LEMBAR KERJA PRAKTIKUM

PEMERIKSAAN SEROLOGI
Tujuan pemeriksaan Widal : mengetahui adanya antibodi spesifik terhadap bakteri Salmonella

TUJUAN PRAKTIKUM :
 Memahami cara pemeriksaan Widal
 Memahami cara interprestasi hasil pemeriksaan Widal

DASAR TEORI :

ALAT DAN BAHAN

 Bahan pemeriksaan : serum
 Tabung reaksi : 10
 Pipet volume
 Mikropipet
 Slide
 NaCl 0,9%
 Water bath
 Kit pemeriksaan Widal / Micropath antigens (Omega diagnostics)
CARA KERJA

RAPID SLIDE TEST

 Siapkan slide yang diberi 3 lingkaran
 Dengan mikropipet masukkan serum ke dalam masing-masing lingkaran dengan volume
berturut-turut : 80 ul, 40 ul, dan 20 ul
 Tambahkan ke dalam masing-masing serum 1 tetes antigen (pengenceran 1:20, 1:40, dan
1:80)
 Campurkan dengan cara digoyang-goyangkan selama 1 menit
 Perhatikan aglutinasi yang terjadi. Setiap sampel yang menunjukkan aglutinasi sebaiknya
dikonfirmasi dengan Tube Aglutination Test

TUBE AGLUTINATION TEST

 Siapkan 10 tabung reaksi dan susunlah dalam 1 rak. Beri nomor 1 –10
 Dengan pipet masukkan 1,9 ml NaCl pada tabung 1
 Dengan pipet masukkan 1 ml NaCl pada masing-masing tabung 2-10
 Masukkan 0,1 ml serum pada tabung 1 dan campur hingga homogen
 Ambil 1 ml campuran tabung 1 dan masukkan tabung 2. Tabung 2 dicampur hingga
homogen, dan ambil 1 ml untuk dimasukkan tabung 3 , dan seterusnya hingga tabung 9
 Ambil 1 ml larutan pada tabung 9 dan dibuang
 Tambahkan setiap tabung 1 tetes antigen. Dengan demikian didapatkan pengenceran pada
tabung 1 – 9 berturut-turut : 1/20, 1/40, 1/80, 1/160, 1/320, 1/640, 1/1280, 1/2560.
 Tabung 10 hanya berisi NaCl dan antigen, serta berfungsi sebagai kontrol
 Campur larutan hingga homogen dan inkubasikan sebagai berikut :
- Titrasi O : 50o C selama 4 jam
- Titrasi H : 50o C selama 2 jam
 Pada kontrol antigen harus tidak terdapat aglutinasi
 Hasil : Adanya aglutinasi menunjukkan adanya antibody

1 2 3 4 5 6 7 8
 INPRESTASI HASIL
 Titer O yang tinggi (> : 160) atau kenaikan titer menunjukkan infeksi aktif
 Titer H yang tinggi (> : 160) menunjukkan pernah divaksinasi/pernah terinfeksi

HASIL
RAPID SLIDE TEST

TUBE AGLUTINATION TEST

1 2 3 4 5 6 7 8

PEMBAHASAN
KESIMPULAN

Yogyakarta, …………200…
Mengetahui
Assisten/Dosen Praktikan

( ) ( )