Fulltext 2 PDF

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
SKRIPSI
N AN IEK N O V IJA N TI
PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI GAS

UNTUK ANALISIS KUANTITATIF NIPAGIN
DAN NIPASOL DALAM CAMPURAN
FA K U LTA S FARM AS1

U N TV E K S ITA S A IR L A N G G A
1987
1 6 JUN 1992
Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI
PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI GAS

UNTUK ANAUSIS KUANTITATIF
NIPAGIN DAN NIPASOL DALAM CAMPURAN
SKRIPSI
DIBUAT UNTUK MEMENUHI SYARAT MENCAPAI GELAR
SAHJANA FARMASI PADA FAKULTAS FARMASI
UHIVERSITAS AIRIANGGA
19 8 7
F F
H o U
oleh : f*
NANIEK NOVIJANTI
053110Z+09 JfVI I I B
rERPUSTAKAA*
” WZTBRS1TAS A1RLANOM
SURABAYA
1 6 JUM B92

KATA PENGANT/iR
Dengan rasa syukur kepada Tuhan Yang Kaha Esa, yang
telah melimpahkan berkatNya dan iremperkenankan ksmi untuk

dapat menyelesaikan tugas sk rip s i guna merr.enuhi syarat-
syarat dalair. mencapai g e l a r Sarjana Farmasi pada Fakultas
Farmasi Un iversitas Airlangga.
Pada kesempatan i n i perkenankan kami menyampaikan

rasa terima kssih yc-ng sebessr-besarnya kepada :
1. Bapak DR.r'iuhamad Zainuadin dan Ibu lira.Andjar Sar-
djimah selaku dosen peir.bimbing yang telah sudi rcelu-
angkan waktunya untuk niembimbing, meniberikan petun-
;juk dan pengarahan serta dorongan selarna p e n e lit ia n
berlangsung dan selama pen.yusunan s k r i p s i i n i .
?. Bapak Drs. Hcndro Sutanto, Wakil Direktur P . T . V i t a -
Viva Cosmetics, Surabaya atas i j i n yang dibrrikan
dalam menggunakan peralatan kromatografi gas untuk
keperluan p e n e litia n i n i .
3. Ibu D r a .L il ik Widajati dan Ibu Inggrain i yang te la h
banyak membsntu kami dalair- segi penggunean a l a t kro-
n a to g r a fi gas.
4. Seluruh karyawan jurusan Kin:ia Farmasi Fakultas Far-
masi Un iversitas Airlangga atas semua bantuan yang
telah diberikan aelame kami melakukan p e n e li t i a n un
tuk s k rip s i i n i .
Sebagai akhir k/--ta, kami ingjn nw.persembaKken skrip
s i i n i kepada mu Alttamater Fakultas F? rir-asi Universitas
ii
Airlprigga, dengan harapan s k rip s i i n i uapat t.e rrr.anfeat

bagi ilrnu penpetahu^n.
Semoga Tuhf-n Yang ^ h a n.tlimpahkan rahrr.at atas

segala krbaikan clan bantuan yanp telah diberikan.
Surabaya, Desember 1987

Penyusun
iii

daftar i s i
Ha la man
KATA PENGANTAR..............................................., , ................i i

DAFTAR TABEL............................................ ..................... ...v i i
DAFTAR GAMBAR.........................................., ...................... ...ix
DAFTAR LAMPIRAN..................................................................x i
BAB I . PENDAHULUAN..................................................... ...1
1. Permasalahan......... ............................, 1
2. Tujuan p e n e l i t i a n .............................. ........6
3. Hipotesis p e n e l i t i a n .................................7
BAB I I . TINJAUAN PUSTAKA........................................... ... 8
1. Tinjauan tentang nipagin ... 8
2* Tinjauan tentang n i p a s o l . . . , ...9
3* Tinjauan tentang kromatografi g a s . . . . 9
3.1. Tinjauan umum................. . ...9
3.2* A n alis is k u a l i t a t i f dan k u a n t i t a t i f
dengan kromatografi g a s , . ................... ...12
BAB I I I . A U T , BAHAN DAN METODE PERCOBAAN.................17
1. A l a t - a l a t . ..................................................17
2. Bahan-bahan.. . ..................... ................... ...17
3. Metode p e r c o b a a n . 18
3.1. Penetapan kadar dengan teknik stan
dar e k s t e r n a l ...18
3 .1 .1 . Pembuatan kurva k a l i b r a s i nipagin 18
3 .1 .2 . Pembuatan kurva k a l i b r a s i nipasol..19
3.1-3. Penetapan kadar nipagin dan nipa
s o l d a r i sampel murni..................... .. 20
3 . 1 . Penetapan kadar sampel dalam s e
diaan kosmetik a d s tr in g e n t .. 21
3.2. Penetapan kadar dengan teknik stan
dar i n t e r n a l e u g e n o l . . . . . .. 22
3.2,1 . Pembuatan kurva k a l i b r a s i nipagin
dengan standar i n t e r n a l eugenol.* 22
iv

Ha la man
3*2.2. Pembuatan kurva k a l i b r a s i nipasol
dengan standar i n t e r n a l eugenol., ^3
3 .2 .3 . Penetapan kadar nipagin dan nipa
s o l dari sampel murni dengan stan
dar in t e r n a l eugenol....................... 24
3*2*4. Penet.upan kadar sampel dalam s e
diaan koe metik adstringent dengan
standar i n t e r n a l eugenol.* . . . . ♦ , .
3.3...Penetapan kadar dengan teknik stan
dar i n t e r n a l - napthol................... 2?
3*4. Penetapan kadar dengan teknik stan
dar i n t e r n a l b u t i l paraben..........
4* Metode analis a h a s i l percobaan........
4*1* Ketepatan dan k e t e l i t i a n ............... 29
4*2. Perbandingan metode.........................., 30
BAB IV.HASIL PERCOBAAN............................................. 32
1* Penetapan kadar dengan teknik stan
dar e k s t e r n a l..................... ..................... 32
1 * 1 . Kurva k a l i b r a s i n i p a g i n , . . . . . , . . , . , 3**
1*2. Kurva k a l i b r a s i n i p a s o l . . * . . 3 .'1
1,3* Penetapan kadar nipagin dan nipasol
dar i sampel murni............................... 34
1,4* Penetapan kadar sampel dalam s e d ia
an kosmetik a d s t r in g e n t . ................... 34
2- Penetapan kadar den^n teknik stan
dar i n t e r n a l ^ - napthol....................... 36
2,1* Kurva k a l i b r a s i nipagin dengan stan
dar i n t e r n a l ^ - napthol................... 3&
2,2* Kurva k a l i b r a s i nipas ol dentin stan
dar i n t e r n a l napthol. , . * . . . * * * * 39
2.3* Penetapan kadar nipagin dan nipasol
dar i sampel murni dengan standar
i n t e r n a l (&- napthol...........................
^ , 4 , Penetapan kadar sampel dalam s e d ia
an kosmetik adstringent dengan

Ha la man
standar i n t e r n a l napthol............. 42
3* Penetapan kadar dengan teknik stan
dar i n t e r n a l eugenol............... . ........... 44
3-1. Kurva k a l i b r a s i nipagin dengan
standar in t e r n a l eugenol........ 44
3.2. Kurva k a l i b r a s i nipasol dengan
standar i n t e r n a l e u g e n o l , , . . . ........
3.3* Penetapan kadar nipagin dan nipa
s o l d a r i sampel murni dengan stan
dar in t e r n a l eugenol..................... . 46
3*4, Penetapan kadar sampel dalam s e -
diaan kosmetik adstringent dengan
standar i n t e r n a l e u g e n o l . . ............. 48
4. Penetapan kadar dengan teknik stan
dar i n t e r n a l b u t i l paraben ,.............. 50
4.1. Kurva k a l i b r a s i nipagin dengan
standar i n t e r n a l b u t i l parab en.... 50
2. Kurva k a l i b r a s i nipasol dengan
standar in t e r n a l b u t i l paraben,... 51
4.3. Penetapan kadar nipagin dan n i
pasol d a r i sampel murni dengan
standar i n t e r n a l b u t i l paraben.... 52
4*4. Penetapan kadar sampel dalam se-
diaan kosmetik ad stringent dengan
standar i n t e r n a l b u t i l parab en.... 54
5. Hasil analisa data................................ 56
5.1. Ketepatan dan k e t e l i t i a n . .......... 56
5.2. Perbandingan metode........................... 59
BAB V.PEMBAHASAN...................... 63
BAB VI.KESIM PU LAN DAW SARAN 66
RINGKASAN........................ 68
BAB V II.D A F T A R PUSTAKA............ 71

LAMPIRAN-LAMPIRAN... 90

DAFTAR TABEL
Tabel Hala man
I . Konsentrasi dan luas puncak kromatogram
nipag in........, ................................................ 32
IX. Konsentrasi dan luas puncak kromatogram
n i p a s o l . ................................................. . . •. 33
I I I . Hasil penetapan kadar nipagin dan nipa
s o l dalam sampel murni dengan metode
standar e k s t e r n a l ........................................ 35
IV. Hasil penetapan kadar-nipagin dan nipa
s o l dalam sediaan kosmetik dengan me
tode standar e k s t e r n a l . . . ......................... 37
V, Konsentrasi, luas puncak kromatogram dan
perbandingan luas puncak kromatogram da
r i nipagin dan f - napthol....................... 3t
VI. Konsentrasi, luas puncak kromatogram dan
perbandingan luas puncak kronatogram da
r i nipasol dan £ - napthol......................... 3*
V I I . Hasil penetapan kadar nipagin dan nipa
standar i n t e r n a l napthol............ 41
V I I I . Hasil penetapan kadar nipagin dan nipa
s o l dalam sediaan kosmetik dengan meto
de standar i n t e r n a l napthol........... .. 43
IX. Konsentrasi, luas puncak kromatogram dan
r i nipagin dan eugenol................. ............ 44
X. Konsentrasi, luas puncak kronatogram dan
r i nipasol dan eugenol................. . 45
XI. Hasil penetapan kadar nipagin dan nipa
standar i n t e r n a l e u g e n o l . . . . . . ............... 47
v ii

Ha la man
XXI. H a s il penetapan kadar nipagin dan nipa
s o l dalam sediaan kosmetik dengan metode
standar i n t e r n a l e u g e n o l * . , . . . , , .............. ^9
X I I I . Konsentrasi, luas puncak kromatogram dan
r i nipagin dan b u t i l paraben,............* cet 50
XIV. Konsentrasi, luas puncak kromatogram dan
r i nipasol dan b u t i l p a r a b e n , . , , .............. 51
XV, Hasil penetapan kadar nipagin dan nipa
standar i n t e r n a l b u t i l p a r a b e n , * . * , ........ fvj
XVI, Hasil penetapan kadar nipagin dan nipa
s o l dalam sediaan kosmetik dengan metode
standar i n t e r n a l b u t i l para ben, * , , , , , , , « 53
XVII, Ketepatan dan k e t e l i t i a n h a s i l penetap
an kadar nipagin dan nipasol dalam sam-
pel m u r n i , , . , , . , , .......................................... 57
X V I I I . Ketepatan dan k e t e l i t i a n h a s i l penetap
an kadar nipagin dan nipasol dalam s e
diaan kosmetik a d s t r i n g e n t * . . . . . . . . ........
XIX. Tabel Anava b a s i l penetapan kadar nipa
gin dalam sampel murni............... , ' . . * » • * * y :1
XX, Tabel Anava h a s i l penetapan kadar nipa
s o l dalam sampel murni,* . . . . • * , ............... $0
XXI. Tabel Anava h a s i l penetapan kadar nipa
gin dalam sediaan kosmetik ad stringent.* 61
XXIX. Tabel Anava h a s i l penetapan kader nipa
s o l dalam sediaan kosmetik ad str ingen t,* 6 r:
v iii
D
AFT
AKG
AMB
AR
Gambar Ealaman
1. Kromatogram nipagin dengan standar eks-

te r n a l dengan berbagai konsentrasi............... '?k
2. Kromatograra nipasol dengan standar eke-
t e r n a l dengan berbagai konsentrasi. . ............
3. Kromatogram nipagin dan nipasol dalam
sampel dengan raetode standar e k s t e r n a l . • • . . 76
4 . Kromatogram nipagin dan nipasol dalam
sediaan kosmetik dengan raetode standar
e k s t e r n a l . ........................................ . ................... 77
5* Kromatogram nipagin dengan standar i n
te r n a l £ - napthol dengan berbagai
konsentrasi................................................. .. 73
6. Kromatogram nipas ol dengan standar i n
te r n a l ^ - napthol dengan berbagai
k o n s e n t r a s i . 79
7, Kromatogram nipagin dan nipasol dalam
sampel murni dengan metode standar i n
te r n a l ^ - n a p t h o l , , ........................................ *0
sediaan kosmetik dengan metode standar
i n t e r n a l £ - napthol.......................................... ;'-*-
9, Kromatogram nipagin dengan standar i n
te r n a l eugenol dengan berbagai konsen
t r a s i ......................................................................
10. Kromatogram nipasol dengan standar i n
t e r n a l eugenol dengan berbagai konsen
t r a s i ...................................................................... ^
t e r n a l eugenol..................... ............* ................
ix

Gambar Halaman

sediaan kosmetik d e n ^ n metode standar
i n t e r n a l eugenol............................ 85
13# Kromatogram nipagin dengan standar i n
t e r n a l b u t i l paraben den^n berbagai
k o n s e n t r a s i . . . ............................................. be
lif. Kromatogram nipas ol dengan standar i n
t e r n a l b u t i l paraben dengan berbagai
konsentrasi.......................... ................ 87
15* Kromatogram nipagin dan nipasol dalam
t e r n a l b u t i l paraben*...................................88
16* Kromatogram nipagin dan nipasol dalam
i n t e r n a l b u t i l paraben.................................. 89

DAFTAR LAMPIHAH
Lampiran Halaman
I- U ji k o r e l a s i ( r ) antara konsentrasi
dan luas puncak kromatogram nipagin
dengan metode standar e k sternp l.......... 90
I I . U ji kore la si ( r ) antara konsentrasi
dan luas puncak kromatogram nipasol
dengan metode standar e k s t e r n a l . . , . , . 92
I I I . U j i k o r e l a s i ( r ) antara konsentrasi
dengan metode standar i n t e r n a l ^ -
napthol............... ...................................... 94
IV. U j i k o r e l a s i ( r ) antara konsentrasi
dengan metode standar i n t e r n a l ^ -
napthol....................................................... 96
V, U j i k o r e la s i ( r ) antara konsentrasi
dengan metode standar in t e r n a l euge
n o l ....................... ...................................... 98
VI, U j i k o r e l a s i ( r ) antara konsentrasi
dengan metode standar i n t e r n a l euge
n o l................................ * ............................ 100
V I I . U j i k o r e l a s i ( r ) antara konsentrasi
dengan metode standar in t e r n a l t>u-
fcil paraben........................................... 102
V I I I . U ji k o r e la s i ( r ) antara konsentrasi
dengan metode standar i n t e r n a l bu
t i l paraben............................................... 1^4
xi

Lampiran Ha la man
IX. U j i t dari kadar r a ta-rata nipagin yang
diperoleh kembali dengan kadar yang d i
anggap benar dalam sampel murni dengan
metode standar e k stern a l........* ........... . 106
X. U ji t dari kadeir r a ta - r a ta nipagin yang
metode standar in t e r n a l ^ - n a p t h o l . , . . 10?
XI. U j i t dar i kadar r a ta -r a ta nipagin yang
metode standar i n t e r n a l eugenol.............. 106
X I I . U j i t dar i kadar r a ta - r a ta nipagin yang
diperoleh kembali dengan kadar yang d i -
metode standar in t e r n a l b u t i l paraben*. 109
X I I I . U j i t dar i kadar r a ta-rata nipas ol yang
metode standar e k s t e r n a l . . ....................... 110
XIV. U j i t dari kadar rata-r ata nipasol yang
diperoleh kembali dengan kadar yang d i - .
metode standar in t e r n a l napthol.... Ill
XV. U j i t dari kadar r a ta - r a ta nipasol yang
anggap benar dajam sampel murni dengan
metode standar i n t e r n a l e u g e n o l , • 112
XVI. U j i t dari kadar rata-r ata nipasol yang
metode standar in t er n a l b u t i l paraben.. 113
XVII. U j i t dari kadar rata-r ata nipagin yang
anggap benar dalam sediaan kosmetik
x ii
Lampiran Hala man

adstringent dengan metode standar
e k s t e r n a l.......................................................
XVIII. U j i t dari kadar rata -rata nipagin yang
adstringent dengan metode standar i n
te r n a l p - napthol.................................. 115
XIX, Uj i t d ari kadar r a ta - r a ta nipagin yang
te r n a l eugenol........................................... 116
XX. Uj i t dar i kadar rata -rata nipagin yang
te r n a l b u t i l paraben.................................. 117
XXI. U j i t d a r i kadar rata -rata nipasol yang
adstringent dengan metode standar eks
te r n a l. 116
XXII. U j i t d a r i kadar r a ta-rata nipasol yang
diperoleh kembeli dengan kadar yang d i
ad stringent dengan metode standar i n
ternal napthol..................... ................ 119
XXIII. U j i t dari kadar r a ta - r a ta nipasol yang
te r n a l eugenol............................................. 120
XXIV. U j i t d ari kadar rata-rata nipasol yang
xi.ii
Lampiran Halaman
t e r n a l b u t i l paraben................................ 121
XXV. U j i F dari kadar nipagin yang d ip er
oleh kembali dalam sampel murni............ 122
XXVI. U j i F dari kadar nipasol yang d ip er
oleh kembali dalam sampel murni............ 124
XXVII * U j i F dari kadar nipagin yang d ip e r
oleh kembali dalam sediaan kosmetik
a d s t r i n g e n t , 126
XXVIII, U j i F d a r i kadar nipasol yang d ip er
oleh kembali dalam sediaan kosmetik
ad s trin g en t............... ................................. 128
XXIX. Tabel k o e f i s i e n k o r e la s i ( r ) ................. 130
XXX. Tabel untuk t ............................................. 131
XXXI. Tabel untuk F.............................................. 132
x iv
Mil***
M1 LM \
, W l TBRSiTAS A l W J ____
I | \ J R A ® i i 5 -----
bab. i
PENDAHULUAN
1*1# Permasalahan
Dewasa i n i , pengawet memegang peranan penting

dalam berbagai proses produksi untuk menghasilkan
produk-produk dengan kualita s yang baik, baik pro
duksi makanan-minuman, kosmetik, maupun preparat-

preparat farmasi, s e p e r t i larutan i n j e k s i , obat-
obat t e t e s , obat minum dan l a i n sebagainya.
Pengawet yang digunakan harus raemenuhi per-
syaratan terte ntu khususnya dalam hal kadarnya. Se
bagai contoh dalam produk makanan-minuman kadar
yang diperbolehkan maksimum 0,1 %, untuk sediaan
kosmetik kadar maksimum 0,1 % 9 dan untuk preparat-
preparat farmasi kadar maksimum 0,2 %♦ ( 1, 2,3» k )

Jika melebihi batas-batas tersebut kemungkinan akan
membahayakan tubuh manusia. Sebaliknya jik a penga
wet tersebut digunakan dengan kadar yang kurang dari
yang seharusnya, maka akan menyebabkan pengawet t e r
sebut tidak e f e k t i f l a g i terhadap suatu sediaan,
misalnya sediaan akan lebih raudah ditumbuhi oleh
mikro organisme. Pada umumnya sediaan yang te la h d i
tumbuhi oleh mikro organisme, maka akan menyebabkan
te rja din ya cemaran pada 6ediaan tersebut, sehingga

sediaan akan b e r s i f a t toksis dan berbahaya terhadap
kesehatan manusia. Dengan demikian masalah kadar
pengawet it u adalah sesuatu hal yang amat penting.
Diantara berbagai macam pengawet, yang umum

digunakan adalah nipagin, nipasol atau campuran
nipagin dengan nipasol, yang raerupakan e s t e r - e s t e r
dar i asam benzoat yang umumnya dikenal sebagai pa
raben. ( 1, 2 )
Metode penetapan kadar nipagin dan nipasol da

lam campuran yang pernah dilakukan adalah dengan
metode spek tr ofoto m etri. Dengan metode i n i terdapat
beberapa kelemahan antara la i n : metode s p e k t r o f o t o
metri tidak dapat digunakan untuk penetapan kadar
pengawet dengan kadar yang sangat k e c i l , y aitu lebih
k e c i l dari kadar 0,1 Disamping i t u sediaan ha-
rus d iekstr ak si t e r l e b i h dulu atau dipisahkan dari
bahan-bahan lainnya dengan menggunakan kromatografi
adsorbsi, dan selanjutnya baru ditetapkan kadarnya
dengan spek tr ofoto m etri. Pada proses ekstraksi i n i
tentu masih ada yang t e r t i n g g a l , maka hasilnya tidak
raencerminkan kadar yang sebenarnya. ( 5 »6 )
Oleh karena i t u , p e r l u dikembangkan metode l a i n
yang tidak memerlukan proses pemisahan dam mempunyai
kepekaan yang lebih baik, Dalam hal i n i te la h dila-*
porkan a n a l i s i s k u a l i t a t i f dan k u a n t i t a t i f dar i n i
pagin dan nipasol dalam campuran dengan metode High
Performance Liquid Chromatography ( RPLC ) . ( 7 )

