ISOLASI DAN IDENTIFIKASI BAKTERI PADA MAKANAN BOBOR BAYAM DI

FOODCOURT BASEBALL UNESA

Wahyu N Sulistyanto Nailiz Z Aprialianti Rizki D Putri Dinik Rokhmatin

JurusanBiologi-FMIPA UniversitasNegeri Surabaya

Mikrobiologi adalah ilmu yang mempelajari tentang jasad renik, makhluk hidup kecil yang
diamati menggunakan alat bantu dan tekhnik khusus. Salah dari kegiatan yang dilakukan adalah
membuat biakan murni bakteri dan mengamatinya. Setelah melakukan rentetan percobaan terhadap
biakan bakteri murni kuah makanan bobor bayam dengan beberapa tujuan yaitu; mengetahui dan
memahami cara pembuatan media pertumbuhan, tekhnik sterilisasi, isolasi bakteri, enumerasi bakteri,
pemurnian bakteri, karakterisasi bakteri dan uji resistensi. Menggunakan metode eksperimental, dimulai
mempersiapkan alat bahan untuk beberapa rentetan kegiatan kedepan; menyiapkan media TA (Touge
agar) dan TC (touge cair), menyeterilkan alat menggunakan sterilisasi kering(oven) dan sterilisasi basah
(autoclafe), mengisolasi bakteri dengan metode Pour Platre Method; enumerasi, menghitung jumlah
koloni pada empat kuadran; pemurnian menggunakan tekhnik Streak Plate Method pada cawan petri lalu
tabung reaksi miring; mengkarakterisasi bakteri murni dengan pewarnaan sederhana, pewarnaan negatif
dan pewarnaan gram; kegiatan terakhir adalah menguji resistensinya dengan mengamati clear zone
yang terbentuk. Pada karakterisasi diambil 3 macam bakteri yaitu bakteri SS1, SS2 dan L6 yang ketiga
merupakan bakteri gram negatif. Penelitian ini juga menumukan bahwa uji resistensi terhadap bakteri
SS1 terhadap antibiotik Tetrasiklin sensitif

