KonstituenfitokimiadaridaunMalvaverticillataL.

MohammadShahabuddin,Md.SharifHossain,Md.MizanurRahman,TanvirMuslimdan
ShameemAraBegum
Abstrak Dalam penelitian ini, penyelidikan fitokimia telah dilakukan untuk isolasi dan
karakterisasikandungankimiadaridaunMalvaverticillataL.bubukdaunkeringdariMalva
verticillataL.diekstraksidenganpetroleumeterdanetilasetat.Upayatelahdiambiluntukisolasi
senyawa dari petroleum eter dan ekstrak etil asetat daun dengan teknik kromatografi.
Tetracontanylpalmitattelahdiisolasidariekstrakpetroleumeterdanketontelahdiisolasidari
ekstraketilasetat.Struktursenyawatelahdibentukolehteknikspektroskopiyangberbeda.Studi
aktivitasantimikrobadarisenyawaterisolasijugadilakukan.
Katakunci:MalvaverticillataL.,daun,ekstrakpelarut,fitokimia,kromatografi,spektroskopi

1.Pendahuluan
Duniatanamankeanekaragamanhayatiadalahsumberdayaterbesarjamudanmasihsekarang
persentasebesardiseluruh6080%daripopulasiduniatergantungpadaobatobatannabati.
Sejakzamankuno,manusiatelahmenggunakanprodukalami,sepertitanaman,organismelaut,
dalamobatobatanuntukmengurangidanmengobatisemuajenispenyakitfisik.Menurutcatatan
fosil, penggunaanmanusiatanaman sebagaiobat dapat ditelusurikembali setidaknya 60.000
tahun[1].Sekarangjelasbahwa,nilaiobatdaritanamaniniterletakpadakonstituenfitokimia
bioaktifyangmenghasilkanefekfisiologisyangpastipadatubuhmanusia.Senyawaalamiyang
terbentukdasarobatmodernyangkitagunakansaatini.Produkalamidanobatterkaitdigunakan
untuk mengobati 87% dari semua penyakit manusia dikategorikan termasuk infeksi bakteri,
kankerdangangguanimunologi[2].Sekitar25%dariobatyangdiresepkandiduniaberasaldari
tanaman[3]danlebihdari3000spesiestanamantelahdilaporkanmemilikisifatantikanker[4].
Sekitar80%daripopulasidinegaranegaraberkembangbergantungpadaobatobatanberbasis
tanaman tradisional untuk kebutuhan perawatan kesehatan primer mereka [5]. Bangladesh
memilikiwarisanyangkayadanbergengsiobatherbalantaranegaranegaraAsiaSelatan.Lebih
dari 500 spesies tanaman obat diperkirakan sebagai tumbuh di Bangladesh dan sekitar 250
spesiesdarimerekayangdigunakanuntukpersiapanobatobatantradisional.Namun,sebagian
besar tanaman ini belum mengalami kimia, farmakologi dan toksikologi untuk menyelidiki
senyawabioaktifmereka(s)[6].MalvaverticillataL.adalahsalahsatuspesiesdarikeluarga
Malvaceae.DaunMalvaverticillataL.biasanyadikonsumsisebagaisayurandibagianutaradari
Bangladesh, yang dikenal sebagai laffa atau Napa Shak. Mengingat pentingnya Malva
verticillataL.banyakpekerjaanyangtelahdilakukanpadabenihdanpolisakaridayangberbeda
telahdiisolasisebelumnyasepertiMVSIIAdanMVSIIG[7]sebagaipolisakaridanetral,MVS
V[8]sebagaipecticutamapeptidoglikan,MVSI[9]jugasebagaipolisakaridanetral,MVSVI
[10] sebagai sebuah novel polisakarida asam. Di sisi lain, dalam kasus daun aktivitas
antimikroba dan analisis fitokimia telah dilakukan untuk ekstrak pelarut yang berbeda [11].
Namun, menurutsurvei literatur, tidakada laporan tentang konstituen fitokimia daunMalva
verticillataL.telahdilaporkan.Olehkarenaitu,penawaranmakalahinidenganpetroleumeter
danekstraketilasetatdaunMalvaverticillataL.danisolasidankarakterisasikandungankimia
yangpentingsecarabiologisdariekstrakyangberbedaawalnya.
2.Eksperimental
2.1BahandanMetode
Semuapelarutdanreagenyangdigunakandalampercobaaniniadalahsalahsatudarianalisis
ataulaboratoriumkelas,dibelidariMerck(Jerman)danBDH(Inggris)kecualipetroleumeter
yangkelaskomersial.Petroleumeter(PE)diperolehdaribensinkomersialsetelahpenyulingan
dialatkacadistilasidandikumpulkanfraksikeinginan.

