Sindrom Klinefelter Merupakan Suatu Kelainan Kromosom

Apakah Sindrom Klinefelter itu??

Secara garis besar Sindrom Klinefelter merupakan suatu kelainan kromosom dimanajuga
dikenal sebagai kondisi XXY. Pada laki-laki normal, mereka memiliki kromosom XY. Namun
pada orang yang menderita Sindrom Klinefelter mereka memiliki kromosom X tambahan.
Sehingga orang-orang ini memiliki pola XXY. Sindrom Klinefelter ini dinamai oleh Dr Henry
Klinefelter dan rekannya di Rumah Sakit Massachusetts, Boston yang pertama kali
menggambarkan sekelompok gejala yang ditemukan pada beberapa pria dengan kromosom X
tambahan. Meskipun semua pria dengan sindrom Klinefelter memiliki kromosom X tambahan,
tidak setiap laki-laki XXY memiliki semua gejala-gejala.

DO YOU KNOW?
“Pada tahun 1970-an, para ilmuwan menyatakan bahwa
kelainan klinefelter merupakan salah satu kelainan
genetik yang ditemui pada manusia, yaitu 1 dari 500 hingga 1
dari 1.000 bayi laki-laki yang dilahirkan akan
menderita sindrom ini.”
Penyebab Sindrom Klinefelter
Pada kondisi normal manusia memiliki 46 kromosom, terdiri dari 44 kromosom tubuh dan 2
kromosom seks. Kromosom seks ini akan menentukan apakah anda laki-laki atau perempuan.
Normalnya laki-laki memiliki kromosom seks berupa XY sedangkan wanita XX. Pada proses
pembentukan gamet terjadi reduksi jumlah kromosom yang mulanya berjumlah 46 menjadi 23.
Pada tahap tersebut juga terjadi pemisahan kromosom seks, misalnya pada pria XY berpisah
menjadi X dan Y begitupun dengan wanita XX menjadi X dan X. Jika terjadi pembuahan pria
maupun wanita akan menyumbangkan satu kromosom seksnya begitupun dengan kromosom
tubuhnya sehingga terbentuk individu baru dengan 46 kromosom.
Pada sindrom klinefelter terjadi gagal pisah pada pria dan atau wanita. Jika yang gagal
berpisah adalah kromosom seks dari pria maka gamet yang ia sumbangkan memiliki kromosom
seks XY yang nantinya akan menyatu dengan kromosom X dari wanita dalam proses pembuahan
sehingga yang terjadi adalah bentuk abnormal 47,XXY (bentuk ini adalah bentuk yang
umumnya terjadi pada sindrom klinefelter seperti yang terlihat pada gambar). Ataupun bila
wanita menyumbangkan XX dan pria menyumbangkan Y. Atau bentuk lain yang terjadi akibat
pria menyumbangkan XY dan wanita menyumbangkan XX sehingga yang terjadi adalah sindrom
klinefelter berbentuk 48,XXXY.
membentuk mosaik klinefelter 46,XY/47,XXY. Biasanya bentuk gejala klinis pada bentuk
mosaik ini lebih ringan daripada bentuk klasiknya tetapi hal ini tergantung dari sebanyak apa
mosaiknya.

Terjadi saat pembentukan embrio

Sindrom Klinefelter terjadi ketika kromosom seks ekstra dari salah satu orangtua diturunkan
pada bayi laki-laki semasa pembentukan embrio. Penurunan kromosom ekstra ini terjadi secara
acak dan kebetulan.

Tidak seperti halnya kelainan kromosom lain seperti Down syndrome, mereka yang keluarganya
ada sejarah sindrom Klinefelter atau ibunya yang melahirkan di usia tua tidak secara otomatis
bakal mengalami kelainan ini.

Ciri – ciri penderita Sindrom Klinefelter

Pengaruh dan tanda-tanda sindrom Klinefelter sangatlah bervariasi dan tidak sama pada setiap
pria yang mengalaminya. Secara mental penderita klinefelter cenderung memiliki IQ di bawah
rata-rata anak normal, memiliki kepribadian yang kikuk, pemalu, kepercayaan diri yang
rendah, biasanya aktivitas yang dilakukan lebih sedikit dari normalnya (hipoaktivitas). Sebagian
penderita ini juga terjadi autisme. Hal ini disebabkan karena perkembangan tubuh dan
neuromotor yang abnormal. Kecenderungan lain yang dialami penderita klinefelter adalah
keterlambatan dan kekurangan kemampuan verbal, serta keterlambatan kemampuan menulis
masalah orientasi seksual, ataupun osteopenia atau osteoporosis. Gangguan koordinasi gerakan
badan, seperti kesulitan mengatur keseimbangan melompat, dan gerakan motor tubuh yang
melambat. Sifat tangan kidal juga lebih banyak ditemui pada penderita sindrom ini
dibandingkan dengan manusia normal. Pada pasien dewasa, kemampuan seksualnya lebih tidak
aktif dibandingkan laki-laki normal.

Selain itu terdapat ciri-ciri fisik yang

ditandai dengan testis yang kecil, kurangnya hormon androgen, juga hormon testosteron yang
rendah yang menyebabkan pertumbuhan otot yang kecil namun mengalami perpanjangan kaki
dan lengan, sehingga tinggi badannya melebihi rata-rata di usianya. Bentuk tubuh dan bulu-
bulu pada wajahnya pun tidak berkembang dengan baik. Selain itu penderita juga mengalami
pembesaran jaringan payudara (gynecomastia). Sehingga penderita kemungkinan mempunyai
resikp kanker payudara yang lebih besar dari pria normal.

Pengobatan
Sebenarnya obat sindrom klinefelter ini belum ditemukan. Umumnya sindrom ini tidak
berbahaya. Namun, untuk mengatasi gejala yang timbul dapat dilakukan beberapa terapi
khusus sesuai dengan kekurangan yang terjadi.

