INSEMINASI SAPI NON ESTRUS YANG TERTUNDA MENINGKATKAN

TINGKAT KEHAMILAN SAAT MENGGUNAKAN SEMEN SEK DALAM

INSEMINASI BUATAN PADA SAPI POTONG
J. M. Thomas, S. L. Lock, S. E. Poock, M. R. Ellersieck, M. F. Smith and D. J. Patterson

ABSTRAK: Percobaan ini dirancang untuk menguji hipotesis penundaan inseminasi

nonestrous sapi akan meningkatkan tingkat kehamilan saat menggunakan semen sek dalam
hubungannya dengan Fixed-Time Artificial Inseminasi (FTAI). Estrus disinkronisasi untuk
656 sapi yang menyusu dengan 7-d CO-Synch + dikendalikan protokol pelepasan obat dalam
internal (CIDR) (100 g GnRH + CIDR [1.38 g progesteron] pada d 0, 25 mg PGF2 pada
penghilangan CIDR pada d 7, dan 100 g GnRH pada d 10, 66 jam setelah penghapusan
CIDR). Alat bantu deteksi Estrus (Estrotect) diaplikasikan pada pemindahan PGF2 dan
CIDR pada d 7, dan ekspresi estrus tercatat di GnRH pada d 10. Sapi ditugaskan untuk 1 dari
3 perlakuan: 1) FTAI (bersamaan dengan GnRH, 66 jam setelah penghapusan CIDR)
dengan semen konvensional terlepas dari estrus Ekspresi. 2) FTAI dengan semen yang
disortir seks terlepas ekspresi estrus. 3) FTAI dengan sperma seks untuk sapi yang
mengalami estrus dan tertunda AI 20 h setelah GnRH akhir untuk sapi gagal
mengekspresikan estrus. Sebuah perlakuan interaksi ekspresi estrus ditemukan (P
<0,0001). Tingkat kehamilan yang lebih tinggi (P <0,0001) adalah dicapai dengan semen
konvensional (Pengobatan 1; 77%) dibandingkan dengan semen seks yang diurutkan
(Perawatan 2 dan 3; 51 dan 42%, masing masing) di antara sapi yang mengekspresikan
estrus. Namun, di antara sapi yang gagal mengekspresikan estrus, Inseminasi tertunda dengan
cairan seks yang diurutkan lebih tinggi (P <0,0001) tingkat kehamilan dibandingkan dengan
jenis kelamin air mani pada waktu standar (Pengobatan 2 dan 3; 3 berbanding 36%, masing-
masing). Selanjutnya, di antara sapi yang gagal mengekspresikan estrus, tingkat kehamilan
FTAI saat menggunakan semen seks yang diurutkan pada waktu yang tertunda (36%)
sebanding (P = 0,9) sampai yang dicapai dengan menggunakan konvensional air mani pada
waktu standar (Pengobatan 1; 37%). Hasil ini menunjukkan bahwa menunda AI nonestrous
Sapi dengan suhu 20 h dari standar FTAI akan memperbaiki kehamilan tingkat ketika sex-
diurutkan semen.
PENGANTAR
Konsepsi terhadap seks yang diurutkan saat ini sedang maksimal, saat sapi diinseminasi
mengikuti pengamatan estrus (Seidel, 2007). Penunjukan pemuliaan tanpa estrus saat ini
tidak dianjurkan dengan sexsorted air mani (Seidel, 2011). Dalam industri daging sapi,
bagaimanapun, Penggunaan sperma seks yang meluas cenderung meningkat memerlukan
pengembangan sinkronisasi estrous dan protokol inseminasi buatan fixed-time (FTAI) itu
secara khusus mengoptimalkan penggunaan semen seks.
Sperma sek menyajikan tantangan unik untuk penggunaan FTAI baik dalam hal jumlah sel
sperma maupun kualitas. Karena inefisiensi aliran cytometric dalam proses pemilahan sel,
hanya sekitar 20% dari sel sperma dari ejakulasi tertentu bisa disortir dengan kandungan
kromosom seks yang diinginkan (Seidel dan Garner, 2002). Akibatnya, sel sperma lebih
sedikit ditempatkan dalam dosis AI semen seks yang diurutkan (biasanya 2 106 sel per
dosis dibandingkan dengan 20 106 sel per dosis dalam semen konvensional). Menurunkan
jumlah sel sperma per Dosis telah terbukti berdampak negatif terhadap kesuburan (Den Daas
et al., 1998; DeJarnette et al., 2008). Seks Air mani juga ditandai dengan penurunan sperma
kualitas. Hollinshead dkk. (2003) menemukan bahwa sex-sorting merupakan proses
menginduksi proporsi kapasitansi yang lebih tinggi dari sel sperma. Adanya hal tersebut
dapat membatasi masa subur sel sperma yang disortir. Oleh karena itu, inseminasi lebih dekat
pada waktu ovulasi sangat menguntungkan.
Data awal yang dikumpulkan oleh laboratorium kami menyarankan Angka kehamilan FTAI
saat menggunakan semen seks diurutkan sangat rendah di antara sapi yang gagal
mengekspresikan estrus sebelum FTAI, barangkali karena kesuburan sperma dan waktu
ovulasi tidak selaras secara optimal. Karena itu, Tujuan dari penelitian ini adalah untuk
mengembangkan strategi untuk mengoptimalkan penggunaan semen seks yang diurutkan
secara dimodifikasi Protokol FTAI yang lebih tepat mengelola betina berdasarkan ekspresi
estrus sebelum FTAI.

