Jerami Volume 3 No.

3, September Desember 2010

PENGARUH PEMBERIAN BEBERAPA KONSENTRASI BAP DAN NAA

TERHADAP MULTIPLIKASI TUNAS PUCUKJERUK KANCI
(Citrus sp) SECARA IN VITRO

(Application of NAA and BAP on In Vitro Shoot Multiplication of Orange Kanci

(Citrus sp.))

Ilvi Rahmi, Irfan Suliansyah,Tamsil Bustamam

Jurusan Budidaya Pertanian Fakultas Pertanian Universitas Andalas

ABSTRACT

The purpose of this study was to determine the effect of NAA, BAP and interaction both
in shoot multiplication Kanci orange shoots in vitro. The design used was factorial in
Complete Randomized Design (CRD) consisting of 2 factors with 3 replications. Factor A is the
BAP, with 4 levels of concentration (0.0, 2.5, 5.0, and 7.5 mg/l). While the factor B is the
concentration of NAA, with 4 levels (0.0, 0.5, 1.0, 1.5 mg/l). Data obtained were statistically
tested using F test at 5% significance level. The conclusions of this study are as follows: a)
giving different BAP concentrations, giving a different effect on the percentage of explants that
had emerged during multiplication and shoot, b) treatment of BAP at a concentration of 2.5
mg/l is the best treatment on the percentage of explants that had emerged during
multiplication and shoot, c) interaction of BAP-NAA showed no significant effect on the ability
of explants multiplied, d) provision of various concentrations of NAA did not show significant
effect on the percentage of explants which have multiplication, percentage of live explants, the
percentage of explants forming shoots and current shoots appear, e) iInteraction of BAP 2.5
mg/l with NAA at concentrations of 0.5 and 1.0 mg/l was the best interaction on the
percentage of explants which formed callus.

Keyword : BAP, NAA, shoot multiplication, Kanci orange

PENDAHULUAN atas, juga ditentukan oleh batang bawahnya.

Kombinasi antara batang atas yang

J
eruk merupakan salah satu komoditas
buah-buahan yang mempunyai peranan
penting di pasaran dalam negeri maupun
luar negeri, baik dalam bentuk segar
maupun dalam bentuk olahan sehingga
pengelolaan jeruk sekarang ini berorientasi
pada pola pengembangan komprehensif
(Djomaeijah et al, 1999). Walaupun populasi
tanaman mengalami peningkatan yang tajam,
namun sampai saat ini buah jeruk belum
memenuhi harapan, karena adanya serangan
penyakit Citrus Vein Phloem Degeration (CVPD)
sehingga banyak tanaman jeruk menjadi
musnah (Aksi Agraris Kanisius, 1994).
Dalam upaya pengembangan tanaman
jeruk, pengadaan bibit unggul dan bermutu
memegang peranan penting, apalagi mengingat
tanaman ini bersifat tahunan. Mutu bibit
tanaman jeruk selain ditentukan oleh batang
berproduksi tinggi dan berkualitas baik, dengan
batang bawah yang memiliki adaptasi luas
terhadap tanah dan lingkungan tumbuhnya;
tahan terhadap hama dan penyakit akar; serta
sesuai dengan batang atas yang digunakan;
akan menghasilkan bibit jeruk yang bermutu
tinggi (Rahayu, 1993).
Jeruk kanci merupakan kelompok batang
bawah indegeneous Muara Sijunjung yang
mempunyai efek cebol (rendah) terhadap
batang atas terutama untuk jeruk keprok siam,
toleran terhadap kekeringan, tanah lempung
dan toleran terhadap Tristeza (Purnomo et al,
2000). Sekarang ini jeruk kanci cukup sulit
untuk didapatkan. Harga jual yang tidak
mendukung dan kurangnya pengetahuan
masyarakat akan kegunaan tanaman ini
menyebabkan kurangnya minat masyarakat
untuk membudidayakannya secara khusus.

