksidan sekunder antioksidan tersier oxygen scavenger dan chelators. Antioksidan $ri(er 'er"ungsi untuk (en-ega% ter'entukn)a radikal 'e'as 'aru karena antioksidan ini da$at (eru'a% radikal 'e'as )ang ada (enjadi (olekul )ang 'erkurang da($ak negati"n)a. Antioksidan $ri(er )ang ada dala( tu'u% )ang sangat terkenal adala% en&i( su$eroksida dis(utase. En&i( ini sangat $enting sekali karena da$at (elindungi %an-urn)a sel!sel dala( tu'u% aki'at serangan radikal 'e'as. Bekerjan)a en&i( ini sangat di$engaru%i ole% (ineral!(ineral se$erti (angan seng te('aga dan seleniu( )ang terda$at dala( (akanan dan (inu(an.

1/

Antioksidan

sekunder

(eru$akan

sen)a*a

)ang

'er"ungsi

(enangka$ radikal 'e'as serta (en-ega% terjadin)a reaksi 'erantai se%ingga tidak terjadi kerusakan )ang le'i% 'esar. ,onto% antioksidan sekunder adala% vita(in E vita(in , dan 'etakaroten )ang da$at di$erole% dari 'ua%!'ua%an. Antioksidan tersier (eru$akan sen)a*a )ang (e($er'aiki sel!sel dan jaringan )ang rusak karena serangan radikal 'e'as. Iang ter(asuk kelo($ok ini adala% jenis en&i( (isaln)a (etionin sul"oksidan reduktase )ang da$at (e($er'aiki D;A dala( inti sel. En&i( terse'ut 'er(an"aat untuk $er'aikan D;A $ada $enderita kanker. Antioksidan )ang ter(asuk oxygen scavenger (engikat oksigen se%ingga tidak (endukung reaksi oksidasi (isaln)a vita(in ,. !helators (eru$akan antioksidan $engikat loga( )ang (a($u (engkatalisis reaksi oksidasi (isaln)a asa( sitrat dan asa( a(ino (9u(alaningsi% #003). *. Me"an sme "e%2a an/ o"s +an Mekanis(e kerja antioksidan se-ara u(u( adala% (eng%a('at oksidasi le(ak )ang terdiri dari tiga ta%a$ uta(a )ang da$at dili%at dala( ga('ar # 'erikut ini B inisiasi $ro$agasi ter(inasi L L L RH L RM N HM RM N 7# L R77M dan R77M N RH L R77H N RM

Gam(a% #.S"ema /a3a1an me"an sme "e%2a an/ o"s +an(K,malan n-s 34 #556)

Pada ta%a$ inisiasi terjadi $e('entukan radikal asa( le(ak )aitu suatu sen)a*a turunan asa( le(ak )ang 'ersi"at tidak sta'il dan sangat

13

reakti" karena ke%ilangan satu ato( %idrogen. Pada ta%a$ $ro$agasi radikal asa( le(ak akan 'ereaksi dengan oksigen (e('entuk radikal $eroksi. Pada ta%a$ ter(inasi radikal $eroksi le'i% lanjut akan (en)erang asa( le(ak dan (eng%asilkan %idro$eroksida dan radikal asa( le(ak 'aru. Hidro$eroksida )ang ter'entuk 'ersi"at tidak sta'il dan akan terdegradasi le'i% lanjut (eng%asilkan sen)a*a!sen)a*a kar'onil rantai $endek se$erti alde%ida dan keton )ang

'ertanggungja*a' atas "lavor (akanan 'erle(ak. Antioksidan )ang 'aik akan 'ereaksi dengan radikal asa( le(ak segera setela% sen)a*a terse'ut ter'entuk. ;a(un (ekanis(e kerja serta ke(a($uann)a se'agai antioksidan sangat 'ervariasi (9u(alaningsi% #003). 0. DPPH (141&+ !en l&#&1 "% l3 +%a7 l) DPPH (1 1!di"enil!#!$ikril%idra&il) (eru$akan radikal sintetik )ang sta'il larut dala( $elarut $olar se$erti (etanol dan etanol serta da$at diukur intensitasn)a $ada $anjang gelo('ang /1/ n( (Ro%(an dan Ri)anto #00/) Penentuan aktivitas antioksidan sala% satun)a da$at dilakukan dengan (enggunakan (etode DPPH. Metode ini sering digunakan karena 'ersi"at seder%ana (uda% -e$at dan $eka serta %an)a (e(erlukan 'e'era$a sa($el. +en)a*a antioksidan akan 'ereaksi dengan radikal DPPH (elalui (ekanis(e donasi ato( %idrogen dan (en)e'a'kan terjadin)a $eluru%an

