ABSTRAK

Tujuan: Untuk mengungkap aktivitas antibakteri berurutan diekstraksi dingin ekstrak pelarut
organik yang berbeda dari buah-buahan, bunga dan daun Lawsonia inermis L. terhadap beberapa
bakteri patogen.

Metode: Bubuk buah-buahan, bunga dan daun L. inermis yang terus menerus diekstraksi dengan
diklorometana (DCM), etil asetat dan etanol pada suhu kamar. ekstrak kering siap dalam
konsentrasi yang berbeda dan diuji untuk aktivitas antibakteri dengan metode difusi agar dengan
baik, dan juga ekstrak diuji untuk menentukan fitokimia yang tersedia.

Hasil: Kecuali DCM ekstrak bunga semua ekstrak uji lainnya mengungkapkan efek
penghambatan pada semua bakteri yang diuji dan efek penghambatan mereka berbeda secara
signifikan (P <0,05). Efek penghambatan tertinggi ditunjukkan oleh ekstrak etil asetat bunga
terhadap Staphylococcus aureus (S. aureus) dan Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa), dan
ekstrak etil asetat buah pada Escherichia coli (E. coli) dan Bacillus subtilis (B. subtilis ). Etil
asetat dan etanol ekstrak bunga, buah dan daun menyatakan penghambatan bahkan pada 1 mg /
100L terhadap semua bakteri uji. Di antara phytochemical diuji flavonoid yang terdeteksi di
semua ekstrak uji kecuali DCM ekstrak bunga. Kesimpulan: Penelitian menunjukkan bahwa etil
asetat dan ekstrak etanol buah dan bunga L. inermis merupakan sumber potensial yang lebih baik
dari agen antibakteri dibandingkan dengan ekstrak daun pelarut masing.

1. LATAR BELAKANG
Perkembangan resistensi mikroorganisme terhadap antibiotik dan munculnya penyakit
menular baru buat kebutuhan mendesak untuk menemukan baru, senyawa antimikroba yang
aman dan efektif [1]. Dalam industri farmasi modern, sumber-sumber alam dan turunan sintetis
semi produk alami memainkan peran kunci untuk produksi obat-obatan baru [2]. Tanaman yang
ditemukan untuk menjadi sumber besar untuk berbagai molekul bioaktif dengan struktur molekul
yang beragam dan fungsi. Molekul-molekul ini terutama berasal dari metabolisme sekunder
tanaman dan melindungi tanaman terhadap predasi oleh mikroorganisme, serangga dan herbivora
[3]. Sejak zaman prasejarah, manusia telah menggunakan berbagai tanaman untuk
menyembuhkan dan mencegah berbagai penyakit, dan masih ditemukan untuk menjadi sumber
yang efektif dalam praktek medis tradisional [4]. Oleh karena itu, evaluasi kegiatan tanaman obat
yang diklaim. karena memiliki properti antimikroba mendapatkan perhatian saat ini.
Lawsonia inermis L. (L. inermis), biasa disebut sebagai Maruthondi (Tamil), Henna
(bahasa Inggris), adalah tanaman obat terkenal di Jaffna Peninsula, Sri Lanka. Ini milik keluarga
Lythraceae. Secara luas terjadi di bagian yang lebih kering terutama di dekat pantai laut Sri
Lanka dan India dan juga di Afrika dan Saudi [5]. Henna adalah gundul banyak bercabang daun
semak dengan cabang lateral sering berakhir di duri; daun sederhana, sebaliknya, seluruh, lanset,
tangkai sangat pendek atau tidak ada; bunga berwarna putih; buah bulat, kapsul dengan berbagai
biji [6]. Akar, daun, bunga dan biji digunakan dalam sistem obat tradisional untuk pengobatan
berbagai penyakit. Daun berguna untuk pengobatan diare, disentri, kusta, kudis dan bisul. Bunga
digunakan dalam cephalalgia, sensasi terbakar, sardiopathy, anemia, insomnia dan demam [6].
Benih yang efektif dalam pengobatan demam intermiten, kegilaan, disentri, diare, dan sakit
mental [7]. kulit diberikan dalam bentuk rebusan untuk pembesaran limpa dan penyakit kulit
keras kepala, dan akar dianggap sebagai khusus untuk kusta [5]. Ada sejumlah penelitian telah
dilakukan untuk membuktikan bioaktivitas L. inermis; radikal bebas dan mengurangi daya [8],
anti ulkus potensi [9], hipoglikemik dan efek antihiperglikemik [10] Aktivitas anthelmintik [11]
protein glycation aktivitas penghambatan osteoklastogenesis penghambatan [13] dan aktivitas
antibakteri [12]. Namun, di Studi antibakteri L. inermis ada beberapa celah untuk mengisi. [2,

14-17] Sebagian besar penelitian sebelumnya didasarkan pada ekstrak daun L. inermis, tetapi
dalam pengobatan tradisional buah dan bunga juga digunakan untuk pengobatan . Selain itu di
sebagian besar .Studi antibakteri ekstraksi pelarut atau metode ekstraksi sekuensial panas
(Soxhlet) digunakan untuk mendapatkan ekstrak.