Key words : bobor bayam, bakteri,

PENGANTAR
Bobor bayam merupakan makanan
olahan bayam khas Indonesia yang
mengandung bahan utama bayam dan
santan. Bayam (Spinacia oleracea) memiliki
kandungan zat besi berupa Fe2+ atau ferro,
jika bayam terlalu lama berinteraksi dengan
O2 (oksigen) maka kandungan Fe2+ pada
bayam akan teroksidasi menjadi Fe3+ atau
ferri. Meski sama-sama zat besi yang
bermafaat bagimanusia, ferro lain halnya
dengan ferri yang bersifat racun. Santan
memiliki kandungan kalsium, omega 3, serat
dan protein. Penelitian ini dilakukan untuk
mengetahui bakteri yang terdapat pada
bobor bayam.
Bobor bayam dipilih sebagai sampel
pada penelitian ini karena dalam kedidupan
sehari-hari bobor bayam diketahui mudah
basi. Basi nya bobor bayam terjadi ketika
diletakkan ditempat terbuka tanpa
pemanasan maupun pendinginan. Selain itu
bobor bayam terdiri dari bahan bayam,
santan dan bumbu. Tidak adanya bahan
antioksidan atau bahan sejenis seperti jahe
memungkinkan menjadi salah satu
penyebabnya. Oleh karena itu bobor bayam
digunakan sebagai sampel penelitian
ini.Kontaminasi yang terjadi pada makanan
dan minuman dapat menyebabkan
berubahnya makanan tersebut menjadi
media bagi suatu bakteri. Bakteri yang
sering didapatkan pada makanan basi
kebanyakan merupakan bakteri gram negatif
yang merupakan bakteri patogen penyebab
penyakit. Penyakit yang ditimbulkan oleh
makanan yang terkontaminasi disebut
penyakit bawaan makanan (food-borne
diseases). Foodborne diseases sebagian
besar disebabkan oleh konsumsi bahan
pangan yang tercemar oleh mikroorganisme
patogen yang dapat menyebabkan infeksi
ataupun intoksifikasi. Infeksi makanan
adalah masuknya bakteri kedalam tubuh
melalui makanan yang terkontaminasi,
sedangkan intoksifikasi makanan adalah
adanya toksin bakteri yang terbentuk
didalam makanan pada bakteri
bermultifikasi dan tubuh memberikan reaksi
terhadap bakteri tersebut. Berdasarkan jurnal
Nygren at al (2012) menyatakan bahwa
Shigella sp. bayak terkandung dalam sayur-
sayuran, sedangkan menurut Jawetz (2007)
menyatakan bahwa adanya Escerichia coli
sebagai indikator terkontaminasi makanan
dan minuman.
Bakteri dapat ditumbuhkan dan
dikembangkan pada suatu substrat yang
disebut media. Media yang digunakan
tersebut harus sesuai susunannya dengan
kebutuhan jenis-jenis bakteri yang
bersangkutan. Media yang digunakan pada
pertumbuhan bakteri bobor bayam adalah
media taoge agar. Media taoge agar
digunakan karena harganya relatif murah
dan memiliki kandungan yang cukup untuk
pertumbuhan bakteri. Tauge, berfungsi
sebagai sumber energi dan bahan mineral
bagi mikroba, pemberi vitamin E yang
diperlukan oleh mikroba, juga sebagai
sumber nitrogen.Sukrosa, sebagai sumber
METODE PENELITIAN
Penelitian ini menggunakan metode
eksperimental yang dilakukan 31 Agustus
2016 hingga 19 Oktober 2016. Penelitian
dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi
FMIPA UNESA
Alat yang digunakan pada
pengamatan bakteri ini (meliputi pembuatan
media pertumbuhan, sterilisasi, isolasi,
enumerasi, pemurnian, karakterisasi serta uji
resistensi) adalah pemanas (kompor), panci,
beaker glass, saringan, pengaduk, gelas
ukur(10 ml, 25ml, 100ml), timbangan, botol
bekas saos, kertas saring, autoclafe,
oven,cawan petri, enlemeyer, wrap,
alumunium foil, lampu spirtus, spet 1 ml,
ose, botol spray. Sasaran pada penelitian ini