Metode i n i memerlukan pelaru t-pelaru t yang harganya

r e l a t i f mahal.
Metode kromatografi la i n untuk penetapan ka

dar nipagin dan nipasol dalam campuran adalah raeto-
de kromatografi gas. Keuntungan d a r i pada kromato
g r a f i gas i n i adalah : pelaksanaannya cepat dan aku-
r a t , mempunyai kepekaan dengan rentang konsentrasi
yang cukup besar, dapat digunakan untuk penetapan
kadar z a t - z a t tertentu dengan kadar yang sangat ke
c i l , dan tidak memerlukan eluen yang mahal. ( 5 , 6,
7,6,9 )
Didalam l i t e r a t u r telah dilaporkan bahwa untuk
penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam campuran
secara kromatografi gas, dilakukan melalui proses
m e t i la s i atau proses s i l i l a s i t e r l e b i h dahulu untuk
mendapatkan bentuk e s te r metilnya atau bentuk t r i
methyl s i l y l ether nya yang le b ih mudah menguap.
( 5 , 6, 7» 8j 9 )• Tetapi berdasarkan kenyataan bahwa

nipagin dan nipasol sudah dalam bentuk e s te r sehing-
g a t i t i k didihnya cukup rendah ( 7 ) , maka keniung-
kinan nipagin dan nipasol dalam campuran dapat d i -
a n a l i s i s secara k u a l i t a t i f dan k u a n t i t a t i f dengan
kromatografi gas tanpa harus d i m e t i l a s i atau d i s i -
l i l a s i t e r l e b i h dulu,
An alisis k u a n t i t a t i f dengan kromatografi gas
dapat dilakukan dengan 2 metode , yaitu dengan meng-
gunakan metode standar eksternal dan metode standar

internal.
Metode standar eksternal berdasarkan prinsip

sebagai berikut : mula-mula dibuat kurva k a l i b r a s i
d ar i z a t standar. Kurva k a l i b r a s i tersebut menyatakan
hubungan antara luas puncak kromatogram terhadap kon-
s e n tr a s i z a t standar. Untuk penetapan kadar sampel
dapat ditentukan dengan menentukan luas puncak kroma

togram sampel kemudian dilakukan s u b s titu s i kedalam
persamaan r e g r e s i kurva k a l i b r a s i atau dapat pula d i
tentukan dengan car^ perbandingan lu«*s puncak kroma

togram sampel terhadap luas puncak kromatogram stan
dar.
Pada metode standar eksternal terdapat kelemah-

an antara la i n karena adanya proses ekstraksi dan va-
r i a s i volume pengin jeksian. Didalam l i t e r a t u r disebut-
kan balwa kesalahan karena v a r i a s i volume pengin j e k s i
an dapat mencapai 5 ~ 10 # C 10 ) . Untuk m e n ^ ta s i

kelemahan tersebut dikembangkan metode standar i n t e r
nal. Metode standar i n t e r n a l pada prinsipnya adalah
sebagai berikut : pada sampel maupun za t standar di~
tambahkan suatu standar i n t e r n a l yang telah diketahui
konsentrasinya, Kurva k a l i b r a s i yang dibuat d i s i n i
adalah hubungan antara perbandingan luas puncak stan
dar terhadap luas puncak standar in t e r n a l terhadap

konsentrasi z a t standar. Untuk penetapan kadar sampel
dapat ditentukan d en^n menentukan luas puncak kro-
matogram sampel, kemudian dilakukan s u b s titu s i keda-

lara persamaan r e g r e s i kurva k a l i b r a s i atau dapat pula

ditentukan dengan cara perbandingan luas puncak kro
matogram sampel terhadap luas puncak kromatogram stan
dar i n t e r n a l terhadap perbandingan luas puncak kro
matogram z a t standar terhadap luas puncak kromatogram

standar internal*
Telah dilaporkan dalam l i t e r a t u r , standar i n t e r

nal yang te la h digunakan untuk penetapan kadar nipagin
dan nipasol dalam campuran adalah : £> - napthol, ben
z y l benzoat dan phenanthrene. ( 5 ,6,7 ,8 ,9 ) . Pada da-

sarnya standar i n t e r n a l i t u adalah z a t l a in yang mem-
punyai s i f a t f is ik a -k im ia yang mirip dengan z a t yang
akan d i a n a l i s i s , sehingga b i la dilakukan ekstraksi da
pat te r e k s tr a k s i dengan baik dan detektor masih merabe-
rikan respon yang sebanding dengan z a t yang d ia n a lisa ,
Dalam hal i n i kemungkinan senyawa homolog paraben, mi-
salnya b u t i l paraben atau senyawa f e n o l i s l a i n , misal-

nya eugenol dapat digunakan sebagai standar in t e r n a l .
Berdasarkan uraian dia ta s, maka dapat dirumus-
kan permasalahan : seberapa besar ketepatan dan kete-
l i t i a n penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam cam-
puran dengan rnetode kromatografi gas melalui teknik
standar eksternal dan standar in t e r n a l tanpa proses
derivatisasi.
Dalam p e n e litia n i n i k r i t e r i a h a s i l penetapan
kadar adalah ketepatan dan k e t e l i t i a n . Sebagai ukuran
dari ketepatan adalah % kadar yang diperoleh kembali

ADLN Perpustakaan Universitas
I Airlangga
C % Recovery ) . Hasil penetapan kadar disebut
mempunyai ketepatan yang baik, jika tidak ada

perbedaan yang bermakna ( pada harga oC t e r t e n -
tu ) antara harga yang dianggap benar dengan
kadar yang diperoleh kembali. Adapun sebagai

ukuran dar i k e t e l i t i a n digunakan k o e f i s i e n va
r i a s i , Metode penetapan kadar dianggap mempunyai
k e t e l i t i a n yang baik jika KV leb ih k e c i l dari
3 %. ( 10 )
1.2. Tu.iuan -penelitian
Untuk menjawab permasalahan tersebut perlu

dilakukan p e n e litia n dengan tujuan untuk :
1. Menentukan ketepatan dan k e t e l i t i a n h a s i l pe

netapan kadar nipagin dan nipasol dalam cam-
puran dengan metode kromatografi gas melalui
teknik standar eksternal dan standar i n t e r
nal.
2. Membandingkan ketepatan dan k e t e l i t i a n h a s i l
penetapan kadar antara metode standar e k ster
nal dan standar in t e r n a l ^ - napthol, euge-
nol dan b u t i l paraben,
Kara pan d a r i p e n e litia n i n i adalah : de

ngan diperolehnya ketepatan dan k e t e l i t i a n yang

baik, maka metode kromatografi gas dapat digu
nakan untuk a n a l i s i s k u a n t i t a t i f senyawa-senyawa

yang lain .
1.3. Hi-potesis r e n e l i t i a n
Dari uraian d iatas , diduga bahwa a n a l i s is

nipagin dan nipasol dalam campuran dengan meto
de kromatografi gas akan mempunyai ketepatan
dan k e t e l i t i a n yang baik,
Sebagai v a r i a b e l bebas dalam p e n e litia n i n i ada

lah metode kromatografi gas dengin beberapa ma-
cam standar i n t e r n a l , sedangkan v a r ia b e l t e r -
gantungnya adalah ketepatan dan k e t e l i t i a n h a s i l
a n a l i s i s . Adapun ketepatan dan k e t e l i t i a n adalah
sebagai berikut : ketepatan metode dikatakan ba

i k jika tidak ada perbedaan yang bermakna antara
harga yang dianggap benar dengan kadar yang d i
peroleh kembali, sedangkan k e t e l i t i a n metode d i
katakan t e l i t i jika KV ( k o e f i s i e n v a r i a s i ) l e
bih k e c i l dar i 3

BAB I I
T1NJAUAN HJSTAKA
1- jeptanp; Kipaflin ( I,2,3,^,ll,-12,i3,ll|.,15>l6,l? -)
Nipngin adalah nama umuni dari irietil paraben atau

metil p - hidroksi benzoat.
Rumus molekulnya adalah : CgKgC^ dan rumus bangun-

nya adalah sebagai berikut :
OH
COOCH*
Nipagin berupa serbuk hsblur halus, putih, hampir tidak

berbau, tldak mempunyai rssa, kemudian agak membakar
d i i k u t i rasa t e b a l , Nipagin mempunyai t i t i k lebur 131 0
dan t i t i k ciidih 270 0 - 280 . Kelarutan nipagin dalam
a i r adalah ( 1:500 ), dalam a i r mendidih ( 1:20 ), da
lam etanol ( 95# ) P ( 1:3*5 )» dalam aseton P ( 1:3 ),
dalam g l i p c r o l P panas ( 1:60 ), mudah le.rut dalam
e t e r P, dan dalam lrrutan a l k a l i hidroksida. Kegunaan
nipagin yang paling urnum aaalah sebagai zat pengawet
untuk mfkanan-minuman, kosmetik dan preparat-preparat
farmasi. Kadar penjf.kaien nipagin sebagai pengawet ada
lah : untuk rri? kanan-minurii&n adalah 0,05 - 0,1 %, untuk
kosmetik. adalah 0 ,0 5 - 0,1 % dan untuk preparat farmasi
adalah 0,01 - 0,2 %.

2» S.i” ja.Uan,..t^t.apg NjmsoJ. ( 1 ,2,3 ,4 ,1 1 ,1 2 ,1 3 ,1 ^,1 5 ,1 6 ,1 7 )
Nipasol adalah nama umum dari p r o p i l paraben

atau p r o p i l p - hidroksi benzoat.
Rumus molekulnya adalah ; dan rumus ba-

ngunnya adalah sebagai berikut :
OH
cooc^h7
Nipasol berupa serbuk hablur putih, tidak berbau dan

tidak berasa. Nipasol mempunyai t i t i k lebur 96 - 97°
Kelarutan nipasol dalam a i r adalah ( 1:2000 ) , dalam
eta n ol ( 95& ) P ( 1:3,5 ) , dalam aseton P ( 1;3 ) ,

dalam g l i s e r o l P ( 1:1^0 ) , mudah larut dalam larutan
a l k a l i hidroksida, dan dalam e t e r . Kegunaan nipasol
yang paling umum adalah sebagai z a t pengawet untuk ma-
kanan-minuman, kogmetik dan preparat-preparat farmasi.
Kadar pemakaian nipasol sebagai pengawet adalah : un
tuk makanan-minuman adalah 0 ,0 5 - 0,1 %, untuk kosme
t i k adalah 0 ,0 5 - 0,1 % dan untuk preparat farmasi
adalah 0,01 - 0,2 %.
3, Tinjauan tentang kromatografi gas ( 18,19,20,21,22 )
3.1. Tin.iauan umum
Kromatografi gas adalah salah satu teknik kro-

10
matografi dimana yang bertindak sebagai fase gerak
adalah gas dan sebagai fase diara dapat berupa fase pa-
dat maupun fase c a i r , Jika dilakukan kromatografi gas
terhadap campuran 2 a t an lebih za t ( s olu t ) , maka
z a t - z a t tersebut akan d id istrib usik an pada kedua fase
tersebut, yaitu fase gerak dan fase diam, dimana d i s -

tribusinya tergantung pada kelarutan z a t - z a t tersebut
pada fase gerak dan fase diamnya, Sebagai ukuran be-
sarnya d i s t r i b u s i d a r i masing-masing s o lu t dalam fase
gerak dan fase diam adalah harga k o e f i s i e n d i s t r i b u s i
( K ) , dimana :
C
rr S
Cg ; konsentrasi s o lu t dalam fase diam

( sta sion er )
Cm : konsentrasi s o lu t dalam fase gerak
( mobil )
Dari persamaan d i a t a s , dapat d i l i h a t bahwa b i l a kon

s e n tr a s i s o lu t dalam fase diam r e l a t i f besar, maka
harga K nya juga akan lebih besar, dan sebaliknya.
Pada umuranya harga K dari berbagai z a t ( solut ) da
lam suatu sistem fase gerak dan fase diam tertentu
adalah berbeda satu sama l a i n , oleh karena harga K

merupakan salah satu k a r a k t e r is t i k dari suatu zat
( solu t ) . Harga K ternyata mempunyai hubungan dengan

11
waktu r e t e n s i ( t r ) . Waktu r e t e n s i ( t ) adalah wak-
tu yang dibutuhkan oleh solu t untuk menempuh jarak s e -

panjang kolom, dimana :
*r = ^ ( 1 + K Vs/Vm >
dengan keterangan :
t ; waktu r e t e n s i solut
t : waktu r e t e n s i fase gerak
K : koefisien distribusi
V : volume fase diam
: volurae fase gerak
Dari persamaan d ia ta s , t e r l i h a t bahwa t r tergantung

pada besarnya t ffl , K dan V6/Vm. Harga t m dan Vg/Vm
adalah konstan untuk suatu sistem kromatografi gas
te r te n tu , karena : panjang kolom, kecepatan fase ge
rak, volume fase gerak dan fase diam adalah terte ntu .
Dengan demikian t hanya dipengaruhi oleh harga K.
Dari persamaan d iatas , je la s la h b i l a beberapa
s o l u t yang mempunyai harga K yang berbeda berada da
lam campuran dan dilakukan kromatografi gas dengan
fase gerak dan fase diam tertentu akan mempunyai har-
6a t yang berbeda pula. Makin besar harga K makin

besar t nya. Dengan demikian harga t r adalah karak-
t e r i s t i k suatu z a t t e t a p i tidak s p e s i f i k untuk z a t
tersebut.

12
TJntuk raengetahui dera jat keterpisahan campuran

za t dengan metode kromatografi gas dapat ditentukan
dengan derajat keterpisahan atau dinyatakan dengan
harga r e s o l u s i ( R ) , dimana :
tr : waktu ret e n s i kromatogram 1
t : waktu r e t e n s i kromatogram 2
2
: lebar puncak kromatogram 1
wP : lebar puncak kromatogram 2
2.2. A n alis is k u a l i t a t i f dan k u a n t i t a t i f dengan_kroma-
t_ogra.fi _gas

13
Sepert i dikemukakan d ia ta s , bahwa kromatografi

gas dapat digunakan untuk a n a l i s i s k u a l i t a t i f dan ku-
a n t i t a t i f . Sebagai besaran yang dapat dipakai untuk

k r i t e r i a dalam a n a l i s i s k u a l i t a t i f ada beberapa macam,
antara l a i n : waktu r e t e n s i ( t ) dan waktu r e t e n s i
rela tif ( X ) , Untuk a n a l i s i s secara k u a l i t a t i f de
ngan memakai besaran t , maka dilakukan dengan cara
sebagai berikut : larutan standar diinje ksikan kemu-
dian ditentukan waktu retensinya ( t „ . ) , Sete-
r su
lah i t u diin je ksikan larutan sampel dan ditentukan
waktu retensinya ( t ) . Apabila t _ ^ . sama dengan
r 8p r
t r Sp , maka kemungkinan sampel tersebut sama dengan
z a t standar. D is i n i ada kelemahannya, yaitu t ka-
dang-kadang dipengaruhi oleh konsentrasi z a t yang d i
injeksikan dan waktu pengin jeksian. Sshingga walaupun
zatnya sama, t e t a p i t r nya dapat tidak sama. Untuk me-
ngatasi kelemahan i t u maka digunakan besaran waktu
retensi r e l a t i f ( ).
Untuk pengukuran dapat ditentukan dengan cara
sebagai berikut : injeksikan larutan standar yang t e -
lah ditambah dengan standar i n t e r n a l , kemudian tentu-
kan waktu r e t e n s i d a r i larutan etandar ( t^ ) dan
waktu r e t e n s i standar i n t e r n a l ( t r ) . Setelah i t u
dihitung waktu r e t e n s i r e l a t i f standar ( X ),
dimana :
r ist

Denman cara yang sama dilakukan pula terhadap sampel,
kemudian dihitung waktu ret e n s i r e l a t i f sampel (<Csp )
*Csp = tr gP
^r i s t
Apabila h a s i lbp sama dengan ©CSt. , nwka kemunfs-

kinan sampel tersebut eama dengan standar.
Sedangkan untuk a n a l i s i s k u a n t i t a t i f dapat d i -
gunakan beearan luas puncak atau t i n g g i puncak kroma-
togram. Luas puncak dapat ditentukan dengan cara :
ditirabang, dengan i n t e g r a t o r atau dentin dihitung.
Untuk a n a l i s i s k u a n t i t a t i f d ari z a t - z a t dalam campur-
an dapat ditetapkan dengan metode standar eksternal
dan standar i n t e r n a l . Adapun cara untuk perhitungan
dengan metode standar eksternal adalah sebagai b e r i -
kut :
dimana :
C : konsentrasi sampel
X
C : konsentrasi standar
s
A : luas puncak kromatogram sampel
A
A : luas puncak kromatogram standar
s
Persamaan diatas dapat berlaku apabila ada hubungan

l i n i e r antara konsentrasi standar dengan luas puncak
standar* Kelemahan dar i metode standar ekst ernal i n i
adalah adanya fak tor v a r i a s i volume pengin jekeian dan
proses ekstraksi sampel yang tidak serapurn;i, sehingga

untuk mengurangi kesalahan tersebut digunakan raetode
standar i n t e r n a l , dimana pada metode i n i ditambahkan
suatu z a t l a i n pada sampel yang konsentrasinya telah
diketahui, sehingga pada penetapan kadar dengan meto
de standar i n t e r n a l za t standar i n t e r n a l maupun sampel
sama-sama mengslami proses ekstraksi , dengan demiki
an sampel dan za t standar i n t e r n a l pada proses eks
t r a k s i tersebut akan t e r j a d i pengurangan kadar,
Selain proses ekstraksi yang berpengaruh pada
penetapan kadar dapat juga disebabkan karena pengin-
jeksian s e t i a p saat tidak s e la lu sama ( b e r v a r i a s i )
Dengan standar i n t e r n a l maka pengurangan kadar dapat
d i a t a s i . Sebagai contoh , 6uatu sampel diinjeksikan
sebanyak 5 jul» untuk pengin Jeksian selanjutnya tidak
s e la lu tepat 5/ul, dengan penambahan standar i n t e r n a l
yang konsentrasinya telah diketahui maka sampel dan
standar i n t e r n a l akan mengalami penginjeksian dengan
volume yang b e rv a r ia s i pula, Sedangkan cara untuk per-
hitungan dengan standar in t e r n a l adalah :

16
dimana :
Cx : konsentrasi sampel
Cs t : konsentrasi standar
\ / Ai s t ^ perbandingan luas puncak kromato
gram sampel terhadap luas puncak
kromatogram stan dar i n t e r n a l
A6tÂi s t : Perbandingan luas puncak kromato
gram standar terhadap luas puncak
kromatogram standar i n t e r n a l
Persamaan diatas dapat berlaku apabila ada hubungan
l i n i e r antara perbandingan luas puncak kromatogram

standar dan standar i n t e r n a l terhadap konsentrasi
standar, Dari persamaan-persamaan diatas dapat digam-
barkan kurva k a l i b r a s i sebagai berikut :
Metode standar eksternal Metode standar in t e r n a l

1?
BAB I I I
ALAT, bAHAK DAN N.ETOIfl*: PVRCOBAAN
1. A l a t - a i a t
- Kromatografi Gas model Varian 3700, dilengkapi de -

ngan ;
- Kolom : 0V-101; psnjang : 3 m; diameter:

0,3 cm.
- Letektor : Flame I o n iz a tio n Detector (FIi>)

- Gas pembawa :
- Alat suntik : Hamilton Syringe F . i c r o l i t e r 701

dengan volume 10 u l .
- Perekam data : Hewlett Packard
model 3390 A
2. Bahan-bahan
Semua bahan yang digunakan adalah pro analisa, ke-

cuali disebutkan l a in
- Nipagin
- Nip?.sol
- Eugenol
- - na phthol
- Butil Paraben

16
- Etanol
- Eter
3«. Metode Percobaan
3.1. Penetapan kadar dengan teknik standar eksternal
3.1.1. Pembuatan kurva k a l i b r a s i nipagin
Ditimbang saksama 100 mg nipagin, dilarutkan

dalam etanol sampai diperoleh volume tep^t 100,0
ml. Larutan i n i mempunyai kadar 1000 ppm. Dari l a
rutan i n i dibuat pengenceran sehingga diperoleh
kadar nip;;gin : 750 ppm, 500 ppm, 250 ppm dan 100
ppm. Dari masing-masing larutan i n i diinjeksikan
sebanyak 4 p i kedalam a l a t kromatografi gas, kemu-

dian diamati dan dihitung luas puncak kromatogram-
nya. Harga waktu r e t e n s i dan luas puncak kromato -

gram dapat dibaca dalam perekam data.
Kemudian dihitung k o e f i s i e n k o r e l a s i dan persamaan
r e g r e s i kurva k a l i b r a s i yang menyatakan hubungan
antara luas puncak kromatogram terhadap konsentra-
s i nipagin.
Penginjeksian dilakukan setelah a l a t kromato
g r a f i gas mencapai keadaan s t a b i l dengan kondisi
sebagai berikut :
- Suhu :
kolom : 200°C; i n j e k t o r : 210°C;

19
detektor : 230°C.
- Attenuator :
a l a t kromatografi gas : 10- ^

perekam data : 2
Untuk seterusnya dalam parcobaan i n i yang d i -

maksud dengan diin je ksikan kedalam a l a t kromatogra
f i gas adalah penginjeksian setelah a l a t mencapai
keadaan s t a b i l dengan kondisi sama dengan seperti
diatas.
3.1.2. Pembuatan kurva k a l i b r a s i nipasol
Ditimbang saksama 100 mg nip asol, dilarutkan

dalam etanol sampai diperoleh volume tepat 100,0 ml
Larutan i n i mempunyai kadar 1000 ppm. Dari larutan
i n i dibuat pengenceran sehingga diperoleh kadar n i
pasol : 750 ppm, 500 ppm, 250 ppm dan 100 ppm. Dari
masing-masing larutan i n i d iin jeksikan sebanyak 4
jxl kedalam a l a t kromatografi gas, kemudian diamati
dan dihitung luas puncak kromatogramnya. Harga wak

tu r e t e n s i dan luas puncak kromatogram dapat dibaca
dalam perekam data.

