TOPIK PERCOBAAN
Topik Percobaan : Reaksi Uji Asam Amino Dan Protein
II.
TUJUAN
Tujuan dari percobaan ini adalah :
1. Menganalisis unsur-unsur yang menyusun protein
2. Uji Biuret pada telur
NH2 C COOH
Efek pada gambar tersebut adalah efek zwitter (atau ionisasi ganda).
Dengan adanya ion ganda ini menyebabkan bereaksi dengan asam ataupun
basa. Terdapat 20 macam asam amino yang ditemukan dalam protein.
Berdasarkan gugus R-nya asam amino terdiri dari:
1. Asam Amino dengan gugus R-nya berupa hidrogen atau rantai karbon
yaitu glisin, alanin, valin, leusin, isoleusin dan fenilalanin
2. Asam Amino dengan gugus R-nya mengandung gugus hidroksil (-OH)
yaitu Serin, treonin, dan tirosin
gugus
karboksil
Nama
Glisin
Alanin
Valin
Leusin
Isoleusin
Serin
Threonin
Fenilalanin
Metionin
Sistein
Asparagin
Tirosin
Triptofan
Prolin
Glutamin
As. Aspartat
As. Glutamat
Lisin
Arginin
Histidin
Sifat
Netral
Netral
Netral
Netral
Netral
Netral
Netral
Netral
Netral
Netral
Netral
Netral
Netral
Netral
Netral
Asam
Asam
Basa
Basa
Basa
Jenis
Non esensial
Non esensial
esensial
esensial
esensial
Non esensial
esensial
esensial
esensial
Non esensial
Non esensial
Non esensial
esensial
Non esensial
Non esensial
Non esensial
Non esensial
esensial
esensial
esensial
Asam amino
yang berpolimerisasi melalui ikatan peptida membentuk
protein. Contoh nya adalah tripeptida yang terdiri atas 3 macam asam
amino yaitu glisin, alanin dan serin. Maka rumus struturnya adalah:
O
O
H2C C NH CH C OH
NH2
CH2OH
Nama Alat
Jumlah
Tabung reaksi
4 buah
Batang pengaduk
1 buah
1 buah
1 buah
1 buah
Lampu spritus
1 buah
Gelas ukur
Gelas Kimia
Pipet Tetes
b. Bahan
No
Nama Bahan
Jumlah
1:5
NaOH padat
Secukupnya
NaOH 10%
Secukupnya
HgCl2 1 %
Secukupnya
Uji Buret
Reagen dan Bahan
No
Nama Bahan
Ukuran/Jumlah
1:5
NaOH 10%
Secukupnya
CuSO4 0,1%
Secukupnya
Nama Bahan
Ukuran/Jumlah
1:5
Alkohol Tehnis 7 %
Secukupnya
I PROSEDUR KERJA
Uji Asam Amino dan Protein
1. Memasukkan 3 tetes protein ke dalam tabung reaksi pertama dan
memanaskannya dan mengamati perubahan yang terjadi. Terjadi
kogosongan menunjukkan karbon, dan bintik-bintik air diatas
tabung menunjukkan adanya oksigen dan hidrogen.
2. Memasukkan 4 tetes protein ke dalam tabung reaksi dan
menambahkan 1 keping NaOH padat dan memanaskannya kemudian
mengamati perubahan yang terjadi dari ada tidaknya bau amoniak
dan berubah tidaknya kertas lakmus merah menjadi biru bila
kertas tersebut didekatkan pada mulut tabung reaksi.
3. Memasukkan 4 tetes putih telur ke dalam tabung reaksi dan
menambahkan larutan NaOH 10% sebanyak 2 mL dan kemudian
dipanaskan lalu menambahkan 4 tetes HgCl 2 1 % dan mengamati
perubahan yang terjadi.
Uji Biuret
1. Memasukkan 3 mL larutan protein dan menambahkan 1 mL NaOH
10% dan mengaduknya.
2. Menambahkan 1 tetes CuSO4 0,1 % dan mengocoknya.
3. Mencatat perubahan yang terjadi
1.
2.
3.
IV.
