SPEKTROFOTOMETER

Kata ini berasal dari kata Latin

spektrum, yang berarti gambar, dan
foto-foto kata Yunani phosor, yang
berarti cahaya. Spectrophotometeris
salah satu instrumen diagnostik dan
penelitian utama yang
dikembangkan. Menggunakan sifat-
sifat cahaya dan interaksinya
dengan zat lainnya. Umumnya,
cahaya dari lampu dengan
karakteristik khusus dipandu melalui
perangkat, yang memilih dan
memisahkan panang gelombang
ditentukan dan membuatnya
mele!ati sampel. "ntensitas cahaya
meninggalkan sampel diambil dan
dibandingkan dengan apa yang
berlalu melalui sampel. #ransmitansi,
yang tergantung pada faktor-faktor seperti konsentrasi zat dihitung dari rasio
intensitas ini.
$. #U%U$& '()$L$#$&
Spektrofotometer ini digunakan di laboratorium untuk Menentukan
kehadiran atau konsentrasi suatu zat dalam larutan, sehingga memungkinkan
analisis kualitatif atau kuantitatif sampel.
*. ')"&S"' K()%$
Sebagai prinsip dasar, cahaya dianggap sebagai bentuk energi
elektromagnetik. +alam ruang, ia memiliki kecepatan konstan dan uni,ersal
-./ sekitar 0 1 23 m 4 s. +alam media lainnya 5transparan6 melalui mana
cahaya mele!ati, kecepatannya akan sedikit lebih rendah dan dapat dihitung
dengan persamaan berikut7

dimana7
8o 9 8elocity di mana cahaya mele!ati media
n 9 indeks bias Medium 7 yang nilainya berosilasi, secara umum, antara 2,3
dan :,;.
(nergi elektromagnetik memiliki rentang yang sangat luas panang
gelombang. *eberapa contoh dapat dilihat pada tabel berikut7
#ype electromagnetic
(nergy
)ange of !a,elength
)adio !a,es <rom a fe! meters to a fe! kilometres
)adar !a,es <rom 2 to 23 cm
"nfrared !a,es <rom 2 to micron 523
=
6
8isible light <rom 033 to >33nm 5nanometer6
1- ray <rom 3.2 to 3.; $ 5$ngsrtom6
?amma rays $ppro1imately 3.332: $ 5$ngstrom6
Setelah lulus atau berinteraksi dengan media yang beragam, cahaya
mengalami serangkaian fenomena. +i antaranya ditampilkan re@eksi, refraksi,
difraksi, penyerapan, difusi, polarisasi dan fenomena lain yang diukur dengan
berbagai instrumen dan perangkat. #abel di ba!ah ini menunukkan rentang
panang gelombang yang digunakan untuk melaksanakan tes spektrofotometri.
Section of the lighting
Spectrum
)ange of !a,elength
Ultra,iolet 23-:33 nm 5nanometer6
&ear ultra,iolet :33-:A3 nm
8isible light 0A3->A3 nm
&ear infrared >A3-0333 nm
Mid infrared 0333-:3333 nm
<ar infrared 03333-033333 nm
Figure 27. Interaction of light with matter
*erkenaan dengan interaksi cahaya dengan materi, ?ambar :>
membantu dalam menelaskan kompleksitas fenomena yang teradi. +iagram
pada ?ambar :> menunukkan bah!a radiasi insidental -"o/ dapat menalani
serangkaian transformasi. Bal ini dapat tercermin -"r/, ditransmisikan -"ni/, diC
digunakan -"d/, diserap dan langsung dipancarkan sebagai @uoresensi -%ika/.
<enomena yang spektrofotometri didasarkan terutama penyerapan dan
transmisi. +alam rangka untuk memahami bagaimana, maka perlu untuk
mengambil hukum *eer Lambert ke dalam rekening. *eer Lambert La!. %uga
dikenal sebagai hukum *eer atau hukum *eer Lambert *ouguer, itu
mengidentiDkasi hubungan antara konsentrasi sampel dan intensitas cahaya
yang ditransmisikan melalui itu. *erkenaan dengan hukum yang disebutkan,
ada dua konsep implisit7 transmitansi -#/ dan absorbansi -$/. #ransmitansi -#/
adalah sebagian kecil dari cahaya insidental dari panang gelombang yang
ditentukan mele!ati sampel.
