Formulasi dan Evaluasi in vitro preparasi antiageing

topical Buah Benincasa hispida

Abstrak

Penuaan adalah fase penurunan bertahap efisiensi tubuh dan aktivitas metabolik
setelah mencapai tahap kedewasaan. Bebas radikal menyebabkan perubahan
oksidatif dalam kolagen, elastin material dan perubahan karakteristik membran
dan menginduksi reaksi polimerisasi. Penggunaan antioksidan topikal dapat
mengatasi beberapa efek ini dan menghambat penuaan actinic. Produk herbal
yang populer karena risiko minimum efek samping dengan efisiensi yang
maksimal. Penelitian ini dilakukan untuk mengevaluasi potensi anti penuaan dari
ekstrak buah Benincasa hispida tidak banyak studi ilmiah telah dilakukan untuk
mengeksplorasi utilitas sebagai peremajaan kulit penambah dan sebagai
antioksidan.

Setelah menghapus lapisan luar dan benih, daging buah dikeringkan. daging buah
yang dikeringkan diekstraksi berturut-turut dengan petroleum eter, kloroform, etil
asetat dan metanol oleh Soxhlation selama 2 hari. Metanol pulih di bawah vakum
dan ekstrak kering diperoleh (menghasilkan 4,2% w/w), yang disimpan dalam
desikator.

Cocok dasar krim topikal untuk pengangkutan efektif ekstrak buah dikembangkan
dan in vitro evaluasi untuk kegiatan peremajaan kulit diuji dengan aplikasi untuk
stratum korneum dari kulit mayat manusia dan oleh dansil metode klorida
fluoresensi.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa krim dibuat dari ekstrak buah Benincasa
dapat membuktikan sebagai persiapan antiageing dan dapat digunakan untuk
memperlambat gejala penuaan.

PENDAHULUAN

Kulit adalah fleksibel, memperbaiki diri kapsul yang memisahkan lingkungan

internal tubuh dari eksternal lingkungan. [1] Penuaan adalah fase penurunan
bertahap efisiensi tubuh dan aktivitas metabolik setelah mencapai tahap
kedewasaan. Perubahan tubuh yang menyebabkan penurunan harapan hidup
dengan usia yang dikenal sebagai pikun, yang merupakan karakteristik hidup.
Hasil penuaan kulit akibat paparan bahan kimia, radiasi dan suhu di lingkungan.
Penuaan dapat diklasifikasikan sebagai penuaan intrinsik, yang merupakan acara
kronologis dan tak terelakkan, dan actinic penuaan, yang tergantung pada paparan
individu radiasi UV. [2] penuaan ini ditingkatkan karena radikal gratis yang
dihasilkan dalam tubuh melalui berbagai jalur metabolik akibat oksidasi makanan
berlemak dan paparan konstan untuk radiasi UV. Efek yang terlihat dari penuaan,
seperti kering, kulit kasar dengan kurang elastisitas, adalah Kombinasi dermal dan
epidermal perubahan yang terjadi di kulit. Perubahan dermal yang gangguan di
kolagen dan jaringan elastin, penurunan kapasitas retensi air dan penyusutan
dermis. [2,3] Epidermis adalah lapisan berkembang biak kulit. Pembaharuan kulit
normal atau pergantian epidermal waktu 56-72 hari. [4] Kali ini meningkat selama
penuaan karena penurunan metabolisme sel dan tarif mitosis. Itu Dansyl metode
klorida fluoresensi oleh Jansen et al. [5] adalah dipilih untuk menentukan waktu
stratum corneum pembaharuan. Buah Benincasa hispida (Thunb.) Cogn.,
Umumnya disebut sebagai abu labu, milik Cucurbitaceae keluarga, adalah
dipekerjakan sebagai bahan utama dalam kusmanda lehyam, yang digunakan
dalam berbagai gangguan saraf di Ayurvedic Sistem kedokteran. [6] Menurut Raja
Nighantu (karya kuno di terapi), obat-obatan dari Benincasa hispida dibuat dari
tua, buah-buahan matang. Pulp itu tergores menjadi strip tipis dan jus air yang
merembes keluarlah banyak dikumpulkan dan diawetkan. [7] utama konstituen
dari buah ini adalah triterpenoid, flavonoid, glikosida, sakarida, karotenoid,
vitamin, sitosterol dan asam uronic. [6,8-14] Banyak aplikasi buah Benincasa
telah dilaporkan untuk berbagai penyakit seperti dispepsia, sensasi terbakar,
penyakit jantung, vermifuge, diabetes, antiinflamasi aktivitas, aktivitas diuretik
dan sebagai antikanker agen. [15] Namun, tidak banyak studi ilmiah telah
dilakukan untuk menjelajahi utilitas sebagai penambah kulit-pembaruan dan
sebagai antioksidan. Dalam terang informasi ini, hadir Penelitian dilakukan untuk
merumuskan krim dan mengevaluasi potensi antiageing dari ekstrak buah
Benincasa hispida.
BAHAN DAN METODE

Buah yang matang dari Benincasa hispida dikumpulkan dari pasar lokal kota
Nagpur di bulan September dan diidentifikasi dan dikonfirmasi oleh ahli botani
dari Shri M. M. Ilmu College, Nagpur. Sebuah spesimen voucher (MMSC-8127)
diendapkan di Departemen Botani.

Dansyl klorida diperoleh dari SRL Kimia, Mumbai, India. aparat spreadability,
Brookfield viskometer dan spektrofluorometer diperoleh dari Horiba Jobin Yvon,
Kyoto, Jepang, yang bekerja untuk saat ini belajar. Semua bahan kimia lainnya
dan pelarut yang digunakan adalah dari kelas analitis.

Persiapan Ekstrak

Setelah menghapus lapisan luar dan biji, daging buah dikeringkan pada suhu tidak
melebihi 60C menggunakan nampan pengering. daging buah yang dikeringkan
diekstraksi berturut-turut dengan petroleum eter (60-80 C), kloroform, etil asetat
dan metanol oleh Soxhlation selama 2 hari. Metanol pulih di bawah vakum dan
ekstrak kering diperoleh (menghasilkan 4,2% w/w), yang disimpan dalam
desikator. [16]

formulasi dan preparasi krim topikal yang cocok mendasarkan

Formula tidak ada. 1

fasa minyak: Cetyl alkohol 5%, gliseril monostearat 15%, sorbitan monooleat
0,3%, polisorbat 0,3%.

fasa air : Methyl Cellulose 1%, dimurnikan q.s. air

Formula tidak ada. 2

fasa minyak: Asam stearat 4%, stearil alkohol 5%, cetyl alcohol 2%, lanolin 5%,
isopropil miristat 8%.
fasa air: Propylene glycol 5%, gliserin 5%, paraben 0,18%, propil paraben
0,02%, EDTA 0,05%.

Dasar krim di atas disusun oleh akurat berat fasa minyak dan fasa air dan
mengambil dalam gelas secara terpisah dan pemanasan sekitar 70 C. Fase air
kemudian dicampur dengan fase minyak oleh triturasi sampai krim beku dan
didinginkan. [17]

Perbandingan evaluasi cream

Kedua dasar dibandingkan dengan satu sama lain untuk penampilan, spreadability,
jumlah air, diffusibility, rheologi dan stabilitas studi. Ketercucian ditentukan
dengan menggosok jumlah kecil dari dasar di tangan dan mencuci dengan air
hangat tanpa menggunakan sabun. [17-20]

tes spreadability

dasar krim harus menyebar dengan mudah tanpa terlalu banyak hambatan dan
tidak harus menghasilkan gesekan yang lebih besar dalam menggosok proses.
Spreadability dihitung menggunakan spreadability yang aparat terbuat dari papan
kayu dengan skala dan dua kaca slide memiliki dua panci di kedua sisi terpasang
pada katrol. sampel kelebihan ditempatkan antara dua slide kaca dan 100 g berat
ditempatkan pada slide kaca selama 5 menit untuk kompres sampel untuk
ketebalan yang seragam. Berat (250 g) ditambahkan ke dalam panci. Waktu
dalam detik yang dibutuhkan untuk memisahkan dua slide diambil sebagai ukuran
spreadability.