adalah mahasiswa biologi sebagai bahan
pembelajaran maupun wawasan penelitian
yang berupa artikel. Populasi pada penelitian
ini adalah semua bakteri yang terdapat pada
sampel kuah sayur bobor bayam. Sedangkan
sampel yang diambil dalam penelitian ini
adalah bakteri murni dengan kode SS1, SS2
dan L6 yang diisolasi dari kuah sayur bobor
bayam dan ditumbuhkan pada media touge
agar serta touge cair
karbohidrat, sumber karbon organik, sebagai
sumber energi bagi mikroba.. Agar, sebagai
bahan pemadat medium. (TC tidak memakai
agar). Akuades, sebagai bahan pelarut untuk
menghomogenkan larutan.
Tujuan dilakukannya penelitian ini
pada pengisolasian, enumerasi, pemurnian,
karakterisasi, uji katalase, uji motilitas dan
uji resistensi bakteri untuk memisahkan
bakteri tertentu dari lingkungannya
menggunakan media pada cawan petri,
menghitung jumlah koloni,
mengembangbiakkan satu koloni bakteri
menggunakan media agar miring pada
tabung reaksi, mengkarakterisasi suatu
biakan murni bakteri hasil isolasi,
membedakan antara bakteri yang
menghasilkan katalase dan tidak
menghasilkan katalase, mengetahui bakteri
motil atau non motil, dan untuk menguji
tingkat resistensi suatu bakteri terhadap
antibiotik tertentu.
Penelitian ini dilakukan melalui
beberapa tahap yaitu, pembuatan media
pertumbuhan. Pembuatan media
pertumbuhan menggunakan ekstrak touge
dengan bahan touge 250 gr, aquades 1 liter,
gula 60 gr dan agar batang 15 gr yang
dipanaskan untuk dijadikan media touge cair
dan touge agar. Media yang dihasilakan
berupa touge agar dan touge cair. Kemudian
disimpan pada ruang pendingin untuk
digunakan kegiatan tahap percobaan
berikutnya.
Selanjutnya sterilisasi alat yang
dilakukan menggunakan sterilisasi kering
(oven) dan sterilisasi basah (autoklaf). Alat-
alat yang digunakan untuk kegiatan tahap
percobaan kedepan disterilisasi semua
kedalam autoklaf dengan suhu 121°C selama
15 menit dan oven 121°C selama 2 jam.
Kemudian tahap isolasi, enumerasi
dan pemurnian bakteri. Isolasi bakteri
merupakan cara untuk memisahkan
mikroorganisme tertentu dari lingkungan,
sehingga didapat biakan murni. Sampel
makanan diambil kuahnya, kemudian
dilakukan pengenceran hingga 10-7,
diinkubasi dengan cawan posisi terbalik.
Pengenceran dilakuan dengan mengambil 1 Penelitian terakhir adalah uji
ml dari suspensi pengenceran 10-1 (sebelum resistensi dengan meletakkan paper disk
pengambilan terlebih dahulu dilakukan antibiotik pada bakteri uji yang telah dire-
homogensi dan dimasukkan tabung reaksi 9 kultur pada media Tauge Cair (TC) dan
ml akuades. Suspensi tersebut merupana 10-2 diinkubasi selama 24-28 jam. Selanjutnya
dan melakukan tahap tersebut hingga 10-7. mengamati zona hambat/ clear zone yang
Enumerasi (penghitungan) koloni pada terbentuk disekitar disk antibiotik,
isolasi berumur 24 jam serta. Dilanjutkan mengukur diameter zona hambat/clear zone
pemurnian bakteri dengan metode streak dan memasukkandalam tabel dan
plate method pada empat kuadran, koloni membandingkannya.
yang terpisah merupakan biakan murni
(menentukan koloni bakteri untuk masing-
masing orang). Kemudian menanam pada
media agar miring.
Selanjutnya karakterisasi bakteri
meliputi, pewarnaan bakteri (pewarnaan
sederhana, pewarnaan negatif dan
pewarnaan gram), uji katalase untuk
menentukan bakteri katalase postif atau
negatif dan uji motilitas untuk mengetahui
motilitas mikroba.

