Kegiatan Antihyperlipidemic Allium lampu chinense

abstrak
Allium chinense adalah tanaman obat dan makanan gizi yang umum
digunakan di Asia Timur. Dalam penelitian ini, kami menyelidiki in vitro aktivitas
antioksidan (pemulungan dari, a-difenil-bpicrylhydrazyl radikal bebas, kandungan
total fenol, mengurangi daya, dan jumlah aktivitas antioksidan) dan konstituen
dari berbagai ekstrak dari A. chinense. Selain itu, kami juga mempelajari in vivo
efek hipolipidemik ekstrak pada tinggi lemak-diet tikus Wistar. ekstrak etanol dari
A. chinense menunjukkan aktivitas antioksidan penting, dan ekstrak penting
minyak dosis tinggi, baik secara signifikan mengurangi serum dan kolesterol total
hepatik, trigliserida, dan kadar lipoprotein lowdensity dan peningkatan serum
kadar high-density lipoprotein dalam diet highfat- tikus Wistar dibandingkan
dengan orang-perawatan berikut diamati dengan Probucol obat kontrol. Selain itu,
lemak visceral di tinggi lemak diet tikus Wistar berkurang. Selanjutnya, kelompok
dengan dosis tinggi penting minyak dan ekstrak residu menunjukkan efek
protektif terkait dengan perubahan hati histopatologi. Hasil ini menunjukkan
bahwa A. chinense adalah tanaman yang berharga layak penyelidikan lebih lanjut
sebagai suplemen makanan potensial atau obat botani.

1. Perkenalan
Kedua spesies oksigen reaktif (ROS) dan stres oksidatif memainkan peran
sentral dalam patologi dan perkembangan banyak penyakit manusia terkait. Oleh
karena itu, upaya besar untuk ilmiah menyelidiki potensi endogen dan antioksidan
eksogen telah muncul [1]. Untuk memperkirakan aktual pertahanan oksidatif atau
stres status, kelompok yang dipilih dari nutrisi dan biomarker antioksidan, seperti
superoksida dismutase, katalase, glutation peroksidase, dan NADPH (nicotinamide
adenin dinukleotida fosfat) oksidase, diukur. Secara umum, tingkat ROS yang
tepat menghasilkan transmisi intraseluler dan pertahanan sinyal terhadap
patogen. Namun, peningkatan kadar ROS menyebabkan perkembangan beberapa
penyakit manusia, termasuk kanker, diabetes, aterosklerosis, iskemia, dan
disfungsi endokrin. Oleh karena itu, moderat tingkat ROS dan menurunkan jumlah
lipid serum yang penting dalampengobatan penyakit.
Didistribusikan di Asia Timur, Allium chinense (sinonim: Allium bakeri; nama
umum: rakkyo, bawang Cina) adalah ramuan asli abadi ke China yang biasanya
dipanen dari Maret sampai Mei. A. chinense umumnya dibudidayakan untuk
tujuan gizi dan obat, dan sering acar dan disajikan sebagai lauk atau sebagai
suplemen gizi. Tanaman ini secara tradisional digunakan untuk mengobati
stenocardia, asma jantung, dan agregasi antiplatelet [2]. Its alami
sulfurcontaining senyawa yang bertanggung jawab untuk rasa bawang-seperti
yang terbukti mempengaruhi kolesterol plasma dan aterosklerosis in vitro [3,4].
Studi lain juga melaporkan kemampuan nya konstituen steroid untuk mencegah
cedera jantung yang disebabkan oleh stres oksidatif. Meskipun lebih dari 20
senyawa steroid yang berbeda telah diidentifikasi, termasuk saponin furostanol
[5], spirostanol saponin [6], dan xiebai-saponin [7], hanya satu studi meneliti
aktivitas antioksidan A. chinense [8]. Karena kegiatan antihyperlipidemic yang
belum dipelajari sebelumnya, kami menyelidiki aktivitas target dan kandungan
kimia dari A. chinense.
Dalam penelitian ini, lampu A. chinense dibudidayakan di Taiwan diselidiki
untuk komponen pokok dan asam organik. Jumlah quercetin dan rutin di ekstrak
dianalisis dengan kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC), sedangkan senyawa
minyak atsiri dianalisis dengan spektrometri massa kromatografi gas (GC-MS).
