Lap HB COgina
Lap HB COgina
Judul
Pemeriksaan Hemoglobin dengan Metode Hemoglobin Cyanida
(sianmethemoglobin).
II. Tanggal Praktikum
Senin, 8 Mei 2006
III. Tujuan
1. Mahasisa da!at meng"k"r kadar hemoglobin (Hb) dengan metode
hemoglobin #yanida (sianmethemoglobin)..
2. Mahasisa akan da!at mengetah"i nilai Hb sam!le dan !atologis dari hasil
!raktik"m.
$. %engan bant"an hasil !raktik"m yang dilak"kan, mahasisa akan da!at
melak"kan diagnosis dini !enyakit a!a sa&a yang m"ngkin m"n#"l akibat
kek"rangan Hb.
IV. Dasar Teori
Hemoglobin mer"!akan !rotein yang terda!at dalam sel darah merah
(S%M) dan ber'"ngsi antara lain "nt"k (
1. Mengikat dan membaa oksigen dari !ar")!ar" ke sel"r"h åan
t"b"h.
2. Mengikat dan membaa karbondioksida dari sel"r"h t"b"h ke !ar")
!ar".
$. Memberi arna merah darah.
*. Mem!ertahankan keseimbangan asam basa dari t"b"h.
Hemoglobin mer"!akan !rotein tetramer kom!ak yang setia!
monomernya terikat !ada ""s !rostetik hem dan kesel"r"hannya mem!"nyai
berat molek"l 6*.*+8.
$
%arah mengand"n ,,8)11,2 mMol hemoglobin
monomer-. (1,6)18,* gr-d.), tergant"ng !ada &enis kelamin dan "m"r indi/id".
Hemoglobin da!at mengikat * atom oksigen !er tetramer (sat" !ada setia!
s"b"nit hem), atom oksigen terikat !ada atom 0e
21
, yang terda!at !ada hem,
!ada ikatan koordinasi ke)+. Hemoglobin yang terikat !ada oksigen diseb"t
oksihemoglobin ata" hemoglobin teroksidasi (oksiHb) ata" (Hb22).
Hemoglobin yang s"dah mele!askan oksigen diseb"t deoksihemoglobin (Hb).
Hemoglobin da!at mengikat s"at" gas hasil !embakaran yang tidak sem!"rna
yait" karbonmonoksida (C2) dan diseb"t karbamonooksidahemoglobin
(HbC2).
3katan Hb dengan C2 ini 200 kali lebih k"at dari!ada ikatan Hb dengan
oksigen, dan akibatnya Hb tidak da!at lagi mengikat, membaa dan
mendistrib"sikan oksigen ke åan. %alam keadaan lain m"atan 0e yang
terda!at !ada !"sat hem da!at ber"bah men&adi 0e
$1
. Hal ini da!at ter&adi
karena oksidasi oleh senyaa)senyaa !engoksidasi. Hemoglbinnya diseb"t
hemoglobin teroksidasi ata" methemoglobin (MetHb) ata" Hb(0e
$1
). %alam
bent"k ini Hb tidak da!at mengikat oksigen ata" kehilangan '"ngsinya yan amat
!enting. 4ebera!a deri/at dari hemoglobin, misalnya oksiHb, Hb, dan HbC2
da!at dibedakan dengan melak"kan !engen#eran ini oksiHb terlihat berarna
merah kek"ning)k"ningan, Hb berarna merah ke#oklatan dan HbC2 berarna
terang (#arminetint). 5nt"k lebih &elasnya setia! deri/at Hb da!at !"la
dibedakan dengan mengg"nakan s!ektrosko!.
a. Alat dan Bahan
6. 6lat)6lat
1. 7ab"ng reaksi "k"ran + ml $ b"ah ,. Mikro!i!et 10)100 8.
2. 9ak tab"ng reaksi 8. s!ektro'otometer
$. Caan Petri :. ;"/et
*. 7orni<"et 10. Pi!et "k"r $ ## dan + ##
+. S!"it $ ## 11. 4l"eta!e
6. Sikat 12. =ellota!e
4. 4ahan
2. Sam!el darah /ena. +. Ser"m Patologis
$. 9eagen Hb #yanida. 6. ;a!as
*. 6lkohol ,0 >. ,. 7iss"e
+. .ar"tan ?%76 8. .abel
V. Cara Kerja
1. %arah diambil dari /ena mediana #"biti sebanyak 1 ##.
2. Mas"kkan darah dalam tab"ng yang telah diberi ?%76.
$. %iko#ok darah !erlahan.
*. %iink"basi selama $ menit.
+. 3si d"a tab"ng reaksi dengan 9eagen Hemoglobin Cyanida sebanyak + ##.