HASIL PENELITIAN
Berdasarkan penelitian yang telah
dilakukan, proses isolasi dan inkubasi
sampel uji roti pisang selama 24 jam
menghasilkan 5 jenis isolat bakteri yang
dapat tumbuh pada media. Koloni yang
terbentuk memiliki beragam karakteristik
yang berbeda. Karakteristik pembeda
morfologi koloni bakteri yang diamati
tersebut meliputi: karakteristik optik,
karakteristik permukaan, pigmentasi,
ukuran, bentuk, elevasi, dan bentuk tepian
koloni sebagaimana disajikan pada tabel 1.

Tabel 1. Enumerasi jumlah koloni bakteri pada cawan petri dari berbagai konsentrasi dengan
metode

Jumlah Koloni Per- Standart

Cawan Keterangan
Pengenceran Plate Count
Petri

10-5 10-6 10-7

A 1 1 5
1,0 x 108
B - - 3 Rata-rata dari pengenceran 10-7

X=8:2
=4

4,0. 107
 < 30 X 107 . (4,0. 107) Fu/mL

Berdasarkan hasil yang telah kemudian dilakukan pengamatan bakteri dan

diperoleh pada pengamatan jumlah koloni disajikan pengamatan morfologi koloni
bakteri pada sayur bobor bayam yang sebagai berikut seperti pada tabel 2.
tersedia di foodcourt baseball Unesa,

