Kloning

Dari Wikipedia, ensiklopedia bebas

Untuk kloning manusia, lihat kloning manusia . Untuk kegunaan lain, lihat Cloning (disambiguasi) .

The anemon laut ( Anthopleura elegantissima ) menjalani kloning

Dalam biologi, kloning adalah proses memproduksi populasi individu yang sama secara genetik identik yang
terjadi di alam saat organisme seperti bakteri , serangga atau tanaman bereproduksi secara aseksual . Kloning
dalam bioteknologi mengacu pada proses yang digunakan untuk membuat salinan DNA fragmen ( kloning
molekuler ), sel (kloning sel), atau organisme .Istilah ini juga mengacu pada produksi beberapa salinan produk
seperti media digital atau perangkat lunak .
Clone Istilah ini berasal dari bahasa Yunani Kuno kata Klon, "ranting", mengacu pada proses di mana
pabrik baru dapat dibuat dari ranting. Dalam hortikultura , kloning ejaan digunakan sampai abad kedua
puluh; e akhir mulai dipakai untuk menunjukkan vokal adalah "panjang" dan bukan "o pendek". [1] [2] Sejak
istilah memasuki leksikon populer dalam konteks yang lebih umum, clone ejaan telah digunakan secara
eksklusif .
Dalam botani, yang lusus istilah tradisional digunakan. [3] : 21, 43
Di Amerika Serikat, konsumsi manusia daging dan produk lainnya dari hewan kloning telah disetujui
oleh FDA pada tanggal 28 Desember 2006, dengan tidak ada label khusus yang dibutuhkan karena makanan dari
organisme kloning telah ditemukan untuk menjadi identik dengan organisme yang mereka kloning. [4] praktek
tersebut telah bertemu perlawanan yang kuat di daerah-daerah lain karena informasi yang salah, [5] seperti
Eropa, terutama atas masalah pelabelan.
Kloning Molekuler
Artikel utama: kloning Molekuler
Kloning molekuler mengacu pada proses pembuatan beberapa molekul. Kloning umumnya digunakan untuk
memperkuat DNA fragmen yang mengandung seluruh gen , tetapi juga dapat digunakan untuk memperkuat
urutan DNA apapun seperti promotor , urutan non-coding dan DNA secara acak terfragmentasi. Hal ini
digunakan dalam berbagai macam eksperimen biologi dan aplikasi praktis mulai dari sidik jari genetik untuk
produksi protein skala besar. Kadang, kloning istilah menyesatkan digunakan untuk merujuk kepada
identifikasi kromosom lokasi gen yang terkait dengan fenotipe tertentu yang menarik, seperti di kloning
posisional . Dalam prakteknya, lokalisasi gen ke kromosom atau genom daerah tidak selalu memungkinkan
seseorang untuk mengisolasi atau memperkuat urutan genom yang relevan. Untuk memperkuat urutan DNA
apapun dalam organisme hidup, urutan yang harus dihubungkan dengan asal replikasi , yang merupakan urutan
DNA mampu mengarahkan penyebaran dirinya dan setiap urutan terkait. Namun, sejumlah fitur lain yang
diperlukan dan berbagai khusus vektor kloning (sepotong kecil DNA di mana fragmen DNA asing dapat
dimasukkan) ada yang memungkinkan ekspresi protein , penandaan, tunggal terdampar RNA dan DNA produksi
dan sejumlah lainnya manipulasi.
Kloning setiap fragmen DNA dasarnya melibatkan empat langkah [6]
1.
2.
3.
4.

fragmentasi - berantakan untai DNA

ligasi - perekatan bersama potongan-potongan DNA dalam urutan yang diinginkan
transfeksi - memasukkan potongan-potongan yang baru terbentuk dari DNA ke dalam sel
screening / seleksi - memilih keluar sel yang berhasil transfected dengan DNA baru

Meskipun langkah-langkah ini tidak berubah-ubah antara prosedur kloning sejumlah rute alternatif dapat
dipilih; ini dirangkum sebagai strategi kloning.
Awalnya, DNA bunga perlu diisolasi untuk memberikan segmen DNA dengan ukuran yang cocok. Selanjutnya,
prosedur ligasi digunakan di mana fragmen diperkuat dimasukkan ke dalam vektor (sepotong DNA). Vektor
(yang sering melingkar) yang linearised menggunakan enzim restriksi , dan diinkubasi dengan fragmen yang
menarik di bawah kondisi yang tepat dengan enzim yang disebut DNA ligase . Setelah ligasi vektor dengan
menyisipkan bunga transfected ke sel. Sejumlah teknik alternatif yang tersedia, seperti sensitivation kimia
sel, elektroporasi , injeksi optik dan biolistics . Akhirnya, sel-sel transfected yang dibudidayakan. Sebagai
prosedur tersebut adalah efisiensi sangat rendah, ada kebutuhan untuk mengidentifikasi sel-sel yang telah
berhasil transfected dengan membangun vektor yang berisi urutan penyisipan yang diinginkan dalam orientasi

