Perubahan Mitokondria Dalam Penuaan Otak Tikus: Peran Efektif - Epigallocatechin

Gallate (?)

ABSTRAK
Penuaan adalah proses multi-faktorial yang melibatkan kekurangan dalam metabolisme tubuh.
mitokondria otak rentan terhadap kerusakan oksidatif karena tingkat metabolisme yang tinggi.
Penurunan sistem antioksidan selama proses penuaan menambah kerusakan saraf untuk
komponen mitokondria seperti sistem antioksidan, enzim siklus Kreb dan kompleks rantai
transpor elektron. Karena otak adalah organ yang kaya akan asam lemak, produk peroksidasi
lipid seperti hidroksinonenal yang dominan. Produk-produk peroksidasi lipid konjugasi dengan
asam amino untuk membentuk adduct yang mengubah sifat struktural dan fungsional mereka.
Epigallo katekin gallate adalah antioksidan kuat yang kaya ekstrak teh hijau. Penelitian ini
dijelaskan potensi antioksidan dari epigallo katekin gallate untuk melawan kerusakan oksidatif
mitokondria dalam otak. Studi terdiri dari muda (3-4 bulan; 15020 g) dan berusia (di atas 24
bulan; 42020 g) tikus putih jantan strain Wistar di Grup I dan II. Kelompok III dan IV terdiri
dari tikus muda dan tua dilengkapi dengan epigallo katekin gallate (2 mg / kg berat badan)
selama 30 hari. Antioksidan, enzim siklus Kreb dan kompleks rantai transpor elektron diuji di
fraksi mitokondria. Ekspresi Hydroxynonenal dilakukan dengan menggunakan analisis
imunohistokimia. Suplementasi epigallo catechin gallate menurunkan ekspresi hidroksinonenal
di otak berusia, menambah regulasi sistem antioksidan dan ditambah kegiatan enzim siklus Kreb
dan transpor elektron rantai kompleks di mitokondria otak tua demikian membuktikan potensi
antioksidan pada tingkat mitokondria.
I.

Pendahuluan

Otak terhitung kurang dari 2% dari berat badan dan mengkonsumsi 20% dari pengambilan
oksigen basal. konsumsi oksigen yang tinggi terkait dengan kebocoran elektron sepanjang rantai
pernapasan dengan pembentukan radikal berikutnya. Jumlah tinggi asam lemak tak jenuh ganda
(PUFA) hadir dalam membran neuronal (Floyd, 1999) juga berkontribusi terhadap tingkat
metabolisme yang tinggi.
Mitokondria telah diusulkan untuk bertindak organel sebagai sentral dalam regulasi penuaan
(Wallace, 2005), karena mereka mengontrol kadar energi sel, spesies oksigen reaktif (ROS)
produksi / detoksifikasi dan apoptosis, yang semuanya sangat penting dalam menentukan umur.
Mitokondria merupakan sumber utama superoksida (O2-) Dan ROS lainnya dalam sel,
menghasilkan sekitar 85% dari total O2- seluler, melalui reaksi O2 yang menyimpang (Droge,
2002). Reaksi radikal ini dengan ikatan ganda asam lemak dalam lipid menghasilkan peroksida
menimbulkan sebuah, aldehida b-tak jenuh termasuk malondialdehid (MDA), 4-hidroksinonenal
(HNE) dan akrolein (Adibhatla dan Hatcher, 2008). HNE dianggap paling reaktif dari senyawa
ini dan, karena itu, mediator penting dari kerusakan radikal bebas (Esterbauer et al., 1991).
Disfungsi mitokondria tampaknya berkontribusi beberapa hilangnya fungsi yang menyertai
penuaan (Sastre et al., 1996). Mitokondria dari umur penggunaan jaringan oksigen tidak efisien,

yang mengganggu sintesis ATP dan hasil dalam peningkatan produksi oksidan (Hagen et al.,
1997). Tingkat mapan molekul yang rusak secara oksidatif yang tergantung baik pada
pembentukan ROS bersih dan pembersihan molekul yang rusak (Trifunovic dan Larsson, 2008).
Pertahanan antioksidan juga menurun dengan usia (Sanz et al., 1997), makingmitochondria
evenmore rentan terhadap cedera oksidatif. Peluruhan mitokondria yang dihasilkan pada
akhirnya dapat menyebabkan produksi energi yang tidak memadai dan / atau hilangnya
homeostasis kalsium. Perubahan tersebut dapat mengakibatkan apoptosis sel tidak beralasan dan
juga menyebabkan penurunan metabolisme umum jelas dalam penuaan. Studi kami sebelumnya
dijelaskan potensi antioksidan dari epigallocatechin gallate (EGCG) terhadap stres oksidatif yang
disebabkan kerusakan makromolekul dalam otak tikus (Srividhya et al., 2007). Penelitian ini
berfokus pada peran EGCG dalam memerangi stres oksidatif dimediasi mitokondria kerusakan di
otak tikus tua.
II.

