NUR FADILLAH HERMAN

C03417014

UJI AGLUTINASI

Antibodi dapat menghubungkan antigen, sehingga terjadi penggumpalan atau

aglutinasi. Aglutisasi dapat dilhat dengan mencampur antigenik seperti bakteri spesifik.
Antisera IgM adalah glitinator yang lebih efektif daripada IgA.uji aglutinasi sering digunakan
dalam bakteriologi untuk mengidentifikasi organisme tertentu.

CALIFORNIA MASTITIS TEST (CMT)

Tes yang dilakukan pada susu sapi, sekitar 2 ml susu pada masing-masing kelenjar susu
diambil dan ditambahakan reagen lalu digerakkan melingkar. Tes positif menunjukkan
adanya formasi gel (menggumpal). Reaksi CMT susu mastitis disebabkan oleh asam
deoksiribonukleat (DNA) dari nukleus leukosit dalam susu sel tersebut pecah oleh pereaksi
CMT yang dihasilkan dalam pelepasan DNA dan pembentukan gel karena reagen bereaksi
dengan DNA yang dilepaskan CMT. Perekasi terdiri dari trietanolamina sulfonat yang
tersedia dalam bentuk cairan kental yang mengandung 60% dari bahan aktif. Ungu
bromocresol ditambahkan sebagai indikator dan pH disesuaikan menjadi 7,0 7,5. Reaksi
CMT dimulai 0-4 tergantung pada jumlah sel inflamasi pada susu yang diuji.

CAMP TEST (Christie, Atkins, dan Munch-Peterson - periset yang pertama menggambarkan
fenomena litik ini pada tahun 1944)

Tes ini digunakan terutama untuk identifikasi dugaan Streptococcus agalactiae. Patogen
menghasilkan "faktor CAMP" yang mampu menyelesaikan (hemolisis sinergistik). lisis
parsial sel darah merah yang dihasilkan oleh hemolysin spesies Staphylococcus.

PROSEDUR:

1. Streak Staph hemolisis di tengah piring darah.

2. Streak the Strep yang akan diuji pada sudut kanan sampai, tapi tidak menyentuh, garis
Staph.
3. Inkubasi piring pada suhu 35 C selama 18-24 jam.

Reaksi CAMP positif dicatat oleh munculnya zona hemolisis yang jelas secara parsial
zona hemolisis yang dihasilkan oleh Staph. Zona hemolisis reaksi positif dapat memiliki a
bentuk karakteristik yang membantu identifikasi.
Beberapa bakteri CAMP-positif: Streptococcus agalactiae (zona hemofisis panah-kepala),
Listeria monocytogenes, Rhodococcus equi (zona berbentuk sekop hemolisis),
Arcanobacterium pyogenes, Corynebacterium renale dll.

FERMENTASI CARBOHYDRATE: (TREHALOSE DAN SORBITOL)

Kemampuan bakteri untuk memanfaatkan subset tertentu dari karbohidrat dapat

memungkinkan diferensiasi genera dan spesies. Untuk pengujian reaksi fermentasi bakteri,
karbohidrat (yaitu trehalose, sorbitol) adalah ditambahkan ke media bebas gula pada
konsentrasi 0,5% sampai 1%. Media diinokulasi dengan organisme uji dan diinkubasi pada
suhu 35 C. Tabung dibaca setelah 18-24 jam. Dapat pula menggunakan medium semipadat
"Bacto Cystine Tryptic Agar", yang mencakup indikator pH, fenol merah

HASIL:

Tabung yang tidak diinokulasi berwarna merah.

Reaksi negatif - tabung tetap merah.

Reaksi positif - tabung menjadi kuning.

TEST CATALASE

Tes untuk keberadaan enzim katalase. Tes ini berguna untuk membedakan Streptococci (-ve)
dari Staphylococci (+ ve), Erysipelothrix (-ve) dari Listeria (+ ve) dan Corynebacterium
(+ve) kecuali Arcanobacterium pyogenes (sebelumnya disebut Corynebacterium pyogenes).
Ambil sebagian koloni dengan kawat, oleskan ke kaca geser, tambahkan setetes hidrogen
peroksida (3%). Gelembung segera menunjukkan adanya tes positif.