Kemudian dihitung k o e f i s i e n k o r e la s i dan persamaan
r e g r e s i kurva k a l i b r a s i yang menyatakan hubungan
antara luas puncak kromatogram terhadap konsentrasi
nipasol.

20
3.1.3. Penetapan kadar nipagin dan nipasol dari sampel

murni
Ditimbang saksaina 100 mg nipagin dan 100 mg

nipasol, masing-masing dilarutkan dalam etanol
sampai diperoleh volume tepat 100,0 ml. larutan
i n i masing-masing mempunysi kadar 1000 ppm.
Dibuat larutan campuran nipagin dan nipasol
dengan perbandlngan masing-masing 10 5 . Larutan
tersebut diinjeksikan sebanyak 4 ;ul keaalam a l a t
kromatografi gas, kemudian diaiT.ati dan dihitung

luas puncak kromatogram nipagin dan n ip as o l. Harga
waktu re t e n s i dan luas puncak kromatogram dapat
dibaca dalam perekam data.
Dengan cara yang sama dilakukan juga terhadap

larutan campuran nipagin dan nipasol dengan per-
bandingan masing-masing : 5 *• 10, 10 : 1, 1 : 10
dan 10 : 10. Sebagai larutan standar digunakan
larutan dengan perbandingan 10 : 10. Semua pene
tapan diatas masing-masing dilakukan sebanyak dua
k a l i . Berdasarkan luas puncak kromatogram nipagin
dan nipasol, dapat dihitung kadar nipagin dan n i
pasol dalam campuran dengan persamaan sebagai be-
rikut :
dimana

21
Cx : konsentrasi nipagin atau nipasol
Cst : konsffntrs s i standar nipagin atau nipasol

Ax : luas puncak kromatogram nipagin atau nipa -
sol
^st ' ^ ua s Puncak kromatogram standar nipagin a -

tau nipasol
3.1.4. Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik ads-

tr ingent
Ekstraksi nipagin dan nipasol dslam sediaan d i l a k u -

kan dengan metode sebagai berikut ( ?»9 ) *•
Dipipet 20,0 ml sampel, dimasukkan kedalam

corong pisah. Diekstraksi dengan 25 ml e t e r .
Ekstraksi diulangi sebanyak aua k a l i masing-masing
dengan 25 ml e t e r . Fase e te r dikumpulkan kemudian
dicuci dengan 10 ml a i r . Fase e te r diuapkan sampai
kering. Sisa penguapan ditambah etanol sampai v o l u
me 10,0 ml. Terhadap larutan i n i dilakukan penetap
an kadar nipagin dan nipasol dengan cara sebagai
berikut : d iinjeksikan sebanyak 4 }xl kedalam alat.

kromatografi gas, kemudian diamati dan dihitung
luas puncak kromatogramnya. Harga waktu r e t e n s i
d^n luas puncak kromatogram dapat dibaca dalam pe
rekam data. Pada kondisi yang same diinjeksikan
juga larutan standar nipagin dan nipasol dengan
kadar masing-masing 1000 ppm atau 2000 ppm.

22
Banyaknya sampel yang ditetapkan kadarnya sdalsh
5 sampel , dengan urutan penyuntikan b e rs e lin g

sebagai berikut : standar, sampel, standar, sam
pel dan seterusnya. Semua penetapan diatas ma -
sing-masing dilakukan sebanyak dua k a l i . Berda-
sarkan luas puncak kromatogram nipagin dan n i p a
s o l , dapat dihitung kadar nipagin dan nipasol
dalam sampel s e p e r t i cera tersebut diatas pada
bu tir 3.1.3.
3.2. Penetapan kadar dengan teknik standar i n t e r n a l :

eugenol
3 .2.1. Pembuatan kurva k a l i b r a s i nipagin dengan stan -

dar interna l eugenol
Ditimbang saksama 100 mg nipagin dan 200

mg- eugenol, masing-masing dilarutkan dalam eta-
nol sampai diperoleh volume tepat 100,0 ml. La
rutan i n i mempunyai kadar masing-masing 1000
ppm dan 2000 ppm.

Dibuat larutan campuran nipagin dan euge -
nol dengan perbandingan masing-masing sebagai
berikut : 1000 ppm : 2000 ppm, 750 ppm : 2000
ppm, 500 ppm : 2000 ppm, 250 ppm : 2000 ppm dan
100 ppm ; 2000 ppm. Dari masing-masing larutan
i n i diinjeksikan sebanyak A pi kedalam s l a t
kromatografi gas, kemudian diamati dan dihitung

23
luas puncak kromatogram nipagin dan eugenol, Harga
waktu r e t e n s i dan luas puncak kromatogram nipagin
dan eugenol dapat dibaca dalam perekam data. Kemu
dian dihitung k o e f i s i e n k o r e la s i dan persamaan re-

g r e s i kurvs k a l i b r a s i yang menyatakan hubungan an
tara perbandingan luas puncak ("Peak Area R a t i o " )
kromatogram nipagin dengan eugenol terhadap kon
sentr asi nipagin.
3.2.2. Pembuatan kurva k a l i b r a s i nipasol dengan standar

internal eugenol
Ditimbang saksama 100 mg nipasol dgn 200 mg

eugenol, masing-masing dilarutân dalam etanol sam
pai diperoleh volume tepat 100,0 ml. Larutan i n i
mempunyai kadar masing-masing 1000 ppm dan 2000
ppm.
Dibuat larutan campuran nipasol dan eugenol
dengan perbandingan masing-masing sebagai berikut:
1000 ppm : 2000 ppm, 750 ppm : 2000 ppm, 500 ppm :
2000 ppm, 250 ppm : 2000 ppm dan 100 ppm : 2000
ppm. Dari masing-masing larutan i n i diinjeksikan
sebanyak 4 ^1 kedalam a l a t kromatografi gas, kemu
dian diamati dan dihitung luas puncak kromatogram
nipasol dan eugenol. ferga waktu r e t e n s i dan luas
puncak kromatogram nipasol dan eugenol dapat diba-
cs dalam perekam data. Kemudian dihitung k o e f i s i e n

2k
k o r e l a s i dsn persamsan r e g r e s i kurva k a l i b r a s i
yang menyatakan hubungan antara perbandingan luas
puncak ( "Peak Area Ratio" ) kromatogram nipasol
dengan eugenol terhadap konsentrasi nipasol.
3 .2.3. Penetapan kadar nipagin dan nipasol dari sampel

mumi dengan standar internal eugenol
Ditimbang saksama 100 mg nipagin dan 100 mg

nipasol, masing-masing dilarutkan dalam etanol
sampai diperoleh volume tepat 100,0 ml. Laruten i~
ni masing-masing mempunyai kadar 1000 ppm.
Dibuat larutan campuran nipagin dan nipasol
dengan perbandingan masing-masing 10 : 5. Kedalam
larutan i n i ditambahkan larutan standar in t e r n a l
eugenol dengan kadar 2000 ppm, Larutan tersebut
diinjeksikan sebanyak 4 ul kedalam a l a t kromato -

g r a f i gas, kemudian diamati dan dihitung luas pun
cak kromatogram nipagin, nipasol dan standar in -
ternal eugenol. Harga waktu retensi. dan luas pun
cak kromatogram dapat dibaca dalam perekam data.
Dengan cara yang sama dilakukan juga terhadap
larutan campuran nipagin dan nipasol dengan per -
bandingan masing-masing : 5 : 10, 10 : 1, 1 ; 10
dan 10 : 10. Sebagai larutan standar digunakan

larutan dengan perbandingan 10 : 10.

25
Semua penetapan diatas masing-masing dilakukan
sebanyak dua k a l i . Berdasarkan luas puncak kroma

togram nipagin, nipasol dan standar in ternal euge
nol, dapat dihitung kadar nipagin dan nipasol da
lam campuran dengan persamaan sebsgai berikut i
C - ^ is t
^ * c Bt
St/Axs t
dimana ;
CA : konsentrasi nipagin atau nipasol
Cg1. : konsentrasi standar nipagin atau nipa

sol
A /. : perbandingan luas puncak kromatogram

X/Ai s t
nipagin atau nipasol terhaclap luas pun
cak kromatogram eugenol
A ,/. : perbandingan luas puncak kromatogram

' ist
standar nipagin atau nipasol terhadap
luas puncak kromatogram standar euge
nol
3 .2 .4 . Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik ads-

trin gent dengan standar interna l eugenol
Ekstraksi nipagin dan nipasol dalam sediaan dengan
standar internal eugenol dilakukan dengan metode

26
sebagai berikut ( 7,9 ) :
25,0 ml sampel, dimasukkan kedalam l a -

bu ukur 50 ml, ditambahkan larutan standar i n t e r -
nal eugenol dengan kadar 4000 ppm sebanyak 5,0 ml,
kemudian tambahkan larutan sampel sampai volumenya

tepat 50 ,0 ml. Dipipet larutan i n i sebanyak 20,0
ml dimasukkan kedalam corong pisah. Diekstraksi
dengan 25 ml e t e r . Ekstraksi diulangi sebanyak dua
k a l i masing-masing dengan ?5 ml e t e r . Fase e t e r d i -
kumpulkan kemudian dicuci dengan 10 ml a i r , Fase
e t e r diuapkan sampai kering. Sisa penguapan ditam-
bah etanol sampai volume 10,0 ml* Terhadap larutan
i n i dilakukan penetapan kaaar nipagin dan nipasol
dengan cara sebagai berikut : d iin jeksikan seba -
nyak 4 /il kedalam a l a t kromatografi gas, kemudian
diamati dan dihitung luas puncak kromatogramnya.
Harga waktu r e t e n s i dan luas puncak kromatogram
dapat dibaca dalam perekam data. Pada kondisi yang
sama d iinjeksikan juga larutan standar n ip a g i n , n i
pasol dan eugenol dengan kadar masing-masing 1000
ppm : 1000 ppm : 2400 ppm atau 2000 ppm : 2000 ppm
: 2400 ppm.
Banyaknya sampel yang ditetapkan kadarnya a -
dalah 5 sampel, dengan urutan penyuntikan berse
l i n g sebagai berikut : standar, sampel, standar,
sampel dan seterusnya. Semua penetapan diatas ma -

sing-masing dilakukan sebanyak dua k a l i . Berdasar-
kan luas puncak kromatogram nipagin, nipasol dan
standar internal eugenol, dapat dihitung kadar n i

pagin dan nipasol dalam sampel s r p e r t i cara t e r s e
but diatas pada b u tir 3.?.3.
Penetapan kadar dengan teknik standar in ternal :

g?- naphthol
Pembuatan kurva k a l i b r a s i nipagin dengan standar

internal naphthol
Pembuatan kurva k a l i b r a s i dilakukan dengan
cara s e p e r t i diatas paaa b u tir 3.2,1.
Pembuatan kurva k a l i b r a s i nipasol dengan standar

interna l naphthol
Pembuatan kurva k a l i b r a s i dilakukan dengan
cara se p e r ti diatas pada b u tir 3.2.2.
Penetapan kadar nipagin dan nipasol dari sampel
murni dengan standar internal naphthol

Penetapan kadar nipagin dan nipasol dilakukan
aengan cara s e p e r t i diatas pada b u tir 3.2.3.
Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik ads

trin gent dengan standar internal naphthol
Penetapan kadar sampel dilakukan dengan cara

28
s e p e r t i diatas pada b u tir 3*2.4-.
3*4. Penetapan kadar dengan teknik standar internal :

b u t i l paraben
3.4.1. Pembuatan kurva k a l i b r a s i nipagin dengan standar

interna l b u t i l paraben
Pembuatan kurva k a l i b r a s i dilakukan dengan ca
ra s e p e r t i diatas pada b u tir 3.2.1.
3.4.2. Pembuatan kurva k a l i b r a s i nipasol dengan standar

interna l b u t i l paraben
Pembuatan kurva k a l i b r a s i dilakukan dengan ca

ra s e p e r t i diatas pada b u tir 3.2,2.
3.4.3. Penetapan kadar nipagin dan nipasol dari sampel

murni dengan standar internal b u t i l paraben
Penetapan kadar nipagin dan nipasol dilakukan
dengan cara s e p e r ti diatas pada b u tir 3.2.3.
3.4.4. Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik ads

tr in g e n t dengan standar internal b u t i l paraben
Penetapan kadar sampel dilakukan dengan cara
s e p e r t i diatas pada b u tir 3.2.4.
4. Metode analisa h a sil percobaan

29
4.1. Ketepatan dan k e t e l i t i a n
Dari h a s il p e n e litia n kadar nipagin dan nipa -

60 l yeng dip eroleh, dapat ditentukan ketepatan dan
ketelitiannya.
Metode penetapan kadar disebut mempunyai k e te

patan yang baik jik a tidak ada perbedaan yang ber -
makna ( pada harga «£ tertentu ) antara harga yang
dianggap benar dengan h a s il yang dip erole h . Untuk
mengetahui perbedaan tersebut digunakan u j i t satu
sampel ( 23 ) , dengan rumus :
t = ( * - JU. ) T-n-'
s
dimana :
x : harga r a ta - r a ta yang diperoleh
u : hdxga yang dianggap benar
n : jumlah r e p l i k a s i
s : simpangan baku
Apabila harga t pada perhitungan l e b i h k e c i l d a r i t

t a b e l , maka Ho diterima, artinya tidak ada perbeda-
an yang bermakna, dengan kata la i n metode penetapan

kadar mempunyai ketetapan yang baik.
Metode penetapan kadar dikatakan mempunyai ke
t e l i t i a n yang baik jik a besarnya penyimpangan antar
r e p l i k a s i , yang dinyatakan dengan k o e f i s i e n v a r i a s i
tidak l e b i h uari Harga k o e f i s i e n v a r i a s i dapat
dihitung dengan rumus sebagai berikut :

30
Kv = -f~ x 100%
dimana :
s : simpangan baku
x : hsrga r o t a - r a t t yang diperoleh
Dalam hal i n i semakin k e c i l harga k o e f i s i e n v a r i a s i

, make metode tersebut dikatakan semakin t e l i t i .
4.2. Perbandingan metode
Untuk menyimpulkan apakah ads perbedaan % r e

covery antar metode, digunakan u j i P ( Angva ) de
ngan rancangan " Completely Randomized Design ",
Untuk menghitung harga F aigunakan rumus-rumus :
( I T.
1 )2
c? = N
ssT - I ( Xij )2 - CP
ssp = c )--- c?
t- no
SSE = ssT - ssp
Kemudian disusun tabel Anava untuk ” Completely

Randomized Design " sebagai berikut :

31
! Sumber v a r i a s i ! DF ! SS ! NjS ! F hitung !
MS„
! Antar metode ! K-1 ! SSp , SSP t EL i
■ K-1
• mse
ss£
! Dalam metode ! N-K ! S S E ! N-K 1 1
ssT
! Total ! N-1 ! SST ! n^T 1 I
Apabila harga F pada perhitungan l e b i h k e c i l da
r i F tabel pada harga -Ctertentu, b e r a r t i tidak ada

perbedaan yang bermakna antar metode. Metode yang d i -
bandingkan adalah antara metoae stanaar eksternal,
standar internal nepthol, stanaar in ternal eugenol
dan stanQar interna l b u t i l paraben.

32
iJjli) IV
ilA i.J I I * I V v J a O O U : !\J-I
1. Penetaoan. kadar dengan teknik standar e k s t e r n a l ,

1.1. Kurva k a l i b r a s i nippftin,
Ilsr^s luas puncak kromntogram dan konsentrasi

nipagin adalah sebagai berikut ( t a b e l I ).
2Ajj£L I
:
Konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipagin.
ho. Konsentrasi ( ppm ) ! Luas puncak kromatogram
1 . 101,0 ! 0,009
2. ?5?,5 ! 0,029
3. 505,0 0,063
4. 757,5 • 0,113
0,161
o
C
r'
5.
Perhitungan k o e f is ie n k o r e la s i Uan persamaan

re g r e s i kurva k a l i b r a s i antara konsentrasi dengan l u
as puncak kromatogram nipagin dapat d i l i h a t dalam
lampiran I . Harga k o e f is i e n k o r e l a s i yang didapat
adalah r = 0,996. Harga r hitung tersebut le b ih besar
dari r tabel ( 0,878 ) pada harga 0,05 dan derajat
bebas = 3. Hal i n i membuktikan bahwa ada korelasi

33
l i n i e r anta.ro konsentrasi clan luas puncak kromato1-
gram nipagin. Persamaan r e g r e s i kurva k a l i b r a s i ni
pagin adalah : y = 1,679 , 10"4" x - 0,013.
Kromatogram nipagin pada pembuatan kurva k a l i

b ra si dapat d i l i h a t pada gambar 1.
^*2. Kurva k a l i b r a s i n i p a s o l .
Harga luas kromatogram dan konsentrasi nip s-

s o l adalaii sebagai berikut' ( t a b e l I I ).
TABEL II
Konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipasol
Mo. Konsentrasi (ppm ) ! Luas puncak kromatogram
1. 105,4 1 0,008
?. 263,5 ! 0,024
3. 527 ! 0,057
4. 790,5 ! 0,094
5. 1054 ! 0,133
Perhitungan k o e f i s i e n k o r e l a s i dan persamaan
r e g r e s i kurva k a l i b r a s i antara konsentrasi dengan

luas puncak kromatogram nipasol dapat d i l i h a t dalam
lampiran I I . Harga k o e f i s i e n k o r e l a s i yang didapat
adalah : r = 0,998. Harga r hitung tersebut lebih
beser dar i r t a b e l ( 0,873 ) pada harga <>C * 0,05

34
dan dera.jat bebas 3 3 . Hal i n i membuktikan bahwa ada
k o r e l a s i l i n i e r antara konsentrasi dan luas puncak
kromatogram nipasol, Persamaan r e g r e s i kurva kalibra_

s i nipasol adalah y = 1 ,3 2 6 , 1 0 " 4 x - 9 ,6 7 5 , 10 ~3 .
Kromatogram nipas ol pods pembuatan kurva :caM-

brasi dapat d i l i h a t pada gambar 2 .
"1*3. Penetanan kadar nipagin dan nipasol dar i sampel mur-

n i.
Hasil penetapan kadar nipagin dan nipas ol da
r i sampel rnurni dapat d i l i h a t pada t a b e l berikut i n i

( tabel I I I ).
Contoh perhitungan kadar nipagin dsn nipasol dalam

sampel murni adalah sebagai berikut :
Kadar nipagin = ^ ^ x 5?0,0 = 534,6 ppm

0,536
% Recovery nio ag in s 524.1.5 x 100 % = 102,8 %
520,0
Kadar ninasol = ■ x 520,0 - 242,9 ppm
0,578
% recovery ninasol = ^-4? 1 2.... x 100 % = 93*4 %
260,0
Contoh Kromatogram berikut data waktu r e t e n s i
dan luas puncak dapat d i l i h a t pada gambar 3.
1.4. Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik adstri_
ngent.
llss.il penetapan kador nipagin dan n ip as o l da
lam sediaan kosmetik oaoat d i l i h a t pada t a b e l beri_

*—s
«■ **
•3- m in in
A • * *
r\ r- CM CD
r“l U\ O vO O O r-
O
m
(0
'w '
ON
•s_* •w'
r-
V_/
m 35
VO
p. •» «, ■ •> •• C
TN
E
a.
•H CM
■«-
r-
m
in
r\
CM â-
VO
OJ in in in
>»
u ^-s -
o
e k s te r n a l.
VX
> co o CO in CO
o G *» «*
o •H CM r-
(I) bO O c\ o
VO
t-
c^-
© CD CO
cc a T“
P. s_^ <w> r*» CM
•H vo
•»
CVJ CM
«,
CO
A
O'
CM in c\ o
in r^\ vO
tn CM in in
s ta n d a r
' *“ “ ~ -
t*.
r“i
O CO co CO co
<3
T0 03 c- r- r- r-
CO
r*-
>>
h
(D in m in in in a>
C A> a» *. >
m e to d e
<0 o o o o © o
td
o
a >
M
& - - ► - - -
<
o0
den gan
c
3 •H vO VO vO vO vO
Q. CO m m c\ r\ rn
03 in in in in in
CD a • m
. a *»
(0
3
■H O o O O O
m u rn i
- - - - - -
H
o o r- <7\ CM f-
(» r- m o\ CM
0)
sam pel
C3 CM in O m VO
a P. * .. * *.
E »H o o o o o
a
ra
-
a
d a la in
o C
c
3
•H
&J
r—
in
o
vO
CM
VO
?— CD
•"3* r-
a 03 in OJ in o in
P- •* A
co
n ip a s o l
•rt O O o o o
a
- - . . _
rH
o o o o © o
dan
E ca «• «. •« tl
Q. CO o o o o o
a P. cm CM CM CM CM
•H in in in in in
■r
n ip a g in
k
a - - - - -
-a c
c •H o O o © o
CO SO *> •» •> * *
a o o © o o
co P. cm CM CM CM CM
kadar
T-( m in in in in
- - - ► -
E
a »—t
p e n e ta p a n
a o O O O o
v.
O
CO *»
+> (0 o o CM O o
cc P. vO CM in CM CM
3 •H CM in in in
■yH
'O
- * - - - -
to
H a s ll
c
o
>> •H © o O © ©
C6 •>
u cc o CM ©
Ta3 p. CVJ VO CM in CM
•H in CM IT. in
©
- - - - - -
, , . , ,
a O CM ■c in
E
a
co

36
kut i n i ( ta b e l IV )#
P e r h i t u n g a n k a d a r n i p a g i n dan n i p a s o l d a la m s e d i a a n
k o s m e tik : d i l a k ^ k a n s e o e r t i p?3da so m o e l m u r n i d i t i t a s
( b u t i r 1. 3. ).
'/O’lt o jj k r n n t n r r f r ’ ner.i to it d a t a v.'aktu r e t e v . : i
dan I ’j a s n u 'ic n k d a ^ o t d i l i h a t o&da gsmrwar 4 .