yang diperlukan. Vektor kloning modern termasuk dipilih antibiotik penanda resistensi, yang memungkinkan
hanya sel-sel di mana vektor telah transfected, untuk tumbuh. Selain itu, vektor kloning mungkin berisi spidol
pemilihan warna, yang menyediakan biru / putih screening (alpha-faktor komplementasi) dari Xgal menengah. Namun demikian, tahap seleksi ini tidak benar-benar menjamin bahwa insert DNA hadir dalam
sel-sel yang diperoleh. Penyelidikan lebih lanjut dari koloni dihasilkan harus diminta untuk mengkonfirmasi
bahwa kloning berhasil. Hal ini dapat dilakukan dengan cara PCR , analisis fragmen restriksi dan /
atau sekuensing DNA .
Sel kloning
Kloning organisme uniseluler
Kloning koloni sel-line menggunakan cincin kloning
Kloning sel berarti untuk menurunkan populasi sel dari satu sel. Dalam kasus organisme uniseluler seperti
bakteri dan ragi, proses ini sangat sederhana dan pada dasarnya hanya memerlukan inokulasi medium yang
sesuai. Namun, dalam kasus kultur sel dari organisme multisel, kloning sel adalah tugas yang berat karena selsel ini tidak akan mudah tumbuh dalam media standar.
Sebuah teknik kultur jaringan yang berguna digunakan untuk mengkloning garis keturunan yang berbeda dari
jalur sel melibatkan penggunaan kloning cincin (silinder). [4] Menurut teknik ini, suspensi sel tunggal sel yang
telah terkena agen mutagenik atau obat yang digunakan untuk berkendara pilihan dilapisi pada pengenceran
tinggi untuk menciptakan koloni terisolasi; masing-masing berasal dari satu sel yang berbeda tunggal dan
berpotensi klonal. Pada tahap pertumbuhan awal ketika koloni hanya terdiri dari beberapa sel,
steril polystyrene cincin (kloning cincin), yang telah dicelupkan ke dalam minyak ditempatkan di atas sebuah
koloni individu dan sejumlah kecil tripsin ditambahkan. Sel kloning dikumpulkan dari dalam ring dan
dipindahkan ke kapal baru untuk pertumbuhan lebih lanjut.
Kloning sel induk
Artikel utama: transfer inti sel somatik-Sel somatik transfer inti , yang dikenal sebagai SCNT, juga dapat digunakan untuk membuat embrio untuk
penelitian atau tujuan terapeutik. Tujuan yang paling mungkin untuk ini adalah untuk menghasilkan embrio
untuk digunakan dalam penelitian sel induk . Proses ini juga disebut "kloning penelitian" atau "therapeutic
cloning." Tujuannya adalah manusia tidak menciptakan kloning (disebut "kloning reproduksi"), melainkan
untuk memanen sel-sel yang dapat digunakan untuk mempelajari perkembangan manusia dan berpotensi
mengobati penyakit batang. Sementara blastokista manusia klonal telah dibuat, batang baris sel yang belum
diisolasi dari sumber klonal. [7]
Terapi kloning dicapai dengan menciptakan sel-sel induk embrionik dengan harapan mengobati penyakit seperti
diabetes dan Alzheimer. Prosesnya dimulai dengan mengambil inti (mengandung DNA) dari sel telur dan
meletakkan di dalamnya inti dari sel dewasa yang akan dikloning. [8] Dalam kasus seseorang dengan penyakit
Alzheimer, inti dari sel kulit pasien yang ditempatkan ke dalam telur kosong. Sel memprogram mulai
berkembang menjadi embrio karena telur bereaksi dengan inti ditransfer. Embrio akan menjadi genetik identik
dengan pasien. [8] Embrio kemudian akan membentuk blastocyst yang memiliki potensi untuk membentuk /
menjadi apapun sel dalam tubuh. [9]
Alasan mengapa SCNT digunakan untuk kloning adalah karena sel-sel somatik dapat dengan mudah diperoleh
dan berbudaya di laboratorium. Proses ini baik dapat menambah atau menghapus genom tertentu dari hewan
ternak. Hal penting yang harus diingat adalah bahwa kloning dicapai ketika oosit mempertahankan fungsi
normal dan bukan menggunakan sperma dan sel telur genom untuk meniru, oosit dimasukkan ke dalam inti sel
somatik donor. [10] oosit akan bereaksi pada sel somatik inti, dengan cara yang sama itu akan pada sel
sperma. [10]
Proses kloning hewan ternak tertentu menggunakan SCNT relatif sama untuk semua hewan. Langkah pertama
adalah untuk mengumpulkan sel somatik dari hewan yang akan dikloning. Sel-sel somatik dapat digunakan
segera atau disimpan di laboratorium untuk digunakan nanti. [10] Bagian tersulit dari SCNT adalah menghapus
DNA ibu dari oosit pada metafase II. Setelah ini telah dilakukan, inti sel yang dapat dimasukkan ke dalam
sitoplasma sel telur. [10] Hal ini menciptakan embrio satu sel. Sel telur dan sitoplasma somatik dikelompokkan
kemudian diperkenalkan ke arus listrik. [10] Energi ini akan mudah-mudahan memungkinkan embrio kloning
untuk memulai pembangunan. Embrio berhasil mengembangkan kemudian ditempatkan pada penerima
pengganti, seperti sapi atau domba dalam kasus hewan ternak. [10]