dimana:
Ini = intensitas radiasi yang ditransmisikan
I0 = intensitas radiasi insidental
Persentase transmitansi [T%] dapat dinyatakan dengan persamaan berikut:
Konsentrasi molekul menyerap cahaya dalam sampel sebanding dengan absorbansi [A]
dari sampel itu !al ini dinyatakan secara matematis sebagai:
A = x l x c
dimana7
$9$bsorbansidiukur
e 9 Molekul koeDsien absorbansi -liter 4 mol 4 cm/
l 9 %arak dari lintasan yang dilalui 5panang alan6 oleh cahaya dalam sampel
c 9 konsentrasi .ontoh -mol 4 liter/
$bsorbansi -$/ terkait dengan transmitansi -#/ melalui persamaan berikut7
+iagram berikut menelaskan fenomena absorbansi7
Figure 28. absorbansi fenomena
?raDk yang disaikan selanutnya menunukkan bagaimana absorbansi -$/ dan
transmitansi -#/ ber,ariasi sebagai fungsi dari konsentrasi -./ menurut hukum
*eer Lambert.
Transmittance grah
!"sor"ansi gra#$
+alam kesimpulan itu dapat disimpulkan bah!a dengan meningkatkan
konsentrasi zat, transmitansi menurun dan, setelah meningkatkan konsentrasi
zat, absorbansi meningkat.
Linieritas hukum *eer Lambert dipengaruhi ika kondisi berikut ini teradi.
2. 'emindahan dari keseimbangan kimia sampel sebagai fungsi dari
konsentrasi.
:. 'enyimpangan dalam koeDsien absorbansi, konsentrasi yang lebih besar
dari 3,32 M karena interaksi elektrostatik antara molekul di dekatnya.
0. 'erubahan indeks refraksi pada konsentrasi tinggi analit.
E. +ifusi cahaya karena partikel dalam sampel.
;. <luoresensi atau fosfor sampel.
=. &on-monokromatik radiasi.
.. KFM'F&(& S'(.#)F'BF#FM(#()
"iagram yang ditun#ukkan pada $ambar %& menggambarkan hubungan antara berbagai
komponen spektro'otometer
(ang paling penting adalah sebagai berikut
) *umber cahaya
% monokromator
+ Pemba,a sampel
- *istem detektor
. *istem pembacaan
Sumber .ahaya
Tergantung pada #enis spektro'otometer/ sumber cahaya dapat men#adi lampu
tungsten untuk cahaya tampak atau busur lampu deuterium untuk sinar ultra0iolet
1eberapa produsen telah merancang spektro'otometer dengan cahaya tahan lama berselang
2enon lampu memancarkan dalam rentang terlihat dan ultra0iolet 3ampu 4s5 datang
pabrik6berkumpul di atas dasar yang men#amin posisi tetap/ untuk men#aga penyesuaian
optik dan 'okus ketika beroperasi atau ketika mengganti bohlam 7nergi yang memancar
khas yang dipancarkan dari lampu tungsten adalah antara %800 dan +000 9 K 4Kel0in
dera#at5
Monokromator
:onochomator adalah seperangkat elemen yang digunakan untuk membubarkan
cahaya putih men#adi gelombang pan#ang gelombang yang berbeda/ salah satunya
digunakan dalam pembacaan sampel *ecara umum/ ia memiliki celah masuk atau alur
yang membatasi radiasi cahaya yang dihasilkan oleh sumber dan batas6batas ke ,ilayah
yang ditentukan/ satu set cermin untuk transmisi cahaya melalui sistem optik/ elemen
untuk memisahkan pan#ang gelombang radiasi cahaya 4yang mungkin men#adi prisma atau
di'raksi 4atau transmisi5 kisi5/ dan pembukaan keluar untuk memilih pan#ang gelombang
yang diperlukan untuk menerangi sampel Kisi6kisi di'raksi memiliki keuntungan dari
menghilangkan dispersi non6linear dan men#adi sensiti' terhadap perubahan suhu
Bolding Sample
Perangkat ini memegang sampel 4s5 untuk dianalisis Ada #enis pemegang berbagai
sampel untuk mengakomodasi model spektro'otometer yang berbeda dan 0olume sampel:
ini datang sebagai cu0ettes/ microcell/ microplates/ tabung reaksi dan sel aliran kontinu/ dll
spektro'otometer kon0ensional/ pemegang adalah sel atau cu0ette bentuk persegi pan#ang
;u0ettes terbuat dari kaca untuk membaca dalam kisaran dari +-0 sampai )000 nm dan
lain6lain dari silika untuk membaca di kisaran terlihat dari %%0 sampai +-0 nm Ada #uga
cu0ettes dan #enis pemegang sampel lainnya 4misalnya microplates5 dalam plastik seperti
stirena atau polystyrene yang sekali pakai
Sistem +etektor
*istem deteksi dapat dirancang dengan photocells/ phototubes/ dioda atau
photomultipliers !al ini tergantung pada kisaran pan#ang gelombang/ sensiti0itas dan
kecepatan yang dibutuhkan respon *istem deteksi menerima cahaya dari sampel dan
mengubahnya men#adi sinyal listrik sebanding dengan energi yang diterima *inyal listrik
dapat diproses dan diperkuat untuk dita'sirkan oleh sistem membaca <ingkasan kelebihan
dan kekurangan perangkat biasanya digunakan dalam sistem deteksi termasuk dalam tabel
berikut 4lihat sebaliknya5
Membaca Sistem
*inyal yang meninggalkan detektor ber#alan melalui berbagai trans'ormasi Ini
adalah ampli'i ed dan berubah sampai intensitas men#adi persentase transmitansi =
absorbansi proporsional Ada sistem pembacaan analog 4menampilkan hasil pada skala
membaca5 atau yang digital 4menampilkan hasil pada layar5
Figure 2%. Sectrohotometer comonents
!&!T KE'(T'()!( KEK'R!()!(
photocells
(konomi. #erbatas gelombang panang
antara E33 dan >;3 nm.