14

*arna DPPH dari ungu ke kuning )ang diukur $ada $anjang gelo('ang /14 n( (Hanani dkk. #00/). G. K%oma/o-%a! La1 s T 1 s (KLT) 9ro(atogra"i la$is ti$is (eru$akan 'entuk kro(atogra"i $lanar selain kro(atogra"i kertas dan elektro"oresis (Kandjar dan Ro%(an #00@). 9ro(atogra"i la$is ti$is digunakan untuk $e(isa%an sen)a*a se-ara -e$at dengan (enggunakan &at $en)era$ 'eru$a ser'uk %alus )ang dila$iskan ser'a rata $ada le($eng ka-a. Le($eng )ang dila$is da$at diangga$ se'agai kolo( kro(atogra"i ter'uka dan $e(isa%an da$at didasarkan $ada $en)era$an $e('agian atau ga'ungann)a tergantung dari jenis &at $en)era$ dan -ara $e('uatan la$isan &at $en)era$ dan jenis $elarut (De$kes 1?4?). Metode la$isan ti$is (e($un)ai keuntungan uta(a )aitu

(e('utu%kan *aktu )ang le'i% -e$at dan di$erole% $e(isa%an )ang le'i% 'aik karena $en)era$ dala( kro(atogra"i la$is ti$is (e($un)ai ka$asitas )ang le'i% 'esar 'ila di'andingkan dengan kertas (+astro%a(idjojo #00/). Fase dia( )ang digunakan dala( kro(atogra"i la$is ti$is (eru$akan $en)era$ 'erukuran ke-il dengan dia(eter $artikel antara 10!A0O(. +e(akin ke-il ukuran rata!rata $artikel "ase dia( dan se(akin se($it kisaran ukuran "ase dia( (aka se(akin 'aik kinerja kro(atogra"i la$is ti$is dala( %al e"isiensin)a dan resolusin)a. Pen)era$ )ang $aling sering digunakan adala% silika dan ser'uk selulosa (Kandjar dan Ro%(an #00@).

1@

Fase gerak ($elarut $enge('ang) iala% (ediu( angkut. Pelarut ini 'ergerak di dala( "ase dia( karena ada ga)a ka$iler. Pelarut )ang digunakan %arus 'eru$a suatu -a($uran seseder%ana (ungkin )ang terdiri atas (aksi(u( tiga ko($onen. Angka 'anding -a($uran din)atakan dala( 'agian volu(e sede(ikian ru$a se%ingga volu(e total sa(a dengan 100 (isaln)a 'en&ena!kloro"or(!asa( asetat (/0B10B10) (+ta%l 1?@/). Penilaian dan doku(entasi kro(atogra( da$at di'edakan (enjadi dua )aitu angka R" $ada kro(atogra"i la$is ti$is dan 'eru$a $enilaian visual. Earak $enge('angan sen)a*a $ada kro(atogra( 'iasan)a din)atakan dengan angka R" atau %R". Ru(usn)a adala% se'agai 'erikut B R" P Earak )ang dite($u% $ada "ase gerak
Earak )ang dite($u% sen)a*a terlarut

Angka R" 'erjangka antara 0 00 dan 1 00 dan %an)a da$at ditentukan dua desi(al. +edangkan %R" iala% angka R" dikalikan "aktor 100 (%) (eng%asilkan nilai 'erjangka 0 sa($ai 100. Pada $enilaian visual suatu kro(atogra( ada 'e'era$a %al )ang %arus dia(ati )aitu jarak $enge('angan ko($onen larutan -u$likan di'andingkan dengan jarak $enge('angan larutan $e('anding. Eika ada 'e'era$a larutan -u$likan -u$likan )ang satu di'andingkan juga dengan -u$likan lain. Be'era$a %al )ang lain (isaln)a "luoresensi dan teruta(a *arna %asil dari reaksi *arna. .n"or(asi (engenai identitas seringkali da$at juga di$erole% dengan (e('andingkan $eru'a%an *arna $ada $e(anasan dan selanjutn)a $ada $en)i($anan $elat (+ta%l 1?@/). VIII.H 1o/es s

1?