SCNT dipandang sebagai metode yang baik untuk memproduksi hewan pertanian untuk konsumsi makanan. Itu
berhasil mengkloning domba, sapi, kambing, dan babi.Manfaat lain adalah SCNT dipandang sebagai solusi
untuk mengkloning spesies langka yang ada di ambang kepunahan. [10] Namun, tekanan ditempatkan pada kedua
sel telur dan inti diperkenalkan sangat besar, menyebabkan hilangnya tinggi dalam menghasilkan
sel. Misalnya, domba kloning Dolly lahir setelah 277 telur yang digunakan untuk SCNT, yang menciptakan 29
embrio yang layak. Hanya tiga embrio tersebut bertahan sampai lahir, dan hanya satu selamat sampai
dewasa. [11] Sebagai prosedur saat ini tidak bisa otomatis, dan harus dilakukan secara manual di
bawah mikroskop , SCNT sangat sumber daya intensif. Biokimia yang terlibat dalam pemrograman
ulang dibedakan inti sel somatik dan mengaktifkan telur penerima juga jauh dari yang dipahami dengan baik.
Di SCNT, tidak semua informasi genetik sel donor ditransfer, sebagai sel donor mitokondria yang mengandung
mereka sendiri DNA mitokondria tertinggal. Sel-sel hibrida yang dihasilkan mempertahankan struktur-struktur
mitokondria yang awalnya milik telur. Akibatnya, klon seperti Dolly yang lahir dari SCNT tidak salinan
sempurna dari donor inti.
Organisme kloning
Informasi lebih lanjut: Reproduksi aseksual
Kloning Organism (juga disebut kloning reproduksi) mengacu pada prosedur menciptakan organisme
multiseluler baru, genetik identik dengan yang lain. Pada dasarnya bentuk kloning adalah metode aseksual
reproduksi, di mana pembuahan atau antar-gamet kontak tidak terjadi. Reproduksi aseksual adalah fenomena
yang terjadi secara alami di banyak spesies, termasuk sebagian besar tanaman (lihat reproduksi vegetatif ) dan
beberapa serangga. Para ilmuwan telah membuat beberapa prestasi besar dengan kloning, termasuk reproduksi
aseksual domba dan sapi. Ada banyak perdebatan etis mengenai apakah atau tidak kloning harus
digunakan. Namun, kloning, atau propagasi aseksual, [12] telah praktek umum di dunia hortikultura selama
ratusan tahun.
Hortikultura
Untuk penggunaan kloning di pemeliharaan anggur, lihat Perbanyakan anggur .
Clone istilah digunakan dalam hortikultura untuk menyebut keturunan tanaman tunggal yang diproduksi
oleh vegetatif reproduksi atau apomixis . Banyak tanaman hortikultura kultivar klon, yang telah berasal dari satu
individu, dikalikan dengan beberapa proses lain selain reproduksi seksual. [13] Sebagai contoh, beberapa kultivar
Eropa anggur merupakan klon yang telah disebarkan selama lebih dari dua ribu tahun. Contoh lain
adalah kentang dan pisang . [14] Penyambungan dapat dianggap sebagai kloning, karena semua tunas dan cabang
yang berasal dari korupsi secara genetik tiruan dari satu individu, tetapi jenis tertentu dari kloning belum datang
di bawahetis pengawasan dan umumnya diperlakukan sebagai yang sama sekali berbeda dari operasi.
Banyak pohon , semak , tanaman merambat , pakis dan lainnya tanaman keras herba membentuk koloni
klonal secara alami. Bagian dari tanaman individu dapat menjadi terpisah oleh fragmentasi dan tumbuh untuk
menjadi individu klonal terpisah. Sebuah contoh umum adalah dalam reproduksi vegetatif lumut dan liverwort
klon gametofit dengan cara Gemmae . Beberapa tumbuhan vaskular misalnya dandelion dan
tertentu vivipar rumput juga membentuk bibit secara aseksual, disebut apomixis , sehingga populasi klonal
individu genetik identik.
Partenogenesis
Derivasi klonal ada di alam dalam beberapa spesies hewan dan disebut sebagai partenogenesis (reproduksi
organisme dengan sendirinya tanpa pasangan). Ini merupakan bentuk aseksual reproduksi yang hanya
ditemukan pada wanita dari beberapa serangga, krustasea, nematoda, [15] ikan (misalnya Hammerhead hiu [16] ),
yangkomodo [16] dan kadal . Pertumbuhan dan perkembangan terjadi tanpa pembuahan dari pejantannya. Pada
tumbuhan, partenogenesis berarti perkembangan embrio dari sel telur yang tidak dibuahi, dan merupakan proses
komponen apomixis. Dalam spesies yang menggunakan sistem penentuan seks XY , keturunannya akan selalu
perempuan. Contohnya adalah "Little Semut Api "( Wasmannia auropunctata ), yang asli
ke Tengah dan Amerika Selatan namun telah menyebar di banyak lingkungan tropis.
Kloning buatan organisme
Kloning buatan organisme bisa juga disebut kloning reproduksi.
Bergerak Pertama
Hans Spemann , seorang Jerman embriologi dianugerahi Penghargaan Nobel dalam Fisiologi atau
Kedokteran pada tahun 1935 untuk penemuan efek yang sekarang dikenal sebagai induksi embrionik, yang
dilakukan oleh berbagai bagian dari embrio, yang mengarahkan perkembangan kelompok sel ke dalam jaringan

tertentu dan organ . Pada tahun 1928 ia dan muridnya, Hilde Mangold , adalah yang pertama untuk
melakukan transfer inti sel somatik- menggunakan amfibi embrio -. salah satu langkah pertama menuju
kloning [17]
Metode
Reproductive cloning umumnya menggunakan " transfer inti sel somatik "(SCNT) untuk membuat hewan yang
secara genetik identik. Proses ini memerlukan transfer inti dari (sel somatik) sel donor dewasa ke telur yang inti
telah dihapus, atau sel dari blastokista yang inti telah dihapus. [18] Jika telur mulai untuk membagi biasanya itu
ditransfer ke dalam rahim ibu pengganti. Klon tersebut tidak benar sama karena sel-sel somatik mungkin berisi
mutasi pada DNA nuklir mereka. Selain itu, mitokondriadalam sitoplasma juga mengandung DNA dan selama
SCNT DNA mitokondria ini sepenuhnya dari telur donor sitoplasma itu, sehingga mitokondria genom tidak
sama dengan sel donor inti dari yang diproduksi. Hal ini mungkin memiliki implikasi penting untuk crossspesies transfer inti yang tidak kompatibel nuklir mitokondria dapat menyebabkan kematian.
Membelah embrio buatan atau twinning embrio, teknik yang menciptakan kembar monozigot dari embrio
tunggal, tidak dianggap dalam cara yang sama seperti metode lain kloning. Selama prosedur itu,
donor embrio dibagi dalam dua embrio yang berbeda, yang kemudian dapat ditransfer melalui transfer
embrio . Hal ini secara optimal dilakukan pada tahap 6 hingga 8-cell, di mana dapat digunakan sebagai
perluasan dari IVF untuk meningkatkan jumlah embrio yang tersedia. [19] Jika kedua embrio berhasil, hal itu
menimbulkan monozigot (identik) kembar .
Domba Dolly
Artikel utama: domba Dolly

