L-aparaginase disiapkan dengan liposom dengan metode hidrasi lapis tipis (Morris et al, 1978).

Secara cepat , bahan tambahan hidrofobik seperti lesitin kedelai, kolesterol dan penstabil (dicetyl
fosfat dan sterilamin) dilarutkan dalam kloroform dan diaduk sevara mekanik hingga membentuk
campuran homogeny dan campuran tersebut kemudian dikeringkan dalam labu rotary evaporator
(Superfit, India) dibawah kondisi vakum (25 mmHg) dengan temperature 25oC. Lapisan film
tipis yang terbentuk kemudian dibilas dengan gas nitrogen selama 5 menit dan dijaga dibawah
kondisi vakum untuk menghilangkan sisa kloroform. Lapisan film tipis kemudian disuspensikan
dalam 50 ml normal salin yang mengandung L-Asparaginase dan diputar tanpa vakum dengan
kecepatan 100 rpm, untuk mendapatkan suspensi liposom homogeny. Kemudian suspensi
liposom dilewatkan melalui saringan berpori (0.45 m) dibwah gas nitrogen selama 5 menit. Lasparaginase yang tidak terjerap kemudian dihilangkan dari dispersi liposom dengan sentrifugasi
pada 10000 rpm selama 30 menit dan supernatant disisihkan dan pellet liposom dicuci dua kali
dengan salin normal. Konsentrat liposom kemudian di freez dried (Christ, Jerman). Bubuk
liposom akhir kemudian disimpan dalam wadah tertutup rapat pada suhu 4oC untuk penelitian
lebih lanjut.

Evaluasi fisik dan kimia dari liposom

Ukuran partikel, morfologi permukaan dan zeta potensial liposom
Ukuran partikel rata-rata dan distribusi ukuran partikel dari formulasi liposom ditentukan dengan
zeta-sizer after re-suspending dan dilusi dari liposom beku dalam air suling. Distribusi ukuran
partikel dianalisis atau diproses dengan system pemeriksaan terkomputerisasi. Data secara
otomatis dianalisa Light scattering system spectroscopy (LCSS) menggunakan Beckman Coulter
DELAS Nano-C Nano Particle size Analyzer dengan penentuan Zeta potensial menggunakan
metode FST-Forward Scattering melalui elektroda transparan.
Morfologi permukaan dari liposom L-asparaginase ditentukan dengan SEM (Scanning Electron
Microscopy) (Geol,Japan). Sampel liposom diperiksa pada lempeng logam dan dilapisi dengan
emas pada ketebalan 200-500 A. kemudian lempeng diperbesar 200 kali untuk mengambil
gambar morfologi dari sediaan liposom.