LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN I

PEMERIKSAAN ENZIM ASETIL CHOLIN ESTERASE

Metode DGKC-NEW

Disusun Ole !
N"#" ! M$Il"# A%&"'
NIM ! K(A))*)+,
Kelo#-o% ! B III
Asisten ! A'ies K'is&i."nto'o
DEPARTEMEN PENDIDIKAN NASIONAL
UNI/ERSITAS 0ENDERAL SOEDIRMAN
1AKULTAS ILMU-ILMU KESEHATAN
PROGRAM PENDIDIKAN DOKTER
2))3
Laporan Praktikum Biokimia Kedokteran Blok CHEM II
Oleh :
M.Ilham Akbar
K1A000!"
B III
#i$u$un untuk memenuhi per$%aratan men&ikuti
u'ian praktikum Biokimia Kedokteran Blok CHEM II
pada Pro&ram Pendidikan #okter
(ni)er$ita$ *enderal +oedirman
Pur,okerto
#iterima dan di$ahkan
Pur,okerto- *uni .00/
A$i$ten
Arie$ Kri$bi%antoro
K1A00001"
I$ 0UDUL PRAKTIKUM
Pemerik$aan En2im A$etil Cholin e$tera$e 3Metode #4KC56E78
II$ TANGGAL PRAKTIKUM
+enin- ." Mei .00/
III$ TU0UAN
1. Men&ukur Akti)ita$ en2im A$etil Cholin e$tera$e.
.. Men'ela$kan nilai normal A$etil en2im Cholin e$tera$e $erta nilai patolo&i$
dari ha$il praktikum.
!. Melakukan dia&no$a dini pen%akit apa $a'a %an& ditandai oleh ha$il akti)ita$
en2im A$etil Cholin e$tera$e abnormal 9 patolo&i$ melalui bantuan ha$il
praktikum %an& dilakukan.
I/$ DASAR TEORI
Bila ner)u$ )a&u$ diran&$an& maka di u'un& $ara: ter$ebut akan
dilepa$kkan $uatu 2at akti: %aitu asetil kolin 3A;h8. #alam u'un& $ara:
kolinerik-A;h di$impan dalam &elembun& $inap$ dan dilepa$kan oleh 6AP
36er)e A;tion Poten$ial8. A$etil ;holin $eba&ai tran$mitter haru$ diinakti:kan
dalam ,aktu %an& ;epat. Pada $ambun&an $ara: otot- A;h diru$ak $r;ara ;epat
dalam ,aktu kuran& dari 1 milidetik. Koline$tera$e %an& ter$ebat lua$ $i berba&ai
'arin&an dan ;airan tubuh- men&hidroli$i$ A;h men'adi kolin dan asam asetat.
Ada . ma;am koline$tera$e %aitu "setil%olineste'"se 3A;hE8 dan &uti'il
%olineste'"se 3Bu&hE8. A$etilkoline$tera$e terutama terdapat di tempat tran$mi$i
koliner&ik pada membrane pra maupun po$t $inap$ dan merupakan koline$tera$e
$e'ati %an& terutama meme;ah A;h. Bu;h E ber:un&$i meme;ah butiril kolin dan
ban%ak terdapat dalam pla$ma hati- di$ebut 'u&a Pseudo Kolineste'"se. Bu;hE
ber:un&$i dalam elimina$i $uk$iokolin $uatu obat relak$an otot ran&ka dan :un&$i
:i$iolo&i lainn%a belum diketahui. +edan&kan metakolin dihidroli$i$ oleh A;hE.
<ra$n$mi$i kolinerik prakti$ dihentikan oleh en4i# A5 E $ehin&&a
pen&hambatan terhadap en2im ini mi$aln%a oleh $en%a,a or&ano:o$:at 3$e'eni$
in$ekti$ida8 men%ebabkan akti)ita$ kolinerik %an& berlebinahn dan peran&$a$n&an
re$eptoe kolinerik $e;ara teru$ meneru$ %an& diakibatkan oleh penumpukan A;h
%an& tidak dihidroli$i$. Kelompok 2at %an& men&hambat A;hE dikenal $eba&ai
"nti%olineste'"se 3anti A;hE8. #alam urutan kekuatan %an& menin&kat dikenal
$en%a,a5$en%a,a anti A;hE $eba&ai berikut: :o$:o$ti&min- pro$ti&min-
dii$opropil:luoro:o$:at 3#P=P8 dan berba&ai $en%a,a in$ekti$ida or&ano:o$:at
$eperti malathion- parathion dll.