II
tfi. OS 6® ’Cs°
r“ CO VO vO ON
r— l * •. 3?
O v£> o LA VO 'S ’ kD
CJ O '. ON CD ON ON ON
CO w \ .A s/
a o crs (V c— CM
i +• CT\
E 00" v£> CT\ ON vD
C, cvj CVJ r- O
a cr> f- c- c~-
T"» T— r”
— ... _ —•
t>0
tsv.
‘e ft ir
o
> c
on
■_
on CO o fN
on
o •H Js_ ON VO o in
o to a> CD CD © CD
® CO N_S.
cs a in VO
*
CNJ
«,
T~ rN
(A
03
•H *
CO o\ r* r^,
in T— VO
c^* t - o vO c^\
1— r"
M* to. .
H
O r- in vX) VO CO
B n CO cn O r- s^- •W’
TJ S3 m r-\ cc CO >»
C cu ** •. w, u
c a •ri o O o O o <l>
« >
s o
•H
T©3 .X
o
u ►
W
©
o b M
c c
•H
B a a to r- C"- vO ON
f—( c CO in 00 vO c-~
C l LPi »*N CD c*— P-
T3 © •H «k
4* 2: o o o o
co
O
O ©
*ffi5
CD
i—
i
C. u
TfflC3
•H
n ON in vO
c
VC m ^—
c O C in vO COr,
c
'D
O. •»
c
O c o
c ' © 03
•H
6
O
5
CL
ON in o r\ vO
m co VO r— e*-\
U c
on •«s- cc in O
C V
•k
TJ Z. © o O
CD ft)
^ TJ
c ^
rH
O -4Jf! O
Q
O o» o» o
G. o
© c
E
o o o o o
-o g
C-
in
o o o o
Q> K
in o o o
c O
T—
(D Jtf U
— — — —
Q.
TCC3
D o o o o
•» «,
o c o c o
o o c o o o
03 +» in in o o
® to T~ r— o
S
c,
rH
a
O
03
O#s CO VO
ffl o O o CNJ in
CL o o TT rr VO
a o CO CD
3
X3 Cv) aD
T— r—
TJ
«C o o
>j •* *
VC
•. o
o O o r-\ o
u
ffl o o o rî o
o CD CNJ CO
■c
s
C
\J VO
CV' r> in

38
2* Penetooon kadar daru*on teknik standor in tern a l : -

n a p t h o },
2* 1• Kurva k a lib ra si nipaîn dengan standar internal p -

naothol.
Berdasarkan lues puncak kromotogram dan konsen
t r a s i nipagin .yang didapat sebagai berikut (tfcbel V)
TABEL V
Konsentrasi, lues puncak kromotogram dan perbanding-

an luaa puncak kromatogram dari nipagin d an ^ -n ap th ol
No. Konsentraai ! Luas puncak kromatogram ! Perbanding8n

Mipagin(ppm)\ Hipagin - napthol \Lues puncak
1. 51,5 ! 0,027 ! 1,240 ! 0,022
2. 128,3 ! 0,063 ! 1,036 ! 0,066
3. 257,5 J 0,167 ! 1,103 I 0,151
4. 306,2 ! 0,259 ! 1,167 ! 0,222
5. 515,0 ! 0,371 ! 1,177 I 0,315
Perhitungan k o e f is ie n k o r e la s i dan persamaan

r e g r e s i kurva k a l i b r a s i nipagin dengan naphthol
dapat d i l i h a t dalam lampiran I I I . Harga k o e f i s i e n
k o r e l a s i yang didapat adalah r * 0,993* Harga r h i -
tung tersebut le b ih besar dari r tabel ( 0,878 ) pa-
da harga <£= 0,05 dan derajat bebas = J>. Hal i n i mem-
j WIHB I
l n m PU S TA K A A W
J-KW IYERSITAS A lR L A N C H U "
I I U RA BAVA
39
buktikan bahwa ada korelasi l i n i e r antara konsentra

s i dan luas puncak kromatogram nipagin dengan f -
naphthol. Persamaan r e g r e s i kurva k a lib ra si nipagin

dengan nap.thol adalah : y = 6 ,273.10~4 x - 0 , 0 1 3 .
Kromatogram nipagin dengan ^ - napthol pada pern
buatan kurva k a l ib r a s i dapat d i l i h a t pada gambar 5.
2.2, Kurva k a l i b r a o i nip a3 ol dengan standar i n t e r n a l -

n o o th o l.
Besorn.ya luas puncak kromatogram dan konsen -

t r n s i nioorjol yan^ didyput sebtr-.oi borikut ( tab el V I )
TABEL VI
Konsentrasi, luas nuncak kromfltogrom dan perbandingan luas
puncak kromato^rnm dari nipasol dan ft - napthol.
! Konsentrasi ! Luas puncak kroimitogram ! Perbandingan

IIo.
! Itfipasol(ppm)! ftipasol ! nopthol JLuas puncak.
1. ! 51,2 ! 0,043 ! 1,230 ! 0,035
?. ! 128,0 ! 0,075 ! 1 ,042 ! 0,072
3. ! 2V-o,0 ! 0,158 ! 1 ,146 ! 0,138
4. ! 3*4,0 ! 0,317 ! 1 ,303 ! 0,243
5. ! 512,0 ! 0,391 ! 1 ,178 ! 0,332

k0
Perhitungan k o e f i s ie n k o r e la s i dan persamaan

r e g r e s i kurva k a l i b r a s i nipasol dengan ^ - napthol
dapat d i l i h a t dalam lampiran IV. Harga k o e f i s ie n k o - '

r e l a s i yang didapat adalah r = Ot 994. Harga r hitung
tersebut le b ih besar dari r tabel ( 0,878 ) pada har
ga ^ = 0,05 dan derajat bebas = 3. Hal i n i membukti-
kan bpnwa ada k o r e l a s i l i n i e r antara konsentrasi dan
luas puncak kromatogram nipasol dengan napthol.
Persamaan r e g r e s i kurva k a l i b r a s i nipasol dengan (^ ~
napthol adalah : y = 6,535.10"*^ x - 9,962.10” ^
Kromatogram nipasol dengan napthol pada
pembuatan kurva k a l i b r a s i dapat d i l i h a t pada gambar
6.
2.3. Penetapan kadar nipagin clan nipasol dari sampel mur-

ni dengan standar interna l ft - napthol.
Hasil penetapan ka<iar nipagin dan nipasol da

lam sampel murni dapat d i l i h a t pada ta b el berikut
i n i ( tabel VII ).
Contoh perhitungan kadar nipagin dan nipasol dalam
Cx
Kadar nipagin x 346,7 - 343,1 ppm

0,292
% Recovery nipagin = x 100 % = 99*0 %

346,7

SS. *ft U
cn
s-m co vo r\ in
vO
r—f o CO cn in
o co o (T\
tn in co
w 3 CTv
0.
e TH
a
P<
a
sz cn
3 in
m
cn CO C
CM
-
<3-
H
O -
m m <n
>>
,3
-P 0 VO
A > 3 O »■»
*3- e' CD
03 o •H o ’•O
a o to os O e' en o
i 0
ry
3 <T\ o> er! c - in cn
<£^
P* cn
•H CM
rH
a
cn
r j-
c-
<n
c-
cm
<X\
c f*'V m m
fn “ r-t
0 M O
4-» o — rH
3 o ^ o
■H C Q. 03 <n m cn cn in
u
3
a,
a
«
<S
P*
cn m <n cn <n
3
-■d 03
i
*»>-
•rW o CD
n 3 e. >
CO 3 a O
+> <-H T3 o
0) 3 0)

+» •H to (T\ a\ CT\ (T» ON 3
0 ■a b 3 CM CM OJ CM CM U
E c a A m * » 1
53 T3 ■M O o o o o 3
C ^ c s
<0 H 3 3
to <y +» CC
a Ph C/5
0
T3 ii rH
cj o
•H O .3 rH
s B -p O vD c^- CM VO
r4 3 — ca in CM CM
H 3 a 3 3 «— cn O r>
£ r* A •« •h «%
£ m T ^rH o o o O o
,-H 3 *°"'
0 3 Cu
a rH 3
a s <3 --
3 3 <3
<5
SH
03 3 ~
W M ff
c G O •H cn in <T t^\ 'S’
5
rH
•H +» OD co ■53" co CM
•3 3 CM v— CM om CMm
a 3 rH A- m
T3 (0 0 •H O o o o
-O Q. o
35
i—< * s
o 0 a
0] Oh cn
o — _
a
•H rH
c ''“ S O c>- f-
£ 01 «• A
a a 3 m3 M3 •J3 M3 vO
3 Q. a TT ^r ■^r TT
73 jrH cn <n cn cn
a
<0 ■m. - - - - -
CjO X)
3 3 a
o« 3 •rH f- r- £*-
-P CsO
.-« CO 3 M3 M3 v£J >sO vO
£X ■^r *3- ^ }-
<n m «n m <n
co
T3
CO — _ w - - - - .
u rH
*» o m f- c-" C"
3 3 9J «• ««
3 3 3 <n vO •5 - VO vO
a -O Cu ^r cn
ca •iH
c~- *«* ^r
•iH m m cn
+» ■3 ss
0
3 to _
a) 3 =
a a 5.
1 >» c. £2 r- cn
rH •pH ■■ » m A
•H Jh to vO m vO VO
CO 3 3 *J- t- •<3* cn ■*r
Q T3 a, cn <n cn
X 3
<> •rH
_ - - - - -
rH
0
a. « # .
E O •— CM cn T in
3 2
CO

if2
Kadar nipasol = x 346,7 = 163,4 ppm

0,331
% Recovery nipasol = -1^ * -. x 100 % = 94,3 %

173,3
Contoh kromatogram berikut data waktu r e t e n s i

dan luas puncak dapat d i l i h a t pada g.ambar 7 .
2.4. Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik a d s t r i

ngent dengan standar interna l - napthol,
Hasil penetapan kadar nipagin dan nipasol da

lam sediaan kosmetik dapat d i l i h a t pada tabel b e r i
kut i n i ( tabel V I I I ).
Perhitungan kadar nipagin dan nipasol dalam sediaan
kosmetik dilakukan s e p e r t i pada sampel murni diatas
( butir 2.3 ).
Contoh kromatogram berikut data waktu r eten si
dan luas puncak dapat d i l i h a t pada gambar 8 .

■5V
ON •3-
VO <T
43
rH in u> cn in CM
O O CD cn cn CO CO
'Ti VO
flj
3
* a CD in CM
•IH cn
VO c- <3-
C
TN o <x» vO
O. CO y£> e' tn CD
a
>>
-T\ C-
in
> LA vo o CM CM
o o CO en co C0
o cn
® co
cs
CD CM co O
cn <m co O cn
co vo Cn vO
~ iH
O
i-
Jrf £
O Cu
O 3
G C r-»
0)
3
a.
I o
53
o
<7\
VO
CM
o
C“—
OJ
m
o
vO
CO CM cn OJ vO VO >>
•rt r*< ui C2. •t u
X) O aj aa. •W o O <0
r3-» T

7) +*
a.
J o
S3 o
a C CD >
c <0 M
co o
aj
TJ +>
T3 Ch VO ITS o C— CO a
© G 3 VO o o »3* CM U
O C ffl XJ OJ m <n
C2 H ,3 C
VO vO
©
a.
47
+»
H 3
0} a j
o
a
•ri Ch as
a
"** r-l
H 0
> zs
o «
S ^ vO «-n <n vO vO
a 2 i? «T Jw ■n
60 1 v3 VO vO
»
un CO
■5S £ A
CL
•H
a ^s. A c C ,— o
rH 3
'O
M G 3
a j 3 ~ -* — - -
T3 to
<a c
x. a •H
afl TD ITV o o m CM
c c cn CO CM
<Q to O LT\ ir\ CO a~\ t—
a, -O ,0 Q «« 9% 0,
03 o o
+■» m © S«
h t“ O r**
®
c
fl* v-3
— — — — —
« H
a 0 cn cn <n P- r-
n Is m «» •»
o a cO <n <n cn vO vO
w04 a
•H
<n cn
cn
<n
tn
vO
VO
vO
vO
u — — — — —
(D
*C cn <n cn C- c~m
G •* «»
ffl <n m <n vO vO
rn cn <n VO vO
CQ m m <n VO vO
— — — — “ -
+»
<0 r -(
3 O o o CO CM o
03 0,
•ri <0 o o VO CO cr>
TJ ^—
s a. o OJ ir» LP» ^r
•r^ CD r— VO C
so T“ T“
G “
3 a — - — — —
>, a
•p4 o o o C>J o
u w aO * * m a
<a aj o o O o o
T3 a. o OJ co in
>a
/■ •H CD
r-
o- c e—
r-
' r“
. . —
C
Vr

kk
3. Penetapan kadar dengan teknik standar i n t e r n a l eugenol

3 . 1 , Kurva kalibrasi, nlnagln dengnn standar i n t e r n a l euge
nol,
Besarnye luas puncak kro'-wtogram dan konsentra
s i nipagin yang didapat sebagai berikut ( t a b e l IX )
TABEL IX
Konsentrnni > luas puncak kromatogram don perbandingan l u
as puncak kromatogram dari nipagin dan eugenol.
! Konsentrasi ILuas puncak kromatogram ! Perbandingan

No.
! Nipagin(ppm) ! Nipagin t Eugenol ILuas puncak
1. '■ 51,5 ! 0,036 \ 1,808 ! 0,020

2. ! 128,8 ! 0,116 ! 1,834 ! 0,063
3. ! 257,5 ! 0,293 ! 1,824 ! 0,161
4. ! 386, 2 ! 0,435 ! 1,033 ! 0,237
5. ! 515,0 ! 0,587 ! 1,812 ! 0,324
Perhitungan k o e f i s i e n k o r e l a s i dan persamaan
r e g r e s i kurva k a l i b r a s i nipagin dengan eugenol da~

pa1> d i l i h a t Ualam lampiran V. Harga k o e f i s i e n k o r e l a s i
adalah : r * 1,003. Karga r hitung tersebut l e b ih

besar dari r ta b e l ( 0,878 ) pada harga X = 0,05 dan
derajat nebos = 3 .
Hal ind inem’nuUtilcan bshwa nds k o r e l a s i l i n i e r antara

konsentrasi dsn luas puncak kromatogram nipag in de
ngan eugenol. Persamaan r e g r e s i kurva k a l i b r a s i nipa
g in dengan eugenol adalah : y = 6,609 ^ x - 0 ,016.

Kromatogram nipagin dengan eugenol pada pembu-
atan kurva k a l i b r a s i dapat d i l i h a t pada gambar 9.
3*2. Kurva k a l i b r n s i nipasol dengan standar i n t e r n a l euge
nol,
Besarnya luas puncak kromatogram dan konsentr^
s i ninasol yang didanat sebagai berikut ( t a b e l X ).
TABEL X
Konsentrasi^luas puncak kromatogram dan perbandingan luas

puncak kromatogram dar i nipasol dan eugenol.
Konsentrasi Luas puncak kromatogram ! Perbandingan

Wo.
i l i p a s o l (ppm) Iiip esol ! TDugenol ! Luas puncak
1. 0,033 ! 1,103 ! 0 ,0 3 0
?. i?ri,o 0,096 ! 1,1 '34 ! 0 ,0 83
3. 2 56 , 0 0,174 ! 1,156 ! 0 , 1 rp1

4. 3 8 4 ,0 0,295 ! 1,147 ! 0 ,2 5 7
5. 5 1 2 ,0 0 ,3 9 6 ! 1,096 ! 0,361
Perhitung 8 n k o e f i s i e n dan persamaan r e g r e s i kur
va k a l i b r a s i n i o e s o l dengan eugenol dapat d i l i h a t da

lam lampiran VI.
Harga k o e f i s i e n k o r e l a s i yang didapat adalah : r =
0,999. Harga r hitung tersebut l e b i h besar dari r
t a b e l ( 0,878 ) pads harga £ » 0,05 dan dera jat be-

bas = 3# Hal i n i membuktikan bahwa ada k o r e l a s i l i
n i e r antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram

n ip as o l dengan eugenol. Persamaan regrern. k y ^ a kali^
b rasi nipasol dengan eugenol adalah y « 7 , 1 2 2 . 10 ~^x
- 0,014.
Kromatogram nipasol dengan eugenol pada pembu
atan kurva k a l i b r a s i dapat d i l i h a t pada gambar 1 0 ,
Penetapan kadar nipagin dan nipas ol d ari sampel mur

ni dengan standar i n t e r n a l eugenol.
Hasil penetapan kadar nipagin dan nipasol dar i

sampel murni dapat d i l i h a t pada t a b e l berikut i n i
( t a b e l XI ) .
Contoh perhitungan kadar nipagin dan n ip as o l dalam
c = AX/Al3t x C
Ox 7 -^ — X °st
at i s t
Kadar nipagin s S.t,2.?Q. x 3^6,7 = 3 4 1,4 ppm

0,325
% Recovery nipagin = x 100 % = 98,5 %

346,7
Kadar nipasol = .Q.aJ..4P. x 346,7 * 147,1 ppm

0,330
% Recovery nipas ol = H- 7-1,.1 x 100 % - 84,9 %
173,3

-■—V •""■s
tt tt
ON \n CM * r7
•* «* A
rt- ON CM in
o CO CN <r
28,79
7i CO o
f*
CD •w' '~»-
•H
a f—
»•
M3
* «»
-w "
cn
w
c r\ CM
CO
S {*- to . \o o
O T •w
c ON in
(U *“ <n CM cn
co a. - _
*
3
(U
a -—‘v »~s _—^
tt tt **
>> in CJ in co OJ
u *,
01 o
B *»
11,96
•H 03 ■q- (D <n CM
o 60
0

cs
ca
cn CT\
'— '
ON r— O
r~ m
A **—>* V -. V. ,
ON
■p <3-
s -*
CJ
-* •s
v£>
««
oA
r*- rn r* in r—
mD CM in
<n T— m
03 - — — •
”2
5
+» tt
i—< o o o o o
OJ o cn m cn cn cn
<n cn tn cn <n cn >i

•p 3 a
 i>*2
<8 _ 03
•H -a B Q.
-J o o O o o ■P
B w a
fn a)
Ch
-M
ca
03
K
- - - " - -
rH
<U o o\ ■^r CJ
a !-« T CM T— CO cn
£ o cn o CM m
S3 w «« #« A M
33 3 o o o O o
a
S3
< rH
£■*
Ta5
co
r*4 to u
O
CJ
c o
-p
fi
a
a.
c-50 o
CM
cn
LTN O on
c a CM CJ CM
•rt <3 a. cn cn o cn
fi X3 ■H
C <0
eu
T(0J
a
•H O
to E 33
a
a
i o. 33
O.
vO
•a-
\D
<T
o \o
a ■V TT
•<H m cn in cn cn
tc aj
Tm3 c—
a 33 «)
■P <n vO >sD vO ■•c
CO o. *3- c •>5P rt*
B cn cn tn <n cn
aj
a
03
-P -p
il) 03
iH
O c- c-»
c 3 <J3
> Q. •iH
«s0
■w 03 vO cn v•^rO t j-
cn
VJD
<0 O- c—
•H cn <n cn
© S
«
rH
0)
P. •
£ O OJ
53
71

48
Contoh kronato^ram berikut d8 ta waktu r e t e n s i dan l u
as puncak dapat d i l i h a t pada gambar 1 1 .
3,4. Penetaosn kadar sampel dalam sediaan kosmetik a d s tr i
ngent dengan standar i n t e r n a l eugenol.

Hasil penetapan kadar nipagin dan n ip as o l da
lam sediaan kosmetik dapat d i l i h a t pada t a b e l b e r i ' -

kut i n i ( t a b e l X I I ).
Perhitungan kadar nipagin dan nipasol dalam , sediaan
kosmetik dilakukan s e p e r t i pada sampel murni - diatas
( b u t i r 3 .3 )•
Contoh kromatogram berikut data waktu retensi
dan luas puncak dapat d i l i h a t pada gambar 1 2 .