210 ISSN 1979-0228

 Pengaruh Pemberian BAP dan NAA terhadap Multiplikasi Tunas Pucuk Jeruk Kanci
Selain itu kerusakan lingkungan dewasa ini,
ikut andil dalam mengurangi jumlah jeruk
kanci.
Untuk masalah diatas perlu usaha
penyediaan bibit sebagai upaya konservasi
plasma nutfah jeruk kanci. Konservasi perlu
dilakukan untuk mempertahankan
keanekaragaman hayati, karena dengan
berkurangnya keanekaragaman hayati akan
sangat merugikan bagi pemulia tanaman dalam
merakit varietas-varietas baru.
Konservasi dapat dilakukan secara
konvensional, yaitu secara in situ dan ex situ,
konservasi secara ex situ dapat dilakukan secara
in vitro. Menurut Soetikno (1985), banyak
keuntungan yang dapat diperoleh dari
pengawetan plasma nutfah dengan
menggunakan teknik kultur jaringan, baik dari
segi biaya maupun sarana. Dalam
perplasmanutfahan kultur in vitro berperan
sebagai alat penyimpanan dan penggandaan
tanaman.
Multiplikasi merupakan salah satu
tahapan yang perlu dilakukan dalam kultur
jaringan selain inisiasi dan aklimatisasi. Salah
satu faktor pendukung laju multiplikasi adalah
kombinasi zat pengatur tumbuh. Menurut
Wattimena et al (1992), pengaruh zat pengatur
tumbuh untuk suatu proses morfogenesis atau
pertumbuhan dan perkembangan tanaman
merupakan kerja sama dari dua atau lebih zat
pengatur tumbuh. Pemilihan zat pengatur
tumbuh dikaitkan dengan urutan tingkat
pekerjaan kultur jaringan. Zat pengatur
tumbuh yang banyak digunakan adalah auksin
dan sitokinin.
Golongan auksin dan sitokinin akan
mempengaruhi respon eksplan yang
dikulturkan. Proporsi yang relatif tinggi dari
auksin terhadap sitokinin menyebabkan
diferensiasi mengarah pada pertumbuhan akar
dan jika sitokinin lebih tinggi dari auksin maka
jaringan akan terdiferensiasi kearah
pertumbuhan tunas, dalam percobaan kultur
jaringan pada umumnya jenis auksin dan
sitokinin yang digunakan adalah NAA dan
BAP karena kedua zat pengatur tumbuh
tersebut relatif tahan terhadap degradasi,
sedangkan media yang banyak dipakai adalah
media MS (George and Sherrington, 1984).
Grinblat (1972) cit Rahayu (1993),
menggunakan potongan kotiledon yang berasal
dari kultur in vitro sebagai eksplan pada media
dasar MS. Kalus terbentuk cukup banyak pada
penambahan BA 0,1 1 mg/l dengan
ISSN 1979-0228
kombinasi 0,1 mg/l NAA, namun persentase
tunas yang muncul adalah paling kecil.
Sedangkan kalus lebih sedikit muncul pada
penambahan 10 mg/l BA dan 1,0 mg/l NAA,
tapi inisiasi tunas adalah maksimum. Penelitian
Rahayu (1993), menyatakan bahwa perlakuan
BA 0,5 mg/l dan NAA 0,1 mg/l memberikan
jumlah tunas total terbanyak pada media MS
dengan eksplan yang berasal dari epikotil jeruk
Troyer Citrange yang dikecambahkan secara in
vitro.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk
mengetahui pengaruh pemberian NAA, BAP
dan interaksi keduanya dalam multiplikasi
tunas pucuk jeruk kanci secara in vitro.
.
BAHAN DAN METODE
Tempat dan Waktu
Penelitian ini telah dilaksanakan di
Laboratorium Kultur Jaringan Tumbuhan
Jurusan Budidaya Pertanian Universitas
Andalas Padang. Penelitian dilakukan dari
bulan Juli 2004 sampai Januari 2005.
Bahan dan Alat
Bahan-bahan yang digunakan dalam
percobaan ini adalah eksplan yang berasal dari
biji jeruk kanci yang dikecambahkan secara in
vitro. Zat kimia penyusun media MS, NAA,
BAP, NaOH 0,1 N, HCl 0,1 N, alkohol 70%,
alkohol 96%, bayclin, sukrosa, aquadest, bubuk
agar-agar, plastic wrap, selotip bening,
detergen, karet gelang, kertas label, tissue, dan
formalin. Adapun alat-alat yang digunakan
adalah autoklaf, timbangan analitik, laminar air
flow cabinet (LAFC), lemari es, oven, pH meter,
botol kultur, kompor gas, hand sprayer, scalpel,
pinset, bunsen,, cawan petri dan rak kultur
yang dilengkapi dengan lampu neon 20 watt
sebagai sumber penyinaran dan alat tulis.
Rancangan
Rancangan yang digunakan adalah
faktorial dalam Rancangan Acak Lengkap
(RAL) yang terdiri dari 2 faktor dengan 3
ulangan. Faktor A adalah BAP dengan 4 taraf
konsentrasi yaitu :
A1 = 0,0 mg/l BAP
A2 = 2,5 mg/l BAP
A3 = 5,0 mg/l BAP
A4 = 7,5 mg/l BAP
Sedangkan faktor B adalah NAA dengan 4
taraf konsentrasi yaitu :
211
Jerami Volume 3 No.3, September Desember 2010
B1 = 0,0 mg/l NAA
B2 = 0,5 mg/l NAA
B3 = 1,0 mg/l NAA
B4 = 1,5 mg/l NAA
Percobaan terdiri dari 16 kombinasi
perlakuan, tiap kombinasi perlakuan ada 3
ulangan, dan pada masing-masing ulangan
terdiri dari 3 botol kultur, sehingga jumlah
satuan unit percobaan adalah 48, dengan 144
botol kultur dimana semua populasi dijadikan
sampel. Denah percobaan dapat dilihat pada
Lampiran 3. Data yang diperoleh diuji secara
statistik dengan menggunakan uji F pada taraf
nyata 5 %. Apabila berbeda nyata maka
dilanjutkan dengan uji lanjutan Duncans
Multiple Range Test (DNMRT) pada taraf nyata
5 % dan disajikan dalam bentuk Tabel.
Pelaksanaan
Sterilisasi Alat
Alat-alat yang akan digunakan disterilkan
terlebih dahulu, seperti botol kultur dicuci
dengan detergen dan dibilas hingga bersih,
setelah itu direndam dengan bayclin 5 ml/l air
selama 1 malam. Alat-alat penanaman seperti
pinset, pisau scalpel dan cawan petri terlebih
dahulu dibungkus dengan kertas lalu
disterilisasi bersama-sama botol kultur dalam
autoklaf pada tekanan 15 psi dengan suhu 1210
C selama 30 menit. Setelah disterilisasi, alat-alat
tersebut diovenkan pada suhu 750 C sampai
saat digunakan. LAFC dan rak kultur disemprot
dahulu dengan alkohol 70 % setiap akan
digunakan. Ruangan inkubasi juga disterilkan
dengan formalin sebelum digunakan.
Persiapan Eksplan
Buah jeruk dicuci dengan detergen sampai
kulit luarnya benar-benar bersih, kemudian
rendam dalam bayclin 5 ml/l air selama lebih
kurang 30 menit. Buah yang telah direndam
bayclin dibawa keruang transfer (tanam)
kemudian masukkan kedalam alkohol 96 %
yang berada dalam LAFC selama 5 menit. Buah
diambil dengan pinset dan dikupas kulitnya,
dalam mengupas usahakan agar scalpel tidak
membelah bijinya, kemudian biji dimasukkan
dalam aquadest steril, dan dilewatkan ke api
setelah itu masukkan dalam media yang telah
disediakan. Biji dikecambahkan dalam botol
kultur yang telah berisi media MS tanpa zat
pengatur tumbuh selama 3 minggu, setelah
membentuk kecambah, bibit dipindahkan ke
media MS yang telah ditambah NAA dan BAP
212
dengan konsentrasi 1 dan 1 ppm.1. Hal ini
dilakukan agar eksplan yang akan digunakan
seragam dan jumlahnya mencukupi. Setelah 1
bulan eksplan diambil tunas pucuknya, tunas
pucuk yang diambil mempunyai 2 buah buku
ditiap tunasnya.
Pembuatan Media
Pada percobaan ini media yang digunakan
adalah media MS (Komposisi media lihat
Lampiran 2) sesuai dengan kebutuhan,
ditambah dengan NAA dan BAP sesuai
perlakuan. Sukrosa diberikan sebanyak 30 g/l
media, setelah itu dilakukan pengukuran pH
yaitu 5,8. Bahan pemadat yang digunakan
adalah bubuk agar-agar sebanyak 7,5 g/l
media. Selanjutnya media dimasak sampai
mendidih dan dimasukkan kedalam masing-
masing botol sebanyak 20 ml/botol dan ditutup
dengan penutupnya. Media disterilisasi di
dalam autoklaf pada tekanan 15 psi suhu 1210 C
selama 20 menit. Kemudian pindahkan dan
disimpan dalam ruang inkubasi selama 1
minggu untuk melihat kontaminasi, bila ada
kontaminasi akan dikeluarkan dari ruangan
inkubasi.
Penanaman
Media dalam botol kultur yang telah
disterilkan dibiarkan (diinkubasi) selama lebih
kurang 1 minggu. Media yang tidak
terkontaminasi siap dipakai untuk penanaman
eksplan. Sebelum dilakukan penanaman, LAFC
dibersihkan dahulu dengan menyemprotkan
alkohol 70 %. Sebelum dimasukkan ke dalam
LAFC, alat-alat dan botol-botol media yang
telah disiapkan disemprot dengan alkohol 70 %
dahulu. Pada saat penanaman, tangan yang
masuk kedalam LAFC juga harus disemprot
dengan alkohol 70 % untuk menjaga agar tetap
steril. Eksplan ditanam pada masing-masing
media, agar seragam tiap-tiap eksplan yang
ditanam mempunyai 2 buah buku yang
dihitung dari titik tumbuh, eksplan dalam
posisi tegak, kemudian ditutup kembali dan
dibalut dengan plastik wrap. Botol yang telah
berisi eksplan dipindahkan keruang
penyimpanan dan disusun pada rak kultur.
Pemeliharaan
Pemeliharaan meliputi menjaga
kebersihan ruang kultur, pemisahan eksplan
atau media yang terkontaminasi oleh
1Komunikasi pribadi dengan ibuk Karsinah di Balitbu
Solok.
ISSN 1979-0228
 Pengaruh Pemberian BAP dan NAA terhadap Multiplikasi Tunas Pucuk Jeruk Kanci