<ok$in butolinu$ maupun tetanu$ men&hambat pen&elepa$an A;hdi $emua
$ara: kolinerik $ehin&&a dapat men%ebabkan kematian akibat paral%$i$ perna:a$an
peri:er. <ok$in ter$ebut memblok $e;ara ire)er$ibel pen&lepa$an A;h di
&elembun& $ara: pada u'un& $ara: pada u'un& ak$on dan merupakan $alah $atu
tok$in palin& poten %an& dikenal oran&.
/$ ALAT DAN BAHAN
Al"t !
1. <abun& reak$i ukuran 1ml.
.. >ak tabun& reak$i
!. Mikropipet ukuran 105100 ?l
0. Mikropipet ukuran 10051000 ?l
1. <orni@uet
. +puit ! ;;
/. Ca,an Petri
". Eppendor:
A. +entri:u&e
10. Cu)et
11. +pektro:otometer
B""n !
1. +erum darah.
.. 1 ml>ea&en en2im ;holine$tera$e3>ea&en .8
!. 1 ml 3>ea&en .8
/I$ CARA KER0A
1. #arah probandu$ diambil $eban%ak ! ;; den&an men&&unakan $puit.
.. #arah dima$ukkan dalam eppendor: untuk $elan'utn%a di$entri:u&e $elama 105
11 menit. #iambil larutan $upernatan 3$erum8 $eban%ak 10 l.
!. Pembuatan larutan ker'a 3,orkin& rea&en8
0. #iambil larutan >ea&en 1 $eban%ak 1 ml kemudian di;ampurkan den&an
larutan $tandard CHE 3>ea&en .8 $eban%ak 1 ml.
1. 1 ml ,orkin& rea&en dima$ukkan ke dalam ku)et.
. #itambahkan 10 l $erum.
/. #ihitun& ab$orban$in%a pada $pektro:otometer den&an pan'an& &elomban&
001 nm den&an $uhu !/B C.
I6$ Nil"i No'#"l
6ilai normal akti)ita$ CHE ,anita C 0000 D 1.00 (9L.
6ilai normal akti)ita$ CHE pria C 1100 D 11/00 (9L.
BAB II
HASIL DAN PEMBAHASAN
A$ H"sil Pen7"#"t"n
Probandu$
6ama : 7ibi$ono 6u&raha
*eni$ kelamin : Laki5laki
($ia : 1A tahun
E
Lar $tandar CHE 1ml 1 ml >ea&en 1 7orkin& rea&en
E
+erum 10Fl 7orkin& rea&en 1 ml 3#iba;a pada $pektro:otometer8
#ilakukan pen&ukuran ab$orban$i den&an men&&unakan $pektro:otometer
pada pan'an& &elomban& 001 nm
B$ H"sil Pe'itun7"n
Pan'an& &elomban& 3G8 : 001 nm
<emperatur : !/H C
Kadar : 1A1/-. (9l
Keteran&an : 6ormal
C. Pe#&""s"n
A$etilkolin adalah tran$miter molekul ke;il %an& kha$. +ub$tan$i tran$miter
ini di$inte$i$ di u'un& pre$inaptik dari koen2im a$etil A dan kolin pada adan%a en2im
kolin asetiltransferase. Kemudian $ub$tan$i ini diba,a ke dalam &elembun&
$pe$i:ikn%a. Ketika kemudian &elembun& melepa$kan a$etil kolin kedalam ;elah
$inaptik- a$etilkolin den&an ;epat meme;ah kembali men'adi a$etat dan kolin den&an
bantuan en2im kolinesterase- %an& berikatan den&an retikulum proteo&likan dan
men&i$i ruan& ;elah $inaptik.