'. i
O''- tt tt
<0 ■«r r~ r— vO
A •k * * •K
M3 r“* ir \ cn
10,06
rH O ON O a\ co
96,3
O r* ___
U1 w 1 •*~s .3 w
S< 03 O m vO o vO
a •» •> o •» ••
•H cn CO in CO vo
3! <M in (Tv vo o-
a CT\ vO C- in CD
cu t- r“
. .
!
l
>» /*™S ,—..
u
T—
8,90
© cn CT\ vo
>
98,2
o G CTN o ' OJ ON <£
o •H O o O co CO
© y* r“
03 0 S -' '■ f'
Q. ’ S’ o r— OJ
•H •• •• •• >
23 r~ CM t— OJ o
VO OJ 1— — CD
CT> c— T— vO i\J
r-
- - - - -
I
iH
0] O
o c /-I
(%)
(%)
© O
03 r- >n m to
C 3 03 CU VO OJ r- r“
53 0Q).
CD a <n cn c-
a •M •k A 01
recovery
■z o o o o
'tj 3 a
o ’
<0 O
C
rH T3
31 aj
04
3o ©
fH
Kv
a
c -P
33 •H •H m o OJ OJ
R ata-rata
/H
03
T3 tf :>o e— o ON OJ m
C 03 03 OJ OJ vo vO
r-t C CD T3 a. •* m •l
o
CQ
H
®
XH
) CqO •rt o O o o o
03 -M O +>
3h V3
“ - - -
c
Ph
<o
J4 -
S3
is
■o
rg
c
O
iH CM T—
03 O <f\ r— Tj-
Cl co C^“ CD ON
•J * * «k «.
<c
to 3
©
<n
Q, o o t— o
o © ■H
T3 a
o <s
+» 'O
<0 ©
e
a c
'O c © •H
a 0) QO <jn OJ f- r*~ OJ
S? i—I
CD
O.
o in vO OJ in
VO VO ON vo CVJ
c a> © •H •»
<s 'O a 2S r" o o o
CU E
<0 03
-M P-> CO
a +»
c o H
© E O cn cn c~- f-
a in 0J *> «•
o a 03 <n m cn vo
fH .M a a. <n cn VC
vo
VO
•H •H <n cn cn
m vo vO
0}
a c
-a •H m cn cn c^ c*~
c 00 •* -
<o <D <n cn <n vO vC
a m m cn vO VO
•H <n <n cn VO vo
“ — — — —
+»
<0 rH
3 O o o oo
J3
•H
CO »• ««
OJ o
CD o o vO CD ON
-a CU o OJ in in
•H CO t- c- VO o
6
c
0 T— »—
a
>>
U
•H o• oM O OJ
0> o
W)
© 03 o c c o o
T3 Q. c OJ cc in
is0:] 'H CO
r“
c- o r- rr
- —
© . . .
Cl _o OJ cn in
•<3'
E
3
CO

50
4. Penetapan kadar donrrar; teknik stonriar i n t e r n a l B u t i l -
paraben,
4 . 1 , Kurva k a l i b r a s i ninarin den;;.fr :;t c r dar i n t e r n a l bu-
til paraben.
3eaarnys luns puncak kromatogram dan konsentra
s i nipagin yang didapat sebagai berikut (tabel X I I I )
?A3iJL XIII
K on s en tras i,lu a 3 puncak kromatogram dan perbandihgan luas
puncak kromatogram dar i nipagin dan b u t i l paraben.
IKonsentrasi IL’jgd puncak kromatogram ! Perbandingan

No.
!Ninngin(ppm) ! .'ipa gin! Butil naroben ! uuas puncak
1. ! 51,5 ! 0,049 ! 1,210 ! 0,040

2. ! 128,8 \ 0,131 ! 1,215 ! 0,108
3. ! 257,5 ! 0,278 ! 1 ,214 ! 0,229
4. ! 3^,2 ! 0,434 ! 1,333 ! 0,326
5. ! 51 SO ! 0 ,583 ! 1,207 ! 0,483
Perhitungan k o e f i s i e n k o r e la s i dan persamaan re

g r e s i kurva k a l i b r a s i nipagin dengan b u t i l paraben da
pat d i l i h a t dalam lampiran V I I . linrga k o e f i s i e n kore
I a s i yang didepot adalah r = 0,993. Harga r hitung

tersebut l e b i h besar dari r ta b e l.

51
( 0,878 ) pada harga 0,05 dan derajat bebas * 3.

Hal i n i membulctikan bshwa a&a K o r e la s i l i n i e r enters
konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipagin de-
ng*n hutj.l paraben.

Persamaan r e g r e s i kurva k a l i b r a s i nipagin dengan bu
t i l paraben adalah y = 9i337.10 ^ x. - 0,013*

Kromatogram nipagin dengan b u t i l paraben pada
pembuatan kurva k a l i b r a s i dapat d i l i h a t pada gambar
13-
4 .2 . Kurve k a l i b r a s i n ip a s o l dengan standar i n t e r n a l bu
t i l paraben.
Besarn.ya luas puncak kromatogram dan konsentrai
s i n ip as o l yang didapat sebagai berikut :
TABEL XIV
K onsentr asi,lu as puncak kromatogram dan perbandingan luas

puncak kromatogram dari nipasol dan b u t i l paraben.
! Konsentrasi !Luas puncak kromatogram ! Perbandingan

No.
!Nipasol(ppm) ! i'lipasoll B u til paraben! Luas puncak
1 ■ 50,8 ! 0,055 ! 1,261 ! 0,044

2. ! 127,1 ! 0,133 I 1,169 ! 0,114
3. ! 254,2 ! 0,272 ! 1,132 ! 0,240
4. ! 381,4 ! 0,435 ! 1,176 ! 0,370
5. ! 508,5 ! 0, 622 f . 1,264 ! 0,492

52
Perhitungan k o e l i s i e n k o r e l a s i dan persamaan -
r e g r e s i kurve k a l i b r a s i n ip s s ol dengan b u t i l paraben

dapat d i l i h a t dalam lampisan V I I I . Harga k o e f i s i e n -
k o r e l a s i vang flidapet adalah : r = 0,999. Harga r

hitung tersebut l e b i h besar dari r t a b e l ( 0,878 )
pada hsrgo £• - 0,05 dan d e raja t bebas - 3. Hal i n i

membuktilcan bahwa ada k o r e l a s i l i n i e r antara konsen
t r s s i dan luas puncak kromatogram nipasol dengan bu
t i l paraben. Persamaan r e g r e s i kurva k a l i b r a s i nipa
so l dcngrm b u t i l paraben odsloh ; y = 9 ,857.10” ^z -
8,619.1 0 “-'
Kromatogram nipasol dengan b u t i l paraben pada
pembuatan kurva k a l i b r a s i dapat d i l i h a t pada gambar-
14.
4.3* Penetapan kadar ninagin dan nipasol dari sampel rnur-

ni dengan standar i nternal b u t i l paraben.
Hasil penetanan kadar nipagin dan nipasol dari

sampel murni dapat d i l i h a t pada t a b e l berikut i n i -
( t a b e l XV ).
Contoh perhitungan kadar nipagin. dan nipasol delam -

c = y r
x Arat'
J/A.i s t. ''Ct
Kadar nipagin = x 346,7 = 356,4 ppm

0,430
% Recovery nipagin = iS iiA x 100 % = 10?,8 &

346,7

^ V*.
tp co ^r- O 05 p— 53
in o
o 04 vCO
' vOfi' vO
O
N t-
9) O' O' o
a O' f-
a oj O O'
c O ^ OJ* O'
4) a .© r*' r~\ c*'
-3 a «- r*\ r"V
X a
u ■ ~
3 >»
Q. b
v
A yt >» C-\
>
CO O' o o CO
A
f*
*
o c c\7 CO p- OJ O' OJ
o •H o CO Os c- O' O' *-
3 <y
A as <0
a OJ O'
•H
vO <r \o in
m «n r-v oj
O*'
a
X. a.
<0 r-»
«
0] 0>
n a] c, >
a>
<3 o
T3
a
y
T3
O 4> >
c £
4-» <0 t
O to V (9
6 O O O O o ■P
f\ r*\ rA
a
C I*
a
a) *r ^3- tp ^
c 31 I
63 53 T3 a O
C Si ■P
0) u <0
*a <v Ci
a
a
a
£.
o
C r-» o Oj w m 0< r-
3 — 3 r> CO cc
<y
a -j a
Sb
OJ rr O ■sr <r-
—
a
a
a a i •H
a
3 C.
S-4 i-H
■c
C C
a jc
0)
to «
c a
■o CVJ f- c— »- (T\
"3 to •a- O' f'' oj
O
c
a 2> C aj
a
■*3- »- -3- O -<y
OT £3 a a> •H
03 E X>
a. 0) a s
a, co *
c o
43 n
TJ a, a vO >43 ■O vo
a a. V tt T rr
iH r> m <n n"\
60 u
a a
a "O
c
3 w
ft
4J
CO
3
a.
vo vO vD
^r
vTPO so
Tp
3 cn c^\ n*\
T3
<0
id
s a o c-
o 3 <n
a
37
.O a
a
r' vQ rp vO vO
>• r"\ Tp Tp
«- c\ c^l
a>
a, 3
>> a
!*)
r- m e-
u
<a
03
a
Ô r~\ <o 'O
*«r c— rp TT
*o c^\ r"\
0]
®
a
E
ffl
CO

Kadar n ip as o l = 2aiL22. x 346,7 - 160,2 ppm

0,502
% Recovery nipasol « «■--- >■?■ x 100 % = 92,4 %

173,3
Contoh kromatogram "berikut data vvaktu . r e t e f i s i 'dan
luas puncak dapat d i l i h a t pada gambar 15.
4.4. Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik a d s t r i

naent dengan standar i n t e r n a l b u t i l paraben.
! i a s i l penetapan kadar nipagin dan nipasol da

lam sediaan kosmetik dapat d i l i h a t pada t a b e l b e r i -
kut i n i ( t a b e l XVI ) .
Perhitungan kadar nipagin dan nipasol dalam sediaan
kosmetik dilakukan s e p e r t i pada sampel murni ( b u t i r

4.3 ).
Contoh kromatogram berikut data vvaktu retensi

dan luas puncak dapat d i l i h a t pada gambar 1 6 .

cn CD c*» ON
55
<T» CO aC
93,4
CO CO CO ON
o - cn ON
p- CM vo r-
E o cn r*»
a
a
vo vo vO vO o
I
>»
u CO
* CO CO «-
94,5
©
> c in
CO
o
o •H
60 cr> oo> CM
© CTi o
© 03
25 a (7\ cn CVJ
CO <n TT VO cn
o in on cn CM
vo CO (A
I
©
a
vo m
(%)
on m
c 3 +» C— P- CO p- CO
© c a 3 *7- «r »3- ON cn
<s
•rt
V
J2 01 J3
recovery
■a © a Qu
© H 3
51
a.
i—4 T<S3
©
e 3 £
© 5 H
•rt SO ©
a z
-o 3 1-1 *rt c- T— p- CM
J3 •s\
R ata-rata
“0 (h <50 co <J\ o p~ «•
c © • © f^\ cn p- CO
iH 3 -a c a. « « »
© .2 c © -H o O o CM o
c M © .D
? ©
'f l 5*
—■ *" •— —• — — —
JX 3
~ Q.
*o
i—1
J 3 •H o in c- in CT\ in
ua Cl XI 31 <Ts ON CD
a to 3 3 CM co cr> in
< a J1 .c a •>
m
OJ o o CM
3 a 25
© l—1 ©
■o TJ
(h o 3 © _
<0 +-> O a
o 60
<0 E 3 © C
+» •H •«r in vo CO T?
13 60 CO r- in CJ
c 3 C r~ i « © < j\ e- o CO ON
©
a
60 a ©
a.
c
u
a
•rt r-
m
T— r—
o o
© u E £3
■w © © ©
© 2-1 75
C —• —• —■ « w.
® i—(
a '--- o <n <n cn P-
<? 01
2. © fA <n cn VO vO
91 Cu a. r-> <n <n vo vO
O ' •*-t cn cn vO vO
Jtf s
» _ _ .
a: c
-o •M cn <n P-
3 10 > - •
3 © <n <n vO vO
4J a. «n «n cn vO vO
73 ■H cn m cn vo vO
*** •— —• —• v. .
J->
H Q o CM o
-« O o •K «
— 0J » o VO CO a*>
•« © o CM in in tj-
^3 a o c- vO o
•w co
to 2
3 E
; a __ »•
5-» a c
•rl o o O CM c
»
s © o o o O o
•’3 a. o Cvi CD vn ■«■
<E P- O p^
z
— _ ..,
-H
©
C. . , . ,
C o <n
CM m
s s
75

• Hasil analisa data
1. Ketemtan dan k e t e l i t i a n
Keseluruhan h a s i l penentuan ketepatan dan

k e t e l i t i a n penetapan kadar sampel murni dapat d i
l i h a t dalam ta b e l berikut i n i ( ta b el XVII ) , se~
dangkan untuk penetapan kjdnr sediaan kosmetik
adstringent dapat d i l i h a t pada t a b e l X VIII.
Dalam p e n e l it i a n i n i sebagai ukuran d a r i ke
tepatan adalah % kadar yang diperoleh kembali
( % Recovery ) dan analisa data yang digunakan

adalah u j i t satu sampel, Sedangkan sebagai ukur
an d ari k e t e l i t i a n digunakan k o e f is i e n v a r i a s i
( KV ) dan analisa data yang digunakan adalah :

tc. t»0 b. bu bC hL W,
57
c j-H G G G G G G
TO CO cc CO CO CO t\> ro
g u p fn M Jh
co 3 3 3 p
•H ,Mi X Si
-P
•H g G G G G G G G
rH CO co CO a. re CO CO CO
a; •H •H ■H •H •H •H •H •H
■p p P P P •P P -P P
•H •H •H •rH •H •<-l •H ■H
rH rH rH rH rH i— 1 rH
Q> 0) a; CU a; 1) OJ
■P P P -p P p P •P
a; <D CU 1/ GJ 4J (D
S*J fed « «
cR «J>J <0 to O VD ON r-
CO f Ln r- o
» •
• * «. *.
(X CJN *— kn uj cc f<N
u > T— T— t— r- CM ■r-
cc
*d
03
G g
co CO M X X X
ft • ■p •H •rH •H •H •rH •H •H •rH
CO •H CO 00 CO OS CO CO CO CC CO
p G p. ,n ,a 
V
—t CO E 10 P p p p p p p ■P
> CU CO CO C a; a> c A/ Q, o C
X ,G (0 « bti bd X Nd
i-1 C h
0> cn A3 ,— N
•r-l ,--4
tv P CD at
e-i •H rO
CL> rH
+-» O >> CO O VJ r-- O fo in
flj CO
U • > « « •> » « »>
a a> e' LT\ to CM LT\ LA t\J o
a > er* O'' cr> 0^ ON CO cn
G •H o
(9 C o
■o <D
c «
G co
d TJ
P
CO c c l_P U"\ ON U\ lp. ir> lT v UN
a •H

a> fH O JO <L O £3
p 4J JC CO P € £
CO P P u CO P -P
ll J* G CO * G CO
•a <L) •*-t ft rH ft <L> •H ft rH ft
o CO o Cl o
•p U M G G rH U c G rH
0) CD CO V •H CO CO <LJ •H
XJ -a 1 bo P •cJ '■0 1 WJ P
c g 3 G G
CO CO <f-V u ,Q CO <0 D ,Q
-p •p p •P
CO CO 1 i 1 CO CO 1 ( 1
c rH
•H o
■p hC CO
(0 CO CO
ft p.
•H
K S5

;>3
be bC bO bO bu bU bO bu
« c G G C c C C
ro cr ro ro ro ro ro ro
Jh U u
£ 3 3 p 3 p p 3
ro ,* id A A A A
•H
•P G G C c c c C C
•H ro ro ro ro CB ro ro ro
rH •H •H ■H •H •<H •H •H •rH
a; ■P ■P P p P P P P
■p •rH •<H •H •H •rH •fH •H •H
u rH rH rH rH ~H rH rH rH
w (U a; QJ P
4) 0) a, 0) <Lr (L> c; <D
'sd « * W
p
c —
o
Si. CT in o X CC vo T—
c L f» C\i cn o O'* VO o o
•H •> » *■ •b »
u <- t— CO 0^ •sj- cn o* c—
-p > T~ r"
TO to w
■d T3
ro CD
A
g 1
c •H ro X A
cc -P ■p ro r* ^ • ro M
ft 0) ro •d •H •H •H •H TJ •H ■H •H •H
 fi x> fi P x» rO
c o +>
c M i g c c c G c c G
1 iT ro ro ro ro ro ro ro
a C P p -p p p p -p •p
OJ rH ro ro ro ro ro ro ro
M rH ro •H ft ft P. ft Q- ft ft ft
M •H •«“< W V a; u tD t; u
rH CJ
CO "D ro •p p •p p p p -p p
> TO d) 3h d) i> o «j t' t> c
£ CQ W « X «
'H G E
(Q ro
fi •rH rH
CO P ro
iH •H •a
rH
0> rH
+» O >> vO K\ C\l U"\ CO in
(D CO • * a» at
J* ro 0) tn CO CN/ C\J V-0 K>
a > CO CO O' 0-> cn cn cn cn
a •H o
ro C o
•d a
c «
g ro
CO T3
p
Cl g
ft •H g in LA tn in LTN LT\ lt\
o b£)
p ro
V ft .. ..
* •H rH rH
C (1 rH ro rH
c ro rH C C ro rH G
(4 g O o G o 1>
4> S-- .G X) XI X3
4. P QJ P ro p 0) -p
T3 ro
W P X3 U CO P x;
O ii G ft ro G ft ro
P a; •*H ro rH ft •<H ro rH ft
t> G O C O
h g rH h c rH
ro ro •H ro ro «; •H
'd XJ 1 b£ -P T3 -d 1 bO -P
c c 3 3 C 3 3
cc (U O ' 4J X) ro ro 4j x»
p p p -p
CO cn 1 1 ;o CO i 1 1
g rH
•H o
*0 CO
-P ro ro
ro ft ft
CO •H •H
85

59
5.2. Perbandingan metode
Hasil u j i F untuk membandingkan % recovery

antsr metode dapat d i l i h a t pada tabel Anava diba
wah i n i .
Tabel XXX
Tabel Anava h a s il penetapan kadar nipagin dalam

sampel murni.
Sumber v a r i a s i DF SS MS Fhitung Ftabel

I
|
Antar metode 3 30, 6 0,24 3,24

03
^
Dalair. metode 16 2075,8 129,7
Total 19 2167,6
Fhitung l e b ih k e c i l dari Ftabel.
Jadi tidak adp perbedaan yang bermakna antar

metode.

60
Tabel XX
Tabel Anava h a s il penetapan kadar nipasol dalam

sampel murni.
Sumber v a r i a s i DF SS MS Fhitung Ftabel
Antar metode 3 515,1 171,7 0,661 3, ?4
Dalam metode 16 4156.4 259,3
Total 19 4673,5
Fhitung l e b ih k e c i l dari Ftabel.
Jadi tidak sda perbedaan yang bermakna antar
metode.

61
Tabel XXI
Tabel Anava h a s il penetapan kadar nipagin dalam

sediaan kosmetik adstringent.
Sumber v a r i a s i uF ss MS Fhitung Ftabel
Antar metode 3 465,3 154,4 2,32 3,24
Dalam metode 16 1062,5 66,4
Total 19 1525,8
Fhitung l e b i h k e c i l dari Ftabel.
Jadi tidak adg perbedaan yang bermakns antsr
metode.

62
Tabel XXII
Tabel Anava h a sil penetapan kadar nipasol dalam

sediaan kosmetik adstringent.
bumber v a r i a s i .OF SS NS Fhitung Ftabel
Antar metode 3 45,8 15,3 0,26 3,24
Dalam metode 16 954,2 59,6
Total 19 1000,0
Fhitung le b ih k e c i l dari Ftabel.
Jadi tidak ada perbedaan yang bermakna antar
metode.

BAB V
PEMBAHASAN
Untuk a n a l i s i s k u a n t i t a t i f dengan menggunakan
kromatografi gas diperlukan adanya za t standar sebagai

pembanding. Dalam percobaan i n i , te lah dilakukan u j i
k u a l i t a t i f terhadap nipagin dan nipasol standar dengan
menggunakan pereaksi-pereaksi kimia yang s p e s i f i k , pe-
nentuan t i t i k lebur dan pengamatan waktu r e t e n s i, Dari
h a s i l yang dip erole h menunjukkan bahwa nipagin dan n i
pasol standar yang digunakan memenuhi syarat sesuai
dengan yang t e r t e r a dalam l i t e r a t u r dan e e r t i f i k a t ana

lisis .
Dalam p e n e litia n i n i k r i t e r i a h a s i l a n a l i s i s ku
a n t i t a t i f adalah ketepatan dan k e t e l i t i a n , Sebagai ukur-

an d a r i ketepatan adalah % kadar yang diperoleh kembali
( % Recovery ) , Hasil penetapan kadar disebut mempunyai
ketepatan yang baik, jika tidak ada perbedaan yang ber
makna pada harga <£ tertentu antara harga yang dianggap
benar dengan kadar yang diperoleh kembali. Adapun seba-
^ i ukuran dari k e t e l i t i a n digunakan k o e f i s i e n v a r i a s i
( KV ) # Metode penetapan kadar dianggap mempunyai ke
t e l i t i a n yang baik jika KV leb ih k e c i l dari 3 %. ( 10 )
Untuk penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam
sampel murni ternyata untuk penetapan kadar nipagin dan

nipasol dengan teknik standar eksternal menunjukkan

ketepatan yang baik, karena s e te la h melalui u j i t satu

sampel ternyata tidak ada perbedaan yang bermakna pada
= 0 , 0 5 antara harga yang dianggap benar ( 100 % )
dengan kadar yang diperoleh kembali, Adapun k e t e l i t i a n
nya adalah kurang baik. dimana harga KV lebih besar
d a r i 3 %• ( l i h a t tab el XVII )
Pada penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam
sampel murni dengan standar i n t e r n a l ^ - napthol, euge
no l dan b u t i l paraben hasilnya adalah sebagai berikut :
kadar nipagin dan nipasol dalam campuran dengan ketiga
macam standar i n t e r n a l tersebut ternyata menunjukkan

ketepatan yang baik, karena tidak ada perbedaan yang
bermakna pada X = 0 , 0 5 antara harga yang dianggap benar

( 100 % ) dan kadar yang diperoleh kembali, dan k e t e l i
t i a n untuk penetapan kadar nipagin dan nipasol dengan
ketiga macam standar i n t e r n a l tersebut kurang baik ,

karena diperoleh harga KV yang lebih besar dari 3 %•
( l i h a t ta b e l XVII ).
Untuk penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam

sediaan kosmetik dengan teknik standar eksternal dipe
r ole h h a s i l sebagai berikut ; > Recovery nipagin dan
nipasol mempunyai ketepatan dan k e t e l i t i a n yang kurang
baik, karena terdapat perbedaan yang bermakna pada JL =
0 , 0 5 antara harga yang dianggap benar ( 100 % ) dan
kadar yang d ip eroleh kembali. Harga KV yang diperoleh
le b ih besar dar i 3 %• ( l i h a t tabel XVII )

65
Pada teknik standar i n t e r n a l dengan ketiga macam
standar i n t e r n a l yang digunakan tersebut memberikan ke

tepatan yang baik, t e t a p i untuk k e te litian n ya kurang
baik, karena harga KV lebih besar dar i 3 ( lihat
ta b e l X V III )
Dari h a s i l percobaan yang diperoleh, ternyata
untuk penetapan kadar nipagin dan nipasol, baik dalam
sampel murni maupun sediaan kosmetik a&stringent dengan
teknik standar ekst ernal dan standar i n t e r n a l nap
t h o l , eugenol dan b u t i l paraben mempunyai k e t e l i t i a n
yang kurang baik. Hal i n i kemungkinan disebabkan karena
v a r i a s i volume penginjeksian. Dalam l i t e r a t u r disebut-

kan bahwa kesalahan karena v e r i a s i volume pengin jeksian
dapat mencapai 5 - 1 0 %, ( 10 )
Dari h a s i l percobaan dan analisa data ternyata
bahwa metode standar eksternal dan metode standar i n t e r

nal tidak ada perbedaan % Recovery.