Selain itu, ekstrak A. lampu chinense diuji dalam serangkaian uji in vitro
antioxidation, serta dalam in vivo antihyperlipidemic Model tikus. Buktiyang
dilaporkan untuk antioksidan dan efek antihyperlipidemic A. ekstrak chinense
menunjukkan bahwa bahan tanaman adalah kandidat yang menjanjikan untuk
menangkal penyakit oksidatif stressrelated dan aterosklerosis.

2.Bahan dan metode

 2.1. Bahan kimiaa, a-Diphenyl-b-pikrilhidrazil radikal bebas (DPPH), asam
linoleat, butylated hydroxyanisole (BHA), butylated hydroxytoluene, a-tokoferol,
sapi albumin serum, asam thiobarbituric, ferrozine, lesitin, SDS (sodium dodesil
sulfat), amonium tiosianat, besi klorida, KH2PO4, dan K2HPO4 dibeli dari Sigma-
Aldrich (St Louis, MO, USA). Sodium dihydrogen phosphate, disodium hidrogen
fosfat, NaBr, dan asam trichloacetic diperoleh dari Merck & Co Inc (Kenilworth, JN,
USA). Tween 20 diperoleh dari Wako Pure Chemical Industries, Ltd (Osaka,
Jepang). HCl, NaCl, dan tembaga sulfat dibeli dari Tokyo Chemical Industry Co Ltd
(Tokyo, Jepang). EDTA dibeli dariMallinckrodt Farmasi (Raleigh, NC, USA). Ferrous
klorida, Coomassie brilian biru G-250, n-butanol, dan asam fosfotungstat dibeli
dari Avantor Performance Materials (Baker dianalisis reagen; Center Valley, PA,
USA).
2.2. bahan tanaman dan persiapan ekstrak A. chinense dibeli dan berbudaya
dari Puli Kota di Nantou County, Taiwan (April 2013). Bagian bola tanaman dicuci
dan dikeringkan di tempat teduh. Ekstrak air A. chinensebola disiapkan oleh rasio
tanaman-to-air (1: 4), dan kemudian blender digunakan untuk menghancurkan
bola lampu. Akhirnya, aparat Likens- Nickerson digunakan untuk memanaskan
ekstrak dengan pelarut (rasio n-heksana-to-eter: 1: 1) selama 3 jam. Kemudian,
gas nitrogen digunakan untuk mengeringkan ekstrak dan mendapatkan minyak
esensial (ABO). Sisa residu disaring dan beku kering untuk mendapatkan
supernatan (ABW) dan residu (ABR) lapisan.
2.3. Analisis komponen utama
2.3.1. Penentuan kadar air, kadar abu, minyak mentah lemak konten, konten
mentah-protein, konten mentah-serat, dan kandungan karbohidrat Komponen
menargetkan ditunjukkan terdeteksi menggunakan metode yang disetujui oleh
Asosiasi Resmi Pertanian Kimiawan.
2.3.2. Penentuan asam organik Sampel bubuk (500 mg) diekstraksi dengan 50 mL
80% etanol. Suspensi ini dikocok selama 45 menit di ruang suhu dan disaring
melalui Whatman No 4 kertas filter. Residu lima kali kembali diekstraksi dengan
tambahan 25 mL 80% etanol. filtrat gabungan kemudian putar menguap pada 40?
C dan dilarutkan kembali dalam air deionisasi ke volume akhir 10 mL. Ekstrak air
disaring menggunakan 0,45-mm membran filter polyvinylidene fluoride (Millipore,
Billerica, MA, USA) dan dianalisis menggunakan kinerja tinggi kromatografi cair
(HPLC). Sistem HPLC terdiri pompa Hitachi L-2130 (Tokyo, Jepang), seorang
Rheodyne 7725i injector (Rohnert Park, CA, USA), sampel lingkaran 20-mL, a
Hitachi L-2400 detektor UV, dan kolom GP250 RP-18 (4.6 mm 250 mm;? Mightysil,
Kanto Chemical Co, Tokyo, Jepang). Fase gerak adalah asetonitril / deionizer air
[75:25 (v / v)] dengan laju alir 0,8 mL / menit, dan deteksi UV adalah pada 300
nm. Setiap asam organik diidentifikasi menggunakan Asam otentik organik
(semua dari Sigma-Aldrich) dan dihitung oleh kurva kalibrasi masing-masing.