HASIL PENGAMATAN
Larutan
1. Tahu
Perlakuan
Hasil Pengamatan
Gosong/karbon
Ada
bintik-bintik
air
(oksigen dan hydrogen)
Amoniak
lakmus merah
2. Telur
4 tetes larutan
Protein + NaOH 10% sebanyak
2 mL dipanaskan/dididihkan + 4
tetes HgCl2 1%
3 tetes protein lalu dipanaskan
menjadi biru
-
Terdapat
bintik-bintik dan gosong
Tercium bau
yang menyengat (amonium)
Lakmus
merah menjadi biru
4 tetes larutan
Protein + NaOH 10% sebanyak
2 mL dipanaskan/dididihkan + 4
tetes HgCl2 1%
1 gram susu + 5 mL air
- 3 tetes larutan susu dipanaskan
Tercium
3. Susu
hitam
Larutan
Warna Gosong
Terdapat uap
dinding tabung
air
jadi
pada
4 tetes larutan
susu + NaOH 10% sebanyak 2
mL
4 tetes larutan
susu + NaOH 10% sebanyak 2
mL dipanaskan/dididihkan
4 tetes larutan
susu + NaOH 10% sebanyak 2
mL dipanaskan/dididihkan + 4
tetes HgCl2 1%
3
tetes
larutan
protein
(dipanaskan)
berwarna
larutan
4. Tempe
kuning
pada
Uji Biuret
Larutan
Tahu
Perlakuan
3 mLlarutan protein + 1 mL
NaOH 10 %
+ 3 tetes CuSO4 0,1 %
Telor
3 mLlarutan protein + 1 mL
NaOH 10 % + 3 tetes CuSO4
0,1 %
Susu
1 mL NaOH 10 % +3 mLlarutan
susu + 3 tetes CuSO4 0,1 %
Tempe
3 mL larutan Tempe + 1 mL
NaOH 10 % + 3 tetes CuSO4
0,1 %
Hasil Pengamatan
warna keruh
Larutan
Berwarna
(CuSO4 = 3 tetes)
ungu
Perlakuan
2 ml larutan protein + 10 ml
alkohol 70% kemudian diaduk
Telor
2 ml larutan protein + 10 ml
alkohol 70% kemudian diaduk
Larutan
Protein larut dalam pelarut
alkohol,
tidak
terdapat
endapan
Susu
2 ml larutan protein + 10 ml
alkohol 70% kemudian diaduk
Larut
berwarna putih keruh
Tempe
2 ml larutan protein + 10 ml
alkohol 70% kemudian diaduk
Larutan
Protein akan larut, tidak
terdapat endapan
V. PEMBAHASAN
1.
Hasil Pengamatan
Terbentuk
endapan
dan
pada protein tersebut. Saat itu larutan protein (Telur) telah dihidrolisa
oleh larutan NaOH. Kemudian setelah ditambah 4 tetes HgCl 2 1% terjadi
perubahan warna menjadi warna hitam dan tidak terbentuk endapan, hal ini
membuktikan bahwa telur memiliki unsur belerang yang merupakan unsurunsur yang terdapat pada protein. Larutan protein yang mempunyai unsur
belerang apabila ditambah dengan HgCl 2 maka akan terbentuk endapan HgS
yang berwarna hitam, dimana endapan tersebut menandakan adanya unsur
belerang.
3.Susu
Pada perlakuan yang pertama 3 tetes susu lalu dipanaskan hasilnya
semakin lama dipanaskan bau gosongnya semakin menyegat. Hal itu
menunjukan adanya karbon dalam protein, dan terlihat bintik-bintik air
dibagian dinding tabung. Hal ini terjadi karena unsur oksigen dan hidrogen
adalah unsur yang dimiliki oleh susu dan menunjukkan adanya asam amino,
karena susu tersusun oleh asam-asam amino.
Pada perlakuan yang kedua 4 tetes larutan susu + 1 keping NaOH padat
lalu dipanaskan, maka lama-kelamaan akan timbul bau yang menyengat yang
menandakan adanya amonia dan bila kertas lakmus merah diletakkan pada
mulut tabung maka akan terjadi perubahan warna lakmus merah menjadi
biru. Bau amonia atau perubahan warna menunjukkan adanya unsur nitrogen
dan hidrogen dalam larutan protein. Dan terdapat endapan berwarna
orange.