66
BAB VI
KESIMPULAiJ DAN SARAN
Berdasarkan h a s i l percobaan dan analisa data dari

h a s i l p e n e li t ia n yang telah dilakukan i n i dapat disim-
pulkan ha l-hal sebagai berikut :
1* Metode penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam sam

pel murni dengan metode kromatografi gas melalui te k
nik standar eksternal dan standar i n t e r n a l ^ - nap

t h o l , eugenol dan b u t i l paraben ternyata mempunyai
ketepatan yang baik, t e t a p i k ete litiann ya kurang ba
ik.
2. Pada penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam s e d i a
an kosmetik adstringent dengan metode kromatografi

&s melalui teknik standar eksternal mempunyai ke te
patan dan k e t e l i t i a n yang kurang baik; sedangkan de
ngan teknik standar i n t e r n a l (j> - napthol, eugenol
dan b u t i l paraben mempunyai ketepatan yang baik ,
t e t a p i k e te litia n n y a kurang baik.

Berdasarkan h a s i l - h a s i l p e n e li t i a n i n i disaran-
kan untuk dilakukan p e n e l i t ia n lebih lanjut untuk pene
tapan kadar dengan menggunakan standar i n t e r n a l yang

la i n * Juga disarankan untuk digunakan pada sediaan kos
metik yang l a i n , makanan-minuman dan sediaan-sediaan
farmasi.

63
RINGKASAN
Telah dilakukan p e n e litia n " Penggunaan metode
kromatografi untuk a n a li s is k u a n t i t a t i f nipagin dan

nipasol dalam campuran ".
Dalam p e n e l it i a n digunakan kromatografi gas yang

dilengkapi dengan kolom OV - 101 dan i n t e g r a t o r Hewlett
Packard model 3390 A.
Dari hasi percobaan dan analisa data ternyata

bahwa : metode penetapan kadar nipagin dan nipasol da
lam sampel murni dengan metode kromatografi gas melalui
teknik standar eksternal dan standar i n t e r n a l ^ - nap
t h o l , eugenol dan b u t i l paraben ternyata mempunyai ke
tepatan yang baik, t e t a p i k e te litia n n y a kurang baik ;
sedangkan pada penetapan kadar nipagin dan nipasol da
lam sediaan kosmetik adstringent dengan metode kromato
g r a f i gas melalui teknik standar eksternal mempunyai
ketepatan dan k e t e l i t i a n yang kurang baik, sedangkan
dengan teknik standar i n t e r n a l £>- napthol, eugenol dan
b u t i l paraben mempunyai ketepatan yang baik, ttrtapi ke
t e l it i a n n y a kurang baik.
Adapun data yang diperoleh adalah sebagai berikut :
untuk penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam sampel
murni dengan teknik standar eksternal menunjukkan ke
tepatan yang baik, t e t a p i k etelitiann ya kurang baik
( recovery untuk nipagin 97*8 %, dan untuk nipasol 95>0 %

69
sedangkan k o e f i s i e n v a r i a s i untuk nipagin 12,81 % dan

untuk nipasol 17,17 % ).
Pada penetapan kadar nipagin dan nipasol d^.Iam

sampel raurni dengan teknik standar in t e r n a l p - napthol
manunjukkan ketepatan yang baik, t e t a p i k e te litia n n y a
kurang baik ( recovery untuk nipagin 95,0 % dan untuk
nipas ol 9 5 , 3 % f sedangkan k o e f i s i e n v a r i a s i untuk nipa
gin 9,68 % dan untuk nipasol & , % % ) . Untuk teknik
standar i n t e r n a l eugenol memmjukkan ketepatan yang baik
t e t a p i k ete litia nn ya kurang baik ( recovery untuk nipa
gin 93,2 % dan untuk nipasol 82,7 sedangkan k o e f i s i
en v a r i a s i untuk nipagin 11,96 % dan untuk nipasol
28,79 % ) . Untuk teknik standar i n t e r n a l b u t i l paraben
menunjukkan ketepatan yang baik, t e t a p i k e te litia n n y a
kurang baik ( recovery untuk nipagin 92,1 % dan untuk
nipasol 9 0 , 5 %% sedangkan k o e f i e i e n v a r i a s i untuk nipa
gin 1 3 ,4 5 % dan untuk nipasol 1 3 *0 ? % )•

sediaan kosmetik adstringent dengan teknik standar eks-
te r n a l niempunyai ketepatan dan k e t e l i t i a n yang kurang
baik ( recovery untuk nipagin 85»6 % dan untuk nipas ol
92,8 #, sedangkan k o e f ie i e n v a r i a s i untuk nipagin 4,59 %
dan untuk nipasol 4*98 % ) .

sediaan kosmetik adstringent deng*n teknik standar i n
te r n a l ^ - napthol menunjukkan ketepatan yang baik, t e
ta p i kete litiannya kurang baik ( recovery untuk nipagin

8 9 ,3 % dan u n t u k n i p a s o l 9 2 ,5 %, se d a n g k a n k o e f i s i e n
v a r i a s i u n t u k n ip a g in 1 1 , 2 5 % dan u n t u k n i p a s o l 9 ,6 8 % )
U n tu k t e k n ik s t a n d a r i n t e r n a l e u g e n o l m e n u n ju k k a n k e -
t e p a t a n y a n g b a i k , t e t a p i k e t e l i t i a n n y a k u ra n g b a ik
( r e c o v e r y u n t u k n ip a g in 98*2 % d a n u n t u k n i p a s o l 9 6 ,3 %
s e d a n g k a n k o e f i s i e n v a r i a s i u n t u k n ip a g in 8 ,9 0 % d a n u n
t u k n i p a s o l 1 0 ,0 6 % ) . U n tu k t e k n ik s t a n d a r i n t e r n a l
b u t i l p a ra b e n m e n u n ju k k a n k e t e p a t a n y a n g b a i k , t e t a p i
k e t e l i t i a n n y a k u ra n g b a ik ( r e c o v e r y u n t u k n ip a g in
9 4 ,5 % d a n u n t u k n i p a s o l 9 3 , ^ % t s e d a n g k a n k o e f i s i e n
v a r i a s i u n t u k n ip a g in 9 , 0 4 % dan u n t u k n i p a s o l 7 , 0 1 % ) .

71
BAB. V II
DAFTAR PUSlAKA
1. Aalto, T #R* , e t . a l . ; August. 1953 > p- hydroxy benzoic

acid esters as p re s e rv ative ; J . o f The American Phar
maceutic a l A s s o c ia tio n : v o l . X I I : p. 44 9 - 456.
2. Lawrence, C a r l . A . , Block, Seymor.S. ; 1968; Desinfec-
t &TU S t e r i l i z a t i o n and P r e s e r v a t i v e ; Lea and Febiger;
Philadelphia; p. 421-422, 559-560, 569-570, 637-638.
3. Anonym; 1973; B r i t is h Pharmaceutical Codex: The Phar
maceutical Press; London; p. 305* 413*
4. Martindale. The Extra Pharmacopoeia; 28 t h . e d i t i o n ;
The Pharmaceutical Press; London; 1982; p. 5-287,
1290 .
5. Donato, Sam Joseph; June 1965> Separation and Estima
tio n o f Methyl and p r o p i l esters o f p- hydroxy benzo
i c acid by Gas Chromatography; J. Pharm.Sci: v o l . bk :
p. 917 - 918.
6 . Batchelder, Martin, e t . a l . ; Feb. 1972; Chromatographic
Separation and Determination o f Methyl p- hydroxy
benzoate; J.Pharm.Sci: v o l . £1; p. 252 - 253*
7. Lach, J .L. and Sawardeker, J . S . ; March 1965; Rapid
Method f o r The Determination o f Mixtures o f p- hydro
xy benzoate esters by Gas Chromatography; i
v o l. 5k; p. 424 - 426.

72
8 . Anonym; 1975; The_„Unite_d States Pharmacopeia; 19 th;

Mack Publishing Company; Easton; p. 621-622, 561, 568*
9. Hopp, Eva; Assay o f Parabens in Aqueous Solution by
Gas Liquid Chromatography; 1978; Medd.Norsk.Farq.
Selsk; v o l . p. 153 - 157.
10. Skoog, Douglas*A. and West, Donald.M.; i960; P r i n c i
ples o f Instrumental A n a ly s is : second e d iti o n ; Saun
ders College Philad elphia; Holt Saunders Japan Tokyo;
p. 683, 727.
11. Departemen Kesehatan Republik Indonesia; 1979; Farmn-
kope Indonesia: e d i s i I I I ; Jakarta; p. 378, 535* 784 -

786.
12* Departemen Kesehatan Republik Indonesia; 1979; Kodaks
Makanan Indonesia tentang Bahan Tambah^.n Makanan; Ja
karta; p. 284 - 409 .

13. The Merck Ind ex: 9 t h , e d i t i o n ; Merck and Co., Inc;
U.S.A.; 1976; p. 5972, 7655.

14. M.Jay, James; 1978; Modern Food M ic ro bio log y : second
e d iti o n ; D.Van Nostrand Comp.; New York; p, 163 - 165.
15. F r a z ie r , W.C.; 1958; Food M ic ro bio lo g y : Mc.Graw H i l l
Publishing Comp., L t d . ; New York; p. 137.
16. Jacob, Moris.B. Ph.D.; 1962; The Chemical Analysis o f
Foods and Food Products; third e d it i o n ; D.Van Nostrand
Comp., I n c . ; Princenton, New Yersey; p. 168 - 169.

17. Pearson, David; 1970; The Chemical Analysis o f Foods;
s ix th e d iti o n ; Chemical Publishing Comp., Inc; New-
York; p* 36 - 37.

73
18, Clark, E.G.C,(Ed); 1971; I s o l a t i o n and I d e n t i f i c a t i o n
o f Drugs in Pharmaceuticals, body f l u id s and -post

mortem m a t e r i a l : The Pharmaceutical Press; London;
P. 59 - 83.
19, Pecsok, e t . a l . : Modern Method o f Chemical A n a l y s i s ;
second e d iti o n ; John W ille y and Sons; New York; p.
85 - 106.
20, W illa r d , Hobart, e t . a l . : Instrumental Method o f Ana
l y s i s : s i x t h e d i t i o n ; The Mac Millan Comp,; London;
p, 1078'1095.
21, I . K . K o l t o o f f , et._al. ; Quantitative _ChemleaI A n a l y s i s :

fourth e d i tio n ; The Mac Millan Comp,; C o l l e r Mac
Millan Limited London; p. 1076 - 1079.
22, Heftman, Erich; Chromatographic A Laboratc> ryHandbook
o f Chromatographic and Ele ctro phoretic Method: th ird
e d i t i o n ; Van Nostrand Peinhold Comp.; New York; p.
189 - 226,
25. Daniel, Wayne.Vi.; 1978; B i o s t a t i s t i c s A Foundation
f o r Analysis in The Health Sciences: second e d iti o n ;
John Wiley and Sons; New York, Chichester, Brisbane,
Toronto; p. 170.

7k
Gambar 1 : Kromatogram nipagin dengan standar e k eter-

nal dengan berbagai konsentrasi.

75
Gambar 2 ; Kromatogram nipasol dengan etandar e x t e r

nal dengan berbagai konsentrasi.

76
X r<.£.'-a*?1.y.
u* .5
s ta n d a r
V,
.V *7*— «,
u1 , ~
r \ i/&j roj\
O' .s. .5 .
C o. ■»- .»
f- Y-1"
u*1j *
^ ~
ft/01.
&
•z1I1~
SSQSi
8
«V ►— vg f*v <.j
«Z Ctf • • .
m a* — ctj
<
sr.rs
ce* —:
' —4<’ 4
uj X > il
&:Ss?e&
« V
fXJ
'l'•*
X'I»
~
a 6j
Gambar 3 : Kromatogram nipagin dan nipasol c

iala
msampel
murni dengan metode standar eksternal.

77
s ta n d a r
s ta n d a r
Gambar k : Kroraatogram nipagin dan nipasol dalam

eksternal

75
Ui v l rt '
C*
in CSJ
%?bf
s*£
%•*?$
V<J
f •£ i > v.
>r. a
*■ s.*
t.. r t~>i *
•£ . *
+> ■*• '
>■
L. it- iV
- (t-S c« ■.*
■-
r »■? fjrN e
2ESS
? 5'*•—
s X — —
\T r t
co
6. ft OCa > £§££
*• ♦
5
•J- ft:*: 5. 2S58
"ti3» f>'.«-T'— * * A. f>
- W2K
r-- — •t>
w
.*r t- f< J- «“■ jv
*1 *r 1 CK
yj •» -* 'y S
Si
Gambar 5 : Kromatogram nipapin dengan stanaar internal
napthol denppn berbapai konsentrasi.

79
Gambar 6 : Kromatogram nipasol dengan standar internal
a- napthol aengan berbagai konsentrasi.

80
r c.;
ft
n a »:<■ a*
r o*'. *
. .p *
x i* *
a. X ’■£ V •
s ta n d a r
ixS.f**>*5*—«•
IJJ ,*•»
s ^ x»
ul X > •*-
a . 4aj vj :«• >
:- <.■> :■«• '•* ►-
5i||g
-5&sl
«*> — ^
,v a . — r> cu
i l ^c*t* r*»
«r *•■» <5*
*•*
a •:*? -a* -* X
«a:tv? ■f
UJ -S' - • • *
S•?.*•—*■■
* ■ * r » •■- * j
x s* »*. S'
•2 r s i s .
l-J .r* '7> L
laJ + X ' C >•
" - > ■ J >V
y; •=■
Gambar 7 Kromatogram nipagin u^n nipasol dalam sampel

murni Ueng.an metode stanaar internal nap
th ol*

81
. V c , a> r*. vj
<x c? o j 10 <.j
w v r\ ▼ r-v
a r>. *• » 'X‘
uj « . to *r in
cc + — * if. S- Cm.
11 UJ W ;.C CL CO Ci!( > I
is f-i ^S' * >- CO h- I
»- —
s ta n d a r
<£ 11/ CO ‘>£i

*3fO<0
V
v . I Oi •—
.*
; - i,-, « . (ij
«x a ■• » rv <••■
iu co r - i'V *■
• *r »£. •» ('j
iK ji- m
u:jviaiW
a ■■ '^
i- .5> « ' ■*■
r-
x•£•fv®®
T.
<1 .S' • » = ' 'S'
LU j£l CO l‘*•
& . CXl t f l « 5 CO
5 - trt ! ~
UJ * V i * r '• >
^ -f .5% f f i —■
« V r != ^ S 5
ix r- -I- oc- •*.
s ta n d a r
U1 «• 'X. >■> .£
i -r .2. W ifc
" I ILJ — Cl U‘
'■2> (■:■ —i m
— « •?. r -. — K j i--. OJ
|— oJ C*' “ O'
‘XC
E •_•
Gambar 8 : Kromatogram nipagin dan nipasol dalam

in te r n a l f - napthol.

32
•V • *
<z I T K»
Lu •£>C*? *-•
~
Ox
CM
~ *
r- is
r. o: 5;
M i v . p.
U J 31 > J*
i . c l 0 5 C«*
*- (,*<*- i-
cc a « • J ’,
•z f-s co \:t
i•'•jSCufi v ~.
u ; &< k£< f ,
x «• <\j o,
CCi Lu o •»>
——
•X. CO
<rr —c*
» I-'
.■>• r— I—. -V
• I C; <1 U •
£ \ £
u iC O > U
Cu o. co ;>■
<irs«•®
u i 'X' ••; rs
^ f Q\ -m A' ^ CO *<>
• t'iw c vi I ' n
Uv —* 0? X »
CO
r - ■* i/> ^
s : c :« <r
s » -Si ~
°V
iu 7 Ja
wC l. c* ;►
K- H
C£ r\ <!• f>V
- i rs * ® ^ < x m\ :*••
CjC •* f**/ —
« uj
r$K?
f* cv —
<j5
'•’i »
f'V
.V
-X d ' < . '
Gambar 9 : Kromatogram nipagin dengan standar internal

eugenol dengan berbagai konsentrasi.

83
. V tt* ’-0 'C

<t 0 ^ 1 v?
U< IT, © I'
. i l I'd Cu l »
ft. a. i .
5^ m f— l-
<r r- ■*■5.-' <x rs «■ it.

U J is . \ f i .J,
ui .x. ••; a. Cl.' + IT> i n
■&«-</) •*'
<C •?■>IQ r t l u ’ ■•> 9 , CO
iN w «•
<?!$&! in l<5 —
» *• L*- « ^ C.J
.v t~ ?u *r •?. ■ I— ftj ■«- C*i
< liZ
« ed • •
uj a- — oj
<X U-< K"' '7 1

i n r-s - < * '
1<0—
■© t Sf W *'
->s £O'.,<^5 , C<
_
Ot ■ ■
<X .*> .I> S>
S.V&F.
' ® C >'J UJ U i i* 05
SrfeJS3-
u lX t t ^
n. a . co l\. * m f s .
> • v"j i - ►
— C. W '
r-s ut
: lu r% <o
F5« v « . r s u">
fs‘ r- >\J f ffi
« Crt • - •
IU i£ i •” OJ
CM Vs .
-~4- JS
Gambsr 10 : Kromatogram nipasol dengan standar internal
eugenol dengan berbcgai konsentrasi.

s ta n d a r
84
Gambar 11 : Krom atogram n ip a g in dan n i p a s o l dalam sam

p e l m u rn i dengan metode s t a n d a r i n t e r n a l
e u g e n o l.

35
.'<• — eg
* x OJ — OJ •>
Lu — IT1 V ' to
•V
« f N '7 . CO IT,
uj (•-! o . « rs.
at ■ . • .
If S 'S © <*•
I/O TO f> '.i'
T. f ' rs £ i
cm
\ .» ® &■ —
I S' S' «■ <s>
s,
ui a: a. ;»■ a.
a. a. oi cv > 1 'S ' 'S ' S '
ov i— *• i—
UJ * Q . CL >
<X rs <s> * iv
s ta n d a r
uj * in * '®
ic t v t S
»•> CN
— lil
— fO
—.
ir>» « * m
•V I— O J — U> 0.
• so : - •
uj * — —
P
f*Vrs •?-. —
<£ — C i ftl
uj — ir- r . ir>
:£'s"
U i Tv v f v —•
v*C ‘
<1 l \ * 'Si —
r - 'i a- ^
2: f ' e* O',oj
s * o * “
Cm.
X .* •* .S'
r- r-. r r '1'•'<
X I O ' .7". OJ
u j x :*-:■• fc- V « i i .* —
o. co cc. :»• i-
>■ <Si>-•>-»-

a. a. m o. o.
>- tft r- ►- v-
<r rs «r. ® «•
« t Hnt
U iX i(o « n
standar
’■**58
ir> rv ifi v
<itt
;•«• f - o j — m ff-i
Gambar 12 : Kromatogram nipagin dan nipasol dalam

in te r n a l eugenol.