Tabel 2. Hasil pengamatan morfologi koloni

Kode Karakteristik Bentuk

Sampel Gambar Pigmentasi Bentuk Elevasi
Koloni Optik Tepian

10-5 A

10-5 B

10-6 A SS1 Opaque Putih Circular Convex Entire

10-6 B

10-7A

10-5A
SS2 Translucent Putih Circular Umbonate Fillamentous
10-5B

10-5A

10-5B
SS3 Opaque Putih Spindle Raised Entire
10-6A

10-6B

10-5A SS4 Transparent Putih Irregular Umbonate Curled

10-5A
SS5 Opaque Putih Irregular Convex Undulate
10-5B

10-5A
SS7 Tranculent Putih Circular Umbonate Entire
10-5B
 10-6A

10-6B

10-5 A

10-5 B SS8 Transparent Putih Irregular Flat Undulate

10-7A

10-5A,
L6 Opaque Putih Circular Raised Erose
10-5B

Berikut ini merupakan hasil pengamatan morfologi sel bakteri pada sayur bobor bayam yang
tersedia di foodcourt baseball Unesa dengan metode pewarnaan sederhana, negatif, dan gram.
Berikut hasil pengamatan seperti pada tabel 3.

Tabel 3. Hasil karakterisasi sel bakteri

Kode
Pewarnaan Sederhana Pewarnaan Negatif Pewarnaan Gram
Bakteri

SS1 Bentuk sel: Basil

Bentuk sel: Basil Bentuk sel: Basil Susunan sel: Streptobasil

Susunan sel: Streptobasil Susunan sel: Streptobasil Warna sel: Merah

Warna sel: Biru Warna sel: Transparan Gram (+)/(-): Gram negatif (-)

SS2 Bentuk sel: Coccus

Bentuk sel: Coccus
Susunan sel: Streptococcus
Warna sel: Biru
Bentuk sel: Coccus
Susunan sel: Streptococcus
Susunan sel: Streptococcus
Warna sel: Merah
Warna sel: Transparan
Gram (+)/(-): Gram negatif (-)

L6

Bentuk sel: Basil

 Susunan sel: Monobasil Bentuk sel: Basil Bentuk sel: Basil

Warna sel: Biru Susunan sel: Monobasil Susunan sel: Monobasil

Warna sel: Transparan Warna sel: Merah

Gram (+)/(-): Gram negatif (-)

Pada uji katalase dapat diketahui ada katalase (+). Untuk melihat pergerakan suatu
tidaknya enzim katalase dengan menambahkan bakteri, maka dapat diamati dengan
larutan hidrogen peroksida (H2O2) ke dalam menggunakan metode preparat basah tetes
piaraan bakteri. Jika baktei enghasilkan Oksigen gantung sehingga dapat diketahui bakteri yang
(O2) saat ditetesi hidrogen peroksida (H2O2), diuji dapat bergerak atau tidak.
maka bakteri tersebut merupakan bakteri

Tabel 4. Hasil Uji Katalase dan Motilitas Bakteri

No. Bakteri Uji Resistensi Uji Motilitas

1. SS1 Positif (+) Non Motil

2. SS2 Positif (+) Motil

3. L6 Positif (+) Motil

Bakteri SS1 Bakteri SS2 Bakteri L6

Gambar 4.1. Hasil Uji Katalase dengan Pemberian Hidrogen Peroksida (H2O2) pada
bakteri uji SS1, SS2, dan L6

Hasil uji resistensi bakteri yang atau klinik umum lainnya yaitu Tetrasanbe
terkandung pada sampel makanan sayur yang memiliki kandungan Tetracycline.
bobor bayam, menggunakan antibiotik yang Tetrasiklin HCl termasuk golongan
sering digunakan di rumah sakit, puskesmas tetrasiklin ini mempunyai spektrum luas dan
bersifat bakteriostatik, cara kerjanya dengan melakukan uji resistensi antibakteri
menghambat pembentukan protein pada disajikan dalam bentuk tabel sebagai
bakteri. Hasil yang didapatkan setelah berikut:

Tabel 5. Hasil Uji Resistensi Bakteri SS1 terhadap Antibiotik Tetrasanbe

No. Cawan Petri 50 mg/ml 25 mg/ml 5 mg/ml 0 mg/ml

1 A 18 mm 17 mm 15 mm -5 mm
2 B 27 mm 23 mm 20 mm -5 mm

Gambar 4.1. Hasil Uji Resistensi dengan Pemberian AntibiotikTetrasiklin pada bakteri uji
SS1

PEMBAHASAN
Isolasi Bakteri
Mikroorganisme akan tumbuh dan
berkembang di lingkungan sekitar kita.
Maka untuk memudahkan mempelajari jenis
dan sifat mikroorganisme tertentu harus
dilakukan pengisolasian yaitu memisahkan
mikroorganisme tertentu dari lingkungannya
sehingga akan diperoleh biakan yang tidak
tercampur dengan jenis lain (biakan murni).
Dalam proses menumbuhkan
mikroorganisme dibutuhkan media
pertumbuhan sebagai kebutuhan dasar
mikroorganisme. Meliputi air, senyawa yang
dibutuhkan sebagai sumber energi, mineral,
faktor tumbuh, dan kondisi lingkungan yang
sesuai. Suatu cara agar dapat mengisolasi
mikroba dari tempat yang diinginkan, yaitu
dengan menumbuhkan suatu jenis koloni
mikroba pada cawan petri yang berisi media
taoge agar (TA) dengan metode cawan
tuang. Media taoge agar (TA) merupakan
media universal dan kompleks sehingga
segala macam mikroba sesuai dengan
nutrient yang ada. Sampel mikroorganisme
yang digunakan adalah bakteri dari roti
pisang. Roti pisang tersebut kemudian
ditumbuk sampai halus menggunakan mortal
alu steril. Selanjutnya dilakukan
pengenceran dari 10-1 sampai 10-7 secara
aseptis. Hasil pengenceran 10-5,10-6 dan 10-7
yang kemudian ditumbuhkan pada media
taoge agar (TA) di cawan petri. Bakteri
diinkubasi pada suhu 28-30 ⁰C selama 24
jam dengan posisi cawan petri terbalik. Sel
bakteri tidak dapat bergerak karena terjebak
pada media taoge agar (TA) di cawan petri.
Dengan demikian tiap sel akan tumbuh
membentuk koloni yang terpisah.
Enumerasi Koloni
 Diamati koloni yang terbentuk pada
setiap cawan yang telah diinkubasi dan
dicatat karakteristik morfologi koloni-koloni
yang terbentuk dalam tabel, dilakukan
enumerasi (perhitungan) jumlah koloni
tersebut berdasarkan Standart Plate Count
(cawan yang dipilih untuk perhitungan koloni
adalah yang mengandung 30 sampai 300
koloni). Namun pada penelitian kami hanya
ditemukan koloni bakteri <30, hal ini
disebabkan
Pemurnian Koloni
Diambil 4 koloni dengan bentuk yang
berbeda untuk dimurnikan dengan
menggunakan jarum ose dan digoreskan pada
media Taoge Agar pada cawan petri secara
kuadran, kemudian diinkubasi pada suhu 28-
30⁰C selama 24 jam dengan posisi cawan
petri terbalik. Diambil koloni tunggal yang
terbentuk dari hasil teknik cawan gores
kuadran dan ditanam pada media agar miring
pada tabung reaksi dengan teknik streake.
Biakan tersebut diinkubasi pada suhu 28-
30oC selama 24 jam, kemudian diamati
koloni yang tumbuh. Jika koloni sudah
murni, disimpan di dalam kulkas.
Pewarnaan Koloni
Pengamatan bakteri tanpa pewarnaan
sangat sulit dilakukan karena ukurannya
yang sangat kecil. Sehingga diperlukan
pewarnaan pada bagian sel bakteri agar lebih
jelas ketika diamati struktur dan bagian-
bagiannya serta dapat membedakan antara
bakteri yang satu dengan lainnya. Tipe
pewarnaan bakteri yaitu pewarnaan
sederhana, pewarnaan negatif, dan
pewarnaan gram. Pada pewarnaan sederhana
menggunakan methylene blue. Kebanyakan
sel bakteri dapat diwarnai dengan mudah
menggunakan teknik pewarnaan ini karena
sel bakteri bersifat basofilik. Pewarnaan ini
digunakan untuk melihat bentuk sel bakteri.
Sebelum diwarnai, dilakukan fiksasi
terhadap suspensi pada gelas benda. Untuk
pewarnaan negatif menggunakan tinta bag,
metode pewarnaaan ini bukan untuk
mewarnai bakteri tetapi mewarnai latar
belakangnya menjadi hitam gelap. Pada
pewarnaan ini mikroorganisme kelihatan
transparan (tembus pandang). Teknik ini
berguna untuk menentukan morfologi dan
ukuran sel. Untuk pewarnaan gram
menggunakan crystal violet, iodine, ethyl
alkohol 95% dan safranin. Pada pewarnaan
gram pemberian crystal violet sel akan
membentuk kompleks CV-1yang akan
berikatan dengan Mg-RNA komponen
dinding sel, membentuk komplek Mg-RNA-