Prosedur Eksperimen

1. Isolasi mitokondria
Mitokondria diisolasi dari jaringan otak homogen di 230mm manitol, 70mm sukrosa, 1.0mm
EDTA, dan 10mm Tris-HCl, pH 7,40, dengan perbandingan 10 ml homogenizationmedium / g
jaringan dalam Potterhomogenizerwith Teflon alu. homogenat itu disentrifugasi pada 700 xg
selama 10 menit dan supernatan pada 8000 xg selama 10 menit untuk pelet mitokondria yang
dicuci dalam kondisi yang sama untuk mendapatkan persiapan mitokondria (Navarro et al.,
2005). Mitokondria yang diperoleh, disimpan dalam media yang sama. Kemurnian persiapan
mitokondria dinilai dengan aktivitas suksinat dehidrogenase.
2. Bahan kimia dan reagen
EGCG yang diperoleh dari Sigma-Aldrich, USA. Semua bahan kimia rutin lainnya dan
pelarut yang kelas analitis dan diperoleh dari Sisco Research Laboratory, India.
3. Model Binatang
Penelitian ini melibatkan muda (3-4 bulan; 15020 g) dan berusia (di atas 24 bulan; 42020
g) tikus putih jantan strain Wistar yang dibeli dari Tamil Nadu Hewan dan Ilmu Hewan
Universitas, Chennai, India.
4. Desain Eksperimen
Tikus-tikus dibagi menjadi empat kelompok yang terdiri dari enam hewan masing-masing.
hewan muda menjabat sebagai Group I yang menerima saline (0,89% NaCl) sendiri secara oral
selama 30 hari. hewan berusia menerima garam sendiri secara oral selama 30 hari menjabat
sebagai Group II. hewan muda yang diberikan EGCG (2 mg / kg berat badan / hari) dilarutkan
dalam saline melalui gavage oral untuk jangka waktu 30 hari menjabat sebagai Group III. hewan
berusia yang diberikan dengan EGCG (2 mg / kg berat badan / hari) dilarutkan dalam saline
melalui gavage oral untuk jangka waktu 30 hari menjabat sebagai Group IV. Setelah 30 hari
masa percobaan, semua hewan dibunuh oleh pemenggalan kepala. jaringan otak yang dipotong
segera dan direndam dalam garam fisiologis dingin dan tenggelam dalam garam formalin