Kecil.
Kuat.
#idak perlu sumber energi atau
penguat sinyal.
rendah sensiti,itas.
Kecil.
Kuat.
#idak perlu sumber energi atau
penguat sinyal.
Menanggapi perlahan berubah
dalam intensitas cahaya.
#idak perlu sumber energi atau
penguat sinyal.
$us.
Sinyal tergantung pada suhu.
phototubes <ungsi antara 2G3 dan =;3 nm. uga
antara
=33 dan 2333 nm.
'erlu kalibrasi tergantung pada
suhu
dari lingkungan di mana peralatan
tersebut
diinstal.
$us dengan tingkat pencahayaan
yang tinggi.
photodioda #idak ada bagian mekanis bergerak.
Memperoleh data spektral secara
bersamaan.
Lebar rentang dinamis.
*aik reproduktiDtas panang
gelombang.
'hoto
multipliers
Lebih sensitif dibandingkan
phototubes dan photocells.
+apat terbakar ika hari cahaya
menembus mereka sementara di
operasi.
*ekera pada rentang yang lebih luas
dari panang gelombang.
sangat mahal.
.epat respon terhadap perubahan Membutuhkan sumber tegangan
intensitas cahaya. tinggi.
tidak menadi usang seperti
photocells.
+igunakan hanya dalam
spektrofotometer khusus.
*isa dibuat dengan sensiti,itas di
seluruh aaran
ultra,iolet dan cahaya tampak. 5+ari
2G3 sampai G33 nm6.
"ndikator analog tradisional menanggung meter nama. Ketepatan mereka
tergantung antara faktor-faktor lainnya, pada panang dan umlah pembagian
skala 5di,isi lebih, lebih tepat itu6. Kelemahan utama mereka adalah bah!a
mereka bisa salah membaca, karena kelelahan operator Hatau kesalahan
identiDkasi skala ketika ada beberapa.
"ndikator digital biasanya menunukkan hasil pada layar sebagai angka alpha
diterangi. Bal ini membuat membaca kesalahan kecil kemungkinannya.
+. "&S#$L$S" '()SY$)$#$&
Untuk berfungsi dengan benar spektrofotometer, berikut ini diperlukan7
2. Sebuah sumber listrik pasokan yang sesuai dengan norma-norma dan
standar yang digunakan di negara tersebut. +i negara-negara $merika,
tegangan 223 8 dan frekuensi =3 Bz umumnya digunakan. *agian lain dari
+unia membutuhkan ::3-:0384;3-=3 Bz.
:. $, debu bersih bebas, lingkungan.
0. Sebuah mea kera yang stabil dari peralatan yang menghasilkan getaran
5sentrifus, agitator6.
(. '()$I$#$& S'(.#)F'BF#FM(#()
Spektrofotometer sangat khusus dan peralatan yang mahal. "ntegritas
mereka tergantung sebagian besar pada cara mereka dipasang dan
digunakan. Lingkungan langsung mereka dan kualitas layanan listrik
merupakan faktor yang terpenting untuk peralatan berfungsi sesuai dengan
spesiDkasi. 'emeliharaan rutin diperlukan ber,ariasi dalam kompleksitas, mulai
dari membersihkan hati-hati komponen untuk prosedur khusus yang dilakukan
oleh teknisi khusus yang terlatih atau insinyur dengan informasi teknis untuk
model produsen yang berbeda dan desain.