COAGULASE TEST (CO)

Tes kemampuan organisme untuk menggumpal plasma kelinci melalui aksi enzim
koagulase Tes ini digunakan untuk membedakan staphylococci positif koagulase (CoPS) dari
staphylococci negatif koagulase (CoNS).
Sebuah. SLIDE TEST: (koagulase terikat) Emulsi koloni dalam setetes plasma kelinci
pada slide mikroskop dan aduk perlahan. Sebuah tes positif ditunjukkan dengan menggumpal
dalam waktu 10 detik. Hasil tes negatif saat campuran tetap homogen (tidak ada tanda
penggumpal).
TABUNG TEST: (koagulase bebas)
 Campurkan 0,5 mL plasma murni dengan segumpal bakteri dan inkubasi pada suhu 37
C selama 4 jam. Periksa koagulum (bekuan padat). Tabung negatif harus ditinggalkan di
kamar suhu semalam dan kemudian diperiksa ulang.
Hasil:
CoNS: S. Epidermidis CoPS: S. aureus, S. intermedius Group, * S. schleiferi spp. * S.
hyicus.
* Perhatikan bahwa ini tidak selalu positif dalam uji Slide dan Tube.

TEST OXIDASE CYTOCHROME (CO) (Uji OXIDASE)

Tes ini digunakan terutama dengan bakteri gram negatif. Tes ini positif untuk bakteri
mengandung sitokrom C sebagai enzim pernafasan. Tambahkan tetes pereaksi (tetrametil-p-
fenilediamina) ke selembar kertas saring. Perubahan warna dalam 1 menit menunjukkan
reaksi positif.
HASIL:
Reaksi positif - ungu, mis. Spesies Pseudomonas, Pasteurella, Bordetella
Negatif - tidak berwarna, mis. E. Coli

HIPPURATE TEST
Tes ini digunakan untuk mendeteksi hidrolisis sodium hippurate dengan Streptococci
hemolitik beta dan oleh Campylobacter jejuni. Prinsip pengujian ini adalah salah satu produk
hidrolisis natrium hippurate adalah asam amino glisin. Hal ini dapat dideteksi dengan
menambahkan ninhydrin. Satu sampai tiga koloni organisme yang akan diuji diemulami
dalam 0,1 ml air steril. Sebuah cakram hippurate ditempatkan di dalam tabung dan campuran
diinkubasi selama 2 jam pada suhu 35 -37 C. Setelah inkubasi tambahkan 2 tetes reagen
ninhidrin ke tabung dan reinkubasi sampai 30 menit. Tes positif ditunjukkan dengan warna
ungu. Tes negatif akan menjadi tidak berwarna atau ringan Abu-abu.

INDIA TINTA WET MOUNT (Negatif Stain)

Metode ini digunakan untuk menunjukkan kapsul yang ada pada beberapa organisme.
Ini sangat berguna menunjukkan kapsul besar Cryptococcus neoformans. Bahan klinis atau
organisme dari kultur dicampur pada seluncuran dalam setetes air suling dan Tinta india
Coverlip ditambahkan dan persiapan diperiksa.

MODIFIKASI ACID-FAST STAIN

Tahan panas tetap diwarnai selama 10 menit dengan carbol-fuchsin, dicuci dengan air
keran dan decolorized dengan 0,5% asam asetat selama 20-30 detik. Counterstain dengan
metilen biru untuk 20 detik. Slides dicuci dengan air keran dan dikeringkan. Organisme cepat
asam akan berwarna merah terhadap latar belakang biru. Tes ini sangat berguna menunjukkan
abucus Brucella dari cairan perut janin buntu yang dibatalkan.

TEST INDOLE
 Uji Indole digunakan untuk menentukan kemampuan organisme menghasilkan indol
(hasil dari deaminasi triptofan asam amino dengan tryptophanase). Indole dapat dideteksi
oleh reaksi kompleks zat warna merah dengan "Kovacs Reagent" (amil alkohol,
paradimethylaminobenzaldehyde dan asam klorida pekat). Tes Indole yang disederhanakan
dapat dilakukan dengan menggunakan budaya semalam yang ditanam di TSB (Tryptone Soy
Broth) yang diikuti oleh penambahan reagen Kovac untuk mendeteksi indol di media cair.