Penelitian .r. Dida% ;ur"arida% $ada ta%un #00/ (ene(ukan 'a%*a kadar antioksidan )ang terkandung dala( kelo$ak kering rosella jau% le'i% tinggi di'andingkan dengan tana(an ku(is ku-ing dan 'unga kno$. 5at akti" )ang $aling 'er$eran dala( kelo$ak 'unga Rosella (eli$uti gossypetin" antosianin" dan glucoside hibiscin. Berdasarkan $enelitian di atas da$at dia('il %i$otesis 'a%*a ekstrak etanol dan "raksi etil asetat kelo$ak 'unga rosella ( Hibiscus Sabdariffa L.) diduga (e($un)ai aktivitas antioksidan dengan (etode DPPH (#"# Diphenyl$%$picrylhidra&yl). I8. Ren'ana Penel / an A. Va% a(el 91e%as onal >aria'el ada # )aitu varia'el inde$enden dan varia'el de$enden. >aria'el inde$enden atau dise'ut juga varia'el tidak tergantung )ang terdiri dari varia'el 'e'as dan varia'el terkendali. >aria'el 'e'as (eli$uti -airan $en)ari la(an)a $engeringan dan su%u $engeringan sedangkan varia'el terkendali (eli$uti ju(la% si($lisia kelo$ak 'unga rosella ju(la% -airan $en)ari )ang digunakan dan konsentrasi DPPH. >aria'el de$enden atau varia'el tergantung adala% $ersentase $enangka$an radikal 'e'as )ang diketa%ui dari nilai .,/0. B. Ba3an +an Ala/ Penel / an 1. Ba3an Penel / an a. Ba%an uta(a '. Ba%an $en)ari ,airan $en)ari B Etanol $.a. etil asetat $.a. B +er'uk si($lisia kering Rosella

#0

-. Ba%an untuk "raksinasi dengan (etode $artisi -air!-air B air atau air!etanol dan etil asetat. d. Ba%an untuk uji kualitati" kandungan sen)a*a "lavonoid dengan reaksi *arna B +er'uk 5n H,l #; ser'uk (agnesiu( H,l $ekat. e. Ba%an untuk uji kualitati" kandungan sen)a*a alkaloid dengan reaksi ki(ia B H,l #; air $ereaksi Bou-%ardat dan Ma)er ". Ba%an untuk uji kualitati" kandungan sen)a*a sa$onin dengan reaksi ki(ia B H,l #; air. g. Ba%an untuk uji 9L: kandungan sen)a*a "lavonoid 1. Fase dia( #. Fase gerak B sellulose $.a. B etil asetat!asa( "or(iat!asa( asetat

glasial!air $.a.(100B11B11B#4) A. Pena($ak 'er-akB alu(iniu( klorida 1. Pe('anding B rutin

%. Ba%an untuk uji 9L: kandungan sen)a*a alkaloid 1. Fase dia( #. Fase gerak (40B#0B10) A. Pena($ak 'er-akB Dragendor"" 1. Pe('anding B kinin B sellulose $.a. B toluena!etil asetat!dietil a(ina $.a.

i. Ba%an untuk uji 9L: kandungan sen)a*a sa$onin 1. Fase dia( B sellulose $.a.

#1

#. Fase gerak

B kloro"or(!(etanol!air $.a.(31B/0B10)

A. Pena($ak 'er-akB asa( sul"at 1. Pe('anding j. B stig(asterol

Ba%an untuk uji aktivitas antioksidan dengan (etode DPPH 1) Radikal 'e'as #) Pelarut A) Pe('anding B DPPH (1 1!Di"enil!#!Pikril%idra&il) $.a. B Etanol $.a. B >ita(in , $.a.

#. Ala/ Penel / an a.Alat untuk (e('uat ekstraksi B $erangkat alat (aserasi 'aterbath( '. Alat untuk (e('uat "raksinasi B se$erangkat alat gelas 'aterbath( -.Alat untuk $enentuan aktivitas antioksidan B se$erangkat alat

gelas (ikro$i$et dan s$ektro"oto(eter U>!>is(Kenes)s)10 U>. d. Alat untuk uji kualitati" golongan sen)a*a akti" B ta'ung reaksi alat!alat gelas. e.Alat untuk uji kro(atogra"i la$is ti$isB le($eng 9L: 'ejana 9L: kertas $enjenu% alat $ena($ak 'er-ak. $. Jalann:a Penel / an 1. De/e%m nas Deter(inasi dilakukan dengan (en-o-okkan keadaan (or"ologi tu('u%an 'erdasarkan kun-i!kun-i deter(inasi di literatur. Deter(inasi tana(an rosella (Hibiscus Sabdariffa L ) )ang akan digunakan dala(

##

$enelitian ini dilakukan di La'oratoriu( :aksono(i :u('u%an Eurusan Biologi Fakultas M.PA Universitas ;egeri +e(arang dengan tujuan untuk (engeta%ui 'a%*a rosella )ang akan digunakan dala( $enelitian adala% 'enar!'enar rosella )ang di(aksud.