'etunuk produsen berikut dan hati-hati menggunakan akan menamin
hidup operasional berkepanangan. +alam model terbaru, produsen telah
memasukkan rutinitas otomatis kalibrasi dan ,eriDkasi.+alam dokumen ini
rekomendasi pera!atan umum yang berlaku untuk berbagai spektrofotometer
disaikan. Bal ini menekankan bah!a rutinitas khusus hanya dapat dilakukan
sesuai dengan rekomendasi produsen tertentu untuk masing-masing model
tertentu. 'emeliharaan rutin umum untuk spektrofotometer dalam kondisi baik
dan frekuensi pemeriksaan diperkirakan adalah sebagai berikut7
'emeriksaan Lingkungan "nstrumen
<rekuensi 7 Setiap tahun
+aerah di mana spektrofotometer dipasang harus diperiksa secara ,isual
dan diui elektrik untuk menamin keselamatan operator. 'emeriksaan meliputi
instalasi listrik dan instalasi !ilayah 5infrastruktur Dsik yang berkaitan dengan
spektrofotometer6.
"nstalasi Listrik
"ni harus di,eriDkasi dan diui untuk memastikan hal-hal berikut7
2. $da outlet listrik atau !adah dengan tiang tanah.
:. Stopkontak dalam kondisi baik dan tidak lebih dari 2,; m dari
spektrofotometer.
0. #egangan dari tingkat yang sesuai dan tidak boleh ber,ariasi lebih dari ;J
dari tegangan yang ditentukan di piring peralatan itu.
E. 'olaritas !adah adalah benar.
#es ini harus dilakukan oleh seorang teknisi listrik atau insinyur dan hasil harus
dicatat untuk memungkinkan tindak lanut dari !aktu ke !aktu.
"nstalasi +aerah
2. 'eriksa apakah ada ruang bebas sekitar spektrofotometer untuk dua tuuan.
'ertama, untuk menghubungkan kabel untuk lulus tanpa hambatan dan untuk
komponen lain atau peralatan pendukung 5misalnya penstabil tegangan6.
Kedua, untuk memungkinkan ,entilasi yang memadai dari peralatan ketika
beroperasi.
:. Mengui integritas mea, negara dan kebersihan.
0. 'astikan tidak ada peralatan yang terpasang yang dapat mengirimkan
getaran dalam arak. 5Mis sentrifugal6.
E. 'astikan bah!a itu tidak terpengaruh oleh kondisi yang terlalu lembab, debu
atau suhu tinggi. Suhu kamar yang sesuai untuk pengoperasian
spektrofotometer umumnya berkisar antara 23 dan E3 K ..
;. Bindari memasang peralatan di mana ia menerima radiasi matahari
langsung.
=. %angan memasang peralatan di mana terdapat medan magnet atau radiasi
elektromagnetik intens.
>. 'astikan daerah instalasi bebas dari pengaruh gas dan zat korosif.
<. 8isual pemeriksaan peralatan
Fre$uensi* Setia enam "ulan
Spektrofotometer harus diperiksa secara ,isual untuk mem,eriDkasi bah!a
negara dan integritas komponen perusahaan diselenggarakan sesuai dengan
spesiDkasi pabrik. $spek yang paling penting yang dikutip berikutnya7
2. 'eriksa bah!a struktur mea kera pendukung spektrofotometer berada
dalam kondisi baik.
:. Ui struktur umum spektrofotometer. 'astikan tombol atau s!itch kontrol
dan penutupan mekanik dipasang tegas dan bah!a label identiDkasi mereka
elas.
0. 'astikan bah!a aksesoris adalah bersih, tidak menunukkan retak dan
bah!a negara fungsionalnya adalah optimal.
E. KonDrmasikan bah!a bagian penyesuaian mekanik 5mur, sekrup, baut, dll6
disesuaikan dan berada dalam kondisi baik.
;. 'eriksa apakah konektor listrik tidak memiliki retak atau pecah, bah!a
mereka bergabung dengan benar ke baris.
=. 'astikan kabel tidak menunukkan tanda-tanda splicing, bah!a mereka tidak
usang dan bah!a mereka tidak memiliki usang isolasi.
>. 'eriksa kabel mengamankan perangkat dan terminal bebas dari debu,
kotoran atau korosi. Kabel ini sama tidak harus dikenakan keluar atau
menunukkan tanda-tanda kerusakan.
A. 'eriksa bah!a sistem grounding 5internal dan eksternal6 adalah standar,
dari enis yang disetuui, fungsional dan benar diinstal.
G. 'astikan bah!a sirkuit s!itch atau interrupters, kotak sekering dan indikator
bebas dari debu, kotoran dan korosi.
23. 'eriksa komponen listrik eksternal untuk tanda-tanda o,erheating.
