PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Spektrofotometri merupakan salah satu cabang analisis instrumental yang
mempelajari interaksi anatara atom atau molekul dengan radiasi elektromagnetik.
Interaksi antara atom atau molekul dengan radiasi elektromagnetik dapat berupa
hamburan (scattering), absorpsi (absorption), emisi (emission). Interaksi antara
radiasi elektromagnetik dengan atom atau molekul yang berupa absorbsi melahirkan
spektrofotometri
absorpsi
antara
lain
spektrofotometri
ultraviolet
(UV),
B. Tujuan
Menentukan konsentrasi suatu sampel (bahan alam penghasil pigment) dengan
menggunakan spektrofotometri UV-Visible.
II.
TINJAUAN PUSTAKA
ada, konsentrasi dan tebal atau panjang larutan tersebut. Makin tinggi konsentrasi
suatu senyawa dalam larutan, makin banyak sinar yang diserap.
dengan
spektrofotometri
visible,
pada
spektrofotometri
proton dan satu neutron, sementara hidrogen hanya memiliki satu proton dan tidak
memiliki neutrron. Nama deuterium diambil dari bahasa Yunani, deuteras yang berarti
dua, mengacu pada intinya yang memiliki 2 partikel. Karena sinar UV tidak dapat
dideteksi dengan mata kita maka senyawa yang dapat menyerap sinar ini terkadang
merupakan senyawa yang tidak memiliki warna, bening dan transparan. Oleh karena
itu, sampel tidak berwarna tidak perlu dibuat berwarna dengan penambahan reagen
tertentu. Bahkan sampel dapat langsung dianalisa meskipun tanpa preparasi. Namun
perlu diingat, sampel keruh tetap harus dibuat jernih dengan filtrasi atau sentifungi.
Prinsip dasar pada spektrofotometri adalah sampel harus jernih dan larut sempurna.
Tidak ada partikel koloid/ suspensi.
3. Spektrofotometri UV-Vis
Merupakan alat dengan teknik spektrofotometer pada daerah ultra-violet dan
sinar tampak. Alat ini digunakan mengukur serapan sinar ultra violet atau sinar
tampak oleh suatu materi dalam bentuk larutan. Konsentrasi larutan yang dianalisis
sebanding dengan jumlah sinar yang diserap oleh zat yang terdapat dalam larutan
tersebut. Dalam hal ini, hukum Lamber beer dapat menyatakan hubungan antara
serapan cahaya dengan konsentrasi zat dalam larutan. Dibawah ini adalah persamaan
Lamber beer:
A = - log T
Dimana
= .b.c
A = Absorbans
T = Transmitan
= absorvitas molar (Lcm-4 . mol-1)
c = panjang sel (cm)
b = konsentrasi zat (mol/jam)
Pada spektrofotometer UV-Vis, warna yang diserap oleh suatu senyawa atau
unsur adalah warna komplementer dari warna yang teramati. Hal tersebut dapat
diketahui dari larutan berwarna yang memiliki serapan maksimum pada warna
dekat,
inframerah
pertengahan
dan
jauh.
Inframerah
pada
Panjang Gelombang
Penadahan
Satuan umum
y
Frekwensi, Hz
Meter
-12
10
10
Gelombang
cm-1
-8
20
10 10
16
Sinar X
Ultra ungu
10 10
jauh
Ultra ungu
10 200 nm
10-2 2x10-7
1016 1015
dekat
Sinar
200 400 nm
2x10-7 4,0x10-7
1015 7,5x10-4
tampak
Inframerah
400 750 nm
4,0x10-7 7,5x10-7
7,5x1014 4x1014
13000
13000
dekat
Inframerah
0,75 2,5 m
7,5x10-7 2,5x10-6
4x1014 1,2x1014
4000
n
Inframerah
2,5 50 m
2,5x10-6 5,0x10-5
1,2x1014 6x1012
4000 200
jauh
Geombang
50 1000 m
5,0x10-5 1x10-3
6x1012 1011
200 10
mikro
Gelombang
0,1 100 cm
1x10-3 1
104 108
10 10-2
radio
1 1000 m
1 - 103
108 - 105
25000
pertengaha
dalam bentuk murni. Karena bila tidak, gangguan dari gugus fungsi kontaminan akan
mengganggu signal kurva yang diperoleh (Day dan Underwood, 1986).
Terdapat juga satu jenis spektrofotometri IR lainnya yang berdasar pada
penyerapan
sinar
IR
pendek.
Spektrofotometri
disebut
Near
Infrared
Spectrogotometry (NIR). Aplikasi NIR banyak digunakan pada industri pakan dan
pangan guna menganalisa BB yang rutin dan cepat.
Pada praktikum ini, dilakukan percobaan karakterisasi bahan alam, yaitu buah
leunca, wortel, dan daun ketapang yang ketiganya merupakan penghasil pigmen.
Karakterisasi dilakukan dengan teknik spektrofometri uv-visible.
A. Buah Leunca
Buah leunca atau yang sering disebut buah ranti pada bagian buah, daun dan
kulit batang ranti (Solanum nigrum Linn) mengandung saponin dan tannin, disamping
itu buahnya juga mengandung alkaloid dan daunnya mengandung flavonoid (Depkes
RI, 1999).