86
!Z. 3 • » ( « • ! •
UJ —•IT' S'fi-'
Ct • • •
<r<:■:>■£'«■ —
f~ '5' U*J —
<? .S' ;
l. i-1 Cii :►
LU i l l >
%-<s>>->-
» - 4-
sr ,-s «• .-j y
uj ■' — r<
&: + t io
•CO IT;
• V •*• CO i > « r
< t 05 r N o . —
Ui O J « ' O.'
& £ • • • •
T CC * • <£' —
.V * n c . ■ ? , « .
c w v e *-
.-■r 'X' — c j o j fx * 3 , oj
<r in f-v •- a: « • «■ c> —
UJ "ai — »M
c.
£«'■?. A
s. * 1 ) ~
'•.
( * : ■ ■ ■ ■
a •» x> s>-x.
C**■■*fi
S W ^ fN
t*J CO * • O j I
35
a. &. (ft > i
>. 1--
•«. • » 03 —
u•*>i
UL f f >£> a .
tuceaa ■x < * *•-• -J>
OJ
O . 63 M CL
y- t ?•. <vi -S’
fj n C-i
Ti
.u t . t-v ?-5 Cl
ct * j i«. J .
uj -s. n
Cik * %**s*
Su; •*)
S ', ( V
<Z u j ir , >s) J-.
fS Ij-> — C'.'
■s«
, r->
V u» u ! ®
f , — Oj
>- >'u V <•.!
~ — f'>^
V
Gambar 13 : Kromatogram nipagin dengan standar internal
butil paraben dengan berbagai konsentrasi-

87
♦V W"> C*J V
<z ~ c •Ou w
2
<x*&,v
is>-:■>
oa
*>rs
U. L-j f"*. il* n —
<r « .* •=.' —
C —' « r\ ■*
a : co — r <* §!. f'.J^ '"l:i".'
*; *™
c: -S' s.
! •’* sc .
* •» -S' ‘ff.
lU X' Cu > (u
£t. - - tti f - Ii-
uj x a. :■-
i. C £»asiX!■- «
> O v- K- •— jiT!£?*“ “
« X r \ v> *s» *S'
n. fs c> © <s,
..j •*■ r*-> .7-. •:•• ui ® i7. r-,
*r c\ r's — ct -r — oj r»
■* tu — i.o *• '5 it r*> r \ in
<:w tr.
Oi
»S> — »V r»>
.'• l/V O J f<J

•r ff. .r. rx f>
Ul l/l * f-J —
tc . . . .
•X CO ’S ' S ' ~
P5 «• c . v
T. — 'T W
X CO — # fv
s. ,r. *- -« uj re. i . ft. ic>
it « . . . w . CL. M Cu Cl.
x *i X' *x* ^ s - *• . V -
ixrs ’j? ® -S'

ui ;a <s> i i <
L'. iXt C/i iii I
:- o' j*—
afsls:
<1 IN Cy «• *.
i« w
i 5':-.f irt.t'
■»'tfi-C
uj ix< *
u: — »r
r f !•■>
r ^ i'. f*> rr»
.v h* co
*X CtC
u* - -.fo
OJ
v <X .V
u j
f'-, 1 0 u*< t 'f
.'-• f - O J '"jj f V C ii
• • ■ •
« • — o j f->
" 7 Vii v . |
Gam'bsr 14 : Kromatogram nipasol dengan standar internal
butil paraben denggn berbagai konsentrasi.

9 , >\J ■} ,
<1 1.0 a . —
■_K If. (-• — CO
r— <0 *•
X <•*> 'T,
* Si
j J £ 0 <j- > -
■X. il, CO L . >■
.3 s . >- i-
* ?!'.o or
s ta n d a r
,-.J — »«1
Gambar 15 : Kromstogrsm nipagin uan nipasol dalam sam

pel rnurni aengan metode atandar interna l
butil paraben.

89
•v «t\ in in —
<2 Tv *7*. —
uj k ,
.S’ — ♦ •S' V
u iw•» ojv
« i r\ o j
r \ o-.
x n rs, ro *1
s. * «x» — C'J
tr ’S ' r > ■?»

7 . v <■'. OJ MJ
\ is. c& », —
C
- «iI «3»•'X'- - .j.-
<r rv *< r* a-
*6* I • •& • »
n uj
U lt t L O .
a. co co CD ci.
> Oi >- >- s-
i i iî r*\
s ta n d a r
«■: •*• od ~t i>S

l W p M ‘5.
r*> TO V 171
*v k-
•X tv
«
Cl
<t a.-
<-J-• '.■•I IJ5
s
•r*'.- .■ •:•;>mj - i
L-sS&KgjS
> . V ' O '? < — r ij
*X 1 . -t- *. i.
* f> •„ _• '.fr
id S. ro ; c
■••.; t- r , .;• -v
r 'i.Jf U-r T v->
{•-, :
.» r . *••
cit -iS C — T'
s ta n d a r
<v - r -V <•- X' V
Gambar 16 : Kroma togram nipagin dan nipasol dalam

in te r n a l b u t i l paraben.

90
LAJtfPIRAN I
Uji korelasi (r) antsra konaentrasi dan lua3 puncak kroma
g r a m nipagin dengan metode standar eksternal.
IK o n s e n t r a s i! L u ss puncak! 1 I
No. ! ( x ) ! K ro m ato g ram ! (x - 5 ) 2 ! (y - y ) 2 ! (x-- x ) ( y - y )

i ; ( y ) \ 1 J
1. ' 101,0 ! 0,009 ! 179945,6414,356.10“ 3 27,997

2. ! 2f;2,5 ! 0,029 ! .74365, 2 9 ’ 2 , 1 16.10-3 12,544
1
O
O
O
'3*
505,0 !
V
!
,nT
0,063 ! 0,242
4. ! 757,5 ! 0,113 ! 53963,29 ! 1,444.10“ ? 8,027
5. ! 1010,0 ! 0,161 ! 235031,04 ! 7 ,39 6 .10“ 3 41,693
! I = 2626 ! L = 0,375 ! 543713,3 10,015456 ! 91,303

! x = 525,2 ! y = 0,075 ' t 1
T
T =
t _(____
x _- x ) ( .v - y ) 91,303. _ ^ ,996
31,6'71
Î (x - x ) ^ . l{y - y )'" .
b = Z (X - . 21a1Q 2 * 1 ,6 7 9 .1 0 " 4
i( x - x ) ? 5 4 3 7 1 3 ,3
y - y = ^ ( X - X )
V = 1 , 6 7 9 . 10‘ 4 X - 0,013
Ilorga r t a b e l pada = 0,05 dan d,£ = 5 ~ 2 adalah.

0,R78. Kerf,a r hitu.n^ adalah 0,996 b e r a r t i r hitung le-

91
bih besar d a r i r ta b o l . Jadi dapat disinpulkan ada kore
l a s i l i n i e r antara koncontraoi dan luns puncak krona to -

gram.

92
LA j.J>IRA1? II
Uji korelnsi (r) nnt^rn konacn1;mai dan luas puncak krona
fcocr«m ni oorjol dcnvon netodo ottind*r o internal.
Konsentrani! i,unn ouncok!

lio. ( x ) Kro *ot o^rcm , (x - x ) 2 ! (y - y ) 2 , ( x - x ) ( y - y )
i ( y ) ! ! !
1. 105,4 ! 0,008 195965,582!3,025.10~^ 24,347

2. 263,5 ! 0,024 80905,776! 1 ,5?1. 10"-3 11,099
3. 527,0 ! 0,057 444,36613.6.10~5 ! 0,126
4. 790,5 ! 0,094 58767,456 r9,61.10- 4 ! 7,515
5. 1054,0 ! 0,133 255955,046!4,9.10~3 ! 35,414
1 = 2740,4 ! L = 0,316 59? 11 a , 326! 0,01 0443 ’• 78,501

x = 548,08! y - 0 , 0, 06 3 ! ! !
£ (x — x) (v - .y) = 78,501
r a 0,998
78,^35
1 (x - x ) 2 . £ (;/ - y ) 2
D =
£ (x - x ) (y - y ) _ 73,501_____ =. 1,326.10 -4
£ C* - 5 c )2 “ 5921 1 3 ,2 2 6
y - y * b(x - x)
y B 1,326 .10“ 4 x - 9,675 .10“ 3
ifnrâ r t o b e l nndo .£ = 0,05 don d . f = 5 - 2 adalah
0,870.

93
Harga r hitung adalah 0,993 b e r a r t i r hitung l e b i h besar
d a r i r t a b e l , Jadi dapat disimpullcon ada k o r e l a s i l i n i e r
antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram.

9k
LAMPIRA1J III
U ji k o r e l a s i ( r ) antaro konsentrasi don luas puncak kroma

togram nipe3ol dengan rnetode standar i n t e r n a l £ - napthol
! K on 9entr ooi!Perbandingnn ! ! 1
No • ! ( x ) !Luns puncak , (x - x ) 2 , (y - y ) 2 , ( x - x ) ( y - y )
t ( y ) ! \ \
1.! 51,5 j 0,022 !467 85,6910,018 ! 28,768

2. ! 128,8 ; 0, 066 ! 19321,0 ! 7,9? 1. 10~? 12,371
3 .! 257,5 1 0,151 ! 106,09! 1 , 6 . 10-5 ! 0,041
4.! 386,2 t 0,222 ! 14018,5614,489.10"? 7,933
5.'- 515,0 1 0,315 ! 61107,8410,036 ! 39,552
! 1 =1339 ! £ = 0,776 ! 141339, 18!0,O'j,<,426 ! 8 8 , 665

!x =267,8 ! y * 0,155 ! ! !
r = 1 (x._- 88_, 663. = 0,993

89,304
i (-/. - X)2 . £ (,v - .y) 2
-4
= 6,273 . 10
£ (x - x ) 2 141339,18
y - y = b (x - x )
ty = 6,273 . 10“ AX- 0,013

Horr.n r tobol podn 0,05 dan d . f 3 5 “ 2 adalah
0,378. llnr.ô r i.i.bunr. odflloh 0,993 b nrorti r hitung i e-

95
b ih b e s a r d a r i r t a b e l. Jadi d e p a t d ia im p u lk a n a d a k o r e l a
s i l i n i e r a n t a r a k o n s e n t r Q 3i d a n l u a s p u n c a k k ro m a to g ra m .

96
LAMPIRAN IV
Uji korelasi (r) nntara konsentrasj. dan luas puncak kroma
toaram nioasol denron. roetode s bandar internal ^- napthol
IKonsentrasi Perbandingsn! j t
Ho. ! ( x ) Lues puncak ! ( x - x ) 2 ! (y - y ) 2 ! ( x - x ) ( y - y )

i ( y ) 5 i
1. '• 51,2 0,035 ! 46225,0 10,017 ! 27,735

2. 0,072 ! 19099,24 !B,A.'/l , 10- 3 ! 12,714
3- ! 256,0 0,130 ! 104,04 '■(>,76. 10-4 ! 0,265

A. ! 384,0 0,243 ! 13876,8416,241.10- 3 ! 9,306
5. I 512,0 0,332 ! 60417,64 10,028 ! 41,294
! I =1331,2 I = 0,82 ! 139722,76'.0,060381 ! 91,314
( x = 266,2 y = 0,164 ! 1 1
j ,(x - x ) (.v - y ) = o,994

r *
91,851
>. (x -■ x ) 2 . 1 (y - y ) 2
* * (x - x ) ( y - y) - s 6,535 - 10"4
b *
139722,76
£ (x - x ) 2
y - y * b ( x - x )
y * 6 ,5 3 ? . io * 4 x - 9 ,9 6 ? . 10~3
Hor^s r t a b e l psda ^ = 0,05 dan d . f * 5 - 2 a d a ls h
0,878.

97
Harga r hitunc adalah 0,994 b e r a r t i r hitung l e b i h besar
dar i r t a b e l . Jadi dapat disirvtpulkan ada k o r e l a s i l i n i e r
antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram.

98
LAMPIRAN V
Uji korelasi (r) antara konsentrasi dan luas puncak kroma-
top.ram nipafcin dengan rnetode standar internal eugenol*
! Konsentrasi Verbandingan r i t
I\To. ! ( x ) !Luas puncak ! (x - x ) 2 ! (y - y ) 2 ! ( x - x ) ( y - y )

■ ! Cy ) i J I
1. ! 51,5 ! 0,020 ! 46785,69 !0,020 ! 30,498

?• ! 128,8 ! 0,063 ! 19321,0 !9,604.10~3 ! 13,622
3. ! 257,5 ! 0,161 ! • 106,09 ! 0 ! 0

4. ! 336,2 ! 0,237 !14018 ,56 ! 5,776.TO- 3 ! 8,998
5. ! 515,0 ’ 0,324 !61107,84 !0,026 ! 40,294
!£*1339 ! z = 0,805 141339,18 ! 0 , 06138 ! 93,412
!x= 267,8 ! v = 0,161 t I 1
1 (x - x ) (y
r = 1" ..... ..... “ ' - .V) . 93,412 .. ,
142
\f I (x - x)^ . £ ( y - y ) ■
, £ (x - x ) (y - y) 93,412
- = 6.609 . 10~4
t l x - x )2 141339,18
y ~ y = b ( x - x )
y * 6,609 . 10~4 x - 0,016
Harga r t a b e l pads •£ = 0,05 dan d . f * 5 - 2 adalah

0,878. Harâ r hitung adalah 1,003 b e r a r t i r hitung l e b i h

99
besar d a r i r t a b e l. Jadi dapat diaimpulkan ada k o r e l a s i
l i n i e r antara konccntrani dan luaa puncak kromatogram.

1
00
LAUVIRA1I VI
Uji korelo3i (r) antarn koncentraai dan luas puncak krona
tor.roin ni.oasol deriran 'netode 'Uandar internal eugenol.
! Konsentraai ! Porbendin&on! < 1

No. ! ( x ) ! I.ivaa puncak ! (x - x ) 2 ! (y - y ) 2 i ( x - x ) ( y - y )
1 ! ( y ) I T
*
1. J 51,2 j 0,030 ! 46225,0- !0,021 ! 31,39

2. ! 128,0 ; 0,083 ! 19099,2418,649.10- 3 ! 12,853
3. ! . 256,0 1 0,131 ! 104,0416,25.1 0 ' 4 ! 0,255
4. ! 384,0 1 0,257 ! 13076,04!6,561.10- 3 ! 9,542
5. ! 512,0 1 0, 3 6 1 ! 60417,64!0,034 ! 49,473
! I =1331 ,2 i Z = 0,88? ! 139722,7610,071 ! 99,513

! x= 266,2 J 1
! y * 0,176 !
r s I (x - x) (:/_ _-_vJ__________ _ 9J2,ag.J3 s 0 ( 999

77” 99,601
£ (x - x) . £ (;/ - y )
b = s i * . . 11 = = 7 ,1 2 2 . 1 0 "4
I ( x - x )2 139722,76
y - y = b ( x - x )
y = 7,12? . 10"4 x - 0,014

Jla rg a r t o b n l pnda *C a 0,05 dan d . f = 5 - 2 adalah
0,878. Har&o r h i t u ^ n rta la h 0,999 b e r a r t i r hitung l e b i h

101
besar d ari r t a b e l . Jadi dapat disinpulkan ada k o r e l a s i
l i n i e r antara Iconaentroai dan luas puncak kromatogram.

102
LACTIRAU VII
U j i k o r e l a s i ( r ) a n t a r a k o n s e n t r a s i dan l u a s puncak kroma
to g ra m nip ag in d e n g a n n e t o d e s t a n d a r i n t e r n a l b u t i l para-
ben.
'K o n s e n t r a s i ’ P e r b a n d in g a n T
No. t ( x ) 'L u a s p u n c a k ( x - x ) 2 ' (y - y ) 2 (x -x )(y -y )

» t i
( y )
1. t 51,5 t 0,040 46785,69’ 0,039 42,611

2. < 123,8 i 0,108 19321,0 '0,017 17,931
3. 1 257,5 i 0,229 106,09 ' 6 , 4 . 1 0- "’ 0,082
4. < 386,2 t 0,326 14018,5 6 ' 7 , 921.10"3 10,538
5. 1 515,0 i 0,4-83 61107,34'0,06l 60,811
♦ Z = 1339 * £ = 1,186 141339,1 8 ' 0 , 124985 131,973

fX = 267,8 *y = 0,237 t
£ (x x). C = V J ,.i 2 .7.2 = 0,993

132,911
£ (x - x ) 2 . £ (y - y ) 2
b = S (x - x) ( y - y.) = 1.31^ 9 73 = 9 ; 337.io“ 4

£ ( x ~ i)2 U1339.18
y —y = b ( x - x )
y = 9.337.10"4 * - 0,013
H a rg a r t a b e l pad a <L = 0,05 dan d . f = 5 - 2 adalah

103
0,878. Harga r hitung adalah 0,993 b e r a r t i r liitung le -
bih besar dari r t a b e l , Jadi dapat clisimpulkan ada kore-
l a s i l i n i e r antara konsentrasi clan luas puncak kromato -
gram.

10*4
LAMPIRA17 VIII
U j i k o r e l a s i ( r ) antara konsentrasi dan luas puncak kroma
togram n i p a s o l dengan metode standar i n t e r n a l butil para -

ben.
Konsentrasi Perbandingan »
Ho, ( x ) Luas puncak (x - x ) 2? (y - y ) 2 ' ( x - x ) ( y - y )

f
C y )
1. 50,8 0,044 45624,96 T 0,043 * 44,429

2. 127,1 0,114 18851,29' 0,019 1 18,947
1
-p*
3. 254,2 0,240 104,04f 0,122
o
4. 381,4 0,370 13689,0 * 0,014 • 1 13,306
5. 508,5 0,492 59584,81 0,058 1 58,584

t
£ =1322 £ = 1,26 137654,1 f 0,134144 1 135,888

x = 264,4 y = 0,252 i
r = z U - ..1 ) _______________________ = 1 3 5 , 1 8 8 = 0 > g g g
— — 135,986
U (x - x ) 2 . £ (y - y )
b. = £ f r - ■ X . ) ■j y . I = .1 3.5 > 8 8 S _ = 9i857 # 10-4

l ( x - i r 137854,1
y - y = b ( x - x )
y = 9,857 . 10“ 4 x - 8,619 . 10-3
Harga r ta b e l pada = 0,05 dan d . f = 5 - 2 adalah

105
0,878. Harga r hitunc adalah 0,999 b e r a r t i r hitung l e -
bih besar d a r i r t a b e l . Jadi dapat disimpulkan ada kore
l a s i l i n i e r antara konsentrasi dan luas puncak kromato -

gram.

106
LAIJPIfUK IX
Uji t dari kadar rata - rata n ipagin yang d i p e roleh kemba
li dengan ka d a r yang dianggap benar dalam sampel raurni de
ngan rnetode standar ekcternal.
Sampelf Ilipagin da lain fo 1 C x - 5 )2
1. ' 102,8 25,0

2. ' 97,0 0,64
3. 104,8 « 49
4. 1 76,5 453,69
107,8 r 100,0
» x = 400,9 1 = 628,33
T x = 97,0 i
S = [ S.-* .- .* j .2. = (— P-2.Q j.3.3_ a 12,53

\ n - 1 \ 4
t „ .( x = 0 ,3 9 3
3 12,53
t t a b e l pada <£= 0,05 d . f = 5 - 1 adalah 2,776
t hitung l e b i h Icecil dar i t t a b e l 0,05 ( 4 ),

maka Ho diterim a. Jadi tidak ada perbedaan
yang bermak no antara kadar rata - rata yang -
d ip erole h dengan kadar yang dianggap benar.

1
07
LAJ'/lPIRAIT X
Uji t dari ka d a r rata - rata n ipagin yan^ diperoleh kemba
li dengan ka d a r yang dianggap benar da lam sampel munii de
nâ n rnetode standar internal ^ - napthol.
Sampel ' Uipaîn dalam % ( X - x )2
1. ’ 99,0 1 6, 0
2. * 99,4 19,36
3. ’ 97,2 4,84
4. 1 78,7 265,69
5. 1 100,7 32,49
x ;= 475 =338,38
x - 95,0
1 ( - X f .. ,3.3,8j_ 3 8 _ q ( 20
n - 1 4
t = ( X - M ). 'J n
s 9,20
t t a b e l pada X = 0,05 dan a . f = 5 - 1 adalah
2,776.
t hitung lo b ih k e c i l dari t ta b e l 0,05 ( 4 ) ,

maka Ho d it e rim a. Jadi tidak ada perbedaan -
yang bormakna antara kadar rata - rata yang -
d ip e r o le h dengan kadar yang dianggap benar.

108
LAKPIRAIT XI
Uji t dari kadar rata - rata nipagin yang diperoleh kemba
li dengan kadar yang dianggap benar dalam sampel murni de
ngan metode standar internal eugenol.
Sampel 1 ITipngin dalam % 1 ( x - x
1. ' 98,5 ' 28,09

2. * 94,2 1,0
3. ’ 93,5 ' 28,09
4. ' 73,8 376,36
5. ’ 101,2 64,0
t x =466,2 T * 497,54
» X = 93,2 »
S - S.2L-JZ. j . - L . ~ ..4.97.|.5,4 „ -j 1 #-j 5

\ n - 1 ■/ 4
t= ( X - ,u ) . v n _ ( 9 h 2 . - J O O _ . l d 5 =1>366
3 11,15
t ta b el pada d = 0,05 dan d , f = 5 - 1 adalah

2,776.
t hitung l e b i h k e c i l dari t t a b e l 0,05 ( 4 ),
maha Iio d it e rim a. Jadi tidak ada perbedaan -
yang bermakna antara kadar rata - r a ta yang
dip eroleh dengan kadar yang dianggap benar.

109
LAf.IPIRAl-J X II
Uji t dari k a d a r rata - rata nipagin yang diperoleh kera-
bali dengan kadar yang dianggap benar dalnm sampel murni
dengan rnetode standar internal butil poraben.
Sampel jfopsgin dalam % T ( x - x )2
1. 102,3 114,49
2. 88,9 ' 10,24
3. 97,0 9 24,01
4. 72,0 f 404,01
5. 99,8 59,29
x = 460,5 ' » 612,04

x = 92,1 t
3 = /I J L Z - J L - I 2 == j = 12,37
V n - 1 V 4
t * L x " ^ ^n = ( 92,1 - 100 ) . f l ^ 1j43

S " 12,37
t t a b e l pada *£ = 0,05 dan d,f = 5 - 1 adalah 2,776
t hitung l e b i h k e c i l dari t ta b el 0,05 ( 4 )• maka

Ho diterim a. Jadi tidak ada perbedaan yang bermak-
na antara kadar rata - rata yang d ip e r o le h dengan
kadar yang dianggap benar.