$ Umum 'emeliharaan
2. Pem"ersihan tumahan
+alam kasus kebocoran di pemegang sampel atau carrier, tumpahan harus
dibersihkan sesuai dengan prosedur berikut7
2. Matikan spektrofotometer dan lepaskan kabel dari umpan listrik.
:. ?unakan alat suntik untuk membersihkan pemegang sampel. Menyerap
cairan sebanyak yang mungkin dapat diekstraksi.
0. Keringkan pemegang sampel dengan cotton bud obat.
E. ?unakan kertas lensa atau sepotong kain bersih bertekstur lembut untuk
membersihkan endela fotosel.
;. *ersihkan bagian luar dari instrumen dengan sepotong kain dibasahi dengan
air suling. #ermasuk layar, kontrol dan keyboard dalam pembersihan.
Membersihkan cu,ettes kuarsa
+ianurkan untuk melaksanakan prosedur berikut untuk menaga cu,ettes
kuarsa dalam kondisi baik7
2. .uci cu,ettes menggunakan larutan alkali encer seperti &aFB 3,2 M dan
asam encer seperti B.l, 3,2 M.
:. *ilas cu,ettes beberapa kali dengan air suling. Selalu gunakan cu,ettes
bersih untuk melakukan pengukuran absorbansi.
0. Melakukan prosedur pembersihan ketat dan hati-hati pada cu,ettes ika
sampel yang digunakan dapat menyimpan Dlm. *eberapa produsen
merekomendasikan menggunakan deteren khusus untuk membersihkan
cu,ettes.
:. "aterai eru"ahan
1erbagai model spektro'otometer menggunakan baterai untuk mengha'al data yang
berhubungan dengan analisis/ seperti tanggal dan ,aktu Prosedur untuk mengubah baterai
serupa dalam berbagai peralatan :engikuti prosedur ini dian#urkan:
) Pastikan bah,a indikasi baterai rendah muncul di layar instrumen
% :atikan spektro'otometer
+ 3epaskan kabel listrik pakan
- :embuka kompartemen baterai dan keluarkan baterai usang
. 1ersihkan titik kontak listrik
8 Pasang baterai baru dengan spesi'ikasi yang sama seperti aslinya
> Tutup kompartemen
? !ubungkan kembali peralatan
& *esuaikan in'ormasi tanggal dan ,aktu
0. Peru"ahan "ohlam + lamu
*ola lampu adalah konsumsi dengan umur produktif yang terbatas. "ni harus
meramalkan bah!a pada suatu titik !aktu, maka akan diperlukan untuk
menggantinya. Kemungkinan besar akan terbakar, atau menderita
metallization internal dan penguapan dan cahaya yang dipancarkan tidak akan
lagi memenuhi spesiDkasi proses spektrofotometri. Lampu langkah perubahan
berbeda untuk setiap model dan salah satu harus selalu mengikuti instruksi
dari pabriknya. Langkah-langkah umum adalah sebagai berikut7
2. 'astikan bah!a bola lampu tidak berfungsi atau bah!a ada beberapa
indikasi @ a!. +alam peralatan modern, tanda akan muncul di layar atau kode
kesalahan. +alam peralatan tua, cahaya hanya tidak akan bekera lagi.
:. Matikan spektrofotometer.
0. Lepaskan kabel pakan.
E. Undo sekrup mengamankan bagian atas kompartemen lampu.
;. *uka sekrup menaga mekanisme lampu tetap.
=. *uka sekrup pengikat kabel sambungan listrik ke lampu 5dalam beberapa
peralatan, ini mungkin tidak diperlukan, sebagai dasar perakitan memiliki
mekanisme kontak langsung ke terminal kontak lampu6.
>. 'asang lampu baru dengan karakteristik yang sama seperti aslinya.
?unakan sarung tangan untuk menghindari mendapatkan sidik ari pada
permukaan lampu.
A. Bubungkan kembali kabel listrik ke pakan lampu.
G. 'asang kembali sekrup menaga lampu di tempat.
23. 'asang kembali sekrup penutup kompartemen lampu itu.
22. Bubungkan kembali spektrofotometer.
2:. Bidupkan peralatan F& dan melaksanakan prosedur kalibrasi ulang
peralatan yang ditetapkan oleh produsen.
,. Pre-enti-e Maintenance
'emeliharaan pre,entif spektrofotometer harus sesuai dengan rutinitas dan
frekuensi yang direkomendasikan oleh produsen. Serangkaian rutinitas dasar
yang dapat dilakukan di laboratorium disaikan berikutnya7
2. *ersihkan spektrofotometer secara eksternal, termasuk, layar kontrol atau
pengukuran meter. Bal ini dapat dilakukan dengan menggunakan sepotong
kain halus 5mirip dengan tekstur yang digunakan dalam saputangan6 dibasahi
dengan air suling.