Dolly clone
Dolly , seorang Finn Dorset- domba , adalah mamalia pertama yang telah berhasil dikloning dari sel
dewasa. Dolly dibentuk dengan mengambil sel dari ambing ibu kandungnya. Ibu kandungnya berusia 6 tahun
ketika sel-sel diambil dari ambing nya. [20]Dolly embrio diciptakan dengan mengambil sel dan memasukkannya
ke dalam ovum domba. Butuh 434 kali sebelum embrio berhasil. [21] embrio itu kemudian ditempatkan di dalam
domba betina yang mengalami kehamilan yang normal. [22] Dia kloning di Roslin Institute di Skotlandia dan
tinggal di sana dari kelahirannya pada tahun 1996 sampai kematiannya pada tahun 2003 ketika dia berusia enam
tahun. Dia lahir pada tanggal 5 Juli 1996, namun tidak mengumumkan kepada dunia sampai 22 Februari
1997. [21] Her boneka tetap ditempatkan di Edinburgh Royal Museum , bagian dari Museum Nasional
Skotlandia . [23]
Dolly signifikan publik karena upaya menunjukkan bahwa materi genetik dari sel dewasa tertentu, diprogram
untuk mengekspresikan hanya sebagian yang berbeda dari gen, dapat diprogram untuk tumbuh organisme yang
sama sekali baru.Sebelum demonstrasi ini, telah ditunjukkan oleh John Gurdon bahwa inti dari sel dibedakan
dapat menimbulkan seluruh organisme setelah transplantasi ke telur enucleated. [24] Namun, konsep ini belum
ditunjukkan dalam sistem mamalia.
Kloning domba Dolly memiliki tingkat keberhasilan yang rendah per telur yang sudah dibuahi; dia lahir setelah
277 telur yang digunakan untuk membuat 29 embrio, yang hanya menghasilkan tiga anak domba saat lahir,
hanya satu yang hidup. Tujuh puluh anak sapi telah dibuat dan sepertiga dari mereka mati
muda; Prometea mengambil 814 usaha. Terutama, meskipun klon pertama adalah katak, tidak ada orang dewasa
kloning katak belum diproduksi dari sel donor inti dewasa somatik.
Ada klaim awal bahwa Dolly Domba memiliki patologi menyerupai penuaan dipercepat. Para ilmuwan
berspekulasi bahwa kematian Dolly pada tahun 2003 terkait dengan pemendekan telomere , kompleks DNAprotein yang melindungi ujung linear kromosom . Namun peneliti lain, termasuk Ian Wilmut yang memimpin
tim yang berhasil mengkloning Dolly, berpendapat bahwa kematian dini Dolly karena infeksi pernapasan tidak
berhubungan dengan kekurangan dengan proses kloning.
Dolly dinamai Dolly Parton karena sel-sel kloning untuk membuat dia berasal dari sebuah kelenjar susu sel. [25]
Spesies kloning
Informasi lebih lanjut: Daftar hewan yang telah diklon
Teknik-teknik kloning yang modern yang melibatkan transfer inti telah berhasil dilakukan pada beberapa
spesies. Eksperimen terkenal termasuk:

Kecebong : (1952) Robert Briggs dan Thomas J. Raja telah berhasil mengkloning utara katak macan tutul .
tiga puluh lima embrio yang lengkap dan dua puluh tujuh berudu dari transfer nuklir seratus dan empat
sukses [26] [27]
Carp : (1963) Di China , embriologi Tong Dizhou diproduksi di dunia ikan pertama kloning dengan
memasukkan DNA dari sel ikan mas laki-laki ke dalam telur dari ikan mas betina. Ia menerbitkan temuan
di jurnal ilmiah Cina. [28]
Tikus : (1986) Seekor tikus berhasil dikloning dari sel embrio awal. Soviet ilmuwan Chaylakhyan,
Veprencev, Sviridova, dan Nikitin memiliki mouse "Masha" kloning.Penelitian diterbitkan dalam majalah
"Biofizika" II volume, edisi 5 dari 1987 [ klarifikasi diperlukan ] [29]
Domba : Marked mamalia pertama yang dikloning (1984) dari sel-sel embrio awal oleh Steen
Willadsen . Megan dan Morag [30] kloning dari sel embrio dibedakan pada bulan Juni 1995 dan Dolly
domba . dari sel somatik pada tahun 1996 [31]
Monyet rhesus : Tetra (Januari 2000) dari pemisahan embrio [32] [ klarifikasi diperlukan ] [33]
Babi :. babi kloning pertama (Maret 2000) [34] Pada 2014, BGI di China memproduksi 500 babi kloning
tahun untuk menguji obat baru. [35]
Gaur : (2001) adalah spesies yang terancam punah pertama yang dikloning. [36]
Sapi : Alpha dan Beta (laki-laki, 2001) dan (2005) Brasil [37]
Cat : peniru "CC" (wanita, akhir tahun 2001), sedikit Nicky , 2004, adalah kucing pertama yang dikloning
untuk alasan komersial [38]
Rat : Ralph , tikus kloning pertama (2003) [39]
Mule : Idaho Gem , keledai john lahir 4 Mei 2003, adalah yang pertama clone kuda-keluarga. [40]
Kuda : Prometea , perempuan Haflinger lahir 28 Mei 2003, adalah klon kuda pertama. [41]
Dog : Snuppy , laki-laki anjing Afghan adalah anjing kloning pertama (2005). [42]
Serigala : Snuwolf dan Snuwolffy , pertama dua serigala betina kloning (2005). [43]
Water Buffalo : Samrupa adalah yang pertama kloning kerbau. Ia lahir pada tanggal 6 Februari 2009,
di India 's Karnal Nasional Harian Research Institute namun meninggal lima hari kemudian karena infeksi
paru-paru. [44]
Pyrenean Ibex (2009) adalah hewan punah pertama yang dikloning kembali ke kehidupan; clone hidup
selama tujuh menit sebelum meninggal cacat paru-paru. [45] [46]
Camel : (2009) Injaz , adalah unta hasil kloning pertama. [47]
Pashmina kambing : (2012) Noori , adalah yang pertama kloning pashmina kambing. Para ilmuwan di
fakultas ilmu kedokteran hewan dan peternakan dari Sher-e-Kashmir Universitas Ilmu dan Teknologi
Pertanian Kashmir berhasil mengkloning kambing Pashmina pertama (Noori) menggunakan teknik
reproduksi maju di bawah kepemimpinan Riaz Ahmad Shah. [48]