BAHAN DAN METODE

Semua prosedur percobaan telah disetujui oleh Komite Perawatan dan Penggunaan Hewan
Missouri. Binatang Estrus disinkronkan menggunakan CO-Synch 7-d + protokol pelepasan
obat internal terkontrol (CIDR) untuk sapi potong (n = 656) di 5 lokasi lebih dari 3 d. Sapi
menerima GnRH (100 g, mis., Cystorelin; Merial, Athens, GA) dan sisipan CIDR Eazi-
Breed (1,38 g progesteron; Zoetis, Madison, NJ) pada d 0. On d 7, PGF2 (25 mg, mis.,
Lutalyse; Zoetis) diberikan bertepatan dengan penghapusan sisipan CIDR. Semua sapi
diberikan GnRH (100 g, i.m.) pada d 10 pada 66 jam setelah penghapusan sisipan CIDR.
Alat bantu deteksi Estrus (Estrotect; Rockway Inc., Spring Valley, WI) diaplikasikan pada
pemindahan PGF2 dan CIDRpada d 7, dan ekspresi estrus direkam pada Administrasi
GnRH pada d 10. Sapi dipertimbangkan telah menyatakan estrus jika> 50% lapisan
penggosok telah dihapus dari Estrotect. Sapi ditugaskan dalam kelompok umur oleh BCS
(skala 1 sampai 9: 1 = kurus kering dan 9 = obesitas; Richards et al., 1986) ke 1 dari 3
perawatan: 1) FTAI (bersamaan dengan GnRH, 66 jam setelah CIDR insert removal) dengan
air mani konvensional terlepas dari ekspresi estrus (n = 218), 2) FTAI dengan seks-diurutkan
semen terlepas dari ekspresi estrus (n = 217), atau 3) FTAI dengan sperma seks yang
diurutkan untuk sapi yang telah dinyatakan estrus dan AI tertunda 20 jam setelah GnRH akhir
(Gambar 1) untuk sapi gagal mengekspresikan estrus (n = 221). Waktu PGF2 administrasi,
administrasi GnRH, dan AI dicatat untuk setiap ekor sapi Semua AI dilakukan dengan single
teknisi berpengalaman, dan satu sire digunakan untuknya baik semen konvensional maupun
seks. Semen diperoleh dari pejantan banteng komersial, dan sedotan semen dikemas dalam
tarif standar standar industri untuk konvensional dan semen yang diurutkan menurut jenis
kelamin (25 106 dan 2.1 106 sel sperma per jerami, masing-masing). Dua belas sampai
14 d setelahnya AI, sapi terkena banteng yang subur untuk sisanya dari musim kawin.

Diagnosis Kehamilan
Tingkat kehamilan terhadap AI ditentukan oleh transrectal ultrasonografi (Aloka 500V
dilengkapi dengan 5.0-MHz transduser linier array; Aloka, Wallingford, CT) 60 d setelah
FTAI.