Pada gynecomastia dapat diobati dengan pembedahan. Untuk masalah berbicara,

pembelajaran membaca dan menulis yang lambat dapat diatasi dengan pendidikan khusus,
masalah motorik dapat diatasi dengan terapi fisik. Juga terapi androgen dengan menggantikan
testosteron yang kurang pada penderita klinefelter.
Terapi androgen adalah terapi yang umum dilakukan pada penderita klinefelter, dengan terapi
ini diharapkan akan menumbuhkan rambut tubuh dan rambut fasial, meningkatkan kekuatan,
meningkatkan gairah seksual, membentuk otot, memperbesar testis, meningkatkan mood,
diharapkan mampu mengatasi masalah antisosial, dan mengurangi kemungkinan osteoporosis.

Testis Transcriptome Modulation in Klinefelter Patients with Hypospermatogenesis, Marco

D’Aurora, Alberto Ferlin, et all. Gene expression Molecular medicine

Article number: 45729 (2017).2017

Sindrom Klinefelter (KS) adalah kelainan kromosom seks yang paling umum, dengan prevalensi 1: 600-1: 1000
pada bayi baru lahir, meskipun umumnya didiagnosis pada masa dewasa1. KS merupakan penyebab genetik
utama infertilitas pria yang hadir pada 3% pria infertil dan 15% pria azoospermia2. Sebagian besar subjek KS
(80-90%) menunjukkan kariotipe 47-milyarah non-mosaik, sedangkan 10% kasus lainnya membawa
mosaikisme (misalnya 47, XXY / 46, XY), kromosom seks tambahan (misalnya 48, XXXY, 48, XXYY, 49,
XXXXY) atau kelainan struktural kromosom X (misalnya 47, X, iXq, Y) 3. Pasien KS secara tradisional
digambarkan sebagai azoospermia pada kira-kira 90% kasus, yang membuktikan kegagalan testis primer, testis
perusahaan kecil dan hipogonadisme hipergonadotropis4, bagaimanapun, fenotipnya seringkali sangat
bervariasi. Persentase pasien KS yang sangat rendah (10%) dijelaskan dengan oligozoospermia berat. Sekitar
30-40% pasien KS memiliki hypospermatogenesis pada testis. Sehubungan dengan ini, disarankan agar
spermatogenesis fokal memiliki kemampuan untuk menyelesaikan proses spermatogenik yang menyebabkan
pembentukan spermatozoa dewasa5,6,7.
Azoospermia terkait KS atau oligozoospermia adalah konsekuensi dari degenerasi progresif epitel germinal
yang dimulai sejak awal kehidupan embrio. Proses diferensiasi dimulai hanya ketika sel kuman menunjukkan
kariotipe normal8. Selama pertengahan pubertas, fungsi testis bergerak menuju gangguan ekstensif9 yang terkait
dengan fibrosis dan hyalinisasi tubulus seminiferus dan hiperplasia interstitium8.

Mekanisme molekuler yang mendasari disfungsi pada testis KS telah diinvestigasi dengan buruk dan penyebab
degenerasi testis global masih belum jelas. Kehadiran kromosom X tambahan tampaknya secara signifikan
mengganggu spermatogenesis pada tahap awal10,11. Pada sel kuman meiosis dan pasca-meiosis serta
komponen somatik testis, kromosom X tambahan tidak aktif dan gen gen yang berubah yang terletak di autosom
mungkin menjadi penyebab disfungsi testis global10,11.

Saat ini, terapi kesuburan yang tersedia untuk pria KS azoospermia didasarkan pada TESE (Testicular Sperm
Extraction after Biopsy) dan reproduksi dibantu12. Jaringan molekuler yang terlibat dalam kegagalan
spermatogenik dan testis KS dapat mewakili dasar identifikasi target terapi baru dan pengaturan perawatan awal
yang melestarikan kesuburan residual.

Studi transkripomis sebelumnya pada pasien KS azoospermia dewasa, yang menunjukkan tidak adanya sel
kuman secara lengkap (sindikasi sel Sertoli saja, SCO) memberi petunjuk tentang kemungkinan mekanisme
yang menyebabkan disfungsi testis13. Demikian pula, penelitian inovatif pilot ini menganalisa keseluruhan
modifikasi transkriptomik yang terjadi pada testis KS dewasa yang memiliki hypospermatogenesis.
Perbandingan hasil dari dua studi tersebut menyoroti kesamaan dan perbedaan antara subjek KS azoospermik
dan hipospermatogenik.
Analisis transkripsi menunjukkan ekspresi diferensial gen 1050 dibandingkan dengan testis kontrol. Peta panas
dari transkrip signifikan dibentuk oleh dua cluster gen yang diekspresikan secara genetis (Cluster A dan B) yang
terdiri dari 747 turun dan 303 gen yang diatur dalam hypospermatogenesis KS testis vs testis kontrol (Gambar 1,
Tabel Tambahan S1 dan S2).
Analisis Jalur Ingenuity Fungsional (IPA) dari dua kelompok gen menunjukkan bahwa gen yang diturunkan dari
747 terutama terlibat dalam fungsi biologis berikut: cedera dan kelainan organisma, penyakit sistem reproduksi,
morfologi sel dan organ tubuh, perkembangan dan fungsi sistem reproduksi, seluler gerakan, respon inflamasi
dan gangguan sistem endokrin (Gambar 2A). 303 gen yang diekspresikan secara berlebihan diketahui karena
peran mereka dalam fungsi biologis berikut: kematian sel dan kelangsungan hidup, pertumbuhan dan proliferasi
sel, biokimia molekul kecil, perkembangan seluler, respon inflamasi, perakitan seluler dan pengembangan
organisasi dan jaringan (Gambar 2B).
Kehadiran kromosom X tambahan dapat menjelaskan peran penting yang dimainkan oleh ekspresi surplus gen
terkait-X pada pasien KS selama tahap awal spermatogenesis14 dan menimbulkan serangkaian kejadian yang
mendefinisikan kegagalan testis orang dewasa, namun Peran marjinal pada fungsi testis dewasa. Kita dapat
mempersempit regulasi lebih dari 3 gen (SLC25A5 di wilayah Par1, PRPS1, TCS22D3), dan regulasi gen
AKAP4, yang dipetakan pada kromosom X. Beberapa transkrip autosomal yang terlibat dalam keseluruhan
produksi spermatozoa tampaknya terlibat dalam disregulasi testis yang menyebabkan hipospermatogenesis pada
subjek KS dewasa.