Kloning manusia
Artikel utama: Kloning manusia
Kloning manusia adalah penciptaan salinan genetik identik dari manusia. Istilah ini umumnya digunakan untuk
merujuk kepada kloning manusia buatan, yang merupakan reproduksi dari sel manusia dan jaringan. Ini tidak
mengacu pada konsepsi alam dan pengiriman identik kembar . Kemungkinan kloning manusia telah
mengangkatkontroversi . Rute keprihatinan etis telah mendorong beberapa negara untuk
lulus legislatif mengenai kloning manusia dan legalitasnya.
Dua jenis umum dibahas kloning manusia teoritis adalah kloning terapeutik dan kloning reproduksi. Terapi
kloning akan melibatkan kloning sel dari manusia untuk digunakan dalam obat-obatan dan transplantasi, dan
merupakan daerah aktif penelitian, tetapi tidak dalam praktek medis di mana saja di dunia, seperti dari 2014 Dua
metode umum therapeutic cloning yang sedang diteliti adalah transfer inti sel somatik- dan, baru-baru
ini, induksi sel induk berpotensi majemuk . Reproductive cloning akan melibatkan membuat seluruh manusia
kloning, bukan sel-sel atau jaringan hanya tertentu. [49]
Masalah etika kloning
Artikel utama: Etika kloning
Ada berbagai etika posisi mengenai kemungkinan kloning, terutama kloning manusia . Sementara banyak dari
pandangan ini adalah agama asal, pertanyaan yang diajukan oleh kloning dihadapkan oleh sekuler perspektif
juga. Perspektif tentang kloning manusia bersifat teoretis, sebagai terapi manusia dan kloning reproduksi tidak
digunakan secara komersial; hewan saat ini kloning di laboratorium dan produksi ternak.

Advokat mendukung pengembangan therapeutic cloning untuk menghasilkan jaringan dan organ secara
keseluruhan untuk mengobati pasien yang dinyatakan tidak dapat memperoleh transplantasi, [50] untuk
menghindari kebutuhan untuk obat imunosupresif , [49] dan untuk mencegah efek penuaan. [51] Advokat untuk
kloning reproduksi percaya bahwa orang tua yang tidak bisa dinyatakan berkembang biak harus memiliki akses
ke teknologi. [52]
Penentang kloning memiliki kekhawatiran bahwa teknologi belum berkembang cukup aman, [53] bahwa hal itu
bisa rentan terhadap penyalahgunaan (yang mengarah ke generasi manusia dari siapa organ dan jaringan akan
dipanen), [54] [55] dan memiliki kekhawatiran tentang bagaimana individu kloning dapat berintegrasi dengan
keluarga dan dengan masyarakat pada umumnya. [56] [57]
Kelompok agama dibagi, dengan beberapa menentang teknologi sebagai merebut tempat Tuhan dan, dengan
embrio sejauh yang digunakan, menghancurkan kehidupan manusia; lain mendukung potensi manfaat
menyelamatkan nyawa terapi kloning ini. [58] [59]
Kloning hewan ditentang oleh hewan-kelompok karena jumlah hewan kloning yang menderita malformasi
sebelum mereka mati, [60] [61] dan sementara makanan dari hewan kloning telah disetujui oleh FDA Amerika
Serikat, [5] [62] penggunaannya ditentang oleh kelompok peduli keamanan pangan. [63] [64] [65]
Kloning spesies punah dan terancam punah
Kloning, atau lebih tepatnya, rekonstruksi DNA fungsional dari punah spesies telah, selama puluhan tahun,
menjadi impian beberapa ilmuwan. Teknik kloning saat ini memiliki tingkat keberhasilan rata-rata kurang dari 5
persen, bahkan ketika bekerja dengan spesies akrab; kloning hewan liar biasanya kurang dari 1 persen yang
berhasil.[66] Kemungkinan implikasi dari hal ini yang didramatisasi dalam novel laris oleh Michael Crichton dan
anggaran tinggi di Hollywood film thriller Jurassic Park . Awal berharap untuk menyelamatkan spesies melalui
kloning telah pupus karena kesulitan kloning spesies apapun telah membuat kemajuan sangat
lambat. [67] [68] Beberapa bank jaringan telah datang menjadi ada, termasuk " Frozen Zoo "di Kebun Binatang
San Diego , untuk menyimpan jaringan yang dibekukan dari spesies paling langka dan paling terancam punah di
dunia. [67] [69] [70]
Pada tahun 2001, seekor sapi bernama Bessie melahirkan Asia kloning Gaur , jenis yang terancam punah, tapi
betis meninggal setelah dua hari. Pada tahun 2003, sebuahbanteng berhasil dikloning, diikuti oleh tiga kucing
liar Afrika dari embrio beku dicairkan. Maskapai keberhasilan yang tersedia berharap bahwa teknik yang mirip
(menggunakan ibu pengganti dari spesies lain) dapat digunakan untuk mengkloning spesies
punah. Mengantisipasi kemungkinan ini, sampel jaringan dari Bucardo terakhir ( Pyrenean Ibex ) dibekukan
dalam nitrogen cair segera setelah meninggal pada 2000 Peneliti juga mempertimbangkan spesies yang
terancam punah kloning seperti panda raksasa dan cheetah.
Pada tahun 2002, ahli genetika di Museum Australia mengumumkan bahwa mereka telah direplikasi DNA
dari harimau Tasmania (Tasmanian Tiger), pada saat yang punah selama sekitar 65 tahun,
menggunakan polymerase chain reaction . [71] Namun, pada 15 Februari 2005 museum mengumumkan bahwa
akan menghentikan proyek setelah tes menunjukkan DNA spesimen 'telah terlalu parah rusak oleh ( etanol )
pengawet. Pada tanggal 15 Mei 2005, telah mengumumkan bahwa proyek harimau Tasmania akan dihidupkan
kembali, dengan partisipasi baru dari para peneliti di New South Wales dan Victoria .
Pada bulan Januari 2009, untuk pertama kalinya, hewan punah, Ibex Pyrenean disebutkan di atas dikloning, di
Pusat Teknologi Pangan dan Penelitian Aragon, menggunakan diawetkan DNA dari sampel kulit dari 2001 dan
kambing domestik telur-sel. Ibex meninggal tak lama setelah lahir karena cacat fisik dalam paru-parunya. [72]
Salah satu target yang paling diantisipasi untuk kloning pernah menjadi Woolly Mammoth , tetapi mencoba
untuk mengekstrak DNA dari mammoth beku tidak berhasil, meskipun tim Rusia-Jepang bersama saat ini
bekerja menuju tujuan ini. Pada bulan Januari 2011, dilaporkan oleh Yomiuri Shimbun bahwa sebuah tim
ilmuwan yang dipimpin oleh Akira Iritani dari Kyoto University telah dibangun di atas penelitian oleh Dr
Wakayama, mengatakan bahwa mereka akan mengekstrak DNA dari bangkai mammoth yang telah diawetkan di
laboratorium Rusia dan masukkan ke dalam sel telur dari gajah Afrika dengan harapan menghasilkan embrio
mammoth. Para peneliti mengatakan mereka berharap untuk menghasilkan raksasa bayi dalam waktu enam
tahun. [73] [74]
Para ilmuwan di University of Newcastle dan University of New South Wales mengumumkan pada bulan Maret
2013 yang sangat baru-baru punah lambung-merenung katak akan menjadi subyek dari upaya kloning untuk
menghidupkan kembali spesies. [75]
Umur