(fiksasi) untuk analisis imunohistokimia. Salah satu belahan otak digunakan untuk
mempersiapkan homogenat jaringan dan setengah lainnya digunakan untuk analisis
imunohistokimia. bagian lilin parafin siap dengan jaringan tetap. Tissue homogenat disiapkan
dan sesuai diencerkan menggunakan media mitokondria isolasi.
5. Estimasi Protein
Jumlah protein dalam homogenat jaringan diperkirakan dengan metode Lowry et al. (1951).
Untuk 0,1 ml fraksi mitokondria 1/10 diencerkan otak tikus, 0,9 ml air dan 4,5 ml reagen
tembaga basa ditambahkan dan disimpan pada suhu kamar selama 10 menit. Kemudian 0,5 ml
reagen Folin ini ditambahkan dan warna dikembangkan dibacakan setelah 20 menit pada 640
nm. Kadar protein dinyatakan sebagai mg / ml.
6. Antioksidan Enzimatik
Derajat penghambatan auto-oksidasi pirogalol, dalam pH basa dengan SOD digunakan
sebagai ukuran aktivitas enzim. Untuk 1/5 diencerkan otak fraksi mitokondria, 0,25 ml etanol
dan 0,15 ml kloroform ditambahkan. Setelah 15 menit dari gemetar, suspensi disentrifugasi dan
supernatan yang dihasilkan, merupakan ekstrak enzim.
Aktivitas katalase diukur pada 25 8C dengan menentukan laju degradasi H2O2 pada 240 nm
di 10 mM bufer fosfat (pH 7,0) yang mengandung 10 mM H2O2. Untuk 100 ml 1/2 fraksi
mitokondria diencerkan, 900 ml dari 10mm dapar fosfat yang mengandung 10 mM H2O2
ditambahkan.
Glutation peroksidase (GPx) diuji dengan mengukur jumlah glutation tereduksi (GSH)
dikonsumsi dalam campuran reaksi sesuai dengan metode Rotruck et al. (1973). Campuran
reaksi yang terdiri dari 0,2 ml masing-masing etilen diamin tetraacetate, natrium azida dan
H2O2, 0,4 ml buffer fosfat, 0,1 ml 1/5 fraksi mitokondria diencerkan diinkubasi pada 37 8C pada
interval waktu yang berbeda.
7. Antioksidan Non-Enzimatik
Asam askorbat dioksidasi oleh tembaga untuk membentuk dehidro asam askorbat, yang
bereaksi dengan 2,3-DNPH untuk membentuk 2,4-DNPH. a-Tokoferol diperkirakan dengan
metode Quaife et al. (1949). 1,5 ml fraksi mitokondria, 1,5 ml etanol dan 1,5 ml xylene
ditambahkan dan disentrifugasi pada 3000 rpm selama 10 menit. Glutathione diperkirakan
dengan metode Moron et al. (1979). DTNB dikurangi dengan senyawa sulphydryl untuk
membentuk kompleks berwarna kuning yang diukur dengan spektrofotometer pada 412 nm.
8. Status peroksidasi lipid
Estimasi peroksidasi lipid (LPO) dilakukan mengikuti prosedur dari Hogberg et al. (1974)
menggunakan asam thiobarbituric (TBA).
9. Karbonil protein
Isi karbonil protein dianalisis dengan metode 2,4-dinitrofenilhidrazin (DNPH) seperti yang
dijelaskan oleh Levine et al. (1990). Secara singkat, 1 ml fraksi mitokondria yang mengandung

0,5 mg protein yang dipipet ke dalam tabung, yang 4.0 ml DNPH dalam 2,5 M HCl
ditambahkan.
10. Siklus asam trikarboksilat (TCA) enzim
Kegiatan dehidrogenase isositrat diuji sesuai dengan metode King (1965). Kegiatan
dehidrogenase suksinat ditentukan secara spektrofotometri dengan mengukur penurunan
absorbansi pada 600 nm disebabkan oleh penurunan 2,6- Dichlorophenol indophenol oleh
suksinat dengan metode Vrbacky et al. (2007) dengan sedikit modifikasi. Malat aktivitas
dehidrogenase diuji dengan metode Mehler et al. (1948). sitrat sintase diukur dengan metode
Srere (1969).
11. Transpor Elektron Rantai Komplek
Kompleks I (NADH-CoQ oksidoreduktase) aktivitas diuji dengan metode Hatefi dan Rieske
(1967) dengan sedikit modifikasi. Kompleks II (suksinat-coq oksidoreduktase) aktivitas diukur
dengan metode Hatefi dan Stiggall (1978) dengan sedikit modifications.Complex III (CoQsitokrom c oksidoreduktase) aktivitas diukur dengan metode Shimomura et al. (1984) dengan
sedikit modifikasi. Kompleks IV (sitokrom c oksidase) aktivitas diuji menggunakan metode
Wharton dan Tzagoloff (1964) dengan sedikit modifikasi.
12. Ekspresi HNE oleh imunohistokimia
Analisis imunohistokimia dari 4-HNE dilakukan sebagai desribed sebelum (Zarkovic et al.,
1999) menggunakan antibodi monoklonal untuk deteksi protein HNE-dimodifikasi. Hal itu
diperoleh dari media kultur dari klon yang berasal dari perpaduan sel myeloma SP2-AG8 dengan
B-sel dari tikus BALBc diimunisasi oleh HNEmodified lubang kunci limpet hemocyanine (Waeg
et al., 1996).
13. Analisis statistik
Hasil dinyatakan sebagai meanstandar deviasi (S.D.) selama enam hewan di masingmasing kelompok. Perbedaan antara kelompok dinilai dengan analisis satu arah varians
(ANOVA) dengan menggunakan paket perangkat lunak SPSS for windows. Post hoc pengujian
dilakukan untuk perbandingan antar kelompok menggunakan perbedaan yang signifikan
setidaknya (LSD) uji; signifikansi pada p-nilai <0,001, <0,01, <0,05 telah diberikan simbol
masing-masing di meja.
III.