mikroorganisme dari ruang kultur. tiap eksplan yang ditumbuhkan. Diamati

Penyemprotan ruangan dan botol-botol eksplan sampai tanaman berumur 70 hst, dihitung
setiap hari dengan menggunakan alkohol 70 % dengan rumus :
serta penyinaran dengan cahaya lampu neon 20 % multiplikasi =
watt pada tiap-tiap rak kultur. Jumlah eksplan yang mengalami multiplikasi x 100%
Jumlah eksplan hidup
Pengamatan
Pengamatan dilakukan sampai eksplan e. Persentase eksplan yang membentuk akar (%)
berumur 10 minggu setelah tanam atau 70 hari Eksplan yang membentuk akar ditandai
setelah tanam (hst), pengamatan dilakukan dengan telah munculnya akar yang panjangnya
terhadap : besar atau sama dengan 0,2 cm. Pengamatan
dilaksanakan sampai umur 70 hst, dihitung
a. Persentase eksplan yang hidup (%) dengan menggunakan rumus :
Eksplan hidup ditandai dengan warna % akar = Jumlah eksplan yang membentuk akar x 100%
yang masih hijau, tidak terkontaminasi, dan Jumlah eksplan hidup
masih segar. Dihitung dengan menggunakan
rumus : f. Persentase eksplan yang membentuk
%eksplan yang hidup = Jumlah eksplan yang hidup x 100% kalus (%)
Jumlah eksplan hidup Kalus merupakan sekumpulan sel yang
belum terdiferensiasi, berwarna putih
kompak atau putih kekuningan yang terbentuk
b. Saat muncul tunas (hst)
pada salah satu sisi atau seluruh permukaan
Pengamatan ini ditandai dengan eksplan, diamati sampai umur 70 hst. Dihitung
munculnya tunas yang biasanya berwarna dengan rumus :
putih atau putih kehijauan. Dinyatakan telah % eksplan berkalus = Jumlah eksplan berkalus x100%
muncul apabila pada salah satu populasi Jumlah eksplan hidup
sampel telah muncul atau tumbuh tunas dan
dicatat waktunya. Pengamatan dilakukan pada
saat muncul tunas pertama. HASIL DAN PEMBAHASAN