Setelah proyek delapan tahun yang melibatkan penggunaan teknik kloning perintis, peneliti Jepang menciptakan
25 generasi tikus kloning yang sehat dengan rentang hidup yang normal, menunjukkan bahwa klon tidak
intrinsik berumur pendek daripada hewan secara alami lahir. [76]
Dalam budaya populer
Dalam sebuah artikel di November 8, 1993 artikel dari majalah Time , kloning digambarkan dengan cara yang
negatif, memodifikasi Michelangelo Penciptaan Adam untuk menggambarkan Adam dengan lima tangan
identik. Newsweek Magazine 's 10 Maret 1997 masalah juga dikritik etika manusia kloning, dan termasuk grafis
yang menggambarkan bayi identik dalam gelas.
Kloning adalah tema berulang dalam berbagai kontemporer fiksi ilmiah , mulai dari film action seperti film
2000 Hari ke-6 dan Resident Evil (film seri) , Jurassic Park (film), dan The Island (2005 film) , untuk komedi
seperti Woody Allen 's 1973 Film Sleeper . [77]
Fiksi ilmiah telah menggunakan kloning, kloning paling sering dan secara khusus manusia, karena fakta bahwa
itu membawa pertanyaan kontroversial identitas. [78] [79]Dalam Aldous Huxley 's Brave New World (1932),
kloning manusia merupakan plot utama perangkat yang tidak hanya mendorong cerita tetapi juga membuat
pembaca berpikir kritis tentang apa artinya identitas; Konsep ini kembali diperiksa lima puluh tahun kemudian
di CJ Cherryh 'novel s Forty Ribu di Gehenna (1983) dan Cyteen(1988). Kazuo Ishiguro 's 2005 novel
yang Never Let Me Go berpusat pada klon manusia dan mempertimbangkan etika praktek. Buku lain yang
mewujudkan ide-ide kloning adalah The House of the Scorpion yang membahas hak-hak klon manusia dan
pengambilan organ, set dari mata klon. Novel pendek Mengandung Allah dengan Dr.SMWasi Haider sama
berkaitan dengan ide-ide kloning dan etika, nafsu, dan isu-isu lain seputar topik, menekankan gagasan bahwa
menciptakan kehidupan memberi orang rasa aman palsu keilahian. Implikasi dari menggunakan klon untuk
menggantikan orang-orang tercinta yang telah meninggal dieksplorasi dalam beberapa karya fiksi.Di Margaret
Peterson Haddix 's baru Identitas ganda , karakter utama menemukan bahwa dia adalah tiruan dari kakak
almarhum tua nya. Nomor A adalah 2002 bermain dengan bahasa Inggris dramawan Caryl Churchill yang
membahas subjek kloning manusia dan identitas, terutama nature dan nurture . Cerita, mengatur dalam waktu
dekat, disusun sekitar konflik antara seorang ayah (Salter) dan anak-anaknya (Bernard 1, Bernard 2, dan
Michael Hitam) -. Dua di antaranya adalah klon dari yang pertamaNomor A diadaptasi oleh Caryl Churchill
untuk televisi, di co-produksi antara BBC dan HBO Films . [80] Dibintangi Rhys Ifans dan Tom Wilkinson , itu
disiarkan di BBC Two pada 10 Sep 2008. [81]
Sebuah sub-tema yang berulang fiksi kloning adalah penggunaan klon sebagai
pasokan organ untuk transplantasi . The 2005 Kazuo Ishiguro baru Never Let Me Go danfilm 2010
adaptasi [82] ditetapkan dalam sejarah alternatif di mana kloning manusia diciptakan untuk tujuan tunggal
menyediakan donasi organ secara alami lahir manusia, meskipun fakta bahwa mereka sepenuhnya hidup dan
sadar diri. 2005 film The Island [83] berkisar plot yang sama, dengan pengecualian bahwa klon tidak menyadari
alasan keberadaan mereka. Dalam novel futuristik The House of the Scorpion , klon yang digunakan untuk
menumbuhkan organ untuk mereka kaya "pemilik", dan karakter utama adalah tiruan lengkap.
Penggunaan kloning manusia untuk tujuan militer juga telah dieksplorasi dalam beberapa karya. Star
Wars menggambarkan kloning manusia di Clone Wars , [84] Star Wars Episode II: Attack of the Clones dan Star
Wars Episode III: Revenge of the Sith , dalam bentuk Grand Tentara Republik, sepasukan tentara
kloning. The Universe diperluas juga memiliki banyak contoh kloning, termasuk trilogi Thrawn , Tangan
Thrawn duology, dan Clone Wars Media -era.
Eksploitasi klon manusia untuk pekerjaan berbahaya dan tidak diinginkan diperiksa dalam 2009 film fiksi
ilmiah Inggris Bulan . [85] Dalam novel futuristik Cloud Atlas dan selanjutnya Film , salah satu alur cerita
berfokus pada rekayasa genetik Fabricant Clone bernama Sonmi ~ 451 yang merupakan salah satu dari jutaan
dibesarkan di sebuah buatan "wombtank," ditakdirkan untuk melayani sejak lahir. Dia adalah salah satu dari
ribuan klon diciptakan untuk manual dan tenaga kerja emosional ; Sonmi dirinya bekerja sebagai server di
sebuah restoran. Dia kemudian menemukan bahwa satu-satunya sumber makanan untuk klon, yang disebut
'Sabun', dibuat dari klon sendiri. [86]
Dalam film komedi Multiplisitas , seorang pria klon dirinya tiga kali dengan bantuan ahli genetika.
Kloning telah digunakan dalam fiksi sebagai cara menciptakan tokoh-tokoh sejarah. Di tahun 1976 Ira
Levin Novel The Boys dari Brasil dan yang adaptasi 1978 film yang ,[87] Josef Mengele menggunakan kloning
untuk membuat salinan dari Adolf Hitler . Sebuah Parade of Mirrors dan Refleksi, novel karya Anatoly
Kudryavitsky , berpusat pada kloning dari almarhum Soviet premier Yuri Andropov .

