CHROMATOGRAPHY
AND
THIN LAYER
CHROMATOGRAPH
Y
KROMATOGRAFI KERTAS :
Kromatografi yang paling sederhana,
mudah dan murah.
Kegunaan : identifikasi kualitatif
analisis kuantitatif
Fasa diam : air yang terikat pada
selulosa kertas
Fasa gerak: pelarut organik non polar
PROSES PENGEMBANGAN
PC
Fasa gerak merembes ke dalam
kertas karena efek kapiler
Rembesan fasa gerak dapat
dilakukan dengan 2 teknik yaitu :
a. Ascending (teknik menaik)
b. Descending (teknik menurun)
Proses Pemisahan pada PC
terdiri dari 3 tahap :
1. Penotolan sampel/cuplikan
2. Pengembangan
3. Identifikasi
TAHAP PENOTOLAN
CUPLIKAN
Siapkan kertas kromatografi dengan
ukuran tertentu.
Buat garis awal dengan jarak 2 – 3 cm
dengan salah satu ujung kertas
menggunakan pensil.
Totolkan cuplikan dengan
menggunakan mikropipet atau pipa
kapiler pada garis awal tadi lalu
keingkan.
TAHAP PENEGEMBANGAN
Ujung kertas yang telah berisi totolan
cuplikan dicelupkan ke dalam eluen
dalam bejana.
Eluen dibiarkan merembes melewati
totolan cuplikan.
Hasil pemisahan akan nampak
sebagai noda berwarna pada kertas
dengan jarak yang berbeda-beda dari
garis awal.
Perembesan eluen dihentikan setelah
eluen hampir mencapai ujung kertas.
Kertas diangkat dan diberi tanda
batas eluen lalu dikeringkan.
TAHAP IDENTIFIKASI
Jika noda sudah berwarna dapat langsung
diperiksa dan ditentukan Rf nya.
Bila noda tidak berwarna maka
penampakan noda dapat dilakukan
dengan :
- menyemprot kertas dengan
pereaksi penimbul warna
- menyinari kertas dengan sinar UV
- mendedahkan kertas pada uap
iodium
THIN LAYER
CHROMATOGRAPHY (TLC)
Pelaksanaan TLC menggunakan
sebuah lapis tipis silika atau alumina
yang seragam pada sebuah lempeng
gelas atau logam.
Fasa diam : Silika gel atau alumina.
Fasa gerak : Eluen atau campuran
eluen yang sesuai.