CV-1yang tidak larut dalam alkohol.
Pemberian iodine untuk memperkuat ikatan
primer, hasil ikatan komplek crystal violet-
iodine (CV-1) akan mewarnai sel secara
intensif. Pemberian alkohol sebagai pelarut
lemak dan agen dehidrasi protein.
Pemberian safranin pada sel gram negatif
setelah didekolorisasi pewarna safranin akan
diserap sehingga sel berwarna merah
sedangkan pada sel gram positif pewarna
safranin tidak diserap sehingga sel akan
berwarna biru keunguan (Asri,dkk. 2016).
Karakterisasi dan Pewarnaan
Setiap koloni bakteri memiliki
karakteristik yang beragam. Karakteristik
dapat diamati melalui bentuk, ukuran,
susunan. Berdasarkan jenisnya, bakteri
menunjukkan 3 bentuk dasar yaitu coccus,
basil dan spiral. Bentuk coccus berbentuk
menyerupai buah beri kecil apabila dilihat di
bawah mikroskop. Bakteri yang terbentuk
coccus dapat dibedakan menjadi beberapa
macam, yaitu monococcus (satu),
diplococcus (berpasangan), sterptococcus
(berantai), tetracoccus (4 sel tersusun dalam
satu kubus), stapilococcus (berbentuk
untaian seperti buah anggur) dan sarcina (8
sel tersusun dalam satu kubus). Bentuk basil
berbentuk menyerupai batang atau silinder.
Basil hanya membelah pada satu bidang,
tetapi menghasilkan sel-sel yang
bersambung dari ujung ke ujung (seperti
kereta api) atau dari samping ke samping.
Bakteri basil dapat dibedakan menjadi
coccobasil, monobasil, diplobasil. Ada
bakteri yang berbentuk helikoidal yang
berpilin-pilin seperti spiral/ heliks dan ada
yang berbentuk seperti koma, misalnya
Vibrio cholera.
 Pengamatan bakteri tanpa pewarnaan
sangat sulit dilakukan karena ukurannya
yang sangat kecil. Sehingga diperlukan
pewarnaan pada bagian sel bakteri agar lebih
jelas ketika diamati struktur dan bagian-
bagiannya serta dapat membedakan antara
bakteri yang satu dengan lainnya. Tipe
pewarnaan bakteri yaitu pewarnaan
sederhana, pewarnaan negatif, dan
pewarnaan gram. Pewarnaan sederhana
menggunakan methylene blue, pewarnaan
negatif menggunakan tinta bag dan
pewarnaan gram menggunakan crystal
violet, iodine, ethyl alkohol 95% dan
safranin. Pada pewarnaan gram pemberian
crystal violet sel akan membentuk kompleks
CV-1yang akan berikatan dengan Mg-RNA
komponen dinding sel, membentuk komplek
Mg-RNA-CV-1yang tidak larut dalam
alkohol. Pemberian iodine untuk
memperkuat ikatan primer, hasil ikatan
komplek crystal violet-iodine (CV-1) akan
mewarnai sel secara intensif. Pemberian
alkohol sebagai pelarut lemak dan agen
dehidrasi protein. Pemberian safranin pada
sel gram negatif setelah didekolorisasi
pewarna safranin akan diserap sehingga sel
berwarna merah sedangkan pada sel gram
positif pewarna safranin tidak diserap
sehingga sel akan berwarna biru keunguan
(Asri,dkk. 2016)
Pada pewarnaan sederhana
ditemukan bakteri streptococcus,
streptobasil dan basil pada pewarnaan gram
ditemukan bakteri dengan rangkaian koloni
streptococcus, streptobasil dan monobasil
adalah bakteri dengan gram negatif ditandai
dengan sel berwarna merah.
Uji Katalase dan Uji Motilitas
Pada uji katalase diproleh hasil yang
positif (katalase + )yang menunjukkan
bahwa bakteri tersebut merupakan bakteri
aerob dan menghasilkan enzim katalase. Hal
tersebut diketahui dari timbulnya gelembung
gas O2(oksigen) setelah ditetesi H2O2.
Bakteri katalase positif (bakteri aerob) dapat
menghasilkan gelembung-gelembung gas O2
karena adanya pemecahana H2O2 oleh enzim
katalase yang dihasilkan oleh bakteri itu
sendiri. Komponen H2O2 tersebut
merupakan salah satu hasil respirasi aerobik
bakteri katalase positif yang mana hasilnya
respirasi tersebut justru dapat menghambat
pertumbuhan bakteri karena bersifat toksik
bagi bakteri itu sendiri. Oleh karena itu,
komponen H2O2 harus dipecah agar tidak
bersifat toksik lagi. Dengan enzim katalase,
H2O2 diurai dengan reaksi sebagai berikut :
2H2O enzim katalase 2H2O O2
Uji Resistensi
Uji resistensi bertujuan untuk
mengetahui resistensi bakteri terhadap suatu
antibiotik. Antibiotik yang digunakan yaitu