:. 'eriksa dan bersihkan kabel listrik pakan.
0. 'astikan lampu yang bersih dan dalam kondisi baik. %ika tidak berfungsi,
menginstal yang baru dengan spesiDkasi yang sama seperti aslinya. +alam
spektrofotometer modern, negara lampu terdeteksi secara otomatis oleh
perangkat lunak yang mengontrol negara dan fungsi dari peralatan sehingga
mudah untuk menentukan kapan perlu mengganti lampu. Mengubah lampu
dan melaksanakan penyesuaian berikutnya setelah rekomendasi pabrikan.
E. 'eriksa sekering perlindungan. Sebelum membuka kompartemen di mana
sekering ditempatkan, periksa spektrofotometer dimatikan dan periksa bah!a
kontak yang bersih dan dalam kondisi baik. %ika perlu, ganti dengan yang baru
dengan karakteristik yang sama seperti yang direkomendasikan oleh
produsen.
;. #aruh instrumen dalam konDgurasi operasional.
=. $ktifkan LpadaL saklar dan memungkinkan untuk pemanasan selama lima
5;6 menit. 8eriDkasi bah!a7
a6 Lampu indikator atau percontohan bekera.
b6 "ndikator membaca tinggal di nol 536.
c6 Sumber cahaya bekera.
>. Melakukan tes saat melarikan diri dalam LonL dan posisi LoCL.
a6 8eriDkasi tiang tanah dan polaritas yang benar.
b6 8eriDkasi polaritas yang benar tanpa tiang tanah.
c6 8eriDkasi polaritas terbalik tanpa tiang tanah.
A. Kalibrasi panel depan spektrofotometer sesuai dengan instruksi dari
pabriknya.
G. Ukur sensiti,itas peralatan itu.
23. Melakukan tes sesuai dengan hukum *eer.
22. Kembali spektrofotometer ke konDgurasi a!al ika kalibrasi telah berhasil
diselesaikan.
! 'raktik Saat Menggunakan Spectrophotometer
2. Kalibrasi spektrofotometer setiap kali satu set sampel yang akan dianalisis.
:. %auhkan penutup dari pemegang sampel dan kompartemen ditutup selama
proses pengukuran untuk memastikan bacaan yang memadai.
0. Bindari menggunakan kembali cu,ettes pakai.
E. Banya menggunakan cu,ettes kuarsa untuk melaksanakan analisis di ba!ah
023 nm.
;. Bindari penggunaan plastik cu,ettes ika menggunakan pelarut organik.
=. ?unakan kualitas tinggi boron silikat gelas untuk mempersiapkan standar.
Bindari penggunaan kaca natrium 5natrium oksida6 bila memungkinkan,
sebagai kontak lama dengan standar dapat menyerap dan menghasilkan hasil
yang salah.
>. Bati-hati membersihkan cu,ettes kaca setelah digunakan. *uang-orang
yang menunukkan garis-garis pada permukaan yang elas.
A. ?unakan reagen berkualitas tinggi. Mereka dari kualitas rendah dapat
menyebabkan kontaminasi bahkan dalam konsentrasi yang sangat rendah.
G. 'ara 'engencer digunakan 5air atau pelarut6 harus bebas dari kotoran.
23. 8eriDkasi bah!a sampel atau standar tidak degas dalam
22. 'ara cu,ettes. <enomena ini menghasilkan gelembung pada permukaan
bagian dalam cu,ettes dan kesalahan penyebab dalam pembacaan.
2:. Memperhitungkan bah!a tidak semua zat mematuhi hukum *eer.
Melakukan tes linieritas pada kisaran konsentrasi yang akan digunakan.
+isarankan untuk menyiapkan sekelompok diketahui solusi standar yang tinggi
dan mem,eriDkasi hasil. <enomena yang mempengaruhi hukum *eer adalah
sebagai berikut7
a6 Konsentrasi tinggi oleh asosiasi molekul spesies ion.
b6 8ariasi hidrasi pada konsentrasi rendah mengubah sifat ion kompleks
c6 serapan yang tidak sesuai dengan hukum *eer membutuhkan graDk hasil
standar dikenal. "ni akan menunukkan membaca ,ersus konsentrasi sehingga
pembacaan konsentrasi yang tidak diketahui dapat berhubungan dengan
konsentrasi dari graDk.
TROUBLE
SHOOTING TABLE
M!S!&!. T!/E&
otomatis se$trofotometer
M$S$L$B ')F*L$L( '(&Y(*$* SFLUS"
Spektrofotometer ini
tanpa listrik.