Analisis statistik
Tingkat ekspresi estrus sebelum FTAI dianalisis oleh ANOVA menggunakan model statistik
dengan lokasi, pengobatan, dan lokasi interaksi pengobatan (PROC GLIMMIX; SAS Inst.
Inc., Cary, NC). Selain itu, Tingkat kehamilan FTAI dianalisis dengan ANOVA
menggunakan model statistik dengan ekspresi estrus sebelum lokasi FTAI, lokasi, perawatan,
dan lokasi x interaksi (PROC GLIMMIX; SAS Inst. Inc.). pi menerima suntikan obat dalam
negeri yang dikendalikan (CIDR) yang dikendalikan (1,38 g progesteron) dan diberikan
GnRH (100 g, i.m.) pada d 0. Pada d 7, sisipan CIDR telah dihapus dan PGF2 (25 mg,
mis.) diberikan. Pada 66 jam setelah pemindahan insert CIDR dan PGF2, semua sapi
menerima GnRH (100 g, i.m.). Sapi diberi 1 dari 3 perlakuan: 1) buatan tetap inseminasi
(FTAI; bersamaan dengan GnRH, 66 jam setelah penghilangan CIDR) dengan semen
konvensional tanpa ekspresi estrus, 2) FTAI dengan seks disortir air mani tanpa ekspresi
estrus, atau 3) FTAI dengan sperma seks disortir sapi yang telah mengekspresikan estrus dan
menunda AI 20 h setelah GnRH terakhir untuk sapigagal mengekspresikan estrus 2BCS sapi
pada saat pemindahan sisipan CIDR (skala 1 sampai 9, dimana 1 = kurus dan 9 = obesitas).
3 Tanggapan berat pada jam 66 setelah pemberian PGF2, sebagaimana ditentukan oleh
aktivasi bantuan deteksi estrus (Estrotect; Spring Valley, WI).

HASIL
Jumlah sapi, umur rata-rata, mean BCS, dan respon estrus untuk setiap perlakuan ditunjukkan
pada Tabel 1. Tingkat kehamilan untuk FTAI berdasarkan respon estrus, perlakuan, dan
lokasi ditunjukkan pada Tabel 2. Interval dari PGF2 ke GnRH (rata-rata SE) adalah 66,4
0,8 h untuk semua 3 perawatan. Untuk sapi yang tidak mendapatkan tertunda inseminasi di
Pengobatan 3, interval dari GnRH untuk inseminasi (rata-rata SE) adalah 20,4 1,0 h. Efek
lokasi yang signifikan ditemukan untuk respon estrus (P = 0,0081), sebagai tingkat respons
estrus sebelum GnRH bervariasi di seluruh lokasi Namun, tidak ada pengobatan yang
signifikan efek (P = 0,9057) atau lokasi interaksi perlakuan ditemukan dalam kaitannya
dengan respon estrus (P = 0,5579). Tidak ada pengaruh signifikan dari lokasi (P = 0,6017)
atau lokasi interaksi perlakuan ditemukan (P = 0,0938) di hubungan dengan tingkat
kehamilan FTAI. Saat menggabungkan lokasi (Tabel 3), perlakuan ekspresi ekspresi x
estrous ditemukan (P <0,0001). Sapi itu mengekspresikan estrus sebelum FTAI mencapai
tingkat kehamilan FTAI yang lebih tinggi (P < 0,0001) dibanding sapi yang tidak
mengekspresikan estrus saat sapi diinseminasi dengan air mani konvensional (Treatment 1;
77 berbanding 37%, masing-masing) atau dengan cairan seks yang diurutkan bersamaan
dengan pemberian GnRH (Pengobatan 2; 51 versus 3%, masing-masing). Namun, tingkat
kehamilan ke Petugas seks diurutkan tidak berbeda secara signifikan (P = 0,36) antara sapi
estrus dan nonestrous saat tidak berbulu sapi diinseminasi 20 jam setelah pemberian GnRH
(Pengobatan 3; 42 melawan 36%, masing-masing). Tingkat kehamilan FTAI yang lebih
tinggi (P <0,0001) adalah dicapai dengan semen konvensional (Pengobatan 1; 77%)
dibandingkan dengan semen seks yang diurutkan (Perawatan 2 dan 3; 51 dan 42%, masing-
masing) di antara sapi yang mengekspresikan estrus. Namun, di antara sapi yang gagal
mengekspresikan estrus, Inseminasi tertunda dengan cairan seks yang diurutkan Angka
kehamilan FTAI lebih tinggi (P <0,0001) dibandingkan dengan jenis kelamin air mani pada
waktu standar (Pengobatan 2 dan 3; 3 berbanding 36%, masing-masing). Selanjutnya, di
antara sapi yang gagal mengekspresikan estrus, tingkat kehamilan FTAI saat menggunakan
semen seks yang diurutkan pada waktu yang tertunda (36%) sebanding (P = 0,9) sampai yang
dicapai dengan menggunakan konvensional air mani pada waktu standar (Pengobatan 1;
37%)