#. Pen-,m1,lan (a3an +an 1en: a1an s m1l s a Rosella (Hibiscus Sabdariffa L.) se'an)ak tiga kilogra( )ang tela% diku($ulkan di-u-i dengan air (engalir su$a)a kotoran )ang

(ene($el %ilang ke(udian ditiriskan. +elanjutn)a dikeringkan di al(ari $engering $ada su%u 30Q, (De$kes 1?@/). :ujuan $engeringan si($lisia adala% untuk (enda$atkan si($lisia )ang tidak (uda% rusak se%ingga da$at disi($an dala( *aktu relati" la(a (Mursito #00#). +i($lisia )ang tela% kering ke(udian di%aluskan dan dia)ak. ). Pem(,a/an e"s/%a"s +an !%a"s nas Ekstraksi dilakukan ter%ada$ sa($el kelo$ak 'unga rosella )ang tela% diser'uk dengan -ara (aserasi (enggunakan -airan $en)ari etanol (10 'agian si($lisia kering dala( ?0 'agian -airan $en)ari )ang di'agi (enjadi dua 'agian 'agian $erta(a 4/2 $elarut etanol digunakan untuk (aserasi 'agian $erta(a) di'iarkan sela(a tiga %ari dala( 'ejana tertutu$ sa('il diaduk dan ke(udian dida$atkan "iltrat .. +etela% tiga %ari a($as di$eras a($as dita('a% -airan $en)ari etanol se'an)ak #/2 'agian diaduk dan diserkai se%ingga di$erole% seluru% sari se'an)ak 100 'agian. Bejana ditutu$ di'iarkan di te($at sejuk dan terlindung dari

#A

-a%a)a sela(a dua %ari. Enda$an dan "iltratn)a di$isa% "iltrat . dan .. di-a($ur untuk selanjutn)a di$ekatkan (enggunakan 'aterbath sa($ai di$erole% ekstrak kental etanol ke(udian di%itung rende(enn)a. Berat kental Rende(en P Berat kering +e'agian %asil ekstraksi digunakan untuk $ersia$an $engujian antioksidan dan se'agian lagi untuk "raksinasi. Proses "raksinasi di(ulai dengan (elarutkan ekstrak kental kelo$ak 'unga rosella )ang di$erole% ke dala( seju(la% air %ingga seluru% ekstrak larut se($urna jika ada 'agian )ang tidak larut (aka $elarut )ang dita('a%kan adala% -a($uran air dan etanol dengan $er'andingan ?B1. +elanjutn)a di"raksinasi dengan (engunakan -orong $isa% dengan $elarut etil asetat. Proses ini dilakukan re$likasi se'an)ak A kali. Eu(la% $elarut )ang digunakan untuk "raksinasi se'anding dengan ju(la% air )ang dita('a%kan ke dala( ekstrak etanol ($er'andingan 1B1). Fraksi etil asetat dita($ung dan diua$kan (enggunakan 'aterbath su%u /0Q,. Fraksi etil asetat )ang di$erole% diukur 'eratn)a dan diuji aktivitas antioksidann)a. R 100 2

#1

+ke(a $roses ekstraksi dan "raksinasi kelo$ak 'unga rosella da$at dili%at $ada ga('ar A 'erikut ini B
9elo$ak 'unga rosella Di-u-i ditiriskan dikeringkan Di'uat ser'uk +er'uk kelo$ak 'unga rosella Dita('a% etanol ditutu$ di'iarkan A %ari (terlindung -a%a)a) sa('il diaduk!aduk A($as kelo$ak 'unga rosella Dita('a% etanol diaduk dan diserkai Filtrat kelo$ak 'unga rosella(1)

A($as (di'uang)

