LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI STERILISASI PERALATAN DAN BAHAN PRAKTIKUM Disusun sebagai salah satu syarat untuk memenuhi

tugas Laporan Praktikum mata kuliah Mikrobiologi semester ganji

Disusun oleh : Kelompok 8 A Ri!"i De#m"$"n Lu*h!+ ,ul"n-"#i Th"h" ."sin Bi#*" B"#un" A0k" I12"l Kenn+ P#"mu-+" In-" An-i"ni Resp"n-u 4ul!"5h#i Muh"mm"- Ri0ki M %&'(('(%'')( %&'(('(%'')% %&'(('(%'')& %&'(('(%'')/ %&'(('(%'')) %&'(('(%'')3 %&'(('(%'')8 %&'(('(%'')6 %&'(('(%''3'

Ahm"- Ri01i Ru2i"ns+"h %&'(('(%''3% E!#"n A-0i Solih"* Ani*" Nu# A0i0"h D P %&'(('(%''3& %&'(('(%''3/

UNI7ERSITAS PAD8AD8ARAN 9AKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN PROGRAM STUDI PERIKANAN 8ATINANGOR %'(&

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kami panjatkan kehadirat Allah SWT karena dengan rahmat dan karunia-Nya saya dapat menyelesaikan laporan Akhir Praktikum Pengenalan Peralatan yang merupakan bagian dari tugas Mata !uliah Mikrobiologi Perikanan" Saya mengu#apkan terima kasih kepada Dosen mata kuliah Mikrobiologi Perikanan$ yang telah membantu dan membimbing kami selama penyusunan Laporan Akhir Praktikum ini" Tidak lupa teman-teman dan semua pihak yang ikut berpartisipasi dalam menyelesaikan tugas makalah ini" Dalam penulisan laporan akhir ini mungkin masih terdapat banyak kesalahan$ oleh karena itu kritik dan saran sangat diperlukan untuk memperbaiki kesalahan agar dapat lebih baik lagi kedepannya" Saya berharap semoga makalah ini dapat berguna bagi semua #i%itas akademika yang membutuhkannya"

&atinangor$ ' No%ember 2()*

Penulis

DA9TAR ISI

!ATA P+N,ANTA-""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""i DA.TA- /S/""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""ii 0A0 /""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""") P+NDA12L2AN""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""")

1.1 Latar Belakang.............................................................................. 1 1.2 Tujuan Praktikum..........................................................................2

0A0 //""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""* T/N&A2AN P2STA!A""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""*

2.1 Definisi Umum Sterilisasi..............................................................3 2.2 Jenis-jenis Sterilisasi......................................................................3

0A0 ///""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""' M+T3D+L3,/ P-A!T/!2M"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""'

3.1. Waktu dan Tempat Pelaksanaan Praktikum................................. 3.2. !lat dan Ba"an............................................................................. 3.2.1 !lat......................................................................................... 3.2.2 Ba"an...................................................................................... 3.3 Pr#sedur kerja............................................................................... $ 3.3.1 Sterilisasi %enggunakan &'en................................................$ 3.3.2 Sterilisasi %enggunakan Lampu Bunsen.................................$ 3.3.3 Sterilisasi %enggunakan !lk#"#l.............................................(

0A0 /4""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""5 1AS/L DAN P+M0A1ASAN""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""5

).1 *asil.............................................................................................. + ).2 Pem,a"asan............................................................................... 1

0A0 4"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""")' P+NDALAMAN"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""")' 0A0 4/"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""")6 !+S/MP2LAN DAN SA-AN"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""")6

ii

.1. -esimpulan................................................................................ 1$ .2. Saran.......................................................................................... 1(

DA.TA- P2STA!A"""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""")5 LAMP/-AN""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""")7