Pada percobaan ketiga saat 4 tetes larutan susu ditambah 2 mL larutan
NaOH 10%, larutan berwarna kuning (keruh) kemudian dipanaskan, setelah
dipanaskan tidak ada perubahan warna hanya terdapat bintik-bintik air
pada dinding tabung yang menunjukkan adanya unsur oksigen dan hidrogen
pada protein tersebut. Saat itu larutan susu telah dihidrolisa oleh larutan
NaOH. Kemudian setelah ditambah 4 tetes HgCl 2 1% terjadi perubahan
warna menjadi warna hitam dan tidak terbentuk endapan, hal ini
membuktikan bahwa susu memiliki unsur belerang yang merupakan unsurunsur yang terdapat pada protein. Larutan protein yang mempunyai unsur
belerang apabila ditambah dengan HgCl 2 maka akan terbentuk endapan HgS
yang berwarna hitam, dimana endapan tersebut menandakan adanya unsur
belerang.
4. Tempe
Pada perlakuan yang pertama 3 tetes tempe lalu dipanaskan hasilnya
semakin lama dipanaskan bau gosongnya semakin menyegat. Hal itu
menunjukan adanya karbon dalam protein, dan terlihat bintik-bintik air
dibagian dinding tabung. Hal ini terjadi karena unsur oksigen dan hidrogen
adalah unsur yang dimiliki oleh tempe dan menunjukkan adanya asam amino,
karena tempe tersusun oleh asam-asam amino.
Pada perlakuan yang kedua 4 tetes larutan tempe + 1 keping NaOH
padat lalu dipanaskan, maka lama-kelamaan akan timbul bau yang menyengat
yang menandakan adanya amonia dan bila kertas lakmus merah diletakkan
pada mulut tabung maka akan terjadi perubahan warna lakmus merah
menjadi biru. Bau amonia atau perubahan warna menunjukkan adanya unsur
nitrogen dan hidrogen dalam larutan tempe.
Pada percobaan ketiga saat 4 tetes larutan tempe ditambah 2 mL
larutan NaOH 10%, larutan berwarna kuning (keruh) kemudian dipanaskan,
setelah dipanaskan tidak ada perubahan warna hanya terdapat bintik-bintik
air pada dinding tabung yang menunjukkan adanya unsur oksigen dan
hidrogen pada protein tersebut. Saat itu larutan tempe telah dihidrolisa
oleh larutan NaOH. Kemudian setelah ditambah 4 tetes HgCl 2 1% terjadi
perubahan warna menjadi warna hitam dan tidak terbentuk endapan, hal ini
membuktikan bahwa tempe memiliki unsur belerang yang merupakan unsurunsur yang terdapat pada protein. Larutan protein yang mempunyai unsur
belerang apabila ditambah dengan HgCl 2 maka akan terbentuk endapan HgS
yang berwarna hitam, dimana endapan tersebut menandakan adanya unsur
belerang.
1.
2.
Jawaban pertanyaan
Unsur-unsur yang terdapat dalam protein : Karbon, hidrogen, oksigen,
nitrogen, belerang dan fosfor
Endapan HgS. Dimana HgCl2 digunakan hanya untuk menguji adanya
asam amino dan protein.
Uji Biuret
1. Tahu
Pada uji biuret pada saat 3 mL larutan Protein (tahu) ditambahkan 1 mL
2. Telur
Pada uji biuret pada saat 3 mL larutan telur ditambahkan 1 mL NaOH,
kemudian setelah ditambahkan 1 tetes CuSO4, yang kemudian dikocok
larutan berubah warna menjadi ungu tetapi warna ungunya belum jelas
tetapi pada penambahan 3 tetes larutan CuSO 4 warna ungunya semakin
jelas. Warna ungu tersebut menunjukkan adanya biuret dimana dalam
larutan basa akan menghasilkan warna bila direaksikan dengan CuSO 4.
Reaksi ini disebut reaksi biuret dimana terbentuk kompleks Cu 2+ dengan
gugus CO dan NH dari rantai NH2-CO-NH-CO-NH2.