Saklar on dan oC dalam
posisi oC.
'indahkan saklar ke posisi
on.
#idak ada energi listrik di
outlet pakan.
8eriDkasi pakan listrik
umum. Ui bah!a
keselamatan beberapa
Mekanisme belum macet.
Kabel pakan listrik tidak
terhubung dengan baik.
Sambungkan kabel pakan
tegas.
#ombol keyboard tidak
merespon.
"nisialisasi peralatan
selama start-up
tidak lengkap.
Matikan peralatan dan
aktifkan lagi.
'erintah salah diaktifkan
selama start-up.
#he port serial )S :0:
tidak merespon.
$da inisialisasi lengkap
peralatan
selama start-up.
Matikan peralatan dan
aktifkan lagi.
Kabel interkoneksi
terhubung buruk.
8eriDkasi koneksi.
Layar L.+ sulit untuk
dibaca.
Kontrol kontras
maladusted.
Sesuaikan kontras.
Sistem pencahayaan
dasar terbakar.
Bubungi per!akilan.
'rinter diblokir. $da kertas macet di
printer.
Lepaskan kertas berlebih
dengan halus menunuk
pinset.
Matikan peralatan,
keluarkan kertas dan
instal ulang lagi.
Kertas printer tidak pakan
otomatis atau muka.
Kertas printer terinstal
keliru.
Matikan peralatan,
masukkan gulungan
kertas.
#epi depan kertas tidak
selaras atau dilipat.
Matikan peralatan.
Masukkan kembali
gulungan kertas.
'otong uung depan dan
meluruskan kembali dalam
sistem pakan.
Kontrol pakan kertas tidak
merespon.
Bubungi per!akilan.
.u,ette tidak masuk
pemegang sampel
kompartemen.
.u,ette adalah dari
ukuran yang salah.
?unakan ukuran cu,ettes
ditentukan oleh
produsen.
Mekanisme penyesuaian
cu,ette adalah salah
ditempatkan.
Memperbaiki posisi dari
mekanisme penyesuaian.
'embacaan menunukkan
@uktuasi.
$da gangguan di alan
cahaya.
'astikan cu,ette tersebut
tidak tergores.
'astikan bah!a tidak ada
partikel mengambang di
cu,ette.
?osok dinding optik dari
cu,ette dengan sepotong
membersihkan kain.
'astikan bah!a angkauan
kera yang diseleksi sesuai
untuk sampel di ba!ah
analisis.
'embacaan menunukkan
nilai negatif. #idak ada
absorbansi membaca.
$da sampel tidak ada. #ambahkan sampel ke
solusi.
.u,ette secara tidak
benar diposisikan.
8eriDkasi orientasi endela
cu,ette itu.
'anang gelombang yang
keliru dipilih.
Sesuaikan panang
gelombang ke kisaran
kompatibel dengan
analisis.
'eralatan itu keliru
dikalibrasi dengan
sampel bukan solusi
kosong.
Kalibrasi dengan solusi
kosong atau dengan suling
air.
(on0otomatis se$trofotometer
M$S$L$B ')F*L$L( '(&Y(*$* SFLUS"
Lampu sumber tidak
menyala-up.
<ilamen rusak. Mengganti lampu.
Sekering keselamatan
terbakar.
Mengganti lampu.
$da resistensi di Dlamen
lampu.
Mengganti lampu.
#egangan adalah keliru. #inau tegangan. 'eriksa
sumber pakan.
)endah pembacaan dalam
meter atau di
gal,anometer.
Lampu Sumber rusak. Mengganti lampu.
'hotocell ini kotor atau
rusak.
*ersihkan atau ganti
fotosel.
)angkaian penguatan
rusak.
Mengubah atau
memperbaiki rangkaian
penguatan.
#egangan Lampu Sumber
adalah rendah.
Sesuaikan tegangan.
Stabil indikasi pengukur
tersebut.
#he stabilizer dioda zener
rusak.
?anti dioda Mener.
1!S!R 1EFI(ISI
Penyerapan .
Sebuah fenomena Dsik yang teradi ketika atom atau molekul suatu zat
menyerap cahaya 5foton6. (nergi foton diambil be.g. oleh atom yang elektron
,alensi perubahan antara dua tingkat energi elektronik menghancurkan foton
dalam proses. (nergi yang diserap hilang thrheat atau radiasi. $bsorbansi
adalah ukuran matematika penyerapan, dinyatakan dalam satuan kerapatan
optik 5F+6.
Angstrom.