Hasil

1. Antioksidan Enzimatik
Antioksidan enzimatik seperti SOD, katalase dan GPx menunjukkan penurunan fraksi
mitokondria tikus berusia (p <0,001) bila dibandingkan dengan tikus muda. Hasil terwakili
dalam Tabel 1. Administrasi EGCG selama 30 hari meningkatkan status antioksidan sampai batas
yang signifikan pada tikus kelompok IV (p <0,01) setara dengan tikus berusia (Group II). Tidak
ada perubahan signifikan dalam status antioksidan enzimatik tikus muda (Group III) pada
suplemen EGCG.

2. Antioksidan Non-Enzimatik
Hewan berusia menunjukkan penurunan status antioksidan non-enzimatik jika dibandingkan
dengan tikus muda (Tabel 2). Tingkat GSH, tokoferol dan asam askorbat menunjukkan
penurunan sebesar 31%, 43% dan 32% masing-masing pada tikus berusia perbandingan dengan
kontrol (kelompok I) tikus. suplemen EGCG mengakibatkan peningkatan status antioksidan
nonenzymic ke tingkat yang cukup (p <0,01). Mirip dengan antioksidan enzimatik, EGCG tidak
membawa perubahan dalam status antioksidan non-enzimatik pada tikus muda (Group III).
3. Tingkat MDA
Hewan berusia menunjukkan peningkatan yang luar biasa dalam tingkat MDA perbandingan
dengan hewan kontrol muda (28%). administrasi EGCG selama 30 hari meningkatkan status
peroksidasi lipid hingga batas tertentu (p <0,001).
4. Karbonil Protein
Tingkat protein karbonil menunjukkan peningkatan sebesar 45% dalam kasus tikus berusia
(Group II) bila dibandingkan dengan tikus kontrol muda. suplemen EGCG membawa kembali
tingkat karbonil ke tingkat yang cukup (p <0,001). EGCG tidak mengubah tingkat karbonil pada
tikus kelompok III.
5. Enzim Siklus TCA
Kegiatan enzim siklus TCA pada hewan muda dan berusia yang menunjukkan pada Tabel 3.
kegiatan enzim ini menunjukkan penurunan dalam usia (Group II) hewan setara dengan hewan
kontrol muda (p <0,001). EGCG administrasi untuk hewan berusia meningkatkan aktivitas
suksinat dehidrogenase, dehidrogenase isositrat, dehidrogenase malat, sitrat sintase, acontiase
dan fumarase oleh 30%, 24%, 19%, 22%, 19% dan 11% masing-masing pada hewan Grup IV
bila dibandingkan ke Grup II hewan tua.
6. Transpor Elektron Rantai Komplek
Kelompok II hewan menunjukkan penurunan yang signifikan dalam rantai pernapasan
kegiatan yang kompleks (p <0,01) bila dibandingkan dengan kelompok mengontrol hewan.
Administrasi EGCG (Group IV) mengakibatkan pembesaran dari aktivitas enzim (p <0,05) pada
perbandingan dengan umur (Group II) hewan.
7. 4-Hydroxynonenal
Pada hewan muda HNE tidak terdeteksi dalam sel Purkinje dan pleksus koroid sementara
hewan berusia menunjukkan immunopositivity dalam inti sel Purkinje dan di berbagai sel
pleksus koroid. Pengobatan dengan EGCG (Group IV) dihilangkan HNE dari sel-sel Purkinje
dari hewan tua. Administrasi EGCG (Group IV) juga mengakibatkan pengurangan 4-HNE bila
dibandingkan dengan kelompok II hewan berusia. Dalam struktur lain dari otak dari kedua
hewan muda dan tua, terlepas dari pengobatan dengan EGCG, tidak ada yang menonjol adduct
HNE-protein ditentukan.
IV.