Persentase Eksplan Hidup

c. Persentase eksplan yang membentuk tunas (%)
Pengamatan dilakukan bila sudah muncul
tunas sampai umur 70 hst , dihitung dengan
menggunakan rumus :
%tunas = Jumlah eksplan yang membentuk tunas x 100%
Jumlah eksplan hidup
d. Persentase eksplan yang mengalami
multiplikasi (%)
Eksplan yang mengalami multiplikasi
adalah bila terdapat 2 atau lebih tunas pada
Hasil analisis ragam persentase eksplan
hidup dapat dilihat pada Lampiran 4a. Analisis
ragam menunjukkan bahwa tidak terdapat
interaksi yang nyata antara konsentrasi NAA
dengan konsentrasi BAP yang diberikan
terhadap eksplan hidup, begitu juga dengan
pengaruh utama masing-masing zat pengatur
tumbuh yang diberikan. Hasil uji F pada taraf
5% terhadap persentase eksplan hidup dapat
dilihat pada Tabel 1.

Tabel 1. Persentase eksplan hidup pada media MS dengan pemberian berbagai konsentrasi BAP
dan NAA pada umur 70 hst
Konsentrasi BAP Konsentrasi NAA (mg/l) Pengaruh
0 0,5 1 1,5 Utama BAP
(mg/l) (%)
0,0 77,78 88,89 77,78 88,89 83,33
2,5 88,89 88,89 100,00 100,00 94,44
5,0 100,00 88,89 100,00 100,00 97,22
7,5 88,89 100,00 88,89 88,89 91,67
Pengaruh utama NAA 88,89 91,67 91,67 94,44
Angka-angka pada kolom dan baris yang sama berbeda tidak nyata menurut uji F pada taraf 5%

ISSN 1979-0228 213

Jerami Volume 3 No.3, September Desember 2010

Berdasarkan Tabel 1 diketahui bahwa eksplan. Gunawan (1987) menyatakan bahwa

tanpa pemberian NAA, pada konsentrasi NAA
0,5 mg/l, 1,0 mg/l dan 1,5 mg/l tidak
memberikan pengaruh yang nyata terhadap
persentase eksplan yang hidup. Hal ini juga
terjadi pada tanpa pemberian BAP, pada
konsentrasi BAP 2,5 mg/l, 5,0 mg/l, dan 7,5
mg/l.
Pemberian BAP sampai konsentrasi 5,0
mg/l cenderung meningkatkan persentase
eksplan yang hidup, namun pada konsentrasi
7,5 mg/l persentasenya turun, tetapi lebih
tinggi dibandingkan tanpa pemberian BAP.
Peningkatan persentase eksplan hidup juga
terjadi pada pemberian NAA pada konsentrasi
0,5, mg/l dan 1,5 mg/l.
Tidak adanya pengaruh yang nyata dari
pemberian beberapa konsentrasi NAA dan
BAP terhadap eksplan hidup kemungkinan
disebabkan karena sudah adanya
keseimbangan antara zat pengatur tumbuh
eksogen dengan hormon endogen dari eksplan.
Sumardi (1996), menyatakan bahwa auksin dan
sitokinin bekerja bersama-sama dalam
menciptakan kondisi optimum untuk
pertumbuhan eksplan. Interaksi antara hormon
endogen dan zat pengatur tumbuh yang
diberikan akan mampu mendukung
kelangsungan hidup eksplan.
Tingginya persentase eksplan hidup juga
disebabkan karena komposisi zat dalam media
telah cocok untuk menyokong kehidupan
pertumbuhan dan perkembangan eksplan juga
dipengaruhi oleh media yang digunakan.
Media MS merupakan media yang cocok untuk
pertumbuhan dan perkembangan hampir
semua jenis tanaman. Wattimena et al (1992)
juga menyatakan bahwa faktor-faktor yang
mempengaruhi pertumbuhan dan
morfogenesis tanaman adalah genotipe dari
eksplan yang digunakan, media yang
mencakup komponen penyusun media dan zat
pengatur tumbuh yang ditambahkan,
lingkungan tumbuh, keadaan fisik tempat
kultur ditumbuhkan dan fisiologi jaringan
eksplan yang digunakan.
Persentase Eksplan Yang Mengalami Multiplikasi
Hasil analisis ragam dari persentase
eksplan yang mengalami multiplikasi dapat
dilihat pada Lampiran 4b. Analisis ragam
menunjukkan bahwa interaksi BAP dan NAA
tidak memberikan pengaruh yang nyata
terhadap persentase eksplan yang mengalami
multiplikasi, hal ini juga terjadi pada pemberian
berbagai konsentrasi NAA. Pemberian BAP
pada berbagai konsentrasi memberikan
pengaruh yang nyata terhadap eksplan yang
mengalami multiplikasi. Hasil uji DNMRT
pada taraf 5% terhadap persentase eksplan
yang mengalami multiplikasi dapat dilihat
pada Tabel 2.