*ebuah satuan pan#ang sebesar )06)0m *imbol adalah [@] !al ini digunakan untuk
melakukan pengukuran A6atau $amma6ray
Band lebar.
*ebuah rentang pan#ang gelombang yang monokromator dapat mengirimkan
Difraksi.
Benomena yang disebabkan oleh perubahan dalam arah dan intensitas dari
sekelompok gelombang setelah mencapai rintangan/ atau melalui apersiCe sempit kira6kira
sama dengan pan#ang gelombang dari gelombang
Difraksi kisi .
Sebuah komponen dari monokromator, uga disebut Ltransmisi kisiL. "ni
diCracts cahaya dan dibentuk sebagai rangkaian parallelonto permukaan
mencerminkan. Bal ini dilakukan oleh mesin pelacak dilindungi terhadap
getaran dan ,ariasi suhu. Kisi-kisi yang digunakan di kisi-kisi utama
spectrophotometone yang biasanya memiliki lebih dari 2:33 celah per
milimeter. ?ambar 02 menunukkan fenomena difraksi.
%ika sudut re@eksi -d/ dikenal serta lebar -d/ dari celah, panang
gelombang -N/ dapat ditentukan menurut persamaan berikut7

"ntensitas-"/.
%umlah cahaya yang dipancarkan oleh sumber dalam arah tertentu per unit
!aktu. Lebih umum, pengukuran unit ener rata-rata !aktu. Untuk
mendapatkan intensitas, energi per unit ,olume dikalikan dengan kecepatan di
mana bergerak energi. 8ektor yang dihasilkan adalah permukaan ener per unit
!aktu.
Kepunahan molar atau koeDsien absorpti,itas -e/. #indakan seberapa kuat
spesies kimia menyerap cahaya pada panang gelombang yang ditentukan. "ni
adalah properti intrinsik dari spesies kimia. *ila ada lebih dari satu spesies
menyerap dalam larutan, absorbansi adalah umlah dari nilai absorbansi untuk
setiap spesies indi,idu.
$bsorbansi pada panang gelombang tertentu dari campuran spesies O, Y ...
diberikan oleh

+imana $ adalah absorbansi campuran.
&anometre. Sebuah satuan panang sesuai dengan 23m 5seperseuta ribu
meter6. Bal ini diidentiDkasi oleh simbol -nm/. Bal ini digunakan untuk
mengukur panang gelombang cahaya tampak atau ultra,iolet.
%alan panang. %arak yang ditempuh oleh cahaya tampak atau ultra,iolet
melalui sampel dalam sel analitis 5cu,ette atau baik6.
)efraksi. Sebuah perubahan arah yang teradi ketika sinar cahaya mencapai
interface antara dua media.
Lampu luka di sudut -a/ dan dibiaskan pada sudut -b/ setelah mengubah
media propagasi.
Figure 23. Refraction of light
Spektrofotometri.
Sebuah metode analisis kimia berdasarkan penyerapan atau atenuasi cahaya
dari panang gelombang atau frekuensi ditentukan oleh materi. .ahaya
berinteraksi dengan Dtur khusus dari spesies molekul yang dianalisis7 cahaya
diserap tergantung pada panang gelombang, konsentrasi spesies dan lintasan.
Bal ini memungkinkan menentukan sifat seperti konsentrasi zat, yang dalam
bidang kesehatan dasar, berfungsi untuk melakukan banyak analisis untuk
menentukan status kesehatanpasien.
'anang gelombang. %arak antara puncak-puncak gelombang. Bal ini
menentukan sifat dari berbagai bentuk energi radiasi dalam spektrum
elektromagnetik. Untuk gelombang elektromagnetik, panang gelombang
dalam meter dihitung dengan kecepatan cahaya dibagi dengan frekuensi
5umlah puncak mele!ati titik tertentu dalam !aktu yang ditentukan6.
Figure 24. 1i5 raction gri6
P 9 perbedaan panang gelombang antara dua slot yang berdekatan
5celah6.
LAPORAN PRAKTEK ALAT LABORATORIUM
SPEKTROFOTOMETER
Disusun oleh :
Fahrurrozy (P27838011015)
Dianesty Tri Suciyani(P27838012002)
Dewi Sartika (P27838012008)
Rocha Ratryana (P2783801201!)
"isnu #usua "$ (P27838012015)
%re&orius 'ario Tani (P2783801202!)
Dosen Pemimin! :
"#$ "e% &umi'(n! A%is'()i* ST* MT
+(h,u P* S$ST
KEMENTERIAN KESE"ATAN RI
POLITEKNIK KESE"ATAN KEMENKES SURABA-A
.URUSAN TEKNIK ELEKTROMEDIK
SURABA-A
/012