Diskusi

Ames et al. (1995) mendalilkan bahwa oksidan mitokondria adalah sumber utama dari kerusakan
oksidatif yang terakumulasi dengan usia dan bahwa produk oksidasi ini merupakan kontributor
utama untuk seluler, jaringan, dan organisme penuaan. Perubahan dalam fungsi mitokondria
terjadi dengan usia sebagai akibat dari peningkatan kerusakan oksidatif (Van Remmen dan
Richardson, 2001). Oleh karena itu obat anti-penuaan yang efektif harus ditargetkan untuk
mengurangi kerusakan mitokondria. Peran pelindung dari EGCG dalam menangkal stres
oksidatif mapan. Umur stres diinduksi oksidatif telah dibasahi oleh EGCG dalam neuron
(Srividhya et al., 2007). Meskipun, efek EGCG dalam hal kemampuannya untuk melintasi
penghalang darah-otak dan mengembalikan perubahan mitokondria dalam degenerasi terkait usia
tetap belum diselidiki. Namun, harus disebutkan bahwa HNE produk peroksidasi lipid yang
ditemukan dalam sel-sel otak dari hewan yang lebih tua dalam penelitian kami dikenal untuk
meningkatkan permeabilitas sawar darah-otak (Zarkovic et al, 1997;. Mertsch et al, 2001).
Banyak pekerja sebelumnya telah menunjukkan properti antioksidan catechin dalam beberapa
model stres oksidatif (Chen et al, 2003;. Sastre et al., 2002). Untuk selanjutnya, penelitian ini
diajukan untuk mengevaluasi fungsi catechin utama, EGCG dalam memerangi kerusakan
oksidatif pada mitokondria selama penuaan otak. Oleh karena itu, kita bisa berasumsi bahwa
penuaan dikaitkan dengan perkembangan HNE yang dapat meningkatkan permeabilitas sawar
darah-otak dan akibatnya meningkatkan bioavailabilitas dan efektivitas EGCG, khususnya, pada
hewan berusia seperti yang diperhatikan dalam penelitian kami. Kemungkinan ini akan dikaji
lebih lanjut.
1. Peroksidasi Lipid
Komponen mitokondria rentan terhadap LPO dan ditemukan untuk diucapkan di otak tikus
selama penuaan (Kumar et al., 2008). HNE, penanda bioaktif utama peroksidasi lipid (Zarkovic,
2003a), dianggap paling reaktif dan mediator penting dari kerusakan radikal bebas. protein HNEdimodifikasi telah diidentifikasi pada hewan dan jaringan manusia dalam berbagai kondisi
patologis, menunjukkan keterlibatan modifikasi HNE dalam patofisiologi penyakit degeneratif
dan penuaan selular khususnya di otak (Zarkovic, 2003b).
Dalam penelitian kami, peningkatan HNE pada hewan berusia (Group II) dapat berkorelasi
dengan peningkatan kadar MDA dalam hewan-hewan ini. Kesempatan et al. (1979) telah
melaporkan bahwa akumulasi produk peroksidasi di mitokondria menyebabkan penurunan
produksi ATP dan kompromi pemeliharaan homeostasis seluler. Demikian pula, modifikasi HNE
mengarah pada kegiatan penurunan enzim siklus TCA (Palaniappan dan Dai, 2007). Reaktivitas
HNE dengan enzim mitokondria kunci mungkin penting dalam kerugian usia tergantung di
pembangkit energi dan kerentanan ditingkatkan dari neuron ke apoptosis (Floyd dan Hensley,
2002).
2. Antioksidan Non-Enzimatik
Glutathione, antioksidan endogen utama, ditemukan di dua kolam renang intraseluler yaitu.
dalam sitoplasma dan mitokondria (Muyderman et al., 2004). Tingkat GSH ditemukan menjadi
rendah di usia mitokondria otak (Group II) berbarengan dengan laporan lain (Palaniappan dan
Dai, 2007). Peningkatan kadar MDA dan HNE akan mempengaruhi tingkat GSH di mitokondria