Tabel 2. Persentase eksplan yang mengalami multiplikasi pada media MS dengan pemberian
berbagai konsentrasi BAP dan NAA pada umur 70 hst
Konsentrasi NAA (mg/l)
Konsentrasi BAP Pengaruh Utama
0,0 0,5 1,0 1,5
(mg/l) BAP
(%)
0,0 44,44 44,44 11,11 44,44 36,11 b
2,5 77,78 88,89 100,00 88,89 88,89 a
5,0 77,78 77,78 66,67 66,67 72,22 a
7,5 11,11 0,00 22,22 22,22 13,89 c
Pengaruh utama NAA 52,78 52,78 50,00 55,56
Angka-angka pada kolom yang sama diikuti huruf kecil yang sama berbeda tidak nyata menurut uji DNMRT pada taraf 5%.

Pada Tabel 2 dapat dilihat bahwa
pemberian BAP pada konsentrasi 2,5 mg/l
dapat meningkatkan persentase eksplan
mengalami multiplikasi yang merupakan
persentase tertinggi. Tetapi pada konsentrasi
BAP 5,0 mg/l terjadi penurunan walaupun
tidak nyata. Pada pemberian BAP dengan
konsentrasi 7,5 mg/l terjadi penurunan yang
sangat nyata. Adanya penurunan persentase ini
diduga karena pemberian BAP pada
konsentrasi tinggi diduga dapat menghambat
jumlah tunas yang terbentuk yang ditandai
dengan rendahnya persentase eksplan yang
mengalami multiplikasi.
Moore (1979) dan Wattimena (1988)
menyatakan bahwa pemberian zat pengatur
tumbuh dengan konsentrasi tinggi bukanlah
bersifat mendorong pertumbuhan akan tetapi

214 ISSN 1979-0228

 Pengaruh Pemberian BAP dan NAA terhadap Multiplikasi Tunas Pucuk Jeruk Kanci

menghambat perkembangan eksplan, karena
keseimbangan tidak dapat terjadi sehingga
dapat menghambat proses pembelahan sel.
Namun hal ini juga tergantung dari
kemampuan masing-masing eksplan
menerima tambahan dari luar, karena pada
percobaan Enjoni (2004) pada tanaman jeruk
Crifta-01, pemberian BAP pada konsentrasi 8
mg/l memberikan jumlah tunas terbanyak, ini
menandakan bahwa persentase eksplan yang
mengalami multiplikasi juga cukup tinggi.

BAP 2,5 mg/l + NAA 1,5 mg/l BAP 7,5 mg/l + NAA 1,5 mg/l

Wareing and Philips,1981 cit Thaib (1997)
menyatakan bahwa tanggap tanaman terhadap
hormon dan zat pengatur tumbuh sangatlah
bervariasi tergantung pada kepekaan organ
tersebut. Bekerjanya hormon dan zat pengatur
tumbuh yang diberikan pada jaringan tanaman
yang tanggap, akan membawa perubahan yang
akibatnya dapat diukur pada pengaruh
fisiologis dan morfologis tanaman.
Persentase Eksplan Yang Membentuk Kalus
Hasil analisis ragam dari persentase eksplan
yang membentuk kalus dapat dilihat pada
Lampiran 4c. Sidik ragam menunjukkan bahwa
pemberian beberapa konsentrasi NAA, dan
pada berbagai konsentrasi BAP serta interaksi
keduanya berpengaruh nyata terhadap
eksplan yang membentuk kalus. Hasil uji
DNMRT pada taraf 5% terhadap persentase
eksplan membentuk kalus dapat dilihat pada
Tabel 3.

Tabel 3. Persentase eksplan yang membentuk kalus pada media MS dengan pemberian berbagai
konsentrasi BAP dan NAA pada umur 70 hst
Konsentrasi BAP Konsentrasi NAA (mg/l) Pengaruh
0,0 0,5 1,0 1,5 Utama BAP
(mg/l) (%)
0,0 0,00 b B 66,67 a B 87,50 a A 87,50 aA 60,42
2,5 44,44 b A 100,00 a A 100,00 a A 77,78 aB 80,55
5,0 33,33 a A 11,11 ab C 0,00 b B 33,33 aC 19,44
7,5 0,00 a B 0,00 a C 22,22 a B 0 ,00 aD 5,50
Pengaruh utama 19,44 44,44 50,00 47,22
NAA
Angka-angka pada kolom yang sama diikuti huruf besar yang sama dan angka-angka pada baris ang sama diikuti huruf kecil
yang sama berbeda tidak nyata menurut uji DNMRT pada taraf 5%.

Pemberian NAA pada konsentrasi 0,5
mg/l dan 1,0 mg/l memberikan persentase
eksplan membentuk kalus tertinggi jika
dikombinasikan dengan BAP 2,5 mg/l. Ini
berarti bahwa interaksi auksin dengan
konsentrasi 0.5 mg/l dan 1,0 mg/l dengan
sitokinin 2,5 mg/l telah memberikan
perbandingan yang seimbang terhadap eksplan
yang membentuk kalus. Widiastoety (1985),
menyatakan bahwa pembentukan kalus
biasanya terjadi jika perbandingan antara
konsentrasi auksin dan sitokinin seimbang.
Sumardi (1996) menyatakan, bahwa
pertumbuhan kalus dipengaruhi oleh beberapa
faktor terutama yang berhubungan langsung
dengan eksplan seperti ketersediaan energi,
tempat eksplan tumbuh dan kehadiran zat
pengatur tumbuh terutama auksin dan
sitokinin dalam media kultur dengan
keseimbangan tertentu.
.