Analisis microarray kami menunjukkan regulasi turun CREM. CREM adalah faktor transkripsi testis utama
yang penting untuk produksi spermatozoa15 dan pengembangan tubulus seminiferus. CREM adalah simpul
kunci jaringan kedua yang disimpulkan IPA (Gambar 4A), yang secara negatif mengatur ekspresi faktor
spermatogenesis penting lainnya seperti FHL5 dan PRM1 dan PRM2. FHL5 adalah komponen jalur CREM
yang mengatur sel kuman meiosis16, sementara PRM1 dan PRM2 mengkodekan protein yang terlibat dalam
penggantian histon dengan protamines selama spermiogenesis. Baru-baru ini dilaporkan bahwa jumlah transkrip
PRM1 dan PRM2 yang berubah mempengaruhi keseluruhan proses spermiogenesis dan morfologi sperma,
sehingga mempengaruhi fungsi sperma dewasa17,18. Tingkat ekspresi gen PRM1 dan PRM2 dilaporkan
sebagai indikator infertilitas pria18.
Analisis IPA menunjukkan turunnya regulasi delapan gen yang secara khusus mempengaruhi meiosis laki-laki.
Di antara mereka, HORMAD2 diketahui penting selama prophase meiotic19, sedangkan CCNA1 adalah siklin
spesifik meiosis yang dibutuhkan untuk meiosis I pada epitel germinal testis20. Kelimpahan relatif transkrip
CCNA1 dilaporkan lebih rendah pada pasien dengan defek produksi sperma yang parah20. Analisis jaringan
mengidentifikasi gen kunci lain, EZH2. Gen ini memiliki peran dalam pembaharuan diri sel kuman
primordial21 dan aktivitasnya berkorelasi langsung dengan faktor transkripsi YBX1, YBX2 dan MLH1 yang
mengatur diferensiasi sel kuman dan meiosis22. EZH2 mengatur ekspresi KNAP2, yang terjadi pada sel kuman
testis pada akhir spermatogenesis23. Selain itu, ekspresi spidol sperma klasik (SPAG5, SPAG9, SPA17,
SPATA8, SPATA17, SPATA22, SPATA24 dan SPATS2L) ditemukan turun-diatur. Ini berhubungan dengan
penangkapan meiosis, infertilitas dan sel kuman apoptosis24,25,26,27. Data ini menunjukkan bahwa cacat
diferensiasi meiosis dan kuman sel dapat menyebabkan berkurangnya jumlah spermatozoa dewasa pada pasien
KS.

Analisis IPA terhadap dataset gen yang diturunkan menunjukkan bahwa banyak transkrip berhubungan dengan
status hipospermatogenik, seperti CNOT7, FKBP4 atau RLN1. Gen-gen ini dilaporkan turun-diatur dalam
kondisi infertilitas dan perubahan spermatogenesis pada tikus28,29,30, dan dapat digunakan sebagai penanda
testis hypospermatogenic.
Gen yang diatur turun terutama dapat diekspresikan dalam sel kuman sedangkan gen up-regulated cenderung
diekspresikan dalam komponen somatik, menunjukkan implikasi diferensial gen ini dalam konteks patogen KS
(Tabel Tambahan S1 dan S2). Beberapa transkrip yang diatur ke bawah dikaitkan dengan morfologi dan gerakan
sel kuman. Modulasi turunan transkrip AKAP4, CNOT7, DDX25, FHL5, NR1H3, FHL5, PARVB, PRND,
SEPT12, SPESP1, SYCP3, dan TAF4B dapat dikaitkan dengan morfologi abnormal sel kuman. Secara khusus,
TAF4B adalah faktor transkripsi post meiosis yang mengatur spermiogenesis, dan gangguannya dikaitkan
dengan sperma struktural yang abnormal, mengurangi jumlah sperma, dan motilitas yang berkurang31. AKAP4
(terletak pada kromosom X) mengkodekan protein struktural ekor spermatozoa matang. Ungkapannya yang
rendah bisa dikaitkan dengan motilitas sperma yang berkurang32.

Transkrip down-regulated lainnya seperti FKBP4, GAPDHS, LDHC, PGK2, SLC2A8, dan TRPV6 dilaporkan
oleh analisis IPA untuk memainkan peran sentral dalam gerakan sel kuman laki-laki, sebuah fitur penting untuk
pematangan sperma yang benar dan pelepasannya ke dalam testis luminal edge. . Gerakan ini dikaitkan dengan
perubahan morfologi dan dikontrol ketat oleh sel Sertoli (SCs) 33. Setelah dilepaskan, spermatozoa matang
memperoleh fungsi ekor, sebuah proses yang membutuhkan produksi energi oleh mitokondria. FKBP4,
GAPDHS, LDHC, PGK2, SLC2A8, dan TRPV6 bertindak secara spesifik selama pematangan kuman di seluruh
struktur SCS dan terlibat dalam fungsi ekor34,35,36. Beberapa transkrip dalam dataset gen yang diatur turun
mengkodekan protein terkait mitokondria (MRPs, MTCH2, pembawa zat terlarut mitokondria, TCAIM, TUFM,
UCP1, dan CMC2). Data ini menunjukkan ketidakmampuan sel kuman KS untuk mendapatkan gerakan untuk
proses pematangan yang lengkap.

Kegagalan pematangan sel kuman sesuai dengan ekspresi gen yang banyak terlibat dalam
fungsi SCS. Telah diketahui dengan baik bahwa struktur SCS dan aktivitas metabolik sangat
penting untuk membedakan sel kuman. Hasil kami menunjukkan deregulasi banyak gen
yang mengkodekan protein membran serta protein penahan dan sitoskeleton yang penting
untuk fungsi SCs, yang mendorong ketidakmampuan SCS untuk mempertahankan
pengembangan sel kuman dan untuk mempertahankan integritas Uji-Darah-Testis-Barrier
(BTB). Penurunan regulasi beberapa aktin, AJAP1, COL13A1, MASTL, protocadherins,
TPGS2, TPPP2, TTL, TTLL6, TUBB4B, dan TUBGCP5, diidentifikasi sedangkan CAV1,
CDH13, FN1, SMIM4, TMC8, TMED10P1, TMEM79, TBCA dan TUBA1A ditemukan diatur.
Modifikasi ini dapat mencerminkan cacat pada bentuk dan fungsi SCS, dalam dinamika
mikrotubulus dan juga dalam pembagian sel kuman mitosis dan meiotik37. Jaringan teratas
yang terkait dengan Cluster A (Gambar 3A), berpusat di sekitar node CUL2 dan CALM1,
jelas menarik perubahan dalam komunikasi antar sel kuman dan SCS. Selain itu, hasil
menunjukkan ekspresi diferensial dari banyak transkrip yang terlibat dalam transport molekul
dan aktivitas metabolisme SCS yang merupakan fitur utama pemeliharaan BTB dan
pengembangan germinal38, dan menjelaskan "peran perawat" dari SCS. Metabolisme SC
dan molekul anorganik kecil diangkut ke sel kuman yang tumbuh melalui saluran khusus39.
Dua contoh yang jelas adalah pengangkutan seng dan glukosa / laktat40. Data menyoroti
peraturan turunan banyak pembawa zat terlarut seperti transporter SLC39A3 atau
transporter glukosa SLC2A5 dan SLC2A8. Yang perlu diperhatikan, penelitian kami
mengidentifikasi turunnya regulasi LDHAL6B dan LDHC, dua gen yang mengkodekan enzim
metabolisme laktat. Sel-sel kuman menggunakan laktat yang diproduksi oleh SCs sebagai
sumber energi utama41 mereka, dan temuan kami memastikan bahwa SCS tidak dapat
mempertahankan sel kuman secara benar. Analisis dataset pada gen up-regulated memberikan bukti
untuk modifikasi transkrip yang diekspresikan dalam komponen somatik yang dapat bertanggung jawab untuk
apoptosis dan aktivasi hiperaktif dari sel Leydig (LC).

Pasien KS menunjukkan hipogonadisme hipogonadotropik klasik karena insufisiensi testis primer. FSH adalah
hormon utama yang mengatur spermatogenesis yang bekerja melalui SCS, sedangkan LH merangsang produksi
testosteron oleh LC. Ekspresi gen yang diubah yang diatur oleh jalur FSH dan LH ditemukan. Pengaturan upset
INHBA dan ANXA5 mempengaruhi tingkat FSH dan sumbu hipotalamo-pitutiter masing-masing, yang
mengatur produksi testosteron42,43. Tiga puluh satu transkrip down-modulated berpartisipasi dalam regulasi
"kelainan sistem endokrin" (Gambar 2A). Pada Gambar 3A, CUL2 dihubungkan dengan IGF2BP, sebuah
pengatur terjemahan. Diketahui bahwa anggota jalur faktor pertumbuhan insulin diatur oleh tindakan FSH44.
Kami percaya bahwa ekspresi transkrip yang dimodulasi dalam SKB dan LC dapat dikaitkan secara langsung
atau tidak langsung dengan tingkat FSH dan LH. Regulasi gen Sertoli dan Leydig yang up-to-date, mungkin
karena adanya hiperaktifasi sel-sel ini, ditemukan pada pasien KS dengan sindikat sel Sertoli (SCO) 13 dan
hiperplasia sel Leydig adalah temuan umum pada subjek KS. Namun, apakah disregulasi ini pada dasarnya
disebabkan oleh FSH dan LH yang lebih tinggi atau kerusakan testis primer, yang bertanggung jawab atas
peningkatan kadar gonadotropin, tetap merupakan pertanyaan terbuka.

Dari 303 transkrip up-regulated, sepertiganya terkait dengan proses apoptosis (Tabel Tambahan S3). Di antara
gen-gen ini, IPA mengungkapkan up-regulasi gen pro dan anti-apoptosis. Mengingat kematian sel germinal
yang luas, komponen somatik gangguan apoptosis dapat mewakili mekanisme utama yang menyebabkan
disfungsi KS testis1. Banyak gen diekspresikan dalam sel somatik dan germinal, sehingga sulit untuk
membedakan efek spesifik dari regulasi mereka. Dua gen yang paling penting dalam dataset yang teregulasi
adalah JUN, yang mengatur apoptosis LC, tergantung pada androgen produksi45 dan BCL2, yang
pengaturannya bisa menjadi reaksi terhadap mekanisme yang menginduksi apoptosis46. Apoptosis tampaknya
juga terkait dengan jalur FGF dan NFKb, seperti yang digambarkan oleh jaringan atas yang disimpulkan IPA
pada Gambar 3B. Jaringan ini dilaporkan mengatur kesuburan pria
fungsi dan pengembangan sel somatik / germinal47. Pengaturan up-up dari jalur apoptosis ini mungkin
disebabkan oleh ketidakseimbangan antara sinyal apoptosis dan kelangsungan hidup pada komponen somatik
dan germinal. Hasil penelitian kami menunjukkan bahwa apoptosis pada testis dewasa bisa menjadi konsekuensi
hilangnya sel kuman. Apoptosis sel kuman bisa juga diakibatkan oleh kegagalan sel sekitarnya dalam
memberikan kondisi optimal untuk pertumbuhannya. Sulit untuk menilai apakah penghambatan apoptosis harus
mengembalikan situasi, namun kedengarannya mungkin blok apoptosis dapat diperbaiki pada sebagian kondisi
patologis pada testis KS. Sepengetahuan kami, tidak ada laporan sebelumnya yang secara langsung menjawab
kemungkinan penghambatan terapeutik apoptosis untuk mengembalikan situasi. Namun, Aksglæde dan
rekannya melaporkan bahwa dalam testis manusia, testosteron mampu secara efektif menghambat apoptosis
spermatosit dan spermatid yang diinduksi secara in vitro serta estrogen secara efektif menghambat apoptosis sel
kuman laki-laki di dalam tubulus seminiferus manusia.

Tes KS tampaknya juga dipengaruhi oleh proses peradangan dan nekrosis, yang menyebabkan kematian sel dan
infertilitas 48. Analisis IPA pada jaringan gen 2 (Gambar 4B) mengilustrasikan fitur yang disebutkan di atas,
melaporkan gen yang dikenal dari jalur inflamasi (kompleks CDC42, HLA-DRA, IL1R1, SOD1, dan SOCS3).
Perlu dicatat bahwa gen yang terlibat dalam homeostasis redoks seperti GSTA2 dan GPX1 diregulasi, dan
kemungkinan merupakan tanda peradangan dan aktivasi hiper LC49,50.

Sebuah studi dari Ma et al.51 melaporkan profil ekspresi gen dari sel induk pluripoten induksi (iPSCs) yang
diperoleh dari pasien KS. Hasil kami sesuai dengan yang dilaporkan dalam penelitian ini yang menunjukkan
modulasi gen yang berpartisipasi dalam jalur inflamasi dan apoptosis. Sebaliknya, KS-iPSC menunjukkan up-
modulasi sejumlah besar transkrip terkait-X yang tidak terdeteksi dalam penelitian kami51, yang
mengkonfirmasikan bahwa gen terkait-X dapat berperan selama tahap awal spermatogenesis yang menyebabkan
disfungsi testis. pada pasien KS dewasa.

Hasil penelitian kami dibandingkan dengan yang sebelumnya dilaporkan untuk pasien
azoospermia KS (fenotipe SCO) 13 untuk mengidentifikasi jaringan molekular yang terlibat
dalam kegagalan spermiogenik dan testis KS. KS azoospermic testis menunjukkan
perbedaan up-dan down-regulation masing-masing 656 dan 247 transkrip, dibandingkan
dengan kontrol yang sama. Seperti dilaporkan sebelumnya, sebagian besar transkrip
termodulasi diungkapkan oleh sel Sertoli dan Leydig. Analisis set data menunjukkan
perubahan ekspresi gen yang memainkan peran sentral dalam kematian sel, respon
inflamasi, metabolisme lipid, steroidogenesis, pembentukan dan pemeliharaan pemblokiran
darah-testis, serta kegagalan spermatogenesis. Perbandingan antara pasien dengan
hypospermatogenesis dan SCO mengungkapkan bahwa 109 transkrip regulasisasi up-
regulated dan 34 dibagi dengan dua kondisi yang berbeda (Tabel Supplement S4 dan S5).
Analisis fungsional dari gen 109 up-regulated mengungkapkan bahwa mereka terlibat dalam
interaksi interselular, regulasi penghalang darah-testis, serta apoptosis. Hal ini menegaskan
disfungsi KS testis umum pada kondisi hipospermatogenesis dan SCO. Sebaliknya, hanya
34 gen yang diatur turun dibagi antara kedua kondisi tersebut. Jumlah yang rendah (n = 34)
transkrip down-down yang dibagi bergantung pada rendahnya jumlah transkrip down-
regulated yang disorot untuk pasien dengan SCO (Gambar 5). Faktanya, pasien KS yang
terkena hypospermatogenesis, menunjukkan jumlah sel kuman yang lebih tinggi bila
dibandingkan dengan pasien SCO, yang memungkinkan deteksi jumlah gen yang lebih
tinggi yang dinyatakan dalam epitel germinal. Transkrip ini diturunkan pada pasien KS
dengan hypospermatogenesis bila dibandingkan dengan kontrol normal (lihat Gambar 1,
Cluster A). Kesimpulannya, penelitian kami menunjukkan skenario yang kompleks dimana penurunan
spermatogenik nampaknya merupakan hasil perubahan fungsional dan morfologis pada komponen germinal dan
somatik testis KS dengan hypospermatogenesis. Hasil yang dipublikasikan menunjukkan pola ekspresi spesifik
yang terkait dengan fenotipe klinis52. Selain itu, hasil kami menggambarkan gambar yang serupa dengan yang
dilaporkan oleh Zhuang dkk, pada pasien azoospermia non-obstruktif (NOA )53. Di sisi lain, ekspresi gen yang
benar pada sel kuman mendorong sisa spermatogenesis mengikuti modulasi beberapa transkrip yang terlibat
dalam morfologi dan gerakan sel kuman serta fungsi komponen somatik. Selain itu, data mengkonfirmasi
pentingnya integritas lingkungan mikro testis untuk mempertahankan pertumbuhan sel kuman yang tampak luar
biasa di KS.

Perspektif masa depan

Penelitian target lebih lanjut diperlukan untuk memvalidasi hasil ini pada populasi yang lebih besar, untuk
mengidentifikasi penanda infertilitas yang berguna dan untuk menghilangkan perbedaan antarpribadi. Namun,
data ini bisa menjadi dasar untuk mengungkap jalur molekuler yang menyebabkan kegagalan testis KS.
Beberapa penelitian melaporkan modifikasi ekspresi pada sampel darah dari pasien KS54, menyimpulkan
bahwa analisis darah perifer dapat mewakili perkembangan penyakit dan kemungkinan dapat digunakan sebagai
alat non-invasif yang dipersonalisasi untuk diagnosis banding pada pasien yang menunjukkan fenotipe variabel.
Hasil kami mendukung hipotesis ini, mengungkapkan bahwa beberapa gen terlibat dalam jalur yang tidak khas
testis (yaitu Diabetes Mellitus Signaling, Neurological Disorders atau Cardiovascular Disease).
Ini mungkin menunjukkan kemungkinan bahwa, untuk beberapa gen, modifikasi ekspresi serupa dapat
ditemukan di organ lain atau jaringan. Analisis ekspresi darah dapat membantu untuk membedakan perubahan
yang spesifik testis, untuk menyoroti biomarker yang pasti untuk intervensi. Ini juga akan menantang untuk
melihat modifikasi ekspresi RNA non-coding (ncRNAs) untuk melihat secara global mekanisme yang diubah
pada testis KS dan kemungkinan penyebab ekspresi gen yang berubah. Selain itu, penting untuk mempelajari
ncRNA yang berasal dari kromosom X yang dapat melepaskan diri dari inaktivasi X.

Human chorionic gonadotropin stimulation gives evidence of differences in testicular

steroidogenesis in Klinefelter syndrome, as assessed by liquid chromatography–tandem mass
spectrometry

Stimulasi gonadotropin chorionik manusia memberikan bukti adanya perbedaan testissteroidogenesis pada
sindrom Klinefelter, sebagai dinilai dengan kromatografi cair-tandem spektrometri massa
S Belli1, D Santi1,et 1Unit of Endocrinology, Department of Biomedical, Metabolic and Neural Sciences,
University of Modena and Reggio Emilia, Modena, Italy

Klinefelter syndrome (KS) adalah yang paling sering bawaan

kromosom aneuploidi dengan perkiraan kejadian
1-2 per 1000 laki-laki (1). Kariotipe itu klasik
47, XXY, tapi varian lainnya ditemukan (1). Testis di KS
ditandai oleh fibrosis dan hyalinisasi yang luas
dari tubulus seminiferus dan sel Leydig hiperplasia
(1, 2, 3). KS ditandai dengan hipergonadotropik
hipogonadisme, dan sel Leydig umumnya dipertimbangkan
disfungsional dan tidak mampu menghasilkan tingkat yang memadai
testosteron (TS) bahkan jika dioptimalisasi dengan kadar tinggi
beredar hormon luteinizing (LH) (2).
TS adalah produk utama steroidogenesis di
testis manusia, mulai dari kolesterol (4). Pertama
Langkah steroidogenesis, pregnenolone adalah 17β-hidroksilasi
oleh P450c17, melalui dua jalur yang berbeda, tergantung
pada aksi katalitik dari enzim mikrosomal 3βHSD
(3-ß-hydroxysteroid dehydrogenase) (5). Enzim ini
mengkatalisis kedua konversi gugus hidroksil menjadi a
kelompok keto dan isomerisasi ikatan rangkap dari
B cincin (Δ 5 steroid) ke cincin A (Δ4 steroid) (5)
(Tambahan Gambar 1, lihat bagian data tambahan
diberikan pada akhir artikel ini).
Pada pria, androgen diproduksi oleh testis dan adrenal
dalam jumlah yang berbeda (6, 7, 8). Tingkat TS serum kebanyakan terjadi
dari testis, serta progesteron (P), androstenedion
(AS), dan 17-hidroksiprogesteron (17OHP) (Δ4 jalur).
Namun, jalur Δ4 secara fisiologis hampir terhambat
pada tingkat 17OHP di sel Leydig (5). A bisa dipertimbangkan
terutama sebagai produk testis, karena zona adrenal
reticularis menunjukkan ekspresi 3βHSD2 terendah (9), dan
hanya sejumlah kecil dehydroepiandrosterone (DHEA)
diubah menjadi AS Sebaliknya, serum pregnenolone,
17-hydroxypregnenolone, dan DHEA (semua steroid dari Δ5
jalur) sebagian besar merupakan ekspresi produksi adrenal (5).
Human chorionic gonadotropin (hCG) digunakan di Indonesia
masa lalu untuk mengevaluasi cadangan steroidogenik testis (10).
Uji hCG, bagaimanapun, tidak pernah distandarisasi
Pasien KS dan bervariasi berdasarkan administrasi
5000IU hCG sebagai dosis intramuskular tunggal (11);
5000IU / hari selama 3 (12), 4 (13), atau 5 hari (12); 4000IU / hari
untuk 4 (14) atau 5 hari (15); atau 1500IU / hari selama 3 hari (16). Di
Umum, stimulasi hCG diikuti oleh yang tidak konsisten
kenaikan TS serum dan / atau steroid lainnya, lebih rendah dari pada
kontrol, menghasilkan hipotesis beberapa enzimatik
cacat steroidogenesis testis pria KS (15, 16, 17,
18, 19, 20). Perlu dicatat bahwa beberapa penelitian awal dilakukan
dilakukan bahkan sebelum radioimmunoassays untuk TS berada
penggunaan dan didasarkan pada uji mengikat kompetitif menggunakan
globulin pengikat hormon seks (SHBG) (14, 18). Secara umum,
kebanyakan penelitian menghipotesiskan kekurangan spesifik pada 17-20
Aktivitas lyase di KS (14, 15, 19). Pengetahuan saat ini adalah
bahwa aktivitas 17-20 lyase P450c17 bersifat fisiologis
hampir tidak ada di normal Leydig dan granulosa
sel (5), dan, dengan demikian, hipotesis ini harus ditinjau ulang
sebagai mekanisme sekresi TS yang berkurang pada pria KS.
Desensitisasi sel Leydig menjadi gigih, tinggi,
stimulasi endogen oleh LH telah didalilkan (20). Ini
Hasil yang tidak konsisten tidak dapat mengklarifikasi mekanisme
sekresi TS yang berkurang pada pria KS, dan masalahnya tetap ada
belum terselesaikan selama lebih dari tiga dekade. Baru-baru ini, sebuah penelitian
readdressed dasar hipogonadisme pada pria KS oleh
mengukur serum dan intratesticular TS (ITTS) pada testis
jaringan biopsi (21). Menariknya, penelitian ini menunjukkan hal itu
ITTS meningkat pada pria KS dibandingkan dengan kontrol, jadi
bahwa alasan untuk hypotestosteronemia tetap genap
lebih teka-teki (21).
Kromatografi cair-tandem spektrometri massa
(LC-MS / MS) baru saja divalidasi
oleh kami untuk pengukuran serentak sembilan
steroid serum (22). Dalam penelitian ini, kami mengajukan permohonan untuk
Pertama kali teknik divalidasi ini untuk menganalisa basal
dan androgen androgen androgen hCG dan androgen
prekursor pada pasien dengan KS dibandingkan dengan kontrol
subjek. Dengan asumsi bahwa beberapa steroid serum, yaitu,
TS, 17OHP, dan AS, adalah proxy testicular yang andal
steroidogenesis (23, 24), tujuan dari penelitian ini adalah a
Penilaian ulang lengkap hipogonadisme di KS oleh hCG
stimulasi dan penggunaan modern, state-of-the-art
pendekatan

Ini adalah deskripsi pertama dari respons sel Leydig terhadap

stimulasi hCG eksogen pada KS dan kontrol menggunakan
LC-MS / MS untuk mengevaluasi steroid serum. Dalam penelitian ini, kita
memilih untuk menerapkan satu suntikan injeksi 5000IU dari hCG dan
diikuti steroid serum setiap hari selama 5 hari setelah stimulasi.
Desain eksperimental ini mengeksplorasi respon Leydig
sel untuk stimulasi hCG dalam jangka pendek / menengah.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa, pada kelompok kontrol, maksimal
Tingkat serum TS tercapai pada hari ke 3 setelah stimulasi
dan perlahan turun setelahnya. Tingkat TS serum
hari ke 3 lebih dari dua kali lipat dibandingkan dengan baseline,
mengkonfirmasikan data terbaru pada pria kontrol, di mana
Dosis hCG yang sama diterapkan dan TS diukur dengan
radioimmunoassay setelah ekstraksi dan kromatografi
72h setelah stimulasi (27). Mengingat masa paruh yang panjang,
kadar hCG serum tidak kembali ke garis dasar di
akhir periode pengamatan (Tambahan Gambar 2)
pada kelompok kontrol Sebaliknya, pada pria KS, serum TS
tingkat meningkat secara signifikan kurang dari pada kontrol, dengan
Tingkat maksimal tercapai pada hari ke 2 dan kembali ke level
tidak signifikan secara statistik dari baseline yang sudah ada pada hari ke hari
3 meskipun kadar hCG serum serupa. Karena itu, TS
Produksi bisa lebih terstimulasi pada pria KS, tapi hCG
Stimulasi kurang efisien dibandingkan dengan usia yang diimbangi,
subjek kontrol Hasil ini hampir tidak sebanding dengan
yang dijelaskan dalam studi lama lebih dari tiga dekade
lalu, di mana protokol stimulasi yang sangat berbeda,
periode pengamatan, dan metode uji digunakan
(19, 20). Sesuai dengan studi awal tersebut,
data terkini mengkonfirmasi dan memperkuat konsep a
mengurangi kemampuan testis untuk merespon gonadotropin
stimulasi pada pria KS.
Mekanisme produksi TS yang berkurang tersebut di Indonesia
Laki-laki KS tetap, bagaimanapun, menantang. Dalam penelitian ini,
kami menunjukkan bahwa respon P lebih tinggi pada pasien KS
dan kenaikan 17OHP setelah hCG maksimal dan
identik dengan subjek kontrol yang sudah ada pada hari ke 1. ini
menunjukkan bahwa langkah pertama dari jalur Δ4 sepenuhnya
fungsional pada sel KS Leydig, bahkan jika konversi PS
ke 17OHP muncul secara signifikan lebih efisien dalam kontrol
laki-laki, seperti ditunjukkan oleh 17OHP / P yang jauh lebih tinggi
rasio pada setiap titik waktu. Selain itu, rasio 17OHP / P
meningkat secara signifikan setelah stimulasi hCG, menyarankan
Kontrol langsung gonadotropin ini pada ekspresi gen
dari enzim steroidogenik yang terlibat dalam 17OHP
produksi. Konversi P menjadi 17OHP adalah hasilnya
aktivitas oksidoreduktase P450c17-P450 (POR), yang
diketahui dirangsang oleh cAMP. Enzimatik lainnya
aktivitas mungkin terlibat, misalnya 3βHSD2.
Steroidogenesis testis dapat distimulasi oleh LH dan
hCG, berbagi reseptor LH / choriogonadotropin yang sama
(LHCGR). Namun, hCG memiliki aktivitas in vitro yang lebih tinggi daripada
LH dalam hal produksi cAMP (28). Apalagi Park
dan rekan kerja baru-baru ini menunjukkan bahwa hCG
menginduksi enzim steroidogenik in vivo pada tikus jantan dan
in vitro pada tikus Leydig sel tumor (mLTC-1) (29). Di
khususnya, secara in vitro, setelah beberapa injeksi hCG, mRNA
tingkat enzim steroidogenik (STAR, 3βHSD, CYP17,
dan 17βHSD) menurun secara nyata pada sel mLTC-1 (29).
Demikian pula, model in vivo menunjukkan peningkatan produksi
mRNA dan protein 3βHSD, P450c17, dan 17βHSD3
selama 12 jam pertama setelah pengobatan hCG setiap hari (29). Ini
Peningkatan diikuti dengan penurunan bertahap 24h lebih lanjut
(29). Hasil kami tampaknya mengkonfirmasi efek positif ini
Stimulasi hCG baik pada kontrol maupun pada laki-laki KS. Di
Selain itu, data kami mengkonfirmasi bahwa 17OHP adalah terminal
produk di sel Leydig, seperti yang ditunjukkan oleh sangat tinggi
nilai rasio 17OHP / P, sugestif untuk progresif
akumulasi (dan sekresi dalam darah) 17OHP karena
Aktivitas 17-20 lyase yang sangat rendah dari enzim P450c17
karena afinitas rendah untuk 17OHP (5, 30).
Puncak produksi TS mencapai minimal 1
atau 2 hari kemudian dibandingkan dengan 17OHP maksimal
stimulasi, sesuai dengan preferensial
penggunaan jalur Δ5, yang tidak bisa akurat
dinilai dengan mengukur serum steroid. Padahal, serum
pregnancyenolone, 17OH-pregnancyenolone, dan DHEA adalah
dianggap terutama berasal dari adrenal, dan
androstenediol tidak dapat diukur dengan metode ini
diterapkan disini Demikian pula efisiensi isomerase Δ5-4
(3βHSD2) aktivitas tidak dapat diekstrapolasikan dengan menghitung
rasio AS / DHEA, mengingat asal mula adrenal
DHEA dan testis asal AS diukur dalam serum
(23, 24). Selain itu, serum A tidak meningkat setelahnya
hCG, menunjukkan bahwa langkah selanjutnya produksi TS
tidak memerlukan stimulasi langsung dari 3βHSD2 dan
Aktivitas 17βHSD3 oleh gonadotropin. Sebenarnya, TS /
Rasio AS tidak berubah mengikuti stimulasi hCG, seperti
ditunjukkan oleh data saat ini. Rasio TS / AS, bagaimanapun,
secara signifikan lebih tinggi dalam kontrol daripada pada pasien KS,
mungkin mengidentifikasi setidaknya aktivitas 17βHSD3 sebagai satu
gangguan langkah steroidogenesis testis dalam bentuk ini
hipogonadisme primer 3βHSD2 dapat dilibatkan sebagai
Nah, tapi ini tidak bisa dibuktikan dengan data terkini.
3βHSD2 dan 17βHSD3 adalah HSD dan fungsinya dengan menggunakan
kofaktor nikotinamida NADPH / NADP + dan NADH /
NAD +. Konsentrasi intraseluler kofaktor ini
melebihi steroid dengan banyak perintah besarnya dan
adalah pendorong utama dari arah dan jumlah
reaksi HSD steroidogenik (31). Seperti nikotinamid
Kelimpahan kofaktor tergantung pada redoks intraselular
keadaan, aktivitas HSD dapat dipengaruhi secara signifikan oleh
keadaan metabolik sel (31). Karena itu, lokal
hipoksia dan berkurangnya aliran darah mungkin menjadi penyebabnya
mengurangi 17βHSD3 dan kemungkinan aktivitas 3βHSD2 di
testis fibrotik pasien KS. Pengurangan yang signifikan
vaskularisasi testis sebelumnya ditunjukkan
dalam model tikus KS manusia (21) dan pasien KS,
yang menunjukkan secara signifikan penurunan diameter arteri pada
beberapa organ (32). Kami menyarankan agar TS menurun
produksi dalam testis KS manusia mungkin, setidaknya sebagian,
terkait dengan gangguan aktivitas HSD sebagaimana ditunjukkan oleh
secara signifikan mengurangi rasio TS / AS, karena jaringan berkurang
oksigenasi. Namun, kita tidak bisa mengecualikan sekresi,
daripada produksi, penurunan, misalnya,
karena ketidakmampuan ITTS untuk mencapai aliran darah
di KS Hipotesis sel Leydig disfungsional
di KS baru saja diperdebatkan oleh Tuttelmann dan
rekan kerja (21), yang menemukan ITTS secara signifikan meningkat
konsentrasi dalam model tikus KS dan manusia
biopsi testis dari 11 pasien KS meskipun berkurang
kadar TS serum (21). Penulis menyarankan bahwa a
diubah vaskularisasi mencegah pelepasan TS ke
aliran darah (21). Karena itu, bedeng vaskular berkurang
Pada testis KS mungkin bertanggung jawab untuk kedua TS yang menurun
produksi dan lepaskan ke aliran darah, tapi ini
perlu diuji dalam penelitian lebih lanjut. Semua hipotesis ini
berasal dari pengetahuan terkini tentang enzimatik
proses yang terlibat dalam steroidogenesis, yang bagaimanapun,
melibatkan jalur yang berbeda secara simultan. Seperti serumnya
steroid yang diukur di sini berasal dari testis dan
Dari kelenjar adrenal, keterbatasan penelitian ini adalah itu
Stimulasi hCG dilakukan tanpa menekan
kelenjar adrenal (misalnya, dengan deksametason). Namun,
mengingat hCG bertindak (hampir) secara eksklusif di
testis, hasil yang didapat dapat diasumsikan informatif
dari steroidogenesis testis. Analisis yang lebih berwawasan
steroidogenesis testis in vivo mungkin memerlukan
mengulangi percobaan setelah penekanan adrenal.
Akhirnya, serum E2 meningkat secara signifikan dan dini (hari
1) setelah stimulasi hCG pada kedua kelompok. Hasil ini
untuk dipertimbangkan dengan cermat, karena E2 diukur dengan menggunakan
immunoassay dan bukan LC-MS / MS. Responnya cepat
dari E2 ke hCG mencerminkan stimulasi cepat CYP19
Ekspresi dengan gonadotropin ini pada sel target (28).
Namun, konsentrasi serum E2 di KS lebih rendah dari pada
dalam kontrol mungkin tergantung pada tingkat TS yang lebih tinggi
Pria eugonad, karena aromatisasi lebih efisien
pada subjek KS, seperti yang disarankan oleh secara signifikan lebih tinggi
Rasio E2 / TS. Hal ini sesuai dengan bukti kuat
aromatase immunostaining pada sel Leydig pria KS (33)
dan ekspresi CYP19 aromatase yang lebih tinggi pada testis KS
(34). Selain itu, tingkat LH endogen tinggi bisa
jelaskan peningkatan aktivitas aromatase di KS. Sebenarnya, itu
Telah diketahui bahwa enzim aromatase (gen CYP19A1) adalah
target respons awal LH baik di manusia maupun di Indonesia
tikus (35, 36, 37).
Cepatnya pengurangan serum LH baik di KS
dan di kontrol pria setelah hCG menunjukkan integritas
umpan balik negatif yang diinduksi oleh TS dan E2 pada
Sebagai kesimpulan, kami mendemonstrasikan di sini, untuk yang pertama
waktu menggunakan LC-MS / MS, sel Leydig dari pria KS
mampu merespon stimulasi hCG dan yang pertama
Langkah steroidogenesis berfungsi penuh. Sekresi TS /
Produksi, bagaimanapun, adalah gangguan, mungkin terkait dengan
mengurangi aktivitas HSD karena intratesticular yang tidak menguntungkan
keadaan metabolik.