Sulingpelarutdigunakandiseluruhpercobaan.Semuafraksidipantauolehanalisiskromatografi
lapis tipis (KLT) menggunakan lempeng kaca Merck pradilapisi gel silika (0,25 mm) dan
tempatterdeteksidibawahbaikruangI2atauUVlampu.Pecahandikeringkanpadakondisi
moderatdalamBuchiRotavapor,R114rotaryevaporator.Kromatografikolomdilakukansilika
gel 60 (230400 mesh), dibeli dari Merck (Jerman). Sebuah spektrum UVvis direkam
menggunakan Shimadzu UV 1800 spektrometer, (Jepang). Sebuah Shimadzu FTIR84005
spektrometer (Jepang) digunakan untuk merekam spektrum inframerah. Band utama (max)
dicatatsebagaibilangangelombang(cm1)dipeletKBr.SpektrumNMRdirekamdiCDCl3
(KantoChemicalCoInc)diJNMECX400,pada400MHzuntuk1HNMRdan100MHzuntuk
13CNMRjuga.StandarinternaluntukNMRadalah0,03%tetrametilsilan(TMS).Pergeseran
kimia()diberikandalamppmsehubungandenganTMSdankoplingkonstanta(J)diberikan
dalam Hz. Spektrum massa resolusi tinggi (HRMS) diakuisisi pada spektrometer MS
menggunakan
Skema1:SkemaEkstraksidaunMalvaverticillataL.(NapaShak)
Kemudian,minyakmentahekstraketerdipisahkandengankromatografikolomsilikagelmana
nheksanadanetilasetat(EtOAc)yangdigunakanpadarasioyangberbedasebagaifasegerak
dan serangkaian fraksi dikumpulkan. Fraksi dipantau dengan kromatografi lapis tipis (KLT)
menggunakansistempelarutyangberbedadanbintikbintikmencobauntukmendeteksioleh
UVcahayadanuapyodium.FraksidigabungkanmenurutmerekaRfsenyawadiisolasibersama
dengan beberapa senyawalain. Kristal padat ditandai sebagai EtC1 dansenyawa lain yang
ditandai sebagai EtC0 dan EtC2. Jumlah yang lebih besar dari ekstrak diperlukan untuk
mengungkapkan karakteristik senyawa. Terisolasi senyawa SH1S1 (C1), dan EtC1 yang
ditandaidenganteknikspektroskopiyangberbeda(UVvis,FTIR,1HNMR,13CNMRdan
HRMS).Jumlahnilainilai.DaripolaTLCsenyawaEtC0danEtC2kecildandetaildarisemua
fraksi,hanyaSH1menunjukkansatutempatdengantailing.Analisisspektroskopitidakselesai
belum.Olehkarenaitu,kamimenargetkanfraksiiniuntukpemurnianlebihlanjutkamiAktivitas
antimikrobadaritigasenyawaterisolasiEtC0,prosesdanmencobauntukmencaritahustruktur
kimiayangsebenarnyaEtC1danEtC2dilakukan[11].Cakramdaritigasampelmenggunakan
teknik spektroskopi yang berbeda. Sisa pecahan solusi misalnya EtC0, EtC1, EtC2 yang
diterapkanuntukitutidakdianalisalebihlanjutkarenajumlahkecil.DariituEscherichiacoli
solusibakteri.SebuahkontrolpositifadalahsebagiankecilSH1,kristalputihtunggalseperti
senyawa adalah dibuat dengan menempatkan disk antibiotik (Ciprofloxacin) di piring agar.
terisolasi melalui teknik kromatografi berturutturut (misalnya Aktivitas antibakteri diamati
untukEtC0,EtC1danETPTLCdankromatografikolompadasilikagel).Akhirnya,SolusiC2
dengan zona hambat yang berbeda. senyawa diisolasi dilambangkan sebagai SH1S1 (C1).
Kemudianekstraketilasetat(~9.0gm)difraksinasidengan

3.HasildanPembahasankromatografikolommenjadiserangkaianfraksi.
SemuaBubukkeringdaunMalvaverticillataL.fraksiyangtersisaterganggudikulkasselama
beberapa hari, diekstraksi dengan petroleum eter (PE) diikuti oleh etil asetat dan setelah
menganalisisfraksi,sebuahkristalputihyangsolid(EtOAc).Persentaseekstrakditentukan.Itu
EI(ElectronImpact)teknik.