2.4. flavonoid tekad
2.4.1. Penentuan kandungan quercetin dan rutin
Satu gram sampel diekstraksi selama 24 jam dengan 20 mL
etanol dalam bak air 35? C. Larutan disaring dan
disiapkan untuk analisis HPLC lanjut. Sebuah sistem Hitachi HPLC
dengan pompa L-2130, L-2200 autosampler, dan UV-detektor
(214 nm dan 350 nm, L-2400 detektor UV) digunakan. A-18 RP
GP250 kolom (250 mm 4.6mm diameter dalam, 5 mm;
Mightysil, Kanto Chemical Co) digunakan, dengan fase amobil
dari buffer fosfat (H2O: 85% asam fosfat 99,7: 0,3, v / v) /
asetonitril / metanol pada laju alir 1,0 mL / menit. injeksi
volume sampel adalah 20 mL. Kondisi analitik
dilakukan dengan menggunakan metode Fuleki ini [9]. Pertama,
produk standar kuersetin dan rutin dilarutkan dalam
metanol untuk pembentukan kurva kalibrasi, maka kalibrasi
kurva dibangun menggunakan daerah puncak (Y axis)
dan konsentrasi (mg / mL; X axis) dari quercetin atau rutin
standar. Penerapan analisis HPLC A. chinense
ekstrak dilakukan, dan isi dari quercetin dan
rutin ditentukan di bawah proses yang berbeda terkait
dengan A. chinense.
2.4.2. Penentuan minyak esensial dengan GC-MS
Minyak atsiri dianalisis menggunakan kromatografi gas /
massa detektor selektif (Hewlett-Packard 6890 GC terhubung
untuk Hewlett-Packard 5973 MSD; Agilent Technologies, Santa
Clara, CA, USA). Sebuah kolom kapiler (RTX-lilin, diameter bagian:
0.53 mm? 30 m, 1-mm ketebalan film) digunakan. carrier
gas (helium) dioperasikan pada laju alir 30 mL / menit, dan
Tingkat aliran udara adalah 30 mL / menit. Kualitatif dan kuantitatif
penentuan komponen volatil dilakukan
menurut Majlat et al [10].
2.5. assay antioksidan
2.5.1. Persiapan ekstrak etanol dan ekstrak air
A. chinense
Dua batch bubuk A. chinense (100 mg / batch) dengan
Selain dari 200 mL etanol dan deionisasi air yang individual
diaduk pada suhu kamar selama 8 jam. Solusinya
disaring menggunakan Whatman No 1 kertas filter dan disentrifugasi.
Cairan supernatan disaring dengan Whatman No. 6 penyaring
kertas dan dikeringkan. Kemudian, 20 mL etanol dan air deionisasi
digunakan untuk individual melarutkan sampel, dan
ekstrak etanol (ACEE) dan ekstrak air (ACWE) diperoleh
dan disimpan di? 20? C.
2.5.2. DPPH gratis uji aktivitas radikal-pembilasan
aktivitas radikal-pembilasan bebas DPPH diperkirakan menurut
metode sebelumnya [11]. Setelah 2 mL larutan sampel
ditambahkan ke segar 2 mL 0.2mm DPPH dalam metanol, sampel
dilindungi dari cahaya selama 30 menit, diikuti dengan absorbansi
pengukuran pada 517 nm.
2.5.3. Penentuan jumlah senyawa polifenol
Konsentrasi asam gallic standar atau 0,2 mL sampel
dikombinasikan dengan 1mL Folin-Ciocalteu ini fenol reagen dan
dicampur selama 3 menit. Na2CO3 (7,5%; 0,8 ml) ditambahkan dan
diizinkan untuk duduk selama 30 menit sebelum mengukur di 769 nm. Itu
kontrol positif adalah asam gallic. Jumlah senyawa polifenol
ditentukan sebagai setara asam galat [11].
2.5.4. Jumlah antioksidan-kegiatan uji kapasitas
air deionisasi (1,5 ml), 0,25 mL peroksidase (44 U / mL),
0.25mL H2O2 (500mm), dan 0,25 mL 2,2'-azinobis- (3-
ethylbenzothiazoline-6-sulfonat asam) (ABTS; 1mM) yang
campuran dan bereaksi dalam ruangan gelap selama 1 jam untuk menghasilkan
bluegreen
ABTS. sampel ditambahkan ke dalam campuran, dan
absorbansi diperoleh pada 734 nm. Nilai yang lebih rendah dari
absorbansi terdeteksi, sementara total antioksidan kuat
Kegiatan diamati. aktivitas antioksidan dihitung
menurut rumus berikut: