3.2. Analisis struktural polisakarida G.

spinosa

Fraksi FII dan FIII, serta polisakarida yang tidak terfraksinisasi dari G. spinosa,
mengandung arabinosa (Ara), rhamnose (Rha) dan sejumlah kecil galaktosa (Gal) (Tabel 1).
Persentase yang sama dari Rha dan Gal ditemukan pada polifenol-polisakarida dari Erigeron
canadensis (Rha: 0,7-12,4%; Gal: 3,8-23,4) (Pawlaczyk et al., 2011a), Filipendula ulmaria
(Rha: 5,5%; Gal: 15,7%) dan Rubus plicatus (Rha: 2.4; Gal: 16.1) (Pawlaczyk et al., 2009).
FT-IR fraksi FII dan FIII menunjukkan pita di wilayah 1200-800cm-1 khas karbohidrat
(Gambar 2A). Karena FIII telah menunjukkan sinyal dengan intensitas yang lebih tinggi
dibandingkan dengan FII, ini menunjukkan bahwa FIII memiliki kemurnian yang lebih tinggi
sehingga FII, seperti yang terlihat pada elektroforesis gel agarosa. Sinyal yang diamati pada
3410 cm-1 berhubungan dengan getaran ikatan gugus OH dan yang antara 2950 dan 2850 cm-
1 yang berasal dari getaran peregangan gugus CH alifatik, terutama dari kelompok Metil ester
metil (Kacurkov, Capek, Sasinkov, Wellner, & Ebringerov, 2000; Pawlaczyk et al.,
2011a). Spektrum FT-IR FIII menghasilkan pola khas karbohidrat, tipikal rhamnogalakturonan
dan / atau homogalakturonan dengan sinyal kuat pada 1611 dan 1414 cm-1, merupakan
karakteristik resonansi gugus asam uronic COO (Kacurkov et al., 2000; Pawlaczyk dkk.,
2011b). Pita serapan pada 1240 cm-1 menunjukkan tidak adanya ester sulfat dalam polisakarida
ini (Gambar 2A).
Analisis metilasi dari polisakarida G. spinosa adalah tugas yang sulit karena
mengandung residu dengan kerentanan yang bervariasi terhadap hidrolisis asam. Namun
demikian, kami mencoba fraksi FII yang dimetilasi, yang menghasilkan 30% dari 2,3,5-tri-O-
Me-Ara, 54% 2,3-di-O-Me-Ara dan 16% dari 3-O- Me-Rha. Sebagian besar hasil ini
merupakan kesimpulan berdasarkan analisis NMR. Kita tidak dapat membedakan antara Araf
5-terkait dari Araf terkait 4, namun konformasi furanosil residu -Ara ditunjukkan dengan jelas
oleh analisis NMR. Hasil rendah 3-O-Me-Rha mungkin merupakan konsekuensi dari hilangnya
derivatif ini selama hidrolisis asam. Turunan turunan metilasi dari galaktosa tidak
teridentifikasi.
Kesimpulannya, NMR dan analisis metilasi menunjukkan bahwa polisakarida G.
spinosa mengandung inti -Rhap dan cabang dari 5-linked -Araf. Residu dari 4-linked -GalpA
juga diidentifikasi namun tidak mungkin untuk menentukan distribusinya pada rantai
polisakarida. Fraksi FII dan FIII berbeda dalam susunan keduanya. FIII mengandung proporsi
yang lebih tinggi -GalpA dan lebih rendah dari batasan ujung non-pereduksi -Araf daripada
FII.