Filtrat kelo$ak 'unga rosella (#) Filtrat (1 dan #) diletakkan dala( *ada% tertutu$ dite($at sejuk terlindung dari -a%a)a sela(a # %ari Disaring Enda$an (di'uang)

Filtrat kelo$ak 'unga rosella Di$ekatkan dengan 'aterbath Ekstrak kental kelo$ak 'unga rosella Uji aktivitas antioksidan Uji kualitati" $roses "raksinasi gol sen)a*a akti" Ekstrak kental kelo$ak 'unga rosella dilarutkan dengan air %ingga larut jika tidak larut (aka dita('a%kan -a($uran air! etanol (?B1)

#/

Dita('a%kan etil asetat (1B1) dilakukan re$likasi A kali Fase air<air!etanol Fraksi etil asetat Diua$kan dengan 'aterbath Fraksi etil asetat $adat

Gam(a% ). S"ema 1%oses e"s/%a"s +an !%a"s nas "elo1a" (,n-a %osella (Hibiscus sabdariffa L.)

*. Pem(,a/an s/o" DPPH :iga ko(a se('ilan $ulu% e($at (iligra( ser'uk DPPH diti('ang ke(udian dilarutkan dala( (etanol $.a sa($ai te$at 100 0 (L. .. Pem(,a/an +e%e/ "onsen/%as la%,/an ,2 Akan dilakukan orientasi $enentuan seri konsentrasi ekstrak etanol "raksi etil asetat dan vita(in , dengan ru(us B " P n!1S Dt 9eterangan B

Dr
" n Dt Dr P keli$atan seri konsentrasi P 'an)akn)a seri konsentrasi P konsentrasi tertinggi P konsentrasi terenda% (,,R, #010)

6. Penen/,an 1an2an- -elom(an- (;) ma"s m,m Penentuan T (aksi(al dilakukan dengan (engukur a'sor'ansi larutan DPPH $ada s$ektro"oto(eter dengan $anjang gelo('ang /00! /#/ n( untuk (enda$atkan a'sor'ansi U 0 # ! 0 @. Panjang gelo('ang )ang (eng%asilkan a'sor'ansi $aling 'esar (eru$akan $anjang gelo('ang (aksi(al.

#3

<. Penen/,an operating time Penentuan operating time dilakukan dengan -ara dia('il sala% satu konsentrasi untuk dilakukan operating time yaitu dengan 100 OL larutan uji
ditambah 1,0 mL DPPH

dan (etanol %ingga / 0 (L

selanjutn)a

di%o(ogenkan dengan vorte= sela(a 1 (enit dan diukur $ada (enit ke / 10 1/ #0 #/ A0 A/ 10 1/ /0 // dan 30 $ada T (aksi(al )ang suda% di$erole%. 6aktu $engukuran $ereda(an radikal DPPH )ang (eng%asilkan a'sor'ansi $aling renda% (eru$akan o$erating ti(e. =. U2 a"/ > /as an/ o"s +an Penentuan aktivitas antioksidan dilakukan dengan -ara 1 0 (L DPPH di(asukkan ke dala( ta'ung reaksi dan dita('a%kan 100 OL larutan uji dan dita('a% (etanol %ingga / 0 (L selanjutn)a

di%o(ogenkan dengan vorte= sela(a 1 (enit dan didia(kan sesuai o$erating ti(e setela% itu a'sor'ansi larutan di'a-a $ada $anjang gelo('ang (aksi(al. +e'agai 'langko digunakan larutan DPPH tan$a $ena('a%an larutan uji. +ke(a $enentuan aktivitas antioksidan ekstrak etanol dan "raksi etil asetat kelo$ak 'unga rosella da$at dili%at $ada ga('ar 1 'erikut ini B
Ekstrak etanol kelo$ak 'unga rosella "raksi etil asetat kelo$ak 'unga rosella vita(in , ( $e('anding)

uji kualitati" golongan sen)a*a akti" uji "lavonoid uji uji alkaloid

uji aktivitas antioksidan di'uat seri konsentrasi Di'uat seri konsentrasi

#4

sa$onin

Dita('a% 1 0 (L DPPH Divorte= ke(udian dia'sor'ansi

Gam(a% *. S"ema 1enen/,an a"/ > /as an/ o"s +an e"s/%a" e/anol +an !%a"s e/ l ase/a/ "elo1a" (,n-a %osella (Hibiscus sabdariffa L.)

