1

IDENTIFIKASI BAKTERI GRAM POSITIF

I. HARI / TANGGAL : Selasa, 4 Maret 2014
II. LOKASI PRAKTIKUM : Laboratorium Bakteriologi
III. INSTRUKTUR : Salma P. Yunus, SKM
IV. KELOMPOK : Kelompok III Tingkat I B

V. TUJUAN PERCOBAAN
Mahasiswa mampu mengidentifikasi Bakteri Gram Positif pada
pemeriksaan di bawah mikroskop.

VI. PRINSIP PERCOBAAN :
Pewarnaan Gram membedakan Bakteri Gram Positif dan Bakteri
Gram Negatif berdasarkan kemampuan bakteri mempertahankan
warna kristalin violet, kemudian diperiksa di bawah mikroskop.

VII. DASAR TEORI
Bakteri Gram Positif adalah bakteri yang mempertahankan zat warna
Kristal violet suatu proses Pewarnaan Gram sehingga akan berwarna biru / ungu
jika diamati dibawah mikroskop. Bakteri Gram Positif hanya mempunyai membran
plasma tunggal yang dikelilingi dinding sel tunggal berupa pepdoglikan sekitar
90% dari dinding sel tersebut, dan sinarnya berupa molekul lain yang berwarna
asam teikhoat.
Karaktersistik Bakteri Gram Positif yaitu sebagai berikut.
1. Memiliki lapisan peptidoglikan yang tebal
2. Memilki Sitoplasma membrane lipid
3. Beberapa Spesies memiliki kapsul polisakarida
4. Beberapa Spesies memiliki flagellum

2

Bakteri Gram Positif juga merupakan klasifikasi dari bakteri yang
dibedahkan oleh ciri ciri fisik sebagai berikut :
1. Struktur dinding sel sekitar 15 80 mm berlapis tunggal / monolayer.
2. Dinding selnya mengandung lipid yang lebih normal ( 1 4 %)
peptidoglikan yang ada sebagai asam tekoat.
3. Mengandung asam tekoat
4. Bersifat lebih renta n terhadap pertumbuhan, dihambat secara nyata oleh
zat-zat warna seperti ungu Kristal.
Contoh bakteri gram positif antara lain :
1. Staphylococcus
2. Stretococcuc
3. Enterococcus
4. Bacillus
5. Corynebacterium
6. Nocardia
7. Clostridium
8. Antinobacteria
9. Listeria.

VIII. ALAT DAN BAHAN
1. Alat
- Mikroskop Binokuler
- Object glass
- Lap pembersih lensa objektif
2. Bahan
- Minyak imersi
- Tissue
- Preparat Bakteri Gram Positif

3

IX. PROSEDUR KERJA
1. Siapkan alat dan bahan
2. Hubungkan mikroskop dengan sumber arus listrik
3. Nyalakan mikroskop dengan menekan tombol ON
4. Atur Diafragma, kondensor dan refolvel
5. lalu letakan preparat pada meja mikroskop, jangan sampai terbalik
6. Carilah lapang pandang dengan perbesaran lensa objektif 10x atur fokus
dengan menggunakan makrometer.
7. Teteskan minyak Imersi pada preparat dan putar lensa objektif pada
perbesaran 100x.
8. Naikkan Kondensor, gunakan micrometer untuk memerjelas
pengamatan objek.
9. Identifikasi bakteri yang terlihat pada lapang pandang
10. Setelah selesai mengamati, keluarkan preparat dari meja mikroskop
kemudian kembalikan mikroskop pada posisi awal, cabut steker
mikroskop dari hubungan arus listrik.
11. Setelah selesai lakukan pemeliharaan mikroskop.

X. HASIL PENGAMATAN





Pada lapang pandang mikroskop terlihat bakteri berwarna ungu dan
berbentuk bulat. Jadi preparat ini adalah Bakteri Gram Positif bentuk Kokus.

4

XI. PEMBAHASAN
Pada dasarnya bakteri dapat dibedakan melaui teknik pewarnaan Gram.
Teknik pewarnaan Gram tersebut dapat menghasilkan warna merah dan ungu.
Bakteri gram negative ditandai dengan pewarnaan merah, sedangkan bakteri gram
positif berwarna ungu. Hal ini bertujuan untuk memberikan warna pada bakteri dan
pada akhirnya dapat diidentifikasi dengan mudah.
Pemberian Kristal violet pada bakteri gram positif akan meninggalkan
warna ungu muda. Perbedaan respon terhadap mekanisme pewarnaan gram pada
bakteri adalah didasarkan pada struktur dan komposisi dinding sel bakteri, bakteri
gram positif dinding selnya mengandung protein. Pada bakteri gram positif,
dinding selnya terhidrasi dengan perlakuan alcohol. Pori-pori mengkerut, daya
rembes dinding sel dan membrane menurun sehingga pewarnaan safranin tidak
dapat masuk. Sehingga sel bakteri ggram positif tetap berwarna ungu.

XII. KESIMPULAN
Bakteri Gram Positif berwarna violet (ungu) dengan bentuk bulat atau
kokus membentuk seperti buah anggu dan berwarana ungu yang disebabkan oleh
larutan ungu Kristal violet, saat penambahan iodium kompleks kristal iodium
terbentuk didalam dinding sel, dinding sel mengalami dehidrasi, pori pori
mengecil dan membrane menurun akibat penetesan alcohol. Bakteri Gram positif
berbentuk kokus dengan diameter koloni 0,5 1,5 struktur dinding sel tebal, factor
factor yang mempengaruhi adalah fruksasi, pelunturan, identitas warna, dan
subsrat.
Contoh bakteri gram positif antara lain : Staphylococcus, Stretococcuc,
Enterococcus, Bacillus, Corynebacterium, Nocardia, Clostridium, Antinobacteria
dan Listeria.

5

XIII. DAFTAR PUSTAKA

- Staf pengajar bagian mikrobiologi fakultas kedokteran universitas kedokteran
Indonesia, buku ajar mikrobiologi kedokteran, Binarupa aksara publisher,
Ciputat Tangerang.
- Id.wikipedia.org/wiki/gram-negatif
- Irianto, Koes. 2006. Mikrobiologi. Yrama Widia. Bandung
- H, R. Hasdianah. 2012. Mikrobiologi. Nuha Medika. Yogyakarta









PARAF INSTRUKTUR

Salma P. Yunus,SKM