1
+truktur Koline$tera$e :
Celah $inaptik dii$i untuk dilinta$i menu'u kedalam re$eptor di dalam lipat
$ambun&an. *ika dua molekul a$etilkolin berikatan pada $ebuah re$eptor- re$eptor ini
akan men&alami perubahan bentuk den&an membuka $aluran di dalamn%a %an&
memun&kinkan :lek$u$ kation melinta$i membran. Kon$ekuen$in%a berupa ma$ukn%a
ion 6a
E
akan menimbulkan depolari$a$i membran otot $ehin&&a terbentuk poten$ial
endplate. Keadaan ini $elan'utn%a mendepolari$a$i membran otot di dekatn%a- dan
poten$ial ak$i terbentuk dan ditran$mi$ikan di $epan'an& $erabut $ara:- men&ha$ilkan
kontrak$i otot.
Koline$tera$e $pe$i:ikn%a en2im a$etilkoline$tera$e men&hidroli$i$ a$etilkolin
%an& telah terurai $etelah $aluran tertutup. En2im a$etilkoline$tera$e men&katali$i$
reak$i berikut:
Asetil%olin 8 H2O Aset"t 8 Kolin
En2im ini terdapat dalam 'umlah be$ar dalam lamina ba$ali$ ruan& $inap$. Kolin
didaur ulan& ke dalam terminal $ara: melalui $uatu mekani$me tran$por akti:- tempat
protein ter$ebut dapat kembali di&unakan untuk $inte$i$ a$etilkolin.
.
+inap$ merupakan tempat dimana a$etilkolin berada- tepatn%a pada membran
pre$inap$. +inap$ adalah tempat dimana neuron5neuron $alin& berkontak atau antara
neuron den&an $el e:ektor lainn%a 3Otot dan $el kelen'ar8. Hampir $emua $inap$
men&hantarkan impul$ le,at pelepa$an neu'ot'"ns#ite' pada terminal ak$onI mereka
adalah $ub$tan$i kimia,i %an& men&induk$i perpindahan impul$ $ara: ke neuron
lainn%a atau ke $ebuah $el e:ektor.
!
A$etilkolin di $ekre$i oleh neuron5neuron %an& terdapat di $eba&ian be$ar
daerah otak- namun khu$u$n%a- oleh beberapa neuron dalam &an&lia ba$ali$- oleh
neuron motorik %an& men&iner)a$i otot5otot ran&ka- oleh neuron pre&an&lion $i$tem
$ara: otonom- oleh beberapa neuron po$t&an&lion $i$tem $ara: $impatik. Pada $eba&ian
be$ar ;ontoh diata$- a$etil kolin mempun%ai e:ek ek$ita$iI namun- a$etilkolin ini telah
diketahui 'u&a mempun%ai e:ek inhibi$i pada beberapa u'un& $ara: para$impatik peri:er-
mi$aln%a inhibi$i 'antun& oleh ner)u$ )a&u$.
1
*ika kolin e$tera$e dihambat oleh inhibitor berupa $en%a,a5$en%a,a
or&ano:o$:at maka akan men&hidroli$i$ a$etil kolin %an& telah terurai $e;ara lambat dan
reak$i a$etilkolin ditambah air tidak dapat terpe;ah men'adi a$etat dan kolin. Kolin
e$tera$e $eba&ai en2im ber:un&$i $eba&ai katali$ator untuk memper;epat ter'adin%a
reak$i. *ika $ebalikn%a kolin e$tera$e diran&$an& maka dapat ber:un&$i $eba&ai
pen&obatan pen%akit mia$ternia &ra)i$ dimana akan menin&katkan kon$entra$i
neurotran$miter %an& $emula kuran& dan akan memper;epat pembentukan reak$i a$etat
dan kolin. Karena ran&$an&an pen&eluaran en2im kolin e$tera$e ini men%ebabkan teri$i
penuhn%a ruan& ;elah $inaptik.
1
+elain $en%a,a5$en%a,a anti A;h E $eperti :i$o$ti&min- pro$ti&min-
dii$opropil:luoro:o$:at 3#=P8 dan berba&ai $en%a,a in$ekti$ida or&ano:o$:at
3malathion- parathion-dll8 dikenal 'u&a $en%a,a5$en%a,a %an& dapat di'adikan anti A;h
E- antara lain: At'o-ine %an& ber:un&$i men&eblok akti)ita$ A;h han%a pada
mu$;arini; re$eptor$- Botulinus To9in %an& ber:un&$i men;e&ah pen&eluaran A;h- :-
Bun7"'oto9in %an& ber:un&$i men&halan&i pembukaan $aluran re$eptor A;h- dan %an&
terakhir adalah d-Tu&o5u'"'ine %an& ber:un&$i men&halan&i pembukaan $aluran
re$eptor A;h pada motor end5plate.