ISSN 1979-0228 215

Jerami Volume 3 No.3, September Desember 2010
BAP 2,5 mg/l + NAA 1,0 mg/l
Pemberian BAP pada konsentrasi 7,5 mg/l
dengan berbagai interaksinya dengan NAA
memberikan pengaruh yang tidak nyata.
Perlakuan BAP pada konsentrasi 7,5 mg/l
dengan berbagai taraf konsentrasi NAA
menyebabkan tidak terbentuknya kalus,
kecuali bila dikombinasikan dengan NAA pada
konsentrasi 1,0 walaupun memberikan nilai
yang tidak nyata. Hal ini diduga karena
pemberian BAP yang terlalu tinggi tidak
seimbang dengan konsentrasi NAA dalam
pembentukan kalus. Hal ini terjadi tidak hanya
pada persentase eksplan yang membentuk
kalus, tetapi juga pada eksplan yang mengalami
multiplikasi. Kalus yang terbentuk pada
perlakuan BAP dengan konsentrasi 2,5 mg/l
Tabel 4. Persentase eksplan membentuk tunas pada media MS dengan pemberian berbagai
konsentrasi BAP dan NAA pada umur 70 hst
Konsentrasi NAA mg/l
Konsentrasi BAP
0,0 0,5
(mg/l)
(%)
0,0 77,78 66,67
2,5 100,00 77,78
5,0 88,89 77,78
7,5 88,89 100,00
Pengaruh utama NAA 88,89 80,55
Angka-angka pada kolom dan baris yang sama berbeda tidak nyata menurut uji F pada taraf 5%
Eksogen dengan hormon endogen dari
Tabel 4 memperlihatkan bahwa persentase
eksplan membentuk tunas memberikan
pengaruh yang tidak nyata, tapi jika dilihat dari
angka-angkanya, terlihat bahwa pemberian
BAP pada konsentrasi 2,5 mg/l dan 7,5 mg/l
cenderung memberikan persentase eksplan
membentuk tunas yang sama tinggi. Pemberian
BAP dengan konsentrasi 5,0 mg/l lebih tinggi
dibandingkan dengan yang tanpa pemberian
BAP. Ini membuktikan bahwa pada eksplan
masih perlu tambahan zat pengatur tumbuh.
Kemampuan eksplan membentuk tunas
tertinggi didapat pada pemberian NAA dengan
konsentrasi 1,0 mg/l, namun dapat dilihat
216
BAP 2,5 mg/l + NAA 1,0 mg/l
dengan berbagai taraf konsentrasi NAA
merupakan multiplikasi secara tidak langsung,
yang menghasilkan bahan tanam yang bagus
untuk diregenerasikan membentuk planlet.
Persentase Eksplan Membentuk Tunas
Hasil analisis ragam eksplan yang
membentuk tunas dapat dilihat pada Lampiran
4d. Analisis ragam menunjukkan bahwa
pemberian BAP dan NAA pada berbagai
konsentrasi terhadap eksplan yang membentuk
tunas memberikan pengaruh yang tidak nyata,
begitu juga dengan interaksi BAP dan NAA.
Hasil uji F pada taraf 5% terhadap persentase
eksplan membentuk tunas disajikan pada
Tabel 4.
Pengaruh Utama
1,0 1,5
BAP
77,78 66,67 72,22
100,00 88,89 91,67
100,00 88,89 91,32
88,89 88,89 91,67
91,67 83,33
bahwa penambahan tidak memberikan
pengaruh karena pada pemberian 0,0 mg/l
NAA persentase eksplan membentuk tunas
lebih tinggi dari pemberian NAA 0,5 mg/l.
Wattimena (1992) menyatakan bahwa
proliferasi tunas hanya memerlukan sitokinin
dalam konsentrasi yang tinggi tanpa auksin
atau dengan auksin dalam konsentrasi yang
rendah sekali. Zat pengatur tumbuh pada
eksplan tergantung dari zat pengatur tumbuh
endogen dan zat pengatur tumbuh eksogen
yang diserap dari media tumbuh. Zat pengatur
tumbuh eksogen ini tidak selalu sama dengan
zat pengatur tumbuh endogen. Tetapi
kebanyakan zat pengatur tumbuh eksogen
ISSN 1979-0228
 Pengaruh Pemberian BAP dan NAA terhadap Multiplikasi Tunas Pucuk Jeruk Kanci

mempunyai peran yang sama dengan zat Saat Muncul Tunas

pengatur tumbuh endogen. Pada beberapa jenis
tanaman atau pada tingkat selular kebutuhan
akan zat pengatur tumbuh eksogen itu akan
spesifik.
Gunawan (1988) menyatakan bahwa
interaksi dan perimbangan antara zat pengatur
tumbuh yang diberikan dalam media dan yang
diproduksi oleh sel secara endogen, menentu-
kan arah perkembangan suatu kultur, penam-
bahan auksin atau sitokinin eksogen mengubah
level zat pengatur tumbuh endogen sel.
Hasil analisis ragam saat muncul tunas
dapat dilihat pada Lampiran 4e. Pemberian
beberapa konsentrasi BAP menunjukkan
pengaruh yang nyata terhadap saat muncul
tunas. Pada perlakuan NAA dengan berbagai
taraf konsentrasi tidak memberikan pengaruh
terhadap saat muncul tunas, begitu juga dengan
interaksi keduanya. Saat muncul tunas setelah
diuji dengan uji DNMRT pada taraf 5% dapat
dilihat pada Tabel 5.