2.2PersiapansampelsegarMalvaverticillataL.daun(NapaShak)dikumpulkandaridaerah
pedesaanDinajpur,distrikutaraBangladeshselamamusimdingin.Daunsegaryangdipotong
kecilkecildandikeringkan.Daunkeringudarayanglebihdikeringkandalamovenpadasuhu40
C,dandaunkemudiandikeringkanitutanahuntukbubuk(~200meshsize).Bubukdigunakan
diseluruhpenyelidikan.
2.3 Ekstraksi Proses Sekitar 150 gm daun bubuk dari Malva verticillata L. diekstraksi oleh
seperangkat alat soxhlet dengan petroleum eter (PE) dan etil asetat (EtOAc) berturutturut.
Ekstrakterkonsentrasimenggunakanrotaryevaporator(BUCHIRotavapor,R114,Jepang)pada
suhumaksimum40Cuntukmemberikan~5,2gramekstrakpetroleumeterdan~9.1gm
ekstrak etil asetat (Skema 1) Ekstrak etil asetat (6,07%) lebih tinggi dibandingkan dengan
petroleumeter(PE)ekstrak(3,46%).TerisolasisenyawaSH1S1(C1)daribagianpetroleumeter
adalahkristalputihsolid,yangsangatlarutdalamCHCl3,nheksanadanCH2Cl2.Rf Nilai
diperolehsebagai0,93pada100%nheksana,titikleleh6769C.

FTIRspektrumSH1S1(C1)diKBrpeletmenunjukkan(Gambar.1)sinyalkhasyangberbeda
pada2910,2810,1731,1463,1171dan719cm1wilayah.Bandserapanpada2910cm1dan
2810cm1karenakehadiransp3CHstretching(alifatik)baikkeduaCH3,CH2atau>CH
kelompok.Puncakdi1731cm1adalahuntukkelompokkarbonil(>C=O)darisuatuesteratau
aldehida.Pitaabsorpsipada1171cm1adalahkarenaCOperegangan.Bandserapanpada
1463cm1adalahindikasiCH2lenturdanbandserapanpada719cm1adalahkarenaCH2
lenturdangoyangrantaialifatikpanjang.
SenyawaSH1S1(C1)menunjukkanUVserapanmaksimumpadasekitar268nm(larutanyang
sangatencerdalamnheksana)denganjelaskarenatransisielektronik *padaester(COO)
kelompokfungsional(.Gambar2).

1
HNMR(400MHz,CDCl3,/ppm)spektrumdariSH1S1senyawa(C1)menunjukkan(Gambar.
3)beberapapuncakdidaerahtertentu.=0,860,89(aH&nH,t,J=6.88Hz), 1,25(bHeH&
KhmH,m), 1,55(JH,m), 1,61(FH,t,J=7,5Hz), 2,28(iH,t,J=7,32Hz), 4,034,06
(gH,t,J=6,7Hz).Diamatidaridata 1HNMRdibandingkandengansenyawayangdikenaldari
spektrumNMRdansenyawayangterisolasimenunjukkankemiripandengandotriacontylester
asamdocosanoic[12,13].SinyalNMRkomparatifditunjukkanpadatabel1.
j
Gambar1:FTIRspektrumSH1S1(C1)
Gambar2:spektrumUVdariSH1S1(C1)
Tabel1:Perbandingan1HNMRspektraldatadarisenyawaterisolasiSH1S1(C1)