Dalam anime A tertentu Ilmiah Railgun , Level 5 esper Mikoto Misaka kloning komersial lebih dari 20.000 kali
untuk tujuan penelitian kemungkinan "Tingkat 6" esper. Dalam lain anime / manga Neon Genesis Evangelion ,
kloning manusia adalah topik yang memiliki berat sekitar asal karakter Ayanami Rei . Pada tahun 2012, sebuah
acara televisi Jepang bernama "Bunshin" diciptakan. Karakter utama cerita, Mariko, adalah seorang wanita
belajar kesejahteraan anak di Hokkaido. Dia dibesarkan selalu ragu-ragu tentang cinta dari ibunya, yang tampak
tidak seperti dia dan yang meninggal sembilan tahun sebelumnya. Suatu hari, dia menemukan beberapa barangbarang ibunya di rumah seorang kerabat, dan kepala ke Tokyo untuk mencari kebenaran di balik
kelahirannya. Dia kemudian menemukan bahwa dia adalah klon. [88]
Kloning juga ditampilkan dalam franchise Halo , terutama teknik yang dikenal sebagai "Flash kloning" di mana
clone tidak stabil dari individu dibuat dalam rentang yang sangat singkat. Flash kloning digunakan oleh DK
PBB untuk menculik anak-anak untuk induksi ke dalam program militer SPARTAN-II, yang diam-diam diganti
dengan klon kilat yang mati dalam rentang waktu singkat untuk memastikan bahwa tidak ada yang mencari
anak-anak. The MMORPG EVE Online dan FPS secara online DUST 514 berlangsung di masa depan yang jauh
di mana karakter pemain semua klon; pada saat kematian, otak-negara seseorang dipetakan, ditransmisikan dan
diterapkan pada 'kosong' clone di stasiun atau fasilitas agak jauh.
Dalam 2013 acara televisi Orphan Hitam , [89] kloning digunakan sebagai studi ilmiah tentang perilaku adaptasi
klon.
Biologi molekular atau biologi molekul merupakan salah satu cabang biologi yang merujuk kepada pengkajian
mengenaikehidupan pada skala molekul. Ini termasuk penyelidikan tentang interaksi molekul dalam benda
hidup dan kesannya, terutama tentang interaksi berbagai sistem dalam sel, termasuk interaksi DNA, RNA,
dan sintesis protein, dan bagaimana interaksi tersebut diatur. Bidang ini bertumpang tindih dengan
bidang biologi (dan kimia) lainnya, terutama genetika dan biokimia.
Keterkaitan dengan ilmu hayati "skala-molekul" lainnya[sunting | sunting sumber]
Para peneliti biologi molekular menggunakan teknik-teknik khusus yang khas biologi molekular (lihat
subbab Teknik di bagian lain artikel), namun kini semakin memadukan teknik-teknik tersebut dengan teknik dan
gagasan-gagasan dari genetika dan biokimia. Tidak terdapat lagi garis tegas yang memisahkan disiplin-disiplin
ilmu ini seperti sebelumnya. Secara umum keterkaitan bidang-bidang tersebut dapat digambarkan sebagai
berikut:

Biokimia telaah zat-zat kimia dan proses-proses vital yang berlangsung pada makhluk hidup.

Genetika telaah atas efek perbedaan genetik pada makhluk hidup (misalnya telaah mengenai mutan).

Biologi molekular telaah dalam skala molekul atas proses replikasi, transkripsi, dan translasi bahan
genetik

Semakin banyak bidang biologi lainnya yang memfokuskan diri pada molekul, baik secara langsung
mempelajari interaksi molekular dalam bidang mereka sendiri seperti padabiologi sel dan biologi
perkembangan, maupun secara tidak langsung (misalnya dengan menggunakan teknik biologi molekular untuk
menyimpulkan ciri-ciri historis populasi atauspesies) seperti pada genetika populasi dan filogenetika.
Teknik biologi molekular[sunting | sunting sumber]
Kloning ekspresi[sunting | sunting sumber]
Salah satu teknik dasar biologi molekular adalah kloning ekspresi, yang digunakan misalnya untuk mempelajari
fungsi protein. Pada teknik ini, potongan DNA penyandi protein yang diinginkan ditransplantasikan ke suatu
plasmid (DNA sirkular yang biasanya ditemukan pada bakteri; dalam teknik ini, plasmid disebut sebagai vektor
ekspresi).