Pada praktikum darah diambil dari probandu$ $eban%aki ! ;; kemudian

dima$ukan kedalam ependor: dan diinkuba$i $elama 10 menit. +etelah itu darah
di$entri:u&e $elama 10 menit pada ke;epatan 0000 rpm. Kemudian den&an
men&&unakan pipet diambil $erum darah %an& telah di$entri:u&e $eban%ak 10 l den&an
men&&unakan mikro pipet 105100 l. $erum %an& diambil di;ampurkan den&an 6aCl
0-AJ den&an perbandin&an 1:1. di;ampurkann%a 6aCl 0-AJ ber:un&$i untuk
pen&en;eran $ehin&&a ab$orban$in%a akan lebih mudah diba;a pada alat
$pektro:otometer. Kemudian $erum den&an 6aCl di;ampurkan den&an bu::er dan
en2im $eban%ak !000 l kedalam ;u)et dan dibiarkan $elama 1 menit kemudian
dima$ukan kedalam $pektro:otometer dan di;atat ab$orban$i pertama dima$ukan 31
menit8. Berikutn%a $etelah . menit dan ! menit di;atat ab$orban$in%a. #idapat ha$il
0-0A! pada menit 1 dan menit .I 0-1A!I Menit !I 0-."A. Kemudian perhitun&an %an&
dilakukan men&&unakan rumu$ diata$ didapat ha$il nilai ab$orban$i probandu$ adalah
10"A- (9l. dari ha$il ter$ebut probandu$ di$impulkan abnormal dimana $eharun%a
nilain%a berki$ar diantara !100 D 1.000 (9l. hal ini dikarenakan keru$akan pada alat
$pektro:otometer dimana pen&ukuran ab$orban$in%a men&alami ketidak$tabilan.
<er'adin%a perbedaan antara nilai normal pada laki5laki dan perempuan
dikarenakan adan%a :aktor &eneti$- dan :i$iolo&i$. Pada laki5laki terdapat kadar %an&
lebih tin&&i dalam darah daripada pada perempuan $ehin&&a memiliki nilai normal %an&
lebih tin&&i %aitu antara !100 D 1.000 (9l $edan&kan pada Perempuan .100 D 11000
(9l. +e;ara :i$iolo&i$ terdapatn%a perbedaan 'umlah $el %an& men&ek$kre$i en2im kolin
e$tera$e pada tubuh laki5laki dan perempuan normal.
Kelainan5Kelainan akibat Choline$tera$e :
1. Mi"ste'ni" G'";is
Abnormalita$ dalam mia$ternia &ra)i$ ter'adi pada motor endplate dan
berkuran&n%a 'umlah re$eptor a$etilkolin di dalam otot dan ikut terlibatn%a
&an&&uan pada $i$tem imun dalam pato&ene$i$ mia$ternia &ra)i$. Obat %an&
men&hambat ker'a a$etilkoline$tera$e %an& merupakan en2im %an& terlibat pada
pen&uraian a$etilkolin- akan $e;ara e:ekti: menin&katkan kon$entra$i
neurotran$miter pada mia$ternia &ra)i$. A&en $ema;am ini merupakan inti dari
pen&obatan mia$ternia &ra)i$. Ada dua 'eni$ inhibitor koline$tera$e: inhibitor
re)er$ibel dan inhibitor ire)er$ibel. Inhibitor re)er$ibel %an& beker'a $e;ara $in&kat
3$hort5a;tin&8 dan %an& beker'a $e;ara relati: lama 3lon&5a;tin&8 $ama5$ama $an&at
berman:aat pada mia$ternia &ra)i$. *eni$ inhibitor %an& pertama lebih ban%ak
di&unakan dalam pene&akan dia&no$i$.
.