otak berusia (Lee et al, 2006;. Raza dan John, 2006). Potensi antioksidan EGCG akan terbukti
bermanfaat dalam menambah tingkat GSH dalam mitokondria otak (Group IV). EGCG yang
memiliki kapasitas untuk memuaskan peroxyl dan hidroksil radikal akan terbukti efektif dalam
menangkal kerusakan peroxidative lipid yang dinyatakan menghabiskannya tingkat GSH
mitokondria.
3. Karbonil Protein
Stres oksidatif mitokondria menghasilkan radikal bebas yang mampu mengkatalis
modifikasi sepenuhnya reversibel untuk protein (Humphries et al., 2006). modifikasi HNE
muncul dari kovalen cross-link dengan protein melalui penambahan Michael untuk lisin, sistein,
dan residu histidin (Uchida et al., 1994). Oksidatif kerusakan protein telah didalilkan menjadi
kunci penting dalam proses penuaan. akumulasi terkait usia protein diubah dapat disebabkan
peningkatan kerusakan radikal-dimediasi gratis, hilangnya aktivitas protease, atau kombinasi dari
kedua mekanisme. Studi kami jelas telah menunjukkan bahwa kadar karbonil protein meningkat
secara substansial selama penuaan. EGCG, oleh aktivitas radikal bebas (Yin et al., 2008)
melindungi protein dari karbonilasi dan dengan demikian mengembalikan aktivitas banyak
enzim yang penting untuk proses mitokondria.
4. Antioksidan Enzimatik
Dalam keadaan fisiologis normal, H2O2 seluler serta ROS lainnya memulung oleh berbagai
antioksidan seluler, terutama katalase dan glutation (GSH) sistem (Chan, 1996). Namun, sistem
pertahanan ini mungkin tidak mampu menangkal patologis ditingkatkan ROS dihasilkan dari
disfungsi mitokondria akut atau kronis.
Superoksida adalah molekul reaktif tetapi dapat dikonversi menjadi hidrogen peroksida
dengan dismutase Mn-superoksida (matriks mitokondria) dan kemudian ke oksigen dan air
dengan katalase intramitochondrially (Radi et al., 1991) atau glutathione peroxidase (matriks
mitokondria). SOD dan katalase rentan terhadap kerusakan oksidatif ageassociated karena reaksi
Fenton (Jouihan et al., 2008). Beberapa wartawan telah menekankan pentingnya mitokondria
katalase dalam pemulungan H2O2. Katalase kekurangan pada tikus berusia akan menambah
beban H2O2 scavenging untuk GPx yang kegiatan tergantung pada antioksidan non-enzimatik
GSH.
5. Enzim Siklus TCA
Sejak neuron memanfaatkan glukosa sebagai sumber energi utama mereka, berikut bahwa
fungsi efektif dari siklus TCA adalah penting. fungsi Gangguan enzim kunci dari siklus telah
dijelaskan dalam model disfungsi mitokondria terkait penuaan. Suksinat dehidrogenase
merupakan komponen membran-terikat dari siklus asam sitrat dan juga komponen dari rantai
transpor elektron. Sejak SDH juga besi-sulfur yang mengandung enzim, maka rentan terhadap
inaktivasi oleh aksi radikal superoksida (Gardner et al., 1994). Kegiatan SDH telah dilaporkan
menurun selama neurotoxin diinduksi stres oksidatif (Kamboj et al., 2008). kemampuan EGCG
untuk mengais radikal superoksida akan memainkan peran utama dalam mencegah inaktivasi dan
dengan demikian menambah aktivitas SDH pada tikus Grup IV.

6. Transpor Elektron Rantai Komplek

Studi sebelumnya telah menekankan penurunan aktivitas enzim rantai pernapasan selama
penuaan (Modi et al., 2008). Peningkatan produk peroksidasi lipid MDA dan HNE dan
penurunan aktivitas mereka enzim penting yang terlibat dalam rantai pernapasan dapat co-terkait
(Navarro et al., 2002). Tingkat peroksidasi lipid akan dikenakan efek pada kapasitas fungsional
dari protein, sehingga mempengaruhi aktivitas mereka pada hewan tua. Karena transpor elektron
rantai kompleks yang terikat membran dan peka terhadap lingkungan mikro lipid (Keller et al.,
1997), kerusakan oksidatif membran mitokondria bagian dalam akan memiliki dampak negatif
pada kegiatan rantai transpor elektron.
Banyak peneliti baru-baru ini telah mengidentifikasi potensi anti-apoptosis EGCG
menggunakan in vivo dan in vitro model (Schroeder et al, 2008;.. Meng et al, 2008;. Yao et al,
2008). Penelitian kami telah berorientasi peran EGCG untuk memulihkan dan mengisi toko
antioksidan dalam mitokondria neuronal dan pentingnya HNE diinduksi lipid kerusakan
peroxidative disfungsi mitokondria. Kami menyimpulkan bahwa efek anti-penuaan dari EGCG
dapat dikaitkan dengan aktivitas radikal bebas yang terbukti dengan rendahnya tingkat HNE
pada tikus berusia EGCG diobati.