6. 3si tab"ng reaksi sat" dengan darah sebanyak 2 ## (sebagai sam!le), lal"
diink"basi selama $ menit.
,. 7ab"ng reaksi 2 diisi dengan darah !atologis lal" diink"basi selama $
menit.
8. %iba#a dengan s!ektro'otometri ( sam!le dan darah !atologis) dengan
absorbansi +*6 nm.
VI. Hasil dan Pembahasan
A. Hasil
3dentitas !roband"s dalam !emeriksaan kadar Hb darah dengan metode
hemoglobin #yanida ( Sianmethemoglobin ) adalah(
@ama !roband"s ( ="se! 6bd"l .atie'
5m"r ( 18 tah"n
Aenis kelamin ( Pria
%ata yang di!eroleh dari hasil !emeriksaan dengan mengg"nakan
s!ektro'otometer dengan !an&ang gelombang +*6 nm dengan 'aktor 8*0(
1. @ilai absorbansi blanko 0.00$
2. @ilai absorbansi standar 0.1$,
$. @ilai absorbansi !atologis 0.0:8
*. @ilai absorbansi sam!le 0.116
Sam!el Proband"s
3nk"basi $B
#am!"r hingga
homogen
+000 8l 20 8l
9eagen Cyanida Sam!el %arah
(k"ning) (merah !ekat)
Sam!el Patologis
3nk"basi $B
#am!"r hingga
homogen
+000 8l 20 8l
9eagen Cyanida Sam!el Patologis
(k"ning) (merah)
;adar Hb (gr-dl) C D 6. sam!le E 1* gr-dl
D 6. standar
D 6. sam!le C 6. sam!le F 6. blanko
C 0.116 F 0,00$
C 0,11$
D 6. standar C 6. standar F 6. blanko
C 0,1$, F 0,00$
C 0,1$*
;adar Hb sam!le (gr-dl) C 0,11$ E 1* gr-dl
0,1$*
C 11,8 gr-dl (abnormal)
;adar Hb !atologis(gr-dl) C D 6. !atologis E 1* gr-dl
D 6. standar
D 6. !atologis C 6. !atologis F 6. standar
C 0,0:8 F 0,00$
C 0,0:+
D 6. standar C 6. standar F 6. blanko
C 0,1$, F 0,00$
C 0,1$*
;adar Hb !atologis C 0.0:+ E 1* gr-dl
C 0,1$*
C :,:2 gr-dl
a. Pembahasan
Pada !raktik"m kali ini dilak"kan !emeriksaan hemoglobin. Hasil yang
di!eroleh men"r"t !emeriksaan yang telah dilak"kan adalah abnormal, karena
!roband"s yang bernama ="se! seorang !ria rema&a memiliki kadar hemoglobin
sam!le sebesar 11,8 gr-dl, sedangkan normalnya adalah 1*)18 gr-dl, serta kadar
hemoglobin !atologisnya sebesar :,:2. Hal ini ter&adi akibat !engar"h bebera!a
'aktor diantaranya yait" (
1. ;"rangnya ketelitian !ada saat mengambil sam!le darah.
2. Masa ink"basi yang terlal" lama.
$. ;etidakak"ratan !ada saat dilak"kan !eng"k"ran nilai absorbansi.
7erda!at bebera!a #ara "nt"k meng"k"r kand"ngan hemoglobin dalam
darah, !emeriksaan dilak"kan dengan metode Hemlobin #yanida
(Sianmethemoglobin). Sel darah merah dien#erkan "nt"k menghasilkan
hemoglobin dalam bent"k lar"tan. Hemoglobin yang terbebas ini di#am!"r
dengan bahan kimia yang mengand"ngi #yanida yang mengikat k"at dengan
molek"l hemoglobin "nt"k membent"k #yanmethemoglobin. %engan menyinari
lar"tan #yanmethemoglobin dan meng"k"r &"mlah #ahaya yang disera!
(kh"s"snya bagi gelombang antara +*0 nanometer), &"mlah hemoglobin da!at
ditent"kan.
+
A"mlah hemoglobin normal adalah (
1. Ganita ( 12)16 gr-dl
2. Pria ( 1*)18 gr-dl
$. 4ayi bar" lahir ( 16)2+ gr-dl
*. 4ayi ( 10)1+ gr-dl
+. 4alita ( 11)1* gr-dl
6. 6nak)anak ( 12)16 gr-dl
Hemoglobin adalah !rotein yang ber'"ngsi "nt"k mengikat oksigen,
!engangk"tan oksigen dan 'otosintesis. H"g"s hemoglobin adalah senyaa
tetra!irol siklik. Senyaa tetra!irol terdiri atas em!at b"ah molek"l !irol yang
dih"b"ngkan dalam seb"ah #in#in !lanar oleh em!at &embatan metilen)
.
S"bstansi