2. BAHAN DAN METODE

2.1. Pengumpulan dan identifikasi bahan tanaman
Buah-buahan segar dan sehat, bunga dan daun inermis Lawsonia dikumpulkan dari kebun
raya Departemen Botani, Universitas Jaffna, Sri Lanka, dan identitas taksonomi tanaman ini
dikonfirmasi oleh ahli taksonomi di Departemen Botani, Universitas Jaffna, Sri Lanka. Spesimen
voucher diendapkan di departemen yang sama. Bagian tanaman yang dikumpulkan dicuci di
bawah air leding, dikeringkan di tempat teduh dan kemudian triturated menjadi serbuk halus
dengan menggunakan grinder listrik. Serbuk ini disimpan di udara disegel botol coklat di sekitar
suhu.
2.2. Persiapan ekstrak tumbuhan
Setiap tanaman bagian bubuk L. inermis itu berturut-turut diekstraksi dengan pelarut
organik yang berbeda dalam urutan polaritas meningkat. 100 g masing-masing serbuk dimaserasi
secara terpisah di 300 mL diklorometana (DCM) dengan intermiten gemetar selama tiga
hari.Kemudian mereka pertama kali disaring dengan kain muslin dan kemudian melalui
Whatman kertas no1 filter. Itu residu selanjutnya diekstraksi dua kali dengan menggunakan
pelarut segar sama dan semua filtrat dikumpulkan bersama-sama. Residu yang dihasilkan adalah
udara kering dan selanjutnya diekstraksi dengan etil asetat dan diikuti oleh etanol mirip dengan
prosedur [18] dilakukan untuk ekstraksi DCM. Akhirnya dari masing-masing filtrat pelarut telah
dihapus menggunakan evaporator rotary pengurangan tekanan dan suhu rendah. Hasil dari
masing-masing ekstrak ditimbang dan disimpan di 40C sampai digunakan.
2.3. Bakteri uji
Empat isolat bakteri yaitu Staphylococcus aureus (S. aureus), Bacillus subtilis (B.
subtilis), Escherichia coli (E. coli) dan Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) diperoleh dari
koleksi budaya Departemen Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Jaffna, Sri Lanka.
Bakteri di atas dipertahankan pada miring agar nutrien di 4 0C sampai digunakan untuk
penelitian.

2.4. Uji aktivitas antibakteri

Oleh karena itu, penelitian ini dilakukan untuk mengevaluasi aktivitas in vitro antibakteri
berurutan diekstraksi dingin ekstrak pelarut organik yang berbeda dari buah, bunga dan daun
L.inermis, hadir di Jaffna, terhadap beberapa bakteri patogen yang dipilih, dan untuk
menjelaskan phytochemical yang tersedia di ekstrak uji. In vitro aktivitas antibakteri dari ekstrak
kasar bagian yang berbeda dari L. inermis ditentukan dengan metode juga difusi agar [19].
Bakteri uji dibiakkan dalam kaldu nutrisi pada 37 oC selama 18 jam. Diautoklaf Mueller Hinton
agar (MHA) media dingin ke 40, dan kemudian 1 mL suspensi bakteri di atas (10cfu / mL)
dicampur dengan 15 mL media ini, dituangkan ke dalam cawan Petri steril dan dibiarkan
mengatur. ekstrak uji dibuat dengan melarutkan 60 mg setiap ekstrak di campuran 100 L
dimethyl sulfoxide (DMSO) dan aseton (1: 1 V / V). Wells dibuat pada media dipadatkan dengan
menggunakan bor steril (8 mm) dan diisi dengan 100 L dari masing-masing ekstrak. Streptomisin
(50 g / 100 L) dan 100 L dari campuran DMSO dan aseton digunakan sebagai standar dan
kontrol masing-masing. Budaya piring diinkubasi pada 37 selama 24 jam dan aktivitas
antibakteri ditentukan dengan mengukur diameter zona hambat di sekitar sumur. Setiap
percobaan diulang tiga kali.
2.5. Penentuan konsentrasi inhibitive termurah
Konsentrasi inhibitif terendah dari ekstrak uji ditentukan dengan metode baik difusi agar,
seperti dijelaskan di atas, dengan konsentrasi yang berbeda dari ekstrak uji mulai dari 1 mg / 100
L sampai 40 mg / 100 L. Tes piring kultur diinkubasi pada 370C selama 24 jam dan aktivitas
antibakteri ditentukan dengan mengukur diameter zona hambat di sekitar percobaan baik.
Setiap diulang tiga kali.
2.6. skrining fitokimia kualitatif
Analisis fitokimia kualitatif untuk kehadiran tanin, saponin, flavonoid, steroid dan alkaloid
dilakukan untuk semua ekstrak uji buah, bunga dan daun L. inermis menggunakan prosedur
standar memberikan oleh Trease dan Evans.