iii

BAB I PENDAHULUAN

(:( L"*"# Bel"k"n; 2ntuk mempelajari mikroorganisme dalam kultur$ maka para mikrobiolog memerlukan alat-alat yang menunjang dalam usaha mendapatkan kultur murni" Dalam mikrobiologi$ peralatan laboratorium merupakan unsur penting yang harus ada" Peralatan yang ada dalam laboratorium pun haruslah steril agar dapat menunjang pekerjaan yang berhubungan dengan mikroorganisme dan hal tersebut merupakan syarat mutlak" Artinya$ pada bahan atau peralatan yang akan digunakan harus bebeas dari mikroorganisme yang tidak diingikan yang dapat merusak media atau koloni suatu mikroorganisme yang diinginkan" Adapun peralatan yang umumnya digunakan di dalam laboratorium mikrobiologi antara lain 8 Media yaitu9 #air$ semi solid$ solid :agak miring :siant;$ agak tegak :deep;$ agak #a<an:plate;; dan peralatan yaitu9 autokla=$ tabung kultur$ #a<an petri$ jarum inokulasi$ pipet$ <aterbath$ inkubator$ dan lemari pendingin" Steril merupakan syarat mutlak keberhasilan kerja dalam lab mikrobiologi" Dalam melakukan sterilisasi$ diperlukan teknik-teknik agar sterilisasi dapat dilakukan se#ar sempurna$ dalam arti tidak ada mikroorganisme lain yang mengkontaminasi media" Sterilisasi adalah proses untuk menjadikan alat-alat terbebas dari segala bentuk kehidupan" Seperti yang telah disebutkan bah<a tujuan sterilisasi untuk mematikan mikroorganisme yang tidak diinginkan agar tidak ikut tumbuh" Ada beberapa teknik sterilisasi$ yaitu dengan #ara =isik dengan panas$ mekanik dengan =iltrasi dan kimia dengan senya<a-senya<a kimia" Dalam praktikum ini kami men#oba mempelajari bagaimana #ara mensterilisasi alat > alat yang nantinya dipakai untuk bekerja di dalam laboratorium mikrobiologi" !ami men#oba untuk melakukan sterilisasi guna bekal untuk keberhasilan dalam menumbuhkan suatu biakan koloni mikroorganisme yang diinginkan dengan berhasil"

(:%

Tu<u"n P#"k*ikum Dapat memahami dan memiliki kemampuan untuk melakukan proses

sterilisasi$ baik terhadap bahan atau peralatan yang akan digunakan untuk menangani mikroba"

BAB II TIN8AUAN PUSTAKA

%:( De!inisi Umum S*e#ilis"si Sterilisasi adalah pemusnahan atau eliminasi semua mikroorganisme$ termasuk spora bakteri$ yang sangat resisten" Sterilisasi adalah proses penghilangan semua jenis organisme hidup$dalam hal ini adalah mikroorganisme :proto?oa$ =ungi$ bakteri$ my#oplasma$%irus; yang terdapat dalam suatu benda" Proses ini melibatkan aplikasi bio#idal agent atau proses =isik dengan tujuan untuk membunuh atau menghilangkanmikroorganisme" Sterilisasi didesain untuk membunuh atau menghilangkan mikroorganisme" Target suatu metode inakti%asi tergantung dari metode dan tipemikroorganisme yaitu tergantung dari asam nukleat$ protein atau membranmikroorganisme tersebut" Agen kimia untuk sterilisasi disebut sterilant" Sterilisasi merupakan syarat utama untuk men#apai keberhasilan kerja dalam laboraturium mikrobiologi" Andaikata medium dan alat-alat yang kita pergunakan dalam inokulasi itu tidak steril$ maka kita akan memperoleh piaraan bakteri yang tidak kita inginkan" Maka langkah-langkah pertama yang harus kita ambil sebelum kita mengadakan inokulasi ialah mengusahakan sterilnya medium serta alat-alat perlengkapannya"

%:% 8enis <enis S*e#ilis"si Pada umumnya proses sterilisasi dapat dilakukan se#ara kering dan basah sesuai dengan jenis bahan yang akan disterilisasi" 2ntuk peralatan yang terbuat dari logam dan gelas tahan panas dapat dilakukan sterilisasi kering" 0ahan yang tidak tahan panas$ seperti media kaldu dan media agar$ proses sterilisasinya dilakukan se#ara basah" 0ahan berbentuk #air seperti larutan gula$ garam =os=at$ ammonium$ trace metal$ %itamin$ dapat disterilisasi menggunakan pemanasan dan penyaringan" Sterilisasi kering dilakukan dengan menggunakan api atau o%en"