?. U2 ",al /a/ ! -olon-an sen:a@a a"/ ! +alam "elo1a" (,n-a %osella (Hibiscus sabdariffa L.) a. Reaksi 9i(ia .denti"ikasi kandungan sen)a*a "lavonoid )aitu dengan (en-a($ur se'an)ak # (L larutan sa($el (ekstrak etanol dan "raksi etil asetat) (asing!(asing dita('a% dengan 0 / gra( ser'uk seng dan # (L asa( klorida #; didia(kan sela(a 1 (enit ke(udian dita('a%kan 10 tetes asa( klorida $ekat. Flavonoid ditunjukkan dengan terjadin)a *arna (era% intensi" dala( *aktu #!/ (enit. Eika larutan -u$likan dita('a% dengan 0 1 gra( ser'uk (agnesiu( dan 10 tetes asa( klorida $ekat terjadi *arna (era% jingga sa($ai (era% ungu (enunjukkan adan)a "lavonoid (De$kes 1??/). .denti"ikasi kandungan sen)a*a alkaloid da$at dilakukan dengan (ena('a%kan larutan sa($el dengan 1 (L asa( klorida # ; dan 3 (L air suling ke(udian $anaskan sela(a # (enit selanjutn)a dinginkan ke(udian disaring. Filtrat dita('a% $ereaksi Bou-%ardat 'ila terjadi enda$an 'er*arna -oklat sa($ai %ita( dan dengan $ereaksi Ma)er ter'entuk enda$an (aka

#@

(enggu($al 'er*arna $uti% atau kuning )ang larut dala( (etanol (aka (enunjukkan adan)a alkaloid (De$kes 1??/). .denti"ikasi kandungan sen)a*a sa$onin )aitu dengan (engen-erkan larutan sa($el ke dala( 10 (l air ke(udian ko-ok kuat!kuat sela(a 10 detik 'ila ter'entuk 'ui% )ang (anta$ setinggi 1!10 -( dan dengan $ena('a%an 1 tetes H,l #; 'ui% tidak %ilang (aka (enunjukkan adan)a sa$onin (De$kes 1??/). '. Uji 9ro(atogra"i La$is :i$is (9L:) Uji 9L: kandungan sen)a*a "lavonoid dilakukan dengan (enotolkan ekstrak etanol atau "raksi etil asetat kelo$ak 'unga rosella $ada le($eng sellulose ke(udian di(asukkan dala( 'ejana kro(atogra"i )ang tela% dijenu%i dengan "ase gerak etil asetat ! asa( "or(iat ! asa( asetat glasial ! air dengan $er'andingan 100B11B11B#4. Larutan dielusi ke(udian le($eng dia('il dikeringkan dia(ati $ada sinar U> #/1 n( dan A33 n(. +elanjutn)a dideteksi dengan $ena($ak 'er-ak alu(iniu( klorida. Pe('anding )ang digunakan adala% rutin. Uji 9L: kandungan sen)a*a alkaloid dilakukan dengan (enotolkan ekstrak etanol atau "raksi etil asetat kelo$ak 'unga rosella $ada le($eng sellulose ke(udian di(asukkan dala( 'ejana kro(atogra"i )ang tela% dijenu%i dengan "ase gerak toluena!etil asetat!dietil a(ina dengan $er'andingan 40B#0B10.

#?

Larutan dielusi ke(udian le($eng dia('il dikeringkan dia(ati $ada sinar U> #/1 n( dan A33 n(. +elanjutn)a dideteksi dengan $ena($ak 'er-ak Dragendor"" LP. Pe('anding )ang digunakan adala% kinin. Uji 9L: kandungan sen)a*a sa$onin dilakukan dengan (enotolkan ekstrak etanol atau "raksi etil asetat kelo$ak 'unga rosella $ada le($eng sellulose ke(udian di(asukkan dala( 'ejana kro(atogra"i )ang tela% dijenu%i dengan "ase gerak kloro"or(!(etanol!air dengan $er'andingan 31B/0B10. Larutan dielusi ke(udian le($eng dia('il dikeringkan dia(ati $ada sinar U> #/1 n( dan A33 n(. +elanjutn)a dideteksi dengan $ena($ak 'er-ak vanilin!asa( sul"at LP. Pe('anding )ang digunakan adala% stig(asterol. .denti"ikasi sen)a*a akti" dala( ekstrak etanol dan "raksi etil asetat da$at dili%at $ada ga('ar / 'erikut iniB
Persia$an identi"ikasi dengan (etode 9L: Ekstrak etanol<"raksi etil asetat kelo$ak 'unga rosella ditotolkan di atas le($eng 9L: Bejana kro(atogra"i dijenu%an dengan "ase gerak )ang sesuai Le($eng silika di(asukkan ke dala( 'ejana )ang tela% jenu% Dielusi Le($eng dikeringkan dengan dia(ati $ada sinar U> #/1 n( dan A33 n( Le($eng dideteksi dengan $ena($ak 'er-ak )ang sesuai