Tetrasanbe 500 mg. Konsentrasi antibiotik
Tetrasiklin yang digunakan berbeda yaitu
mulai dari konsentrasi 50 mg/ml, 25 mg/ml,
5 mg/ml dan 0 mg/ml. Uji resistensi yang
dilakukan ditemukan zona penghambat di
sekitar paper diskkecuali pada konsentrasi 0
mg/ml. Pada konsentrasi 50 mg/ml terbentuk
diameter zona penghambat/zona bening
sebasar 18 mm, pada konsentrasi 25 mg/ml
diameter zona hambat sebesar 17 mm, pada
konsentrasi 5 mg/ml diameter zona hambat
sebesar 15 mm dan pada konsentrasi 0
mg/ml zona hambat yang terbentuk adalah -
5 mm. karena bakteri yang digunakan sudah
resisten terhadap antibiotik Tetrasiklin500
mg. Daya kerja antibiotik Tetrasiklin500 mg
melalui penghambatan sintesis protein pada
bakteri. Hal tersebut menunjukkan bahwa
bakteri uji yaitu bakteri SS1 sensitif
terhadap antibiotik Tetrasiklin.Pada
dasarnya ada hubungan antara konsentrasi
antibiotik dengan tingkat resistensi bakteri.
Makin tinggi konsentrasi antibiotik, maka
kemampuan antibiotik untuk membunuh
bakteri makin besar dan sebaliknya. Namun
hal tersebut hanya berlaku untuk bakteri
yang sensitif terhadap antibiotik yang diuji
tersebut.
Pada bakteri yang sensitif
menunjukkan bahwa bakteri tersebut masih
memiliki sisi pengenalan target Tetrasiklin.
Adapun daya kerja Tetrasiklin ini berbeda
dengan antibiotik betalaktam yaitu
Tetrasiklin akan menghambat proses sintesis
protein yaitu dengan menghambat ikatan
subunit kecil 30S ribosom dengan tRNA
aminoasil pada sisi (A-asam amino) unit
besar 50S yang terletak dikompleks ribosom
mRNA. Penghambatan pergerakan tRNA
untuk berikatan menyebabkan gangguan
pembentukkan rantai polipeptida(Istriyati,
2006).
SIMPULAN
Rumuskansimpulanberdasarkanhasil
penelitianAnda.
Simpulanharussesuaidengantujuanpenelitian
danrumusanmasalah. Ditulisdengan TNR12,
jarakantarbaris 1,5
Hasil isolasi bakteri dari kuah bobor
bayam di foodcourt baseball UNESA di
dapatkan jumlah koloni makroorganisme
dengan metode SPC (Standart Plate Count)
yaitu 1,3 × 107 yaitu dari pengenceran 10-5.
Hasil pengamatan morfologi koloni pada
cawan petri di dapatkan 7 macam morfologi
koloni yang berbeda yaitu diberi inisial
koloni bakteri SS1, SS2, SS3, SS4, SS5, SS6
dan SS7. Dalam melakukan pemurnian
bakteri tersebut maka diambil 3 sampel
koloni yaitu koloni bakteri SS1, SS2 dan L6
dan dilakukan karakterisasi. Hasil
karakterisasi bakteri SS1 memiliki
morfologi bentuk sel basil, susunan sel
streptobasil, gram negatif, katalase positif
dan tidak motil. Bakteri SS2 memiliki
morfologi bentuk sel coccus, susunan sel
monococcus, gram negatif, katalase positif
dan motil. bakteri L6 memiliki morfologi
bentuk sel basil, susunan sel streptobasil,
gram negatif, katalase positif dan tidak
motil.Dari uji resistensi dapat diketahui
bahwa antibiotik Tetrasiklin mampu
menghambat pertumbuhan bakteri SS1 pada
cawan petri. Pada komposisi dengan
Lampran
antibiotik lebih pekat, zona hambat yang
dihasilkan lebih luas.
KEPUSTAKAAN
wetz, Melnick, dan Adelberg. 1996.
Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta:
EGC.
Sari, Mulia. 2015. Uji Bakteriologis dan
Resistensi Antibiotik Terhadap
Bakteri Escherichia coli dan Shigella
sp. Pada Makanan Gado-Gado di
Kantin UIN Syarif Hidayatullah
Jakarta. Laporan Penelitian
Amar, Abu, Setiardi Sukotjo, Lie Suan.
2002. Isolasi dan Identifikasi Bakteri
dalam Badeg Pace dari Ponorogo
Jawa Timur.Bogor : PAU
Bioteknologi ITB
Istriyati ,BejoBasuki.
2006.PengaruhPemberianTetrasiklin
PadaIndukMencit (Musmusculus L.)
TerhadapStruktur Skeleton Fetus,
BerkalaIlmiahBiologi, Volume 5,
Nomor 1, Juni 2006, halaman 45-
50.Diaksespadatanggal 21 Oktober
2016darihttp://i-
lib.ugm.ac.id/jurnal/detail.php?dataI
d=855
Asri, Mahanani Tri, dkk. 2016. Petunjuk
Praktikum Mikrobiologi Dasar.
Surabaya: Unesa Press
Kusnadi, Peristiwati, Ammi Syulasmi, Widi
Purwianingsih, Diana
Rochintaniawati. 2003.
Mikrobiologi. JICA: Universitas
Pendidikan Indonesia
SS1 Sederhana SS1 Negatif SS1 Gram

SS2 Sederhana SS2 Negatif SS2 Gram

L6 Sederhana L6 Negatif L6 Gram