S=m*l/t

m - Berat terikat pada slide atas

l - panjang kaca geser

t - waktu di s
Penentuan jumlah air

Jumlah air adalah jumlah maksimum air yang dapat ditambahkan ke 100 g dasar
pada suhu tertentu. Saya ditentukan dengan terus mengaduk dasar dengan
penambahan air suling. Ketika tidak ada air lagi diserap ke basis, dibuktikan
dengan tetesan air yang tersisa di dalam wadah, ini diambil sebagai titik akhir.

Difusi bahan aktif

Diffusibility memberikan jumlah basis krim menyebar dengan permukaan tubuh.

Untuk ini, krim asam salisilat disiapkan dengan menggunakan Formula ada. 1 dan
Formula ada. 2 (salicylic acid 2 g dan krim dasar 98 g). media nutrien agar dibuat
menggunakan ekstrak daging sapi 10 g, pepton 10 g, natrium klorida 5 g, agar 1,2
g dan suling 1000 air ml. Hal ini dituangkan ke dalam cawan Petri dan lubang
dibuat di pusat media dan krim kemudian diaplikasikan ke lubang dan waktu
untuk difusi dicatat, dibuktikan dengan cincin merah muda pada media agar
setelah interval tertentu.

studi rheologi

Untuk menentukan viskositas Formula no. 2, itu disimpan pada suhu kamar dan
pada suhu tinggi dari 45 C. Untuk ini, 50 g basis krim disimpan di 45 C dalam
oven. Viskositas krim ini diukur

setelah interval waktu yang teratur selama 1 bulan. Perubahan dalam viskositas
ditentukan oleh Brookefield Viscometer menggunakan Spindle nomor 7. Lain 50
g basis disimpan pada suhu kamar dan Studi rheologi yang dilakukan dengan cara
yang sama pada hari alternatif.

pengujian stabilitas

pengujian stabilitas dilakukan untuk Formula ada. 2 oleh menjaga 50 g krim pada
45 C dan 50 g di kamar suhu. Itu diperiksa untuk setiap gangguan visual dan
fase pemisahan dari waktu ke waktu selama periode 1 bulan.

Persiapan cream diteliti

Untuk jumlah propilen glikol di dasar (Formula tidak. 2), 5 ekstrak buah%
dicampur dan krim itu dirumuskan dengan cara yang sama seperti yang dari basis
krim polos (Yaitu, tanpa ekstrak buah).

Pengaruh krim siap pada pembaharuan kulit

Metode Dansyl klorida fluoresensi diberikan oleh Jansen et al. [5] digunakan
untuk mengukur efek kulit-pembaharuan krim siap dengan ekstrak buah. Dansyl
klorida adalah pewarna fluorescent yang mengikat rajin dengan kelompok amino
dan sehingga berguna untuk penandaan fluoresensi protein. Itu waktu yang
dibutuhkan untuk pewarna menghilang dari sepenuhnya patri lapisan tanduk
memberikan perkiraan waktu penggantinya.

Penyusunan basis klorida dansil

A 5% b / b dispersi dansil klorida disiapkan dengan petrolatum putih dalam gelap

dengan tenang lampu merah sebagai dye adalah sensitif terhadap cahaya.