A0

Di%itung %arga R"

Gam(a% .. S"ema 1%oses +en/ ! "as -olon-an sen:a@a a"/ ! e"s/%a" e/anol +an !%a"s e/ l ase/a/ +en-an me/o+e "%oma/o-%a! la1 s / 1 s.

D. S"ema Jalann:a Penel / an +ke(a jalann)a $enelitian uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol dan "raksi etil asetat kelo$ak 'unga rosella (Hibiscus sabdarffa L.) da$at dili%at dala( ga('ar 3 'erikut ini B
9elo$ak 'unga rosella segar Dikeringkan dan diser'uk Di(aserasi dengan etanol Ekstrak kental kelo$ak 'unga rosella Di$artisi dengan etil asetat Di'uat seri konsentrasi Uji kualitati" golongan sen)a*a akti" Di'uat seri konsentrasi Fraksi etil asetat Uji kualitati" golongan sen)a*a akti"

>ita(in , Di'uat seri konsentrasi

Dita('a% 1 0 (L DPPH Divorte= Di'a-a a'sor'ansin)a

Gam(a% 6. S"ema 2alann:a 1enel / an ,2 a"/ > /as an/ o"s +an e"s/%a" e/anol +an !%a"s e/ l ase/a/ "elo1a" (,n-a %osella (Hibiscus sabdariffa L.)

E. Anal s s Has l

A1

Data )ang di$erole% 'eru$a nilai a'sor'ansi dari ekstrak etanol dan "raksi etil asetat serta 'aku $e('anding vita(in , ke(udian di%itung $ersentase aktivitas antioksidann)a dengan ru(usB A's kontrol D A's $erlakuan 2 aktivitas antioksidan P A's kontrol R 100 2

9eterangan B A's kontrol P a'sor'ansi DPPH

A's $erlakuan P a'sor'ansi ekstrak etanol dan "raksi etil asetat serta 'aku $e('anding vita(in , Data diola% (enggunakan analisa $ro'it antara log konsentrasi larutan uji (=) dengan $ersentase aktivitas antioksidan ()) se%ingga di$erole% .,/0. 8. 0ASILITAS YANG DIPERLUKAN Lokasi $enelitian adala% di La'oratoriu( :aksono(i :u('u%an Eurusan Biologi Fakultas M.PA Universitas ;egeri +e(arang dan La'oratoriu( 9i(ia Fakultas Far(asi Universitas 6a%id Has)i( +e(arang. 8I. JADAAL AAKTU PENELITIAN Penelitian ini akan dilaksanakan dengan jad*al *aktu se'agai 'erikut B :a%a$ Persia$an 6aktu Maret #010 ! Mei #010 9eterangan +tudi $ustaka $engajuan $ro$osal skri$si $engu($ulan 'a%an $ersia$an 'a%an

A#

ki(ia dan o$ti(asi alat Penelitian Pelaksanaan Euni #010 ! Euli #010 la'oratoriu( Pengu($ulan data Analis data Pen)elesaian Agustus #010 ! +e$te('er #010 $en)usunan la$oran $enelitian DA0TAR PUSTAKA

A-%(ad F. #00? Manfaat )osella (Hibiscus sabdariffa %tt$B<<(osle(sunna%.*ord$ress.-o(< diakses tanggal 1/ (aret #010.

*()"

Ala( +)a% A.;. #00/ Perpaduan sang Pena+lu+ Penya+it" ,!- dan Minya+ uah Merah -etakan . Agro(edia Pustaka Eakarta. ,,R, #010 +tandard 7$erating Pro-edure (+7P) in vitro ,an-er ,%e(o$revention Resear-% ,enter Fakultas Far(asi Universitas Kaja% Mada Iog)akarta.