Tabel 5. Saat muncul tunas dengan pemberian berbagai konsentrasi NAA dan BAP dalam media
MS.
Konsentrasi BAP Konsentrasi NAA(mg/l)
Pengaruh Utama
0,0 0,5 1,0 1,5
(mg/l) BAP
(hst)
0,0 29,44 21,06 25,44 34,50 27,61 a
2,5 19,67 18,50 14,57 14,44 16,79 b
5,0 8,11 18,56 14,78 21,22 15,67 b
7,5 16,55 15,22 20,06 20,00 17,96 c
Pengaruh utama NAA 18,44 18,33 18,71 22,51
Angka-angka pada kolom yang sama diikuti huruf kecil yang sama berbeda tidak nyata menurut uji DNMRT pada taraf 5%.

Pada Tabel 5 terlihat bahwa peningkatan sitokinin. Sitokinin berperan dalam

konsentrasi BAP dari tanpa pemberian BAP
sampai 7,5 mg/l mampu mempercepat saat
muncul tunas. Sedangkan peningkatan
konsentrasi BAP menjadi 7,5 mg/l justru
memperlambat saat muncul tunas jika
dibandingkan dengan pemberian 2,5 mg/l dan
5,0 mg/l. Saat muncul tunas tercepat terdapat
pada pemberian konsentrasi BAP 5,0 mg/l,
yang tidak berbeda nyata dengan pemberian
BAP 2,5 mg/l. Saat muncul tunas terlambat
pada tanpa pemberian BAP, hal ini dapat terjadi
karena sitokinin sangat dibutuhkan dalam
proses pembelahan sel dan merangsang inisiasi
tunas.
Wattimena et al (1992) menyatakan bahwa
peran fisiologis sitokinin adalah mendorong
pembelahan sel, morfogenesis, pertunasan,
pembentukan kloroplas, pemecah dormansi,
pembukaan stomata, pembungaan dan
pembentukan buah partenokarpi. Abidin (1985)
menyatakan sitokinin yang ditambahkan secara
eksogen akan berpengaruh pada peningkatan
sintesis DNA, RNA, dan sintesis protein.
Adenin merupakan salah satu basa organik
penyusun asam nukleat yang merupakan
bahan penyusun kromosom. Setiap
pembelahan sel diikuti dengan duplikasi DNA,
tanpa adenin DNA tidak akan terbentuk.
Pembelahan mitosis tidak akan terjadi tanpa
pembentukan benang gelendong pada
metafase.
Pemberian berbagai konsentrasi NAA
tidak terlalu mempengaruhi saat muncul tunas,
namun dilihat dari pengaruh utama berbagai
konsentrasi NAA, pada konsentrasi NAA 0,5
mg/l memperlihatkan saat tumbuh tunas
tercepat, dan yang terlambat pada konsetrasi
NAA 1,5 mg/l.
Hal ini sejalan pernyataan George and
Sherrington (1984) yang menyatakan bahwa
pada inisiasi tunas hanya memerlukan sitokinin
dalam konsentrasi optimum tanpa auksin atau
auksin dalam konsentrasi yang rendah.
Penambahan sitokinin dalam media kultur
dapat memacu pertumbuhan tunas aksilar dan
mereduksi tunas apikal dari pucuk utama pada
kultur tanaman dikotil, walaupun masih
banyak faktor-faktor lain yang membatasinya
seperti kemampuan sifat multiplikasinya yang
rendah sehingga sangat sulit untuk
menginduksi inisiasi tunas, terutama pada
spesies tanaman berkayu.
Zat pengatur tumbuh yang diberikan pada
media akan berpengaruh terhadap
pertumbuhan eksplan pada kultur in vitro.
Besarnya konsentrasi sitokinin yang
ditambahkan berkaitan erat dengan kandungan