Persiapan kulit mayat manusia

Sepotong segar kulit lengan diperoleh dari Pemerintah. Medical College, Nagpur.
Itu segera dimasukkan ke dalam es untuk menghindari kerusakan dan dibawa ke
Laboratorium. Kulit dibersihkan dengan menghapus lemak subkutan berpegang
pada kulit dengan tang dan gunting. Epidermis kemudian dipisahkan oleh
trypsinization panas metode yang diberikan oleh Kligman. kulit itu dicelupkan ke
dalam air panas dan epidermis itu terkelupas perlahan menggunakan tang.

Epidermis kemudian ditempatkan dalam larutan tripsin (5% di air) selama 5

menit. Pengobatan epidermis dengan larutan tripsin menyebabkan pemisahan
stratum korneum. Ini kemudian dikeringkan semalam di desikator dengan
menyebarkan stratum korneum pada kawat stainless steel mesh. setelah 24 jam,
stratum corneum dipotong menjadi tiga bagian dari 1 cm x 1 cm dan disimpan
dalam desikator, yang kemudian ditempatkan dalam lemari es. [21]

Pengembangan patch neon pada manusia kulit mayat

Dansyl dasar klorida bebas dan seragam diolesi pada potongan-potongan kulit
dengan bantuan jari telunjuk di kegelapan. Potongan kulit dengan patch yang
diawetkan dalam kulkas di bawah 0C dengan mengapit mereka antara dua slide
kaca. Setelah 24 jam, intensitas fluoresensi dari potongan-potongan ini bernoda
diukur pada 340 nm dengan spectrofluoremeter di RSIC, Nagpur. Fluoresensi
intensitas potongan-potongan ini diperiksa selama 2 bulan periode untuk
memastikan bahwa fluoresensi tidak menurun.

aktivitas di patch kulit dikembangkan

Dari tiga patch kulit, patch pertama diperlakukan dengan Benincasa ekstrak buah
krim, yang kedua dengan dasar polos krim dan patch ketiga diperlakukan sebagai
kontrol (diperlakukan dengan standar persiapan anti penuaan). Krim yang
diterapkan intensitas harian dan fluoresensi tercatat pada hari alternatif. Jumlah
hari yang dibutuhkan untuk penghilangan lengkap patch yang tersedia ukuran
stratum korneum perpanjangan waktu.

Analisis statistik

Analisis statistik dilakukan untuk menentukan signifikansi (P <0,05) dari hasil

yang diperoleh. t-test adalah dilakukan untuk perbandingan antara jumlah rata-rata
hari untuk penghapusan patch diobati dengan diteliti yang krim dan kontrol [Tabel
4].

HASIL

Modifikasi Formula ada. 1 dan Formula ada. 2 dibuat dengan metode yang
dijelaskan, dan evaluasi komparatif mereka dilakukan untuk spreadability [Tabel
1], diffusibility dan Jumlah air [Tabel 2]. Tabel 3 menunjukkan viskositas dasar
krim disimpan pada suhu kamar dan pada ditinggikan Suhu, 45 C. Untuk
penilaian stabilitas termal Formula No 2, setengah porsi dari dasar disimpan di 45
C dan setengah sisanya disimpan pada suhu kamar. Tabel 4 menunjukkan efek
dari ekstrak buah Benincasa hispida (5%) krim pada peremajaan kulit. Juga,
penelitian ini dirancang untuk memastikan efek dari krim dasar polos (tanpa
ekstrak buah) pada peremajaan kulit dengan menggunakan Dansyl klorida teknik.
Penurunan intensitas fluoresensi krim diberikan dalam Tabel 4, yang
menunjukkan jumlah hari diperlukan untuk hilangnya.

DISKUSI

Dasar topikal yang cocok dikembangkan yang dapat bertindak sebagai pembawa
efektif untuk ekstrak buah Benincasa, menunjukkan Kegiatan kulit-pembaharuan.
formulasi yang umumnya lebih disukai adalah krim dan lotion. Lotion kurang
diterima oleh pengguna dari krim. Oleh karena itu, diputuskan untuk
mengembangkan basis krim topikal yang diterima secara luas, yaitu ideal minyak
dalam air dasar krim dengan konsistensi yang baik, halus dan bersinar tekstur,
spreadability baik, non-berminyak alam, ketercucian mudah dan stabilitas yang
baik. Menjaga titik-titik diingat, krim dirumuskan yang memenuhi semua
karakteristik.

