Selama 200 tahun penyakit Tuberkulosis menyebabkan kematian 1 miliar orang di dunia 1 .

Pada tahun 2011 terdapat 8,7 juta penyakit tuberkulosis baru dan 1,4 juta orang meninggal
dunia, 430,000 yang meninggal adalah pasien HIV.Diperkirakan terdapat 310,000 kasus
insiden adanya resistensi pada obat1,2.Pada tahun 2015 diperkirakan terdapat 10,4 juta kasus
baru penyakit TB di seluruh dunia, dimana terdiri dari 5,9 juta (56%) pria , 3,5 juta (34%)
perempuan, dan1 juta (10%) pada anak-anak. Penyumbang terjadinya kasus baru penyakit TB
60% terdapat pada negara India, Indonesia, Cina, Nigeria, Pakistan dan Afrika
Selatan3.Indonesia berada di peringkat kelima yang mempunyai angka insiden tertinggi di
dunia dengan kejadian 460,000 merupakan kasus baru setiap tahunnya5.
Tuberkulosis merupakan penyakit infeksi bakteri yang disebabkan oleh bakteri
Mycobacteium tuberculosis (M.tuberculosis)1,3,4.Penyakit ini bukan hanya merusak sistem
pernafasan tetapi juga menyerang sistem saraf, sistem peredaran darah dan sistem limfatik.
Penularan TB dapat terjadi dengan berbagai cara seperti dari manusia ke manusia dan dari
manusia ke hewan, kondisi higines yang buruk, darah dan menghirup udara yang
terkontaminasi oleh orang yang terinfeksi (batuk,bersin,drophlet)4.Pengendalian penyakit TB
dapat dicegah melalui deteksi dini,ada beberapa jenis tes yang digunakan untuk mendeteksi
adanya bakteri Tuberkulosis diantaranya melalui sputum BTA, rapid molekuler test, dan
kultur test3.
Metode dan prosedur yang digunakan dengan menggunakan molekuler
Diagnosa pada teknologi molekuler yang telah berkembang sejak tahun 1990 sekarang
memiliki teknik lebih baik daripada sebelumnya, diantaranya adalah menggunakan teknologi
berbasis polymerase chain reaction (PCR), fluorescent in situ hybridization (FISH) , Nucleic
acid amplification tests (NAATs) , deteksi electokimia pada DNA, Biochip, nanoteknologi
dan teknologi proteomik7. Di bawah ini beberapa metode yang digunakan salah satunya:
PCR

Penanganan sampel dan prosedur ekstrasi DNA. Perangkat disegel untuk meproses
sampe; yang dirancang secara bersamaan menjaga operator bio-security dan
menunjukkan asam nukleat untuk amplifikasi gen.

Prosedur PCR dilakukan dengan alat thermocycler dengan biaya rendah dan dengan
dasar fluorometer, yang dirancang dengan komplektisitas yang rendah. Semua regen

untuk amplifikasi dan deteksi fluorometric termasuk dalam microtubes PCR dalam
bentuk siap pakai. Sebelumnya lima mikroliter DNA dimurnikan digunakan pada setiap
amplifikasi, selama sekitar 2 jam. Setelah produk PCR amplifikasi dievaluasi oleh
fluorometry di fluometer dan data masuk ke memori dan ditampilkan pada layar.
Produksi DNA beruntai ganda adalah titik akhir dan flurometrically terdeteksi secara
sederhana tapi efisien biaya rendah fluorometer dirancang "ad hoc". Seluruh reaksi
dilakukan dalam satu tabung yang tidak dibuka setelah menambahkan sampel diproses
untuk meminimalkan risiko kontaminasi silang dengan amplikon. Waktu dan suhu
parameter untuk reaksi PCR dimasukkan dalam firmware mikroprosesor untuk
menyederhanakan penggunaan alat8.
Fluorescent in situ hybridization (FISH)
200 kode sampel dahak yang dikumpulkan diolah dengan ReaSLR-CSM pengolahan sampel
metodologi (ReaMetrix,Banglore, India) dan kultur pada BBL-MGIT dan Lowenstein Jensen
(LJ) medium. Semua slide yang digunakan dengan 5% fenol dalam 70% etanol. FISH
dilakukan pada semua dahak dan jaringan kultur pita smear diproses dengan menggunakan
M-Genus-TB kit. Smear diperlakukan dengan penyangga pre-treatment, dibilas, lalu
hibridisasi dengan fluorescentely berlabel Mycobacterium genus tertentu (hijau) dan
spesifikasi MTB komplex (orange) probes. Setelah mencuci probes, smear yang dibaca
dengan menggunakan mikroskop LED biru melalui pembesaran 1000x dan kumpulan filter
hijau. Semua kultur yang telah di konfirmasi sequensinya.ZN (Ziehl-Neelsen) pewarnaan
yang telah dilakukan lalu lakukan perbandingan9.
Nucleic acid amplification tests (NAATs)
NAATs untuk mengidentifikasi Mycobacterium tuberculosis pada populasi dengan BTA
positif untuk basil asam-cepat, tetapi kurang sensitif pada populasi sputum-BTAnegatif.Penelitian ini menguji sputum yang diambil pada pagi hari untuk DNA bakteri
tuberkulosis menggunakan 2 NAATs. PCR menargetkan gen secA1 mikrobakteri dan tes
komersial Amplified Mycobacterium tuberculosis Langsung (MTD) (Gen-Probe Inc, San
Diego, CA). Penelitian ini menghitung akurasi diagnosa tes indeks yang mengacu pada
mikrobiologi golden standart ( mikobakterial kultur yang positif dari dahak atau cairan dari
bronkialis), dan diukur dampak klinisnya10.

Biochip
Sistem biochip adalah metode cepat dan akurat untuk obat diagnosis TB resisten
menggunakan sampel dahak secara langsung, terutama untuk deteksi resistensi rifampicin.
Satu set lengkap sistem biochip termasuk biochip, peralatan untuk mempersiapkan sampel,
chip hibridisasi, cuci dan akuisisi data, dan perangkat lunak khusus untuk diagnosis secara
otomatis. Penentuan MDR dari kompleksitas MTB menggunakan biochip dilakukan oleh
petunjuk dari alat yang digunakkan. Produk PCR hibridisasi dengan biochip di BioMixer
sebuah II tiga dimensi miring agitator dan oven hibridisasi. Setelah mencuci dan berputar
oleh Slide otomatis Washer-8 (CapitalBio), slide biochip dianalisis dengan LuxScan-10K
confocal laser scanner dan Mycobacterium tuberculosis software resistensi obat deteksi
sistem uji array, dan pola resistensi obat INH dan RMP11.