ISSN 1979-0228 217

Jerami Volume 3 No.3, September Desember 2010
hormon yang ada di dalam jaringan eksplan
(Locy 1984 cit Enjoni 2004)
Persentase Eksplan Membentuk Akar
Pada percobaan ini tidak terdapat eksplan
yang membentuk akar, hal ini diduga karena
nisbah auksin-sitokinin yang rendah. George
dan Sherrington (1984), menyatakan bahwa
auksin dalam konsentrasi tinggi tanpa atau
dengan sitokinin rendah akan menginduksi
perakaran. Penelitian Rahayu (1993) yang
menggunakan kombinasi NAA 2,1 mg/l
dengan IBA 0,5 mg/l mampu memberikan
jumlah akar terbanyak pada jeruk Troyer
Citrange secara in vitro.
KESIMPULAN
Adapun kesimpulan dari penelitian ini
adalah sebagai berikut :
- Pemberian konsentrasi BAP yang berbeda,
memberikan pengaruh yang berbeda
terhadap persentase eksplan yang
mengalami multiplikasi dan saat muncul
tunas.
- Perlakuan BAP pada konsentrasi 2,5 mg/l
merupakan perlakuan terbaik terhadap
persentase eksplan yang mengalami
multiplikasi dan saat muncul tunas.
- Interaksi BAP-NAA tidak memperlihatkan
pengaruh yang nyata terhadap
kemampuan eksplan bermultiplikasi.
- Pemberian berbagai konsentrasi NAA tidak
memperlihatkan pengaruh yang nyata
terhadap persentase eksplan yang
mengalami multiplikasi, persentase eksplan
yang hidup, persentase eksplan
membentuk tunas dan saat muncul tunas.
- Interaksi BAP 2,5 mg/l dengan NAA pada
konsentrasi 0,5 dan 1,0 mg/l merupakan
interaksi terbaik terhadap persentase
eksplan yang membentuk kalus.
DAFTAR PUSTAKA
Aksi Agraris Kanisius. 1994. Budidaya tanaman
jeruk. Kanisius. Yogyakarta. 220 hal.
Abidin, Z. 1985. Dasar-dasar pengetahuan
tentang zat pengatur tumbuh. Angkasa
Bandung. 85 hal.
218
Allen, M. 2002. Pengaruh zat pengatur tumbuh
terhadap induksi kalus dan
organogenesis nuselus jeruk kanci
(Citrus sp) secara in vitro. Skripsi S1
Fakultas Pertanian Universitas
Andalas. Padang. 41 hal.
Dixon, R.A and Gonzales. 1994. Plant cell
culture. A Practical Approach. Second
Edition. Oxford University Press.
Oxford New York. Tokio. 230 pp.
Djoemaijah, D. P. Saraswati., R. Hardianto.,
M.C.Mahfud., N. Rangarso., Setiono.,
dan Handoko. 1999. Penerapan
teknologi produksi tanaman jeruk
pulung menggunakan bibit bebas
penyakit di daerah endermis CVPD di
Ponorogo Jawa Timur. Dalam
Prosiding Seminar Nasional
Hortikultura. 106-113 hal.
Enjoni. 2004. Respon eksplan pucuk tanaman
jeruk (Citrus sp) terhadap konsentrasi
NAA dan BAP pada inisiasi dan
ploriferasi tunas secara in vitro. Tesis
S2. Program Pascasarjana Universitas
Andalas. Padang. 61 hal.
Ferita, I., Sutoyo., H. Yanti. 2003. Pertumbuhan
dan perkembangan tunas pucuk
melinjo (Gnetum gnemon.L) secara in
vitro. 15-17 hal.
George, L. E ., and P.D Sherrington. 1984. Plant
propagation by tissue culture. Hand
Book and Directory of Commersial
Laboratory Exegetics Ltd. Eversly,
Basingtoke. England. 341 pp.
Gunawan, L.W. 1988. Teknik kultur jaringan
tumbuhan. Pusat Antar Universitas.
Bioteknologi IPB Bogor. 120 hal.
Gunawan, L. W. 1987. Teknik kultur in vitro
dalam hortikultura. Penebar Swadaya
Anggota IKAPI. Jakarta. 115 hal.
Mariska, I. 1987. Konsepsi pelestraian plasma
nutfah dengan biakan in vitro. Edisi
Khusus LITTRO 3(1). 22-27 hal.
Moore, T. C. 1979. Biochemistry and physiology
of plant hormones. Springger-Verlag.
New York. 174 pp.
Prahardini, P. E. R; T. Sudaryono dan Purnomo.
1993. Komposisi media dan eksplan
untuk inisiasi dan proliferasi salak
secara in vitro. Penelitian Hortikultura.
ISSN 1979-0228
 Pengaruh Pemberian BAP dan NAA terhadap Multiplikasi Tunas Pucuk Jeruk Kanci
Vol. 5 no. 2 tahun 1993. Balai Penelitian
Hortikultura Solok. 15-27 hal.
Purnomo., Sukarmin., Karsinah., D. Djatmiadi.,
S, Handjani., Nurhadi., Sunyoto., dan
Sudjijo. 2000. Varietas unggul batang
bawah jeruk. Balai Penelitian Tanaman
Buah. Badan Penelitian dan
Pengembangan Pertanian. Departemen
Pertanian. Solok. 15-16 hal.
Rahayu, M.S. 1993. Pengaruh media, auksin,
dan sitokinin terhadap perbanyakan,
perbanyakan tunas jeruk Troyer
Citrange secara in vitro. Dalam Seminar
Program Pascasarjana IPB. Bogor. 74
hal
Soetikno, P.R. 1985. Prospek kultur jaringan
untuk pelestarian tanaman langka.
Trubus: Pekan tanaman
langka.(Jakarta : 1984). 38-39 hal.
Soetisna, U. dan A.T. Soenarto. 1984. Tanaman
langka di Indonesia. LBN Bogor. (tidak
diterbitkan)
Sumardi. 1996. Penggunaan arang aktif pada
beberapa komposisi NAA dan BAP
dalam kultur durian (Durio zibethinus
------------------------------oo0oo------------------------------
ISSN 1979-0228
Murr.) secara in vitro. Tesis S2. Program
Pascasarjana Universitas Andalas.
Padang 76 hal.
Thaib, R. 1997. Perbanyakan enau (Arenga
pinnata (Wumrb) Murr.) secara in vitro.
Tesis. Program Pasca Sarjana
Universitas Andalas. Padang. 98 hal.
Wattimena, G. A. 1988. Zat pengatur tumbuh
tanaman. PAU. IPB Bogor bekerjasama
dengan Lembaga Sumberdaya Inform
IPB. 145 hal.
Wattimena, G. A; L.W. Gunawan, N.A. Mattjik,
E. Syamsudin, N. M. A. Wiendi, A.
Ernawati. 1992. Bioteknologi tanaman.
Pusat Antar Universitas Bioteknologi
IPB. Bogor. 309 hal.
Widiastoety, D. 1987. Penggunaan teknik
kultur in vitro untuk perbanyakan
tanaman. Bahan latihan dan diskusi
penelitian Buah-buahan Malang. Pusat
penelitian dan pengembangan
Hortikultura. Balai Penelitian
Hortikultura. Lembang. 1-28 hal.
219