Hasil penelitian menunjukkan Formula bahwa tidak ada. 2 memiliki spreadability

baik (Rata-rata spreadability 18,4 1,38) dibandingkan dengan Formula tidak
ada. 1 (Rata-rata spreadability 8,8 1,22). Rumus tidak. 1 menunjukkan
penurunan jumlah air dibandingkan dengan Formula tidak ada. 2, yang mewakili
yang kurang-air-menyerap kapasitas (3,0 ml vs 2,0 ml). Formula tidak ada. 2
menunjukkan baik diffusibility (rata-rata diffusibility 2.05 0.07) dari Formula
tidak. 1 (Rata-rata diffusibility 1,35 0,05). Dengan demikian, Formula tidak. 2
ditemukan untuk memenuhi semua sifat yang diinginkan dari minyak dalam air
dasar krim dan diputuskan untuk menjadi final dasar krim.

Setelah interval waktu tertentu, hasil viskositas menunjukkan bahwa pada suhu
kamar dan pada suhu tinggi, krim tidak menunjukkan perubahan mendadak dalam
viskositas, yang menunjukkan stabilitas basis krim maju di yang lebih tinggi serta
suhu yang lebih rendah. pemeriksaan rutin dari kedua krim selama periode 1 bulan
untuk stabilitas termal menunjukkan bahwa Formula ada. 2 stabil, tanpa
perubahan dari pencairan dan fase pemisahan.

Penurunan intensitas fluoresensi diteliti yang krim dipelajari dan dicatat pada hari
alternatif. Pada hari 1, penurunan intensitas fluoresensi diteliti yang krim
ditemukan menjadi 81% dibandingkan dengan 91% dari kontrol (P-value =
0,0539). Demikian pula, pada Hari 3, 5, 7, 9 dan 11, penurunan intensitas
fluoresensi diteliti yang cream yang ditemukan menjadi 62%, 51%, 35%, 25% dan
12% dibandingkan dengan 90%, 80%, 61%, 42% dan 32% dari kontrol (P-value =
0,0014, 0,0011, 0,0061, 0,0012 dan 0,0013). Perbedaan rata-rata untuk Days 1, 3,
5, 7, 9 dan 11 ditemukan untuk menjadi -7,667, -27,00, -30,00, -23,07, -17,00 dan
-18,07, masing-masing.

T-test menunjukkan bahwa peningkatan pembaharuan kulit dengan cream diteliti

signifikan pada P <0,05 tingkat makna. Kendali patch mengambil 15-17 hari
menghilang sementara Benincasa ekstrak buah krim mengambil 11 hari
menghilang, menunjukkan aktivitas kulit-pembaharuan yang lebih baik. krim
dasar polos melakukan tidak menunjukkan hilangnya dan kulit-pembaharuan efek.

KESIMPULAN

Dapat disimpulkan bahwa krim dibuat dari ekstrak buah Benincasa menunjukkan
signifikan secara statistic khasiat antiageing lebih baik dibandingkan dengan
kontrol. Dengan demikian, krim dibuat dari ekstrak buah Benincasa mungkin
membuktikan menjadi persiapan antiageing dan dapat digunakan untuk
memperlambat gejala penuaan. Hasil yang diperoleh dalam penyelidikan ini
hanya terarah dalam tampilan dan penyelidikan lebih lanjut dapat dibuat atas dasar
ini untuk mendapatkan Data tambahan dan informasi tentang buah Benincasa, dan
efek dari berbagai ekstrak botani gabungan dapat juga dipelajari pada peremajaan
kulit.