3. Susu
Pada uji biuret pada saat 3 mL larutan susu ditambahkan 1 mL NaOH,
kemudian setelah ditambahkan 1 tetes CuSO4, yang kemudian dikocok
larutan berubah warna menjadi ungu tetapi warna ungunya belum jelas
tetapi pada penambahan 3 tetes larutan CuSO 4 warna ungunya semakin
jelas. Warna ungu tersebut menunjukkan adanya biuret dimana dalam
larutan basa akan menghasilkan warna bila direaksikan dengan CuSO 4.
Reaksi ini disebut reaksi biuret dimana terbentuk kompleks Cu 2+ dengan
gugus CO dan NH dari rantai NH2-CO-NH-CO-NH2.
4. Tempe
Pada uji biuret pada saat 3 mL larutan tempe ditambahkan 1 mL NaOH,
pada awalnya berwarna kuning kemudian setelah ditambahkan 1 tetes
CuSO4, yang kemudian dikocok larutan berubah warna menjadi ungu tetapi
warna ungunya belum jelas tetapi pada penambahan 3 tetes larutan CuSO 4
warna ungunya semakin jelas. Warna ungu tersebut menunjukkan adanya
biuret dimana dalam larutan basa akan menghasilkan warna bila direaksikan
dengan CuSO4. Reaksi ini disebut reaksi biuret dimana terbentuk kompleks
Cu2+ dengan gugus CO dan NH dari rantai NH2-CO-NH-CO-NH2.
Jawaban pertanyaan
1. Warna yang terjadi adalah warna ungu violet
2. Karena apabila kelebihan pemakaian CuSO 4 akan menyebabkan
terbentuk endapan yaitu endapan Cu (OH)2 yang tentunya akan
mengganggu test biuret ini
3. Garam ammonium dapat mengganggu test biuret ini karena ammonium
bila direaksikan dengan CuSO4 akan terbentuk kompleks-kompleks NH3
4. 2 Macam zat lain yang dapat memberikan uji biuret positif adalah
histisida, serina dan tronina atau yang mengandung gugus CO dan NH 2
Tahu
Pada pengendapan pelarut organik, pada saat penambahan 2 mL larutan
Protein (tahu) yang kemudian ditambahkan 10 mL larutan alkohol 70% lalu
diaduk, maka akan terbentuk endapan. Endapan tersebut diperiksa kembali
kelarutannya dalam air terlihat bahwa endapan tersebut larut dalam air
dan hanya sedikit yang terbentuk endapan. Hal ini membuktikan adanya
protein, karena berdasarkan sifat protein ada sebagian dari protein yang
larut dalam air.
Telor
Pada pengendapan pelarut organik, pada saat penambahan 2 mL larutan
Protein (Putih telor) yang kemudian ditambahkan 10 mL larutan alkohol
70% lalu diaduk, yang dihasilkan adalah larutan putih telor tersebut larut
dalam pelarut alkohol. Hal ini membuktikan adanya protein, karena
berdasarkan sifat protein ada sebagian dari protein yang larut dalam air.
Susu
Pada pengendapan pelarut organik, pada saat penambahan 2 mL larutan
Protein (Susu) yang kemudian ditambahkan 10 mL larutan alkohol 70% lalu
diaduk, yang dihasilkan adalah larutan susu tersebut larut dalam pelarut
alkohol dan warna larutan tersebut menjadi putih keruh. Hal ini
membuktikan adanya protein, karena berdasarkan sifat protein ada
sebagian dari protein yang larut dalam air.
Tempe
Pada pengendapan pelarut organik, pada saat penambahan 2 mL larutan
Protein (tempe) yang kemudian ditambahkan 10 mL larutan alkohol 70% lalu
diaduk, yang dihasilkan adalah larutan tempe tersebut larut dalam pelarut
alkohol. Hal ini membuktikan adanya protein, karena berdasarkan sifat
protein ada sebagian dari protein yang larut dalam air.
VI. KESIMPULAN
1. Protein adalah senyawa organik yang molekulnya besar, susunannya
kompleks, tersusun atas asam-asam amino terdiri unsur-unsur C, H, O,
N kadang-kadang S, P, dsb.
2. Didalam protein terdapat asam-asam amino, namun dalam asam amino
belum tentu ada protein
3. Sebagian protein ada yang larut dalam air dan ada yang tidak larut
dalam air