2.6. Analisis statistik

Nilai rata-rata dan standar deviasi dari tiga ulangan [20] dihitung dan data menjadi sasaran
untuk memeriksa dengan analisis varians (ANOVA) dilanjutkan dengan uji Tukey (P <0,05)
dengan menggunakan perangkat lunak, SPSS 13.0 untuk versi Windows.

3. HASIL
Hasil ekstraksi sekuensial mengungkapkan produksi persentase yang lebih tinggi dari yield oleh
pelarut etanol pada bunga dan daun, dan DCM pelarut pada buah (Tabel 1).
Tabel 1
Persentase hasil dalam ekstraksi berurutan dari bagian yang berbeda L. inermis.

Pada 60 mg / 100L, kecuali DCM ekstrak bunga semua ekstrak uji lainnya memiliki
penghambatan pada semua bakteri uji, efek penghambatan berbeda secara signifikan (P <0,05)
dan diameter zona inhibisi berkisar antara (9,8 0,4) mm untuk (26,7 0,3) mm (Tabel 2).
Efek penghambatan tertinggi ditunjukkan oleh ekstrak etil asetat bunga pada S. aureus dan
P.aeruginosa, dan ekstrak etil asetat buah pada E. coli dan B. subtilis.
Di antara ekstrak yang diuji, etil asetat dan etanol ekstrak buah, bunga dan daun dipamerkan
penghambatan lebih tinggi terhadap semua bakteri uji dibandingkan dengan DCM ekstrak s dari
masing tanaman parts.Furthermore, hasil yang dihasilkan oleh ekstrak etil asetat dari bunga dan
buah yang ditemukan lebih tinggi daripada yang dihasilkan oleh ekstrak pelarut yang sama dari
daun terhadap semua bakteri uji(Tabel 2).

Efek penghambatan L. inermis pada konsentrasi / 100 L 60 mg pada bakteri patogen.

Di antara ekstrak daun, ekstrak etanol daun memiliki penghambatan lebih tinggi pada semua
bakteri uji dibandingkan dengan etil asetat dan ekstrak DCM. Dalam kasus ekstrak buah, etil
asetat, Ekstrak memiliki penghambatan tertinggi pada E. coli dan B. subtilis, dan ekstrak etanol
pada P. aeruginosa dan S. aureus. Dalam bunga, ekstrak etil asetat memiliki penghambatan pada
semua bakteri uji dibandingkan dengan etanol. DCM ekstrak bunga gagal untuk menghambat
pertumbuhan P. aeruginosa dan B. subtilis. Tidak ada hambatan yang dihasilkan oleh campuran
pelarut DMSO dan aseton. Standard antibiotik streptomisin mengungkapkan penghambatan pada
semua bakteri uji dan tertinggi dan terendah hambatan yang masing-masing pada B. subtilis dan
E. coli (Tabel 2). Dalam studi respon dosis, efek penghambatan semua ekstrak uji bervariasi
dalam dosis cara bergantung (Tabel 3). Etil asetat dan etanol ekstrak bunga, buah dan daun
memiliki penghambatan bahkan pada 1 mg / 100 L terhadap semua bakteri uji. Ekstrak DCM
bagian tanaman ini tidak memiliki aktivitas pada konsentrasi uji termurah tetapi sebagai
konsentrasi meningkatkan aktivitas antibakteri tercatat.

Hasil untuk analisis fitokimia kualitatif mengungkapkan bahwa di antara lima

phytochemical yang diuji setidaknya dua dari mereka yang hadir dalam daun, buah dan bunga
L.inermis. Flavonoid terdeteksi di semua ekstrak uji L.inermis kecuali DCM ekstrak bunga.
Tanin hadir dalam ekstrak etanol daun, bunga dan buah dan etil asetat ekstrak buah. Alkaloid dan
saponin yang hampir hadir, saponin hadir dalam ekstrak etanol buah dan bunga, dan alkaloid
hadir hanya dalam ekstrak etil asetat daun. Tak satu pun dari ekstrak tes menunjukkan hasil
positif untuk tes steroid (Tabel 4).