DISKUSI
Di FTAI, pada dasarnya ada 2 kelompok perempuan: yang menyatakan estrus sebelum FTAI
dan mereka yang belum mengekspresikan estrus. Betina mengekspresikan estrus berovulasi
sebagai respons terhadap lonjakan endogen LH yang terjadi bersamaan dengan onset estrus.
Untuk ini betina, ovulasi terjadi sekitar 28 jam setelah onset estrus (Walker et al., 1996).
Sebaliknya, betina yang belum menyatakan estrus pada saat FTAI tersebut diinduksi untuk
berovulasi sebagai respons terhadap administrasi PT GnRH saat inseminasi, dengan ovulasi
terjadi kira-kira 28 h kemudian (Pursley et al., 1995; Vasconcelos et al., 1999). Oleh karena
itu, ada 2 distribusi yang berbeda Waktu ovulasi dalam protokol FTAI, dengan estrus Wanita
mungkin berovulasi lebih awal dibandingkan FTAI daripada perempuan nonestrous.
Berdasarkan hasil penelitian terdahulu yang melibatkan seks air mani (Mallory et al., 2013;
Nash et al., 2012a), Kami berhipotesiskan bahwa banyak penurunan FTAI Tingkat kehamilan
terhadap perkosaan yang diurutkan menurut jenis kelamin dapat dikaitkan untuk mengurangi
tingkat kehamilan sapi yang gagal diungkapkan estrus sebelum FTAI. Studi yang meneliti
hubungan antara waktu inseminasi dan onset estrus di Ternak telah membawa konsep waktu
optimal inseminasi adalah kompromi Inseminasi terlalu dini relatif untuk ovulasi dapat
menyebabkan umur sperma tidak memadai menyebabkan penurunan tingkat pemupukan
namun peningkatan embrio kualitas, sementara inseminasi terlambat dapat mengakibatkan
berkurangnya seleksi sperma atau oosit yang sedang menuju peningkatan laju pembuahan
namun penurunan kualitas embrio (Dransfield et al., 1998; Dalton et al., 2001; Saacke et
al., 2000). Namun, waktu optimal inseminasin Bila menggunakan air mani konvensional
kemungkinan tidak optimal Saat saat menggunakan sex spanduk, semenjak mengalir Proses
pemilahan sel sitometri dapat merusak sperma Cara yang membatasi umur panjang sperma di
saluran kewanitaan. Kita berhipotesis bahwa inseminasi pada administrasi GnRH Mungkin
terlalu dini untuk wanita nonestrous, yang induksi ovulasi akan terjadi sekitar 28 jam setelah
GnRH administrasi. Data ini mendukung hipotesis tersebut, seperti menunda inseminasi
betina nonestrous sampai 20h setelah GnRH secara dramatis memperbaiki kehamilan FTAI
tarif untuk seks-diurutkan semen. Selain itu, data ini menunjukkan bahwa inseminasi tertunda
Sapi nonestrous menggunakan semen seks dapat menghasilkan tingkat kehamilan yang
sebanding dengan inseminasi menggunakan semen konvensional pada waktu standar. Nash et
Al. (2012a) mengajukan strategi membatasi penggunaan sexsorted air mani untuk sapi
sariawan dalam protokol FTAI, dengan semen konvensional digunakan untuk sapi nonestrous
mencapai tingkat kehamilan yang dapat diterima Sebagai contoh, a Respon estrus khas
sebelum FTAI mungkin sekitar 50% Di antara sapi potong sapi potong, artinya strategi
semacam itu akan membatasi penggunaan semen seks yang diurutkan kira-kira setengah
kawanan Data sekarang, bagaimanapun, menyarankan adanya sebuah kesempatan untuk
memperluas penggunaan semen seks yang diurutkan di Protokol FTAI, karena tingkat
kehamilan serupa tercapai dengan inseminasi tertunda semen yang diurutkan dengan seks
seperti dengan semen konvensional dan tidak ada penundaan. kenaikan konsentrasi serum
estradiol (Allrich, 1994), dan estradiol preovulatory mengkoordinasikan beberapa fisiologis
proses yang berkontribusi terhadap pembentukan dan pemeliharaan kehamilan, termasuk efek
pada folikular sel, oosit, transportasi gamet, dan persiapan dari lingkungan rahim (Pohler et
al., 2012). Konsentrasi estradiol yang lebih rendah di antara sapi nonestrous Mungkin juga
mempengaruhi tingkat kehamilan dengan mengganggu sperma transportasi di saluran
reproduksi wanita. Perry dkk. (2008a, b) mengemukakan bahwa konsentrasi preovulasi dari
estradiol selama estrus berdiri dapat memodulasi uterus pH mempengaruhi transportasi
sperma. Meski administrasi GnRH Tidak menyebabkan estrus, ada kemungkinan tertunda
inseminasi sapi nonestrous memungkinkan waktu untuk pengembangan lingkungan uterine
dan oviductal yang lebih baik, diberi tambahan 20 jam dari paparan tinggi tingkat praovulasi
estradiol sebelum inseminasi. Data kami agak berbeda dengan yang ada di S Filho et Al.
(2012), yang melaporkan bahwa tingkat kehamilan berikut FTAI untuk semen yang disortir
seks tidak jauh lebih rendah daripada tingkat kehamilan terhadap air mani konvensional di
antara sapi yang belum menunjukkan estrus dengan waktu FTAI standar. Namun, studi itu
(S Filho et al., 2012) melibatkan Bossapi indicus daripada sapi Bos taurus seperti dalam
penelitian kami. Selain itu, dalam penelitian oleh S Filho dkk. (2012), estrus disinkronisasi
dengan menggunakan protokol yang mengandung estradiol cypionate (ECP) dan estradiol
benzoat (EB) bukan 7-d CO-Synch + CIDR protokol yang digunakan di penelitian kami Jinks
dkk. (2013) menunjukkan bahwa administrasi dari ECP ke sapi postpartum 24 jam sebelum
GnRHinduced ovulasi folikel dominan kecil dan FTAI mengakibatkan tingkat kehamilan
meningkat dibandingkan dengan sapi yang tidak menerima ECP. Administrasi ECP atau EB
berikut penghapusan perangkat progestin dalam penelitian oleh S Filho dkk. (2012)
kemungkinan memberikan estradiol yang disempurnakan lingkungan dan berpotensi
meringankan beb xerapa dari penurunan angka kehamilan FTAI saat menggunakan seks-
diurutkan semen di sapi nonestrous. Oleh karena itu, itu Tidak jelas apakah ada kesempatan
untuk memperbaiki FTAI tingkat kehamilan melalui inseminasi tertunda nonestrous sapi saat
menggunakan protokol yang mengandung ECP dan EB di antara sapi Bos indicus.