Ranti juga mengandung mineral kalsium, fosfor, besi, vitamin A, vitamin C
(Hernani dan Rahardjo, 2005) Buah ranti berkhasiat sebagai obat penurun tekanan
darah tinggi, obat sembelit dan untuk peluruh air seni (Depkes RI, 1994). Ranti juga
berguna sebagai obat penurun panas, antiradang, antiracun, peluruh dahak, pereda
batuk, Universitas Sumatera Utara kanker mulut rahim, kanker payudara, lever dan
lambung (Hernani dan Rahardjo, 2005).
B. Wortel
Wortel merupakan tanaman jenis umbi-umbian yang tumbuh dengan baik di
dataran tinggi beriklim dingin. Wortel menghasilkan umbi berwarna orange dan
terasa agak manis. Warna orange tersebut diakibatkan oleh pigmen karotenoid
yang dikandungnya.
berarti wortel, yaitu pigmen warna kuning dan orange pada buah dan sayur
(Kumalaningsih 2006).
Karotenoid merupakan pigmen alami yang berwarna kuning sampai
merah,
ditemukan
pada
tanaman, ganggang,
hewan
vertebrata
dan
III.
METODE
vishible
Kuvet
Tabung reaksi
Rak tabung reaksi
Botol semprot
Tissue
7.
1.
2.
3.
4.
Pipet ukur
Bahan
Daun ketapang
Buah leunca
Wortel
Air
B. Prosedur Kerja
I.
Pengenceran Bahan
II.
IV.
A. Hasil
1. Daun ketapang
4,000 A
1,000/ Div
2. Wortel
4,000AA
0,000
200,0 nm
(50 / div)
400,0 nm
(50 / div)
400,0 nm
1,000/ Div
0,000 A
200,0 nm
4,000 A
3. Buah Leunca
1,000/ Div
0,000 A
200,0 nm
(50 / div)
400,0 nm
No
Sampel
1
Buah Leunca
2
Daun Ketapang
3
Wortel
Keterangan
3
1) Pengenceran pada buah leunca adalah 10
3
2) Pengenceran pada daun ketapang adalah 10
3
3) Pengenceran pada wortel adalah 10
Absorbansi
0,455
0,817
0,097
B. Pembahasan
Spektrofotometri adalah suatu metode analisa yang didasarkan pada
pengukuran serapan sinar monokromatis oleh suatu lajur larutan berwarna
pada panjang gelombang spesifik dengan menggunakan monokromator
plasma atau kisi difraksi dengan fototube atau foton hampa. Spektrofotometer
merupakan gabungan dari alat optik dan elektronik, serta sifat-sifat kimia
fisiknya dimana detektor yang digunakan secara langsung dapat mengukur
intensitas dari cahaya
cahaya
yang
diabsorbsikan
(o),
jadi
tergamtung
pada
spektrum
103 . Sehingga
103 . Setelah di
telah
dikalibrasi
dan
spektrofotometri
telah
dinyalakan.
dengan
menggunakan
wortel
dimulai
dengan
sampel yang berada pada tabung reaksi diambil dan di masukan kedalam
kuvet hingga batas yang terdapat pada kuvet. Namun sebelum
dimasukkan larutan tersebut kedalam kuvet, kuvet harus dalam posisi
telah dikalibrasi dan spektrofotometri telah dinyalakan. Selanjutnya
proses scanning dilakukan pada mede photometric dari 200nm-400nm
dan kurva yang terbentuk dapat difoto maupun dicetak untuk
menentukan panjang gelombang maksimal. Pada percobaan dengan
menggunakan wortel panjang gelombang maksimal yang terbentuk
adalah 213,10 nm dan absorbansi terbesar 0,097.
V.
PENUTUP
A. Kesimpulan
1. Spektrofotometri adalah suatu metode analisis yang berdasarkan pada
pengukuran serapan sinar monokromatis oleh suatu lajur larutan berwarna
pada
panjang
gelombang
yang
spesifik
dengan
menggunakan
DAFTAR PUSTAKA
CheeMun, F. 2003. Ketapang (Cattapa) leaves-black water : Understanding black
water. INBS Forum Index. Http://www.joyabetta.com/. Kunjungan :Senin, 15
Juni 2015, 3:58:28 PM
Delia, Kimura M. 2004. Harvest Plus Hand book for Carotenoid Analysis 2nd
edition. Washington: Harvest Plus Technical Monograph.
Hardhiko, R.S., A.G. Suganda, dan E.Y. Sukandar. 2004. Aktivita santi mikroba
ekstrak etanol, ekstrak air daun yang dipetik dan daun gugur pohon ketapang
(Termin alia cattapaL.). Acta Pharmaceutica Indonesia. XXIX, 129-133.
Hardjadi. 1990. Ilmu Kima Analitik Dasar.Jakarta: PT Gramedia.
Khopkar. 2002. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: Universitas Indonesia.
Khopkar. 2003. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: Universitas Indonesia
Kumalaningsih S. 2006. Anti oksidan alami. Surabaya: TrubusAgrisana.
Linder MC. 1991.
Nutritional Biochemistry and Metabolism with Clinical
Applications. Ed 2nd. California: Pretice-Hall International Inc.
Nishigaki, Waspodo IS. 2007.
Jakarta: Cindy Printing.
LAMPIRAN