4. DISKUSI
Penelitian ini jelas menunjukkan aktivitas antibakteri berurutan diekstrak dingin DCM,
etil asetat dan ekstrak etanol daun, bunga dan buah dari L. Inermis.Temuan ini lebih lanjut
memperkaya nilai farmasi L.inermis, dan juga menegaskan keabsahan penggunaan tradisional L.
inermis. Sebagian besar penelitian sebelumnya yang dilakukan pada ekstrak daun,
bagaimanapun, penelitian ini membuktikan bioaktivitas buah dan bunga L. inermis dengan
memberikan aktivitas yang lebih tinggi dari ekstrak daun.
Secara umum, kegiatan antimikroba ekstrak tanaman tergantung pada berbagai faktor;
kondisi lingkungan dan iklim di mana tanaman tumbuh, pelarut yang digunakan untuk ekstraksi,
pilihan metode ekstraksi, konsentrasi tes, metode penentuan aktivitas antimikroba dan
mikroorganisme uji. Dalam penelitian ini, bahan tanaman yang berurutan diekstraksi dengan
pelarut organik yang berbeda dalam rangka meningkatkan polaritas. Metode ekstraksi sekuensial
menjamin ekstraksi senyawa aktif dari bahan tanaman sesuai dengan polaritas mereka, dan juga
mengurangi efek antagonis senyawa dalam ekstrak.
seperti et al melaporkan adanya efek penghambatan berurutan diekstraksi panas (Soxhlet)
etanol, etil asetat dan kloroform ekstrak daun terhadap S. aureus dan E.coli dalam metode difusi
disk [2] [3, 21, 22]. Namun, penelitian ini menunjukkan efek penghambatan ekstrak sekuensial
dingin daun terhadap semua bakteri uji. Variasi dalam hasil penelitian sebelumnya dan sekarang
mungkin karena variasi dalam ekstrak Metode ion atau metode aktivitas antibakteri atau dengan
keduanya. Selama ekstraksi Soxhlet, karena perlakuan suhu tinggi beberapa biomolekul aktif
mungkin melarikan diri dari ekstrak. Telah juga melaporkan bahwa metode juga difusi agar lebih

baik dari disk metode difusi, karena, gugus hidroksil bebas hadir dalam disk dapat mencegah
difusi molekul polar kationik [21] [23]. Oleh karena itu, hasil penelitian ini lebih mendukung
penggunaan metode baik difusi agar dan metode ekstraksi sekuensial dingin.
Etil asetat dan etanol ekstrak dari semua tiga bagian tes L. inermis menyatakan aktivitas
luar biasa terhadap kedua Gram negatif (E. coli dan P. aeruginosa) dan gram positif (S. aureus
dan B. subtilis) bakteri. Hal ini menunjukkan adanya bahan aktif dengan spektrum yang luas dari
aktivitas antimikroba. Bioaktivitas ekstrak tumbuhan tergantung pada jenis dan kuantitas
phytochemical hadir dalam ekstrak. Fitokimia menunjukkan berbagai modus kegiatan antibakteri
[3] . Oleh karena itu, penelitian lebih lanjut diperlukan sejauh kimia merupakan tanaman ini
ekstrak bersangkutan. penelitian mendalam tambahan diperlukan untuk mengisolasi dan
mengkarakterisasi senyawa aktif mereka untuk pengujian farmakologi.
Kesimpulannya, penelitian ini jelas menunjukkan efek antibakteri berurutan dingin
diekstrak DCM, etil asetat dan ekstrak etanol bunga, buah dan daun L. inermis hadir di
semenanjung Jaffna, Sri Lanka. Khususnya etil asetat dan etanol ekstrak buah dan bunga ekstrak
lebih efektif untuk kontrol in vitro bakteri patogen.

KONFLIK ATAS PERNYATAAN TERKAIT

Kami menyatakan bahwa kami tidak memiliki benturan kepentingan.

UCAPAN TERIMA KASIH

Para penulis berterima kasih kepada Departemen Pendidikan Tinggi, Sri Lanka untuk
menyediakan bantuan keuangan untuk bekerja sebagai pembayaran tunjangan penelitian sesuai
dengan melingkar no1 / 2011.

DAFTAR PUSTAKA

Simplisia

100

Dengan EtOH selama 3x

Maserasi

24 jam

Penyaringan
Whattman kertas
No.1)

Ekstraksi

sebanyak

2x

Evaporasi

Hasil ekstrak
ditimbang dan Simpan
disuhu 4oC