Kesimpulannya, hasil ini menunjukkan bahwa FTAI lebih besar Tingkat kehamilan terhadap
perkosaan seks diurutkan dapat tercapa dengan menunda inseminasi sapi nonestrous.
Penggunaan Bantuan deteksi estrus mungkin berguna bagi produsen dalam mengklasifikasi
betina memiliki estrus atau memiliki gagal mengekspresikan estrus sebelum FTAI. Betina
diklasifikasikan sebagai Setelah menyatakan estrus bisa diinseminasi sesuai standar waktu,
dan betina tergolong tidak diungkapkan estrus bisa menerima GnRH diikuti oleh inseminasi
20h nanti Strategi ini menawarkan kesempatan bagi produsen mencapai tingkat kehamilan AI
yang dapat diterima dengan seks yang diurutkan tanpa perlu secara visual mendeteksi estrus
dan inseminate selama beberapa hari seperti pada sistem deteksi estrus Penelitian sebelumnya
menggunakan semen seks yang diurutkan telah dievaluasi menunda waktu AI (mis., interval
diperpanjang dari PGF2 ke AI untuk keseluruhan kelompok yang disinkronkan) dengan
keberhasilan moderat (Schenk et al., 2009; Sales et al., 2011). Namun, sepengetahuan kita,
percobaan ini adalah yang pertama untuk membedakan jenis betina berdasarkan ekspresi
estrus sebelum FTAI dalam upaya untuk mengoptimalkan waktu inseminasi untuk kedua
kelas betina. Diperlukan penelitian lebih lanjut untuk mengevaluasi efeknya tertunda
inseminasi sapi dan heifers nonestrous Saat menggunakan air mani konvensional daripada
seks. Meski tidak sampai tingkat yang sama seperti saat menggunakan seks-diurutkan semen,
FTAI tingkat kehamilan konvensional air mani secara signifikan lebih rendah untuk wanita
yang tidak Ungkapkan estrus sebelum FTAI di data yang telah dipublikasikan sebelumnya
oleh lab kami (Busch et al., 2008; Nash et al., 2012b; Martin, 2012). Analisis retrospektif
lebih lanjut dari data ini menyarankan mungkin ada perbedaan yang cukup besar di antara
sapi jantan pada tingkat kehamilan betina yang gagal diungkapkan estrus sebelum FTAI. Hal
ini menimbulkan pertanyaan apakah sapi jantan yang tidak bekerja sebaik mungkin dalam
protokol FTAI mungkin diidentifikasi atau mungkin melihat peningkatan kesuburan saat
terjadi perbedaan mengelola wanita berdasarkan ekspresi estrus. Eksperimen masa depan
harus mengevaluasi strategi serupa Tertunda inseminasi betina nonestrous sebagai potensi
sarana untuk meningkatkan atau menambahkan konsistensi kepada FTAI tingkat kehamilan
dalam sejumlah konteks.