Proses sterilisasi kering menggunakan api berlangsung dalam sangat singkat" Suhu api yang tinggi dapat membunuh mikroba pen#emar dalam <aktu singkat" Salah satu #ontoh proses sterilisasi menggunakan api adalah sterilisasi ose se<aktu akan digunakan untuk memindahkan mikroba" @ontoh lainnya adalah sterilisasi tabung reaksi$ labu +rlenmeyer atau #a<an petri se<aktu akan mengambil dan menginokulasi mikroba" Pada prinsipnya$ penggunaan o%en untuk sterilisasi dilakukan dengan menggunakan udara panas untuk membunuh mikroba" 2dara panas ini dihasilkan oleh sumber panas berupa api atau arus listrik yang memanaskan elemen pemanas" 3%en digunakan untuk proses sterilisasi peralatan yang terbuat dari logam atau gelas tahan panas"

BAB III METODELOGI PRAKTIKUM

&:(: ,"k*u -"n Temp"* Pel"ks"n""n P#"k*ikum Praktikum ini dilaksanakan pada 8 1ari B Tanggal 8 -abu B *( 3ktober 2()* Tempat 8 Laboratorium Teknologi /ndustri 1asil Perikanan .P/!$ 2ni%ersitas Padjajaran &:%: Al"* -"n B"h"n &:%:( Al"* Adapun peralatan utama yang dibutuhkan dalam proses sterilisasi peralatan dan bahan antara lain adalah 8 a" Peralatan gelas$ seperti tabung reaksi$ #a<an petri$ gelas ukur$ pipet hisap$ labu +rlenmeyer$ gelas beker" b" Peralatan logam$ seperti ose dan pinset #" 3%en listrik d" Waterbath e" !ompor gas atau lampu spirtus =" 0enang kasur &:%:% B"h"n 0ahan utama yang digunakan dalam proses sterilisasi peralatan dan bahan antara lain adalah 8 a" Media kaldu

'

b" Media agar #" !ertas penyaring d" !ertas #oklat"

&:& P#ose-u# ke#<" &:&:( S*e#ilis"si Men;;un"k"n O=en a" @u#i bersih peralatan gelas dan logam menggunakan air bersih yang mengalir" Pergunakan sabun dan sikat halus untuk menghilangkan noda" Tiriskan peralatan yang sudah di#u#i bersih sampai semua air menguap dan peralatan menjadi kering" b" 0ungkus peralatan gelas dan logam yang telah ditiriskan menggunakan kertas #oklat" Pembungkusan harus dilakukan se#ara benar$ sehingga dapat membedakan mana #a<an petri yang bagian tutup :atas; atau alas :ba<ah;" Pembungkusan juga harus dilakukan sedemikian rupa sehingga pembungkus tetap mudah dibuka pada saat akan digunakan" #" Sebelum dilakukan pembungkusan menggunakan kertas #oklat$ #airan yang mungkin masih ada pada bagian mulut pipet hisap harus dikeringkan menggunakan gumpalan kapas" d" Susun peralatan yang telah dikemas ke dalam o%en" Panaskan o%en hingga suhunya men#apai )2) o@ dan lakukan proses sterilisasi selama 2( menit" Selanjutnya matikan o%en" e" Setelah dingin$ pindah peralatan tersebut ke <adah yang telah disediakan dalam keadaan tetap terbungkus"

&:&:% S*e#ilis"si Men;;un"k"n L"mpu Bunsen a" Nyalakan lampu 0unsen

b" Ambil ose yang akan disterilisasi #" Panaskan ujung ose hingga berpijar dan geser hingga semua bagian logam menjadi berpijar d" Dinginkan dengan #ara mengerak-gerakan ose diudara e" 3se siap digunakan

&:&:& S*e#ilis"si Men;;un"k"n Alkohol a" Siapkan gelas beker berisi alkohol b" Masukkan peralatan yang akan disterilisasi ke dalam alkohol #" 0ila akan digunakan$ peralatan diangin-anginkan hingga kering

BAB I7 HASIL DAN PEMBAHASAN

/:( H"sil H"sil S*e#ilis"si Pe#"l"*"n S*e#ilis"si P#insip S*e#ilis"si -"p"* -isimp"n l"m" Ke*e#"n;"n

Tabung -eaksi

Sebagai tempat menyimpan mikroba" Prinsip sterilisasi yaitu pipet di#u#i atau dibersihkan dengan airBaDuades lalu di bersihkanBdikeringkan dengan menggunakan tissuBlap $ dibungkus dengan menggunakan kertas #oklat$ dibungkus rapih dan dimasukan ke dalam o%en$agar tidak ada udara masuk"1al ini dilakukan agar tidak terjadi pertumbuhan mikroba$menghambat tumbuhnya mikroba di dalam tabung reaksi "