Plasmid yang telah mengandung potongan DNA yang diinginkan tersebut kemudian dapat disisipkan ke dalam
sel bakteri atau sel hewan. Penyisipan DNA ke dalam sel bakteri disebut transformasi, dan dapat dilakukan
dengan berbagai metode, termasuk elektroporasi, mikroinjeksi dan secara kimia. Penyisipan DNA ke dalam
sel eukaryota, misalnya sel hewan, disebut sebagai transfeksi, dan teknik transfeksi yang dapat dilakukan
termasuk transfeksi kalsium fosfat, transfeksi liposom, dan dengan reagen komersial. DNA dapat pula
dimasukkan ke dalam sel dengan menggunakan virus (disebut transduksi viral).
Setelah penyisipan ke dalam sel, protein yang disandi oleh potongan DNA tadi dapat diekspresikan oleh sel
bersangkutan. Berbagai jenis cara dapat digunakan untuk membantu ekspresi tersebut agar protein bersangkutan
didapatkan dalam jumlah besar, misalnya inducible promoter dan specific cell-signaling factor. Protein dalam
jumlah besar tersebut kemudian dapat diekstrak dari sel bakteri atau eukaryota tadi.
Polymerase chain reaction (PCR)[sunting | sunting sumber]
Artikel utama untuk bagian ini adalah: Reaksi berantai polimerase
Polymerase chain reaction ("reaksi [be]rantai polimerase", PCR) merupakan teknik yang sangat berguna dalam
membuat salinan DNA. PCR memungkinkan sejumlah kecil sekuens DNA tertentu disalin (jutaan kali) untuk
diperbanyak (sehingga dapat dianalisis), atau dimodifikasi secara tertentu. Sebagai contoh, PCR dapat
digunakan untuk menambahkan situs enzim restriksi, atau untuk memutasikan (mengubah) basa tertentu pada
DNA. PCR juga dapat digunakan untuk mendeteksi keberadaan sekuens DNA tertentu dalam sampel.
PCR memanfaatkan enzim DNA polimerase yang secara alami memang berperan dalam perbanyakan DNA
pada proses replikasi. Namun, tidak seperti pada organisme hidup, proses PCR hanya dapat menyalin fragmen
pendek DNA, biasanya sampai dengan 10 kb (kb=kilo base pairs=1.000 pasang basa). Fragmen tersebut dapat
berupa suatu gentunggal, atau hanya bagian dari suatu gen.
Proses PCR untuk memperbanyak DNA melibatkan serangkaian siklus temperatur yang berulang dan masingmasing siklus terdiri atas tiga tahapan. Tahapan yang pertama adalah denaturasi cetakan DNA (DNA template)
pada temperatur 94-96 C, yaitu pemisahan utas ganda DNA menjadi dua utas tunggal. Sesudah itu, dilakukan
penurunan temperatur pada tahap kedua sampai 45-60 C yang memungkinkan terjadinya penempelan
(annealing) atau hibridisasi antara oligonukleotida primer dengan utas tunggal cetakan DNA. Primer merupakan
oligonukelotida utas tunggal yang sekuens-nya dirancang komplementer dengan ujung fragmen DNA yang
ingin disalin; primer menentukan awal dan akhir daerah yang hendak disalin. Tahap yang terakhir adalah tahap
ekstensi atau elongasi (elongation), yaitu pemanjangan primer menjadi suatu utas DNA baru oleh enzimDNA
polimerase. Temperatur pada tahap ini bergantung pada jenis DNA polimerase yang digunakan. Pada akhirnya,
satu siklus PCR akan menggandakan jumlah molekulcetakan DNA atau DNA target, sebab setiap utas baru yang
disintesis akan berperan sebagai cetakan pada siklus selanjutnya.
Elektroforesis gel[sunting | sunting sumber]
Artikel utama untuk bagian ini adalah: Elektroforesis
Elektroforesis gel merupakan salah satu teknik utama dalam biologi molekular. Prinsip dasar teknik ini adalah
bahwa DNA, RNA, atau protein dapat dipisahkan oleh medan listrik. Dalam hal ini, molekul-molekul tersebut
dipisahkan berdasarkan laju perpindahannya oleh gaya gerak listrik di dalam matriks gel. Laju perpindahan
tersebut bergantung pada ukuran molekul bersangkutan. Elektroforesis gel biasanya dilakukan untuk tujuan
analisis, namun dapat pula digunakan sebagai teknik preparatif untuk memurnikan molekul sebelum digunakan

dalam metode-metode lain seperti spektrometri massa, PCR, kloning, sekuensing DNA, atau immunoblotting yang merupakan metode-metode karakterisasi lebih lanjut.
Gel yang digunakan biasanya merupakan polimer bertautan silang (crosslinked) yang porositasnya dapat diatur
sesuai dengan kebutuhan. Untuk memisahkan protein atau asam nukleat berukuran kecil (DNA, RNA,
atau oligonukleotida), gel yang digunakan biasanya merupakan gel poliakrilamida, dibuat dengan konsentrasi
berbeda-beda antara akrilamidadan zat yang memungkinkan pertautan silang (cross-linker), menghasilkan
jaringan poliakrilamida dengan ukuran rongga berbeda-beda. Untuk memisahkan asam nukleat yang lebih besar
(lebih besar dari beberapa ratus basa), gel yang digunakan adalah agarosa (dari ekstrak rumput laut) yang sudah
dimurnikan.
Dalam proses elektroforesis, sampel molekul ditempatkan ke dalam sumur (well) pada gel yang ditempatkan di
dalam larutan penyangga, dan listrik dialirkan kepadanya. Molekul-molekul sampel tersebut akan bergerak di
dalam matriks gel ke arah salah satu kutub listrik sesuai dengan muatannya. Dalam hal asam nukleat, arah
pergerakan adalah menujuelektrode positif, disebabkan oleh muatan negatif alami pada rangka gula-fosfat yang
dimilikinya. Untuk menjaga agar laju perpindahan asam nukleat benar-benar hanya berdasarkan ukuran (yaitu
panjangnya), zat seperti natrium hidroksida atau formamida digunakan untuk menjaga agar asam nukleat
berbentuk lurus. Sementara itu, protein didenaturasi dengan deterjen (misalnya natrium dodesil sulfat, SDS)
untuk membuat protein tersebut berbentuk lurus dan bermuatan negatif.
Setelah proses elektroforesis selesai, dilakukan proses pewarnaan (staining) agar molekul sampel yang telah
terpisah dapat dilihat. Etidium bromida, perak, atau pewarna "biru Coomassie" (Coomassie blue) dapat
digunakan untuk keperluan ini. Jika molekul sampel berpendar dalam sinar ultraviolet (misalnya setelah
"diwarnai" dengan etidium bromida), gel difoto di bawah sinar ultraviolet. Jika molekul sampel mengandung
atom radioaktif, autoradiogram gel tersebut dibuat.
Pita-pita (band) pada lajur-lajur (lane) yang berbeda pada gel akan tampak setelah proses pewarnaan; satu lajur
merupakan arah pergerakan sampel dari "sumur" gel. Pita-pita yang berjarak sama dari sumur gel pada akhir
elektroforesis mengandung molekul-molekul yang bergerak di dalam gel selama elektroforesis dengan
kecepatan yang sama, yang biasanya berarti bahwa molekul-molekul tersebut berukuran sama. "Marka"
atau penanda (marker) yang merupakan campuran molekul dengan ukuran berbeda-beda dapat digunakan untuk
menentukan ukuran molekul dalam pita sampel dengan meng-elektroforesis marka tersebut pada lajur di gel
yang paralel dengan sampel. Pita-pita pada lajur marka tersebut dapat dibandingkan dengan pita sampel untuk
menentukan ukurannya. Jarak pita dari sumur gel berbanding terbalik terhadap logaritma ukuran molekul.