.. Al4ei#e'
Penderita men&alami kehilan&an ban%ak neuron5neuron hipokampu$ dan kortek$
tanpa di$ertai kehilan&an parenkim otak. #iteliti karena adan%a kaitan den&an
kelainan neurotran$miter dan en2im5en2im %an& berkaitan den&an metaboli$me
neurotran$miter ter$ebut. <ampakn%a adan%a penurunan dari kolin a$etiltran$:era$e
3en2im %an& men$inte$i$ a$etil kolin8.
0
!. Ku'"'e
+aat metaboli$me a$etilkolin berlan&$un& terdapat $ub$tan$i %an& men&hambat
re$idu $erin di dalam pu$at akti: a$etilkolinera$e %an& dapat memperpan'an& ker'a
a$etilkolin dan ber:un&$i $eba&ai ra;un $ara:. >a;un panah kurare $e;ara kompetiti:
menduduki tempat ikatan a$etilkolin pada re$eptor. *adi- dapat di$impulkan
pen%akit kurare ini di$ebabkan adan%a ra;un $ara: pada re$eptor a$etilkolin.
0. Ke'"5un"n o'7"no<os<"t
Kera;unan in$ekti$ida or&ano:o$:at atau karbamat men%ebabkan akti)ita$ en2im
koline$tera$e akan menurun. (ntuk dapat men&e)alua$i den&an baik- nilai da$ar
pa$ien $ebelum paparan $eharu$n%a telah diperik$a dahulu. Keadaan klini$ %an&
dapat men&indika$i pemerik$aan ini %aitu paparan pe$ti$ida den&an &e'ala terutama
mio$i$- pen&lihatan kabur- kelemahan otot- diare- mual- ban%ak men&eluarkan air
liur- berkerin&at- edem paru- dan ke'an&. Belum dapat dipa$tikan apakah nilai
normal men&indika$ikan kepa$tian tidak adan%a paparan in$ekti$ida or&ano:o$:at
dan ba&aimana pada )arian &enetik den&an atau tanpa paparan. Interpreta$i ma$ih
men'adi problem pada akti)ita$ en2im koline$tera$e rendah atau tin&&i.

BAB III
KESIMPULAN
1. Akti:ita$ en2im koline$tera$e pada praktikum adalah 1A1/-. (9l
.. 6ilai normal akti:ita$ en2im a$etilkoline$tera$e pada laki5laki ialah 1100511/00
(9l.
!. En2im ;holine$tera$e mempun%ai peranan %an& pentin& dalam pro$e$ neuro
mu$kuler den&an men&hidroli$i$ A$etilkolin 3A;h8 men'adi a$am a$etat dan kolin.
0. Akti)ita$ en2im ;holine$tera$e abnormal dapat men%ebabkan beberapa pen%akit
diantaran%a Mia$ternia &ra)i$- Al2heimer-Kurare- dan Kera;unan or&ano:o$:at.
DA1TAR PUSTAKA
1. Arthur C. 4u%ton dan *ohn E. Hall.- *antun&- +irkula$i +i$tem +ara:. #alam: Buku
Ajar Fisiologi Kedokteran. Edi$i A. *akarta: E4C- 1AA/: /1.51!.
.. >obert K. Murra%- #ar%l K. 4ranner- dkk. #a$ar Biokimia Beberapa 4an&&uan
6europ$ikiatri. #alam: Biokimia Harper. Edi$i .1. *akarta : E4C- .00! : A5A/.
!. L. Carlo$ *un@ueira- *o$e Carniero- >obert O. Kelle%. *arin&an +ara: dan +i$tem
+ara:. #alam: Histologi Dasar Edi$i ". *akarta: E4C- 1AA": 1!50.
0. +%l)ia A. Pri;e- Lorraine M. 7il$on. Pen%akit #e&enerati: dan 4an&&uan Lain Pada
+i$tem +ara:. #alam: Patofisiologi. Edi$i 0. *akarta: E4C. 1AA1: 100.50!.
1. Arthur C. 4u%ton. Or&ani$a$i +i$tem +ara:- =un&$i #a$ar +inap$ dan +irkuit 6euron.
#alam: Fisiologi Manusia dan Mekanisme Penyakit. Edi$i III. *akarta: E4C- 1AA1:
00/
. *oko +et%ono. A$etilkolin. #alam: Biokimia Neuron. Pur,okerto: (n$oed- .000:
1"5!0