Jumlahproton
Dilaporkanvalue12,13daritriacontanylpalmitat()ppm2H(gH)4,034,064,082H(iH)2,28
2,12,32H(FH)1,611,582H(JH)1,551,54(s+s*+6)H(bHeH&KhmH)
nilaiTeramati()ppm
1,251,23
6H(aH&nH)0,860,890,850,90
13
CNMR(100MHz,CDCl3, /ppm)spektrumsenyawaterisolasiSH1S1(C1)menunjukkan
(Gambar.4)sinyalkarbonpadaberbagaidaerah.174,06(>C=O),64,40(CH 2O),34,40
(CH2C=O), 28,63(CH2CO), 25,93(CH2CH2CO), 25,02(CH2CH2C=O),
29,1529,69(rantaipanjangCH2) 14,13(CH3(CH2)s*COO(CH2)sCH3), 22,70(CH3
CH2(CH2)s*COO(CH2)sCH2CH3), 31,92 (CH3CH2CH2(CH2)s*COO(CH2)sCH2CH2
CH3)[12,13].
Gambar4:13CNMRspektrumdariSH1S1(C1)
Gambar5:spektrumHRMSdariSH1S1(C1)
Gambar3:1HNMRspektrumSH1S1(C1)
Gambar6:ModelstrukturTentatifdariSH1S1(C1)
Darikarakterisasifisikyangdisebutkandiatasdananalisisdataspektral(misalnyaUVvis,FT
Ir,1HNMRdan13CNMR)dariSH1S1senyawa(C1),diamatiitu,dalamspektrummassa
(HRMS)dariSH1S1senyawa(C1)puncakyangdiamati(Gbr.5)diberbagaidaerahtermasuk
EIMS(m/z)diM+816,760,732,704,676,620,592,578,564,493,465,437,409,364,341,
313,257,256,213,185,129,97,57dllmassamolekulsenyawaituditemukandi816dan
puncakdasarberadadi257.dalamrendahm/zberbagaispektrum,itumenyajikanserangkaian
puncakteraturspasioleh14unitmassa,menunjukkanadanyastrukturalkana.Wilayahnilainilai
tinggidiatas500,menunjukkanpolatertentudaripuncakteraturspasisetiap28unit,dari592ke
732.spektrummassaIniadalahhalyangkompatibeldenganrantaipanjangesterlilinmolekul
[14]. Puncak pada 409, 437, 465, dan 493 masingmasing sesuai dengan fragmen ion [C24
[C26H53CO2]+[C28H49CO2]+,
senyawaterisolasimungkinrantaipanjangestermemilikirumusmolekulCnH 2nO2.Struktur
molekultentatifditunjukkanpadagambar.6.]+[14].Rangkaianpuncakdikisaranmassa592732
sesuaidenganionmolekulesterrantaipanjangyangberbedahadirdipabrikterisolasikamiester
SH1S1(C1).Menurutanalisisdataspektralmassa,rumusmolekuldarisenyawadikukuhkan
sebagaiC56H112O2.Setelahmenganalisasemuadataspektroskopi,bahwasenyawaterisolasiyang
mungkin adalah tetracontanyl palmitat (C56H112O2 = 816) atau dotriacontyl tetracosanoate
(C56H112O2 = 816) karena keduanya memiliki UV yang sama, IR, 1H NMR dan 13C NMR
(Gambar.7).H57CO2]+[C30H61CO2]+,dan[C32H65CO2
4.Kesimpulan
Gambar9:StrukturUsulansenyawaEtC1
Dalamlaporanini,kamitelahberhasildiisolasidandikarakterisasisebuahpalmitatlilinester
tetracontanylbaru(C56studispektroskopilebihlanjutterjadiuntukmembentukstrukturakhir
dariketonini.Kamijugatelahcheckoutaktivitasantibakterisenyawaterisolasi.Menganalisis
hasilitujelasbahwa,senyawaEtC0,EtC1danEtC2yangaktifterhadapbakteriEscherichia
coligramnegatif.kegiatantersebutmeningkatdenganmeningkatnyapolaritasdarisenyawa.
zonainhibisitertinggi,7,00mm,diamatiuntuksenyawaEtC2(Tabel2).H112O2)danketondari
daunMalvaverticillataL.(Napashak).Esterlilinmemilikifungsibiologisberagamdibakteri,
serangga,mamalia,dantanamandaratdanjugasubstratpentinguntukberbagaiaplikasiindustri
[15].Pemurnianlebihlanjutdarifraksilaindanekstrakmetanoladalahpenelitianyangsedang
berlangsungkami.Kamijugamencariaktivitasantibakteriekstrakmetanolterhadapbeberapa
grampositifdangramnegatifuntukkelompokkarbonil(>C=O)dariasamkarboksilatatau
keton,tetapitidakadanyapitaserapanuntukOHmenegaskanbahwakelompokkarboniladalah
dari keton. Dari karakteristik fisik dan analisis spektral FTIR, 1HNMR, 13C NMR dari
senyawa EtC1, beberapa kesamaan ditemukan dengan SH1S1 senyawa sebelumnya (C1).
Sekarang dalam spektrum IR, tidak adanya pita serapan untuk OH dan CO menyebabkan
senyawasebagaiketonyangmemilikirantaipanjang.Dalamspektrum1HNMR(.Gambar8),
tripletsekitar 2,3ppmmenunjukkanadanyametilenprotonsebelahkarbonkarbonil(CH2
CO), pada saat yang sama tidak adanya oksigen metilen proton (COOCH2) yang
menyebabkansenyawasebagaiketon.SenyawaEtC1,sepertiketonmemilikirantaipanjang,
jugadidukungolehadanyapuncakpadasekitar 178ppmuntukkarbonkarbonil(CO)dan
tidakadanyakarbonmetilenoksigen(COOCH2)sekitar6065ppmdi13CNMR.

5.UcapanTerimaKasihKamiberterimakasihkepadaDepartemenKimiaTerapan,Universitas
Osaka, Jepang untuk memberikan kita kesempatan untuk mengambil NMR dan MS data
spektrum. Kami juga sangat berterima kasih kepada Departemen Ilmu dan Teknologi,
PemerintahRepublikRakyatBangladeshuntuk
NSICTpersekutuandan'UniversitasHibahKomisi'.