@a<an Petri

#a<an berbahan gelas atau plastik yang digunakan sebagai <adah media kultur dalam bentuk lempeng agar" Prinsip sterilisasi yaitu pipet di#u#i atau dibersihkan dengan

airBaDuades lalu di bersihkanBdikeringkan dengan menggunakan tissuBlap $ dibungkus dengan menggunakan kertas #oklat$ dibungkus rapih dan dimasukan ke dalam o%en$agar tidak ada udara masuk"1al ini dilakukan agar tidak terjadi pertumbuhan mikroba$ menghambat tumbuhnya mikroba di dalam #a<an petri "

,elas 2kur

Prinsip sterilisasi yaitu pipet di#u#i atau dibersihkan dengan airBaDuades lalu di bersihkanBdikeringkan dengan menggunakan tissuBlap $ dibungkus dengan menggunakan kertas #oklat$ dibungkus rapih dan dimasukan ke dalam o%en$agar tidak ada udara masuk"1al ini

)(

dilakukan agar tidak terjadi pertumbuhan mikroba$ menghambat tumbuhnya mikroba di dalam gelas ukur" Pipet 1isap pipet yang bekerja dengan #ara dihisap sehingga #airan akan memasuki pipet sebanyak yang diinginkan" Pipet hisap digunakan untuk memindahkan #airan dalam jumlah relati= lebih banyak " Prinsip sterilisasi yaitu pipet di#u#i atau dibersihkan dengan airBaDuades lalu di bersihkanBdikeringkan dengan menggunakan tissuBlap $ dibungkus dengan menggunakan kertas #oklat$ dibungkus rapih dan dimasukan ke dalam o%en$ agar tidak ada udara masuk"1al ini dilakukan agar tidak

))

terjadi pertumbuhan mikroba$ menghambat tumbuhnya mikroba di dalam pipet tetes"

Labu +rlenmyer

Prinsip sterilisasi yaitu pipet di#u#i atau dibersihkan dengan airBaDuades lalu di bersihkanBdikeringkan dengan menggunakan tissuBlap $ dibungkus dengan menggunakan kertas #oklat$ dibungkus rapih dan dimasukan ke dalam o%en$ agar tidak ada udara masuk"1al ini dilakukan agar tidak terjadi pertumbuhan mikroba$ menghambat tumbuhnya mikroba di dalam tabung erlenmeyer"

,elas 0eker

Prinsip sterilisasi yaitu ose di#u#i atau dibersihkan dengan

)2

airBaDuades lalu di bersihkanBdikeringkan menggunakan tissuBlap $ dibungkus dengan menggunakan kertas #oklat$ dibungkus rapih dan dimasukan ke dalam o%en$ agar tidak ada udara masuk"1al ini dilakukan agar tidak terjadi pertumbuhan mikroba$ menghambat tumbuhnya mikroba di dalam gelas beker" Pipet pipet yang memiliki alat penghisap berbahan karet dan digunakan untuk memindahkan #airan dalam jumlah ke#il" Prinsip sterilisasi yaitu pipet di#u#i atau dibersihkan dengan airBaDuades lalu di bersihkanBdikeringkan dengan menggunakan tissuBlap $ dibungkus dengan menggunakan

)*

kertas #oklat$ dibungkus rapih dan dimasukan ke dalam o%en$ hal ini dilakukan agar tidak terjadi pertumbuhan mikroba$ menghambat tumbuhnya mikroba di dalam pipet" 3se digunakan untuk mengambil mikroba yang akan diinkubasi$ diisolasi atau ditrans=er ke media kultur lain" Prinsip sterilisasi yaitu ose di#u#i atau dibersihkan dengan airBaDuades lalu di bersihkanBdikeringkan menggunakan tissuBlap $ dibungkus dengan menggunakan kertas #oklat$ dibungkus rapih dan dimasukan ke dalam o%en$ hal ini dilakukan agar tidak terjadi pertumbuhan

)A

mikroba$ menghambat tumbuhnya mikroba di dalam ose"

/:% Pem2"h"s"n Sterilisasi merupakan syarat utama untuk men#apai keberhasilan kerja dalam laboraturium mikrobiologi" Andaikata medium dan alat-alat yang kita pergunakan dalam inokulasi itu tidak steril$ maka kita akan memperoleh piaraan bakteri yang tidak kita inginkan" Maka langkah-langkah pertama yang harus kita ambil sebelum kita mengadakan inokulasi ialah mengusahakan sterilnya medium serta alat-alat perlengkapannya" Maka kami akan membahas beberapa metode sterilisasi yang di antara lain 8

BAB 7 PENDALAMAN
": Ap" *u<u"n u*"m" mem2un;kus pe#"l"*"n ;el"s men;;un"k"n ke#*"s 5okl"*> se2elum p#oses s*e#ilis"si -il"kuk"n? Agar aman ketika kita mengambil dari o%en yang panas" Lalu meminimalisir terjadinya kontaminasi dari lingkungan sekitar" 2: 8el"sk"n mek"nisme pen;;un""n o=en lis*#ik -"n $"*e#2"*h *e#h"-"p p#oses s*e#ilis"si +"n; *e#<"-i: a" 3%en dan <aterbath menggunakan aliran listrik yang mengubah aliran listrik menjadi panas b" Tekan tombol 3N lalu atur <aktu penggunaannya"

)'

#" d"

Atur suhu sekitar )2) derajat @el#ius" Atur <aktu pada suhu selama )2-2( menit setelah alat-alat dimasukkan

5: Men;"p" h"sil s*e#ilis"si "-" +"n; 2e#si!"* *"h"n l"m" @sepe#*i pipe*A "-" +"n; *i-"k @sepe#*i me-i" kul*u#A ? !arena ada mikroba yang tahan terhadap panas$ sehingga dapat hidup kembali <alaupun alat-alat telah disterilisasi" Proses sterilisasi pun berbeda-beda$ misalnya jika menggunakan alkohol sterilnya alat bersi=at sementara karena alkohol gampang menguap ke udara" -: Se2u*k"n -"n <el"sk"n me*o-e s*#e#ilis"si p"lin; *ep"* un*uk pe#"l"*"n +"n; *e#2u"* -"#i ;el"s? Dengan menggunakan metode sterilisasi kering" Sterilisasi kering dilakukan dengan api dan o%en" Sterilisasi kering dengan api dilakukan dengan membakar langung ujung-ujung peralatan diatas lampu bunsen" Sterilisasi kering dengan o%en dilakukan dengan panas untuk membunuh mikroba BAB 7I KESIMPULAN DAN SARAN

B:(: Kesimpul"n Dari praktikum yang telah dilakukan dapat diperoleh beberapa kesimpulan bah<a 8 )" Sterilisai alat-alat harus dilakukan sebelum memulai kegiatan praktikum 2" Sterilisasi alat dilakukan supaya alat-alat yang digunakan tidak terkontaminasi bakteri yang tidak diinginkan" *" 2ntuk bahan yang terbuat dari bahan glass akan lebih e=ekti= disterilisasi dengan sterilisasi kering

)6

B:%: S"#"n Penjelasan prosedur yang terdapat di modul agar lebih jelas dan tidak ada perubahan saat praktikum karena akan berpengaruh pada saat pelaksanaannya" Serta absen kelas dan pembagian kelompok segera di =iEasi" Agar tidak terdapat kesalahpahaman dan kebingungan dalam pengerjaan"

)C

DA9TAR PUSTAKA Pel#?ar$ Mi#hael &" dan +"@"S" @han" 2(('" Dasar-dasar Mikrobiologi Jilid 2" &akarta82/-Press" 4olk$ Wesley A" dan Margaret ." Wheeler" )77*" Mikrobiologi Dasar Jilid 1, Edisi Kelima" &akarta8 +rlangga Anonim" 2())" http8BBibn'sholih"blogspot"#omB2())B('B%beha%iorurlde=ault%mlo"html

)5

LAMPIRAN

,ambar ") kertas #oklat

,ambar" 2 mortar

,ambar"* spatula

,ambar"A gelas ukur

,ambar"' #a<an petri

)7

,ambar"6 gelas ukur

,ambar"5 jarum ose

,ambar"7 pinset

,ambar")( labu erlemeyer

,ambar")) benang kasur

,ambar")2 peralatan yang sudah dibungkus

2(

,ambar")* proses sterilisasi menggunakan o%en

,ambar")A pengaturan suhu dan <aktu sterilisasi

2)