Dar)anto dan Agrina #00@" )osela Merah er+hasiat" %tt$B<<***.agrina! online.-o(< diakses tanggal ? (aret #010. De$9es R. 1?4? .arma+ope /ndonesia Edisi ... De$arte(en 9ese%atan Re$u'lik .ndonesia Eakarta ? AA 44#!44A 4@#. De$9es R. 1?@/ !ara Pembuatan Simplisia De$arte(en 9ese%atan Re$u'lik .ndonesia Eakarta 10!11. De$9es R. 1?@3 Sediaan 0aleni+ De$arte(en 9ese%atan Re$u'lik .ndonesia Eakarta 10!11. De$9es R. 1??/ Materia Medi+a /ndonesia jilid >. De$arte(en 9ese%atan Re$u'lik .ndonesia Eakarta AAA!AA4 De$9es R. #000 Parameter Standar 1mum 2+stra+ Tumbuhan -bat" De$arte(en 9ese%atan Re$u'lik .ndonesia Eakarta. Kandjar dan Ro%(an #00@ 3imia .armasi Analisis Iog)akarta 13 A/A!A/1. Pustaka Pelajar

AA

Hanani E. MunVi( A. dan +ekarini R. #00/ /dentifi+asi Senya'a Antio+sidan dalam Spons !allyspongia sp dari 3epulauan Seribu Majala% .l(u 9e"ar(asian >ol .. ;o.A De$arte(en Far(asi FM.PA!U. 9a($us U. De$ok. Har'orne E. B. 1?@4 Metode .ito+imia (Penuntun !ara Modern Menganalisis Tumbuhan) diterje(a%kan ole% 9osasi% P. dan .*ang +. ,etakan ke!# .:B Bandung 41. Hernani dan Ra%arjo M. #003 Tanaman er+hasiat Antio+sidan -etakan ke!# Pene'ar +*ada)a Eakarta. 9u(alaningsi% +. #003 Antio+sidan Alami Penang+al )adi+al ebas" Sumber" Manfaat" !ara Penyediaan dan Pengolahan :ru'us Agrisarana +ura'a)a. Mardia% Hasi'uan +. Ra%a)u A. dan As%adi R. 6. #00? udidaya dan Pengolahan )osella" si Merah Segudang Manfaat -etakan 1 Agro(edia Pustaka Eakarta #A!#@. Mark%a( 9. R. 1?@@ !ara Mengidentifi+asi .lavonoid .:B Bandung 1!A 1/. Mlati .. 9us(ardi)ani +. dan ;a*a*i A. #004 /solasi .lavonoid dari .ra+si 2til Asetat 3ali+s )osel (Hibiscus sabdariffa *() skri$si +ekola% Far(asi .:B %tt$B<<'a%an!ala(."a.it'.a-.id diakses tanggal 11 Maret #010. Mol)neu= P., #001 The use of the stable free radical diphenylpicrylhydra&yl (DPPH) for estimating antioxidant activity" +ongklanakarin E. +-i. :e-%nol. #6 # #11!#1? Mu%tadi, %&&9, Kimia Organik Bahan Alam : Metode Isolasi dalam Workshop Isolasi Chemical Marker dari Bahan Alam , 'akultas 'armasi (ni)ersitas $uhammadiyah, *urakarta. Mursito B. #00# )amuan Tradisional 1ntu+ 3esehatan Ana+ +*ada)a Eakarta 4. Ro'inson :. 1??/ 3andungan -rgani+ Tumbuhan Tinggi Diterje(a%kan ole% Pad(a*inat 9. Bandung .:B 4@. Pene'ar Edisi .>

Ro%(an A. dan Ri)anto +. #00/ Da)a Antioksidan Ekstrak Etanol Daun 9e(uning (Murraya paniculata (L) Ea-k) +e-ara .n >itro Ma4alah .armasi /ndonesia 16 A 1A?. +astro%a(idjojo #00/ 3romatografi Edisi # Li'ert) Iog)akarta.

A1

+ta%l E. 1?@/ Analisis -bat Secara 3romatografi dan Mi+ros+opi .:B Bandung 3 13!14. :a$an E. #00/ 3an+er" Antio+sidan dan Terapi 3omplementer Ele= Media 9o($utindo Eakarta 10A!101 113!114. 6inarsi H. #004 Antio+sidan Alami dan )adi+al ebas" Potensi dan Apli+asinya dalam 3esehatan 9anisus Iog)akarta. Iuniastuti A. #00@ 0i&i dan +esehatan edisi $erta(a Kra%a .l(u Iog)akarta ?/!?3.