1
10
LAi.iPiiMir n il
Uji t dari kadar rata - rata nipasol yang diperoleh kem-
bali dengan kadar yang dianggap benar dalam sampel m u m i
dengan metode standar eksternal.
Sampel ’ Uipa s o l dalam ' ( X - X )2
1. 93,4 2,56
2. 105,3 68,89
3. 67,5 756,25
4. 102,4 54,76
5- 108,5 182,25
x = 475,1 ’ =1064,71
1 X = 95,0
s = X -T . i l l = 16, 31
t = ( x ~ M ).'ln = ( 95,0 - 100 ,,), .,.{ 5 = 0i6f37

S 16, 31
t t a b e l pada = 0,05 dan d . f » 5 - 1 adalah 2 f 776
t hitung l e b i h k e c i l dari t t a b e l 0,05 ( 4 ) , maka

na antara kadar rata - rata yang d ip erole h dengan
kadar .yang dianr;f;ap benar.

Ill
LAj'.iPIItATT XIV
Uji t dari kadar rata - rata nipasol yang diperoleh kem-
bali dengan kadar yang dianggap benar dalam sampel murni
dengan rnetode standar internal <*> - napthol.
Sampel Nipasol dalam % * C x - x )2
1. 94,3 f 1,0
2. 101,8 42,25
3. 81,6 187,69
4. 100,3 25,0
5. 98,5 10,24
x = 476,5 ’ =266,18
x = 95,3 *
s= =8,16
\l 11-1 \j 4
t - ( x — xx ) . -I n = ( 95,3 - 100 ). J 5 _ 1 (250

3 8,16
t t a b e l pada X = 0,05 dan d . f = 5 - 1 adalah 2,776
t hitung l e b il: k e c i l dari t ta b el 0,05 ( 4 ), maka

na antara kadar rata - rata yang d ip erole h dengan

lid
LAJTPIRAM X.V
Uji t dari kadar rata - rata nipasol yang diperoleh kemba
li dengan kadar yan," dianggap benar dalam sampel murni de
ngan metode standar internal eugenol.
Sampel Hipaool dalam % { x - x )2
1. 84,9 4,84
2. 99,7 285,0
3. 42,4 1624,0^
4. 85,5 7,84
5. 101,2 342,25
x =413,7 =2268,02
x = 82,7
S *. I , JL-L l = 12268^02 _ 23,81

\| n - 1 V 4
t * Cj — _L—U1 s ,L„ P? r. I , ."I—1^2,. J./-1.5* ~ 1,628
3 23,81
t ta b e l pada = 0,0? dan d . f == r5 - 1 adalah 2,776

t hitung l e b i h k e c i l dari t ta b e l 0,05 ( 4 ) , maka
Ho diterima. Jadi tidak ada perbedaan yang bermak-
kadar yanr; dianggap benar.

113
LAMPIRAU XVI
Uji t dari k a d a r rata - rata nipasol yang d i p e roleh kemba
li dengan k a d a r yang dianggap benar dalam sampel murni de
ngan rnetode standar internal butil paraben.
Sam pol T J ip a s o l dengan % ( x - x )2
1. 92,4 3,61
2. 96,0 39,69
3. 69,7 432,64
4. 96,0 30,25
5. 97,8 53,29
x = 452,7 559,48
* x = 90,5 •-
s = I ( x _ - ..x ,jj = / 5 52 ,48 m 11t83

\J n - 1 V 4
t - ( x - u ). •' n = ( 90 »5 - 100 )» V' 5 u 1,799

5 11,83
t t a b e l padn = 0,05 dan d . f = 5 - 1 adalah 2,776

t hitung l e b i h k e c i l dar i t ta b e l 0,05 ( 4 )» maka
Ho d it e rim a. Jodi tidak ada perbedaan yang bermak-

114
LAMPIRAN XVII
U ji t d ari kadar ra ta - ra ta nip agin yang d ip e ro le h kemba
li dengan kadar yang dianggap benar dalam sediaan kosme -

t i k ad strin gen t dengan rnetode standar e k s t e m a l.
Sampel 1 nipagin dalam % 1 ( x - x ) 2
1. 1 87,9 5,29
2. ' 89,9 18,49
3. 86,9 1 144
4. 80,0 31,36
5. 83,3 5,29
x = 427,9 • = 61,87
x k 85i 6 1
s = if = ^£1*87 = 3j93
t = L * Z.,R ,8 5>6 = 8,208

S 3,93
t t a b e l pada ■- = 0,05 dan &.f - 5 - 1 adalah 2,776

t hitung l e b i h beaar dari t ta b e l 0,05 ( 4 )> maka
Ho d i t o l a k . Jadi ada perbedaan yang bermakna anta*-
ra kadar rata ~ rata yang dip erole h dengan kadar
yang dianggap benar.

115
LAKPIRAK XVIII
Uai t dari ka d a r rata - rata n ipagin ynng diperoleh kemba
li dengan kadar yan& dian££ap benar dalam sediaan kosme -
tik adstringent dorian metode standar internal ^-napthol
Sampel ITipasin dalan\ % ( x - x )2
1. 105,5 262,44
2. 06,5 7,84
3. 91,6 5,29
4. 30,1 84164
5. 32,7 43,56
x = 446,4 = 403,77
x - 09,3
s = I ( ? ~ x -1- = IQIjII =, 10,05

V n - 1 V 4
t 3 ( x - ju )_,Jn = ( 39,3 - _100 J~5 „ 2,385

S 10,05
t t a b e l pada .4. =* 0,05 dan d . f = 5 - 1 adalah 2,776

t hitunc l e b i h k e c i l dari t ta b e l 0,05 ( 4 ), maka
Ho dite rim a. Jadi tidak ada perbedaan yang bermak-
kadar yang dian^gap benar.

116
LAJ.TPIRAIT XIX
Uji t dari kadar rata - rata n ipagin yang diperoleh kem-
bali dengan ka d a r yang dianggap benar dalam sediaan k o s
metik adstringent dengan metode standar internal eugenol
Sampel Nipagin dalam f$ ( x - x )2
1. 109,1 118,81
2. 100,3 4,41
3. 102,9 22,09
4* 39,6 73,96
5. 38,9 86,49
x = 490,8 = 305,76
x = 98,2
s - I L - , i IQS.fJ-2 = q 74
\ n - 1 V 4
t - .La .£ - L.3Q jJL.t , - 0, 461

S G, 74
t t a b e l pada .v = 0,05 dan d . f - 5 - 1 adalah 2,776

t hitung lebih kecil dari t tabel 0,05 ( 4 ) , maka
Ho diterim a. Jodi tidak ada perbedaan yang bermak-

117
LAIIPIRAIT XX
U j i t dar i kadar rata - rata nipag in yang d ip e r o le h kem-
b a l i dengan kadar yang dianggap benar dalam sediaan kos-

metik adstringent dengan rnetode standar i n t e r n a l b u t i l -
paraben.
Sampel Ilipagin dalam % ( X - x )2
1. 94,9 0,16
2. 90,8 13,69
3; 82,8 136,89
4. 98 r1 12,96
5. 105,8 127,69
x = 472,4 = 291,39
x = 94,5
s = \j L . X . - - X ..) 2 = yi £2± > J3. = 8,54
t = c S - » )- ^ n = ( 94,5 - 100 ) . 5 = 1>443

8,54
t ta b e l pada A. = 0,05 dan d.f * 5 - 1 adalah 2,776
t hitung l e b i h k e c i l dari t ta b e l 0,05 ( 4 ) , maka

Ko dite rim a. Jadi tidak ada perbedaan yang bermak
na antara kadar rata * rata yang d ip e r o le h dengan

118
LAM EERAN ' X X I
Ut
ji t dari k a d a r rata - rata nipasol yang diperoleh kern-
bali dengan kadar yang dianggap be n a r dalam sediaan kos-
net.ik adstringent dengan rnetode standar eksternal.
Sampel ITipasol dalam % ( x - x )2
1. 96,1 10,89
2# 90,8 4,0
3. 85,6 51,84
4. •96,6 14,44
5. 94,9 4,41
x = 464,0 * 85,58
x = 92,8
s = I " .
X -L2 ^ = 4,62
N n - 1 V 4
t = ( a ( 92 ,8 - 100. y.fj = 3i491

S 4 j 62
t t a b e l padn '.;-=0,05 dan d . f = 5 - 1 adalah 2,776

t hitung lo b i l i besar dar i t t a b e l 0,05 ( 4 ),maka
Ho ditolak# Jadi ada perbedaan yang bermakna anta
ra kadar rata - rata yang d ip erole h dengan kadar
yang dianggap benar.

119
UMPIRE XXII
Uji t dari lcadar rata - rata nipasol yang diperoleh kemba
li dengan k a d a r yang dianggap benar dalam sediaan kosme -
tik adstringent dengan netode standar internal ft- napthol
Sampel I'lipasol dalam ?. ' ( X - x ) 2
1. 105,1 158,76
2. 85,6 ' 47,61
3. 93,4 ’ 0,81
4. 95,9 11,56
5. 82,4 1 102,01
x = 462,4 =* 320,75
x * 92,5
s = ,| , /1 ^ 1 5 =8>95
N n - 1 V 4
t * ( * - ) * >l n ^ ( 92,5 - 100 ) . 'i 5 a 1jS7?

S 8,95
t t a b e l pada 0,05 dan d . f = 5 **1 adalah 2,776

t hitung l e b i h k e c i l dar i t ta b e l 0,05 ( 4 ) , maka
Ho diterim a, Jadi tidak ada perbedaan yang bermakna
antara kadar rata - rata yang d ip erole h dengan ka
dar yang dianggap benar.

120
LAi.-mui'T ra n
Uji t dari kadar rate - rata nipasol yang diperoleh k e m b a
li dengan kadar yaiv; dianggap benar dalam sediaan kosmo -
tik adstringent dengan rnetode standar i n t e r n a l 'eugenol.
Sampel Uipasol dalam % r ( x - x )2
1. 106,8 f 110,25
2. 91,4 ' 24,01
3. 105,1 77,44
4. 94,6 2,89
,/ * 83,6 f 161,29
x * 481,5 = 375,88
5 = 96,3 t
s= g / 375,88 = 9j6g
\ n - 1 V 4
t = ^ -n _ L 9j?.?_3., - ,.1PQ. , ) ,»,)/ _5 _ o ,8 5 5
S 9,69
t t a b e l pada ^ = 0,05 dan d . f = 5 - 1 adalah 2,776

t hitung l e b i h k e c i l dar i t t a b e l 0,05 ( 4 )> maka
nn nntnra kadar rata - rata yang d ip erole h dengan

1
21
LAlvIPIKAH XOT
U j i t dar i kadar rata - rata n ip as o l yang diperoleh. Cem
b a l i dengan kadar yang dianggap benar dalam sediaan kos-

metilc ad str ingent dengan metode standar i n t e r n a l b u t i l ■
paraben.
Sampel ITipasol dalam % ( X - 5 ) 2
1. 89,3 16,81
2. 87,8 31,36
3* 88,7 22,09
4. 101,1 59,29
5. 99,9 42,25
A = 466,8 = 171,8
93,4
£ JL2. = J n it§ _ = 6,55

n - 1 V 4
t - ( x - ,u ) . J n K ( 93,4 - 100 ) . v 5 x 2,257

S ” 6,55
t ta b e l pada ^ = 0,05 dan d . f * 5 - 1 adalah. 2,776

t liitung l e b i h k e c i l dari t ta b e l 0,05 ( 4 ) , maka
Ho diterim a. Jadi tidalc ada perbedaan yang bermak-
na antara kadar rata * rata yang d ip erole h dengan

122
LAKPIRA1T XTV
U j i P dar i nipagin yang d ip erole h lcembali dalam sampel
murni.
Sampel 1 Standar 1 Standar i n t e r n a l
» ■3ksternal f ^ - n a p t h o l1 Eugenol' 3 u t i l paraben
1. ' 102,8 * 99,0 98,5 1 102,8

2. * 97,0 99,4 94,2 ' 88,9
3. ' 104,5 97,2 98,5 ' 97,0
4. 1 76,5 ' 78,7 73,8 1 72,0

107,8
c\J* i
99,8
o !
5. ' 100,7 1
On
t
VJt
O
488,9 1 475,0 466,2 » - 1890,6
t 5 5 5 5 20
t 97,8 95,0 93,2 • 92,1 - 378,1
CP _ ( I Ti ) 2 . C 1890,6 ) 2 = 178718,4
II 20
SSfj = L( x )2 - GP
= 180886 - 178718,4 = 2167,6
ssp = i LSi , ) f „ CJ?

11
= 178810,2 - 178718,4 = 91,8

SSg = SS(p. - oSp
= 2167,6 - 91,8 = 2075,8

I ’h itunp = M
m-cuios “S = 129,7
^ * ° ’ 24
Tabel Anava h a s i l penentuan kadar nip agin dalam sampel

murni.
Sumber v a r i a s i T DF! SS * MS 1 ]i? t

hitung F ta b e l
CO
Antar metode » V I 3 0 ,6 ’ 0,24 f 3,24

\D
Dalam metode ' 16 ' 2075,8’ 129,7 ' i
Tota l t 19 t 2167,6T t t
p tabel ° ’ 05 * 3 ’ 16 = 3,24.
F ^ turif*’ 'ceci-l dar i P ta b e l 0,05* 3, 16 ,

mako Ho diterim a. Jadi tidak ada perbedaan yang
bermakna antar metode.

LA12PIRAJT XXVI
U j i F d a r i kadar nipasol yang d ip erole h kembali dalam sam
p e l murai,
Sampel1 Standar 1 Standar i n t e r nal

» Eksternal r ^-napthol 1 iiluênol ' B u t i l paraben
1. * 93,4 t 94,3 ' 84,9 92,4

2. 1 1 101,8 96,8
103,3 ' 99,7 '
• i 67,5 t 81 ,6 1 42,4 69,7
4. ' 102,4 » 100,3 ' 85,5 ' y6,0
5. 1 108,5 t 93,5 ' 101,2 » 97,8
t 475,1 1 476,5 1 413,7 452,7 1818
5 1 5 5 5 20
i 95,0 t 95,3 ' 82y7 ' 90,5 363,5
CP ( i Ti )2 ( 1818
_
= 165256, 2
TT 20
- SST = 1 ( X ) 2 - CP
= 169929 , 7 - 165256, 2 = 4673,5
2
3Sp _ <r. X Ti )— _ ^ ^
^ n
= 165771 ,3 - 16526,2 = 515,1 ,

r» c*
ss^ = S3t - OUp
= 4673,5 -
515,1 = 4158,4

I'ASp ATJ* r-r

^hitun* = — = - ° ’ 661
° MSe 259,9
Tabel Anava h a s i l penetapan kadar nipasol dalam sampel

murni.
Sumber v a r i a s i 1 DP * S3 * MS * p t 7?
hitung tabel
Antar rnetode 1 3 * 515,11 171,7* 0,661 » 3,24

Dalam rnetode 1 16 ’ 4150,4* 259,9' f
t » » t »
T o ta l » 19 *4673,5*
* ta b e l ° - ° 5 ' . 3 , 1 6 = 3,24
J* l e b i h k e c i l dari P t a b e l 0,05 i 3 , 16,maka

Ho diterima. Jadi tidalc ada perbedaan yang bermakna
antar raetodfl.

126
LAMPIRA1J XXVII
UJi F dari kadar nipag in yang dip erole h kembali dalam se-
diaan kosmetik ad strin gen t.
Sampel1 Standar ' Standar i n t e r n a l
» Eksternal f ^-napthol1 Eugenol ' B u t i l paraben
1. t 87,9 105,5 ' 109,1 ' 94,9

2. 89,9 86,5 * 100,3 T 90,8
3. » 86,8 1 91,6 ' 102,9 ' 82,8
4. 80,0 80,1 * 89,6 ' 98,1
5. » 83,3 82,7 ' ' 88,9 ’ 105,8
t 427,9 446,4 ’ 490,8 * 472,4 - 1837

t 5 5 5 5 20
t 85,6 89,3 ' 98,2 ' 94,5 - 367
)2
CP _ i }2 ( 1837,5
— I DoocU , J
N 20
s s T - £( x ) 2 - CF
= 170346,1 - 163820 ,3 = 1525,8
SSp _ c .(. « . )2 - Cl?

n
* 169283,6 - 168020 ,3 = 463,3

SSE = SST - SSp
* 1525,8 - 463,3 ^ 1062, 5

127
k - 1 = 4 - 1 = 3
n - 1 -20-1 =19
DFt - DFp
19 - 3 * 16
SS,
MS = — = -1 ^ 2 - = 154,4
DP,
c jr>
O k-»T? = I 062^ = b&>4
MSE DF_ 16
KSp
= lîzA _ 2,32
*hitun£
wo E 66,4
Tabel Anava b a s i l penetapan kadar nipagin dalam sediaan

kosmetik ad strin gen t.
Sumber v a r i a s i » DP ' 3S ' M3 »p 1 p

Ahitung tabel
Antar metode ’ 3 1 463,3' 154,4 1 2,32 « 3,24

Dalam metode * 16 11062,5 f 66,4 i i
» » t t i
T ota l t ig 11525,81 f »
F ta b el ° ’ °5 > 3 , 1 6 = 3,24
P hitunc ■i'Gloi31 1:ecil dari F tabel 0,05 i 3 , l6,mako

Ho diterim a. Jadi tidak ada perbedaan yang bermakna
antar metode.

128
LAr'TIHATT X X V III
U j i P dar i kadar n ip as o l yang d ip erole h kembali dalam se

diaan kosmetik ad strin gen t.
Sampel * Standar ’ 3tandar i n t e r n a l
» Uksternal 1 p-napthol ' Eugenol T B u t i l paraben
96,1 ' 106,8 T
CO
CTv
1. 1 105,1
2* ' 90,8 85,6 1 91,4 ' 87,8
3. ' 85,6 93,4 * 105,1 ' 88,7

4. 1 96,6 ’ 95,9 1 94,6 1 101,1
5* 1 94,9 82,4 83,6 * 99,9
464,0 ' 462,4 1 481,5 ' 466,8 - 1874,1

» r i 5 5 5 ZO
i 92,8 92,5 96,3 ' 93,4 - 375,0
CP =. ( £ Ti ) 2 ( 1874,7 —) 2■ = 1 ( j ( tdn yQ
11 20
CO
CO
= * ( x ) 2 - CP
EH
= 176725,0 - 175725 ,0 a 1000,0
ss p = L 1 .'EiJ.2. *• CP
n
= 175770,8 - 175725,0 = 45,8
SSE = ssT - SS
P
= 1000,0 - 45,8 - 954,2

129
DPp = k - 1 = 4 - 1 = 3
dpt = n - 1 *20- 1 « 19
dfe - DP,, - ^Pp
.i.
= 19 -• 3 =16
S3p
MSp = _ 45,8
= 15,3
DPp 3
SS~,
Tirq — xL 954,2
= 59,6
16
otb
IViS-p * c *1
■p — _-P = j-^.j-3. p/:
hitune hse " 59,6 “ ’
Tabel Anava h a s i l penetapan kadar n ip as o l dalam sediaan

kosmetik ad strin gen t.
Sumber v a r i a s i ' DP t oo
OO
»
' MS r Ph it u n g T
^ ta b e l
Antar metode f
LT\
0,26
CO
3 15,3' * 3,24
Dalam metode 1 16 '954,2 * 59,6 ’ i
i f » r »
T o ta l 1 19 *1000,0» » »
* ta b el u>°5 ’ 3 - 16 = 3>24
P X
; lJ.. 41.,,v
/1.11%
1/rlj le b i h k e c i l dari P babel 0,05 j 3 ,l6,maka
Ho d i t e r i m a . Jadi tidak ada perbedaan yang bermakna
antar metode.

130
LAMPIRAN XXIX
Harga k o e f i s i e n k o r e la s i pada dernjnd keper-
cayaan 1 % dan 5 %.
CURVE riTTING 315

T:i Ij!c 7-7.2 Values of r at the 5 Perccnt :i ncl I i ri
l.rvch of Sif'nilitAiiCf
0fC»ffS Of 5 1 orr.ms of 5 1
rmouM (00 rCUClNl ructm fAUOOMIOM risciNI K»ClNf
i V*7 1.000 74 306 .496
: 95C .990 n 301 .487
3 a;c 95? It 374 476
4 an .917 77 347 .470
i 754 67* 7B 36) .463
6 ;o; •3f 79 Zii .456
7 6d6 7v0 DO 349 449
6 6J7 765 35 375 418
9 .602 .735 40 304 .393
10 576 70S <0 ?e« 377
11 5*,3 604 50 7/3 354
1? 537 Ml CP .50 375
13* .514 641 70 737 307
14 .47/ (553 60 717 763
15 .48? 60« 90 705 76*
U <66 v.o 100 »?S 754
i; 414 575 t7i 1/4 778
19 .444 .541 150 159 70d
19 433 5<9 700 136 .101
5v 473 .537 DOO 113 N9
;i .413 .576 400 090 176
7? 4<3< .515 500 000 .Ml
;i jy6 .505 IOO«J 047 091
Dikutip dnri :
R i t s c h c l l WA, Handbook o f Hauic Pharmacokinetics,
o t •»
1“ Ed, Drup I n t e l l i g e n c e Publication s.

LAMPIRAN XXX
Tabel "t"
i ’crccntilcs ol ilic I D is lrib u lio u
d. f. ^.*Q < .* n f .»9 f.MS

i 3.078 6.3138 12.706 31.821 63.657
2 1.886 2.9200 4.3027 6.965 9.9248
3 1.638 2.3534 3.1825 4.541 5.8409
4 1.533 2.1318 2.7764 3.747 4.6041
5 1.476 2.0150 2.5706 3.365 4.0321
6 1.440 1.9432 2.4469 3.143 3.7074
7 1.415 1.8946 2.3646 2.998 3,4995
8 1.397 1.8595 2.3060 2.896 3.3554
9 1.383 1.8331 2.2622 2.821 3.2498
10 1.372 1.8125 2.2281 2.764 3.1693
ll 1.363 1.7959 2.2010 2.718 3.1058
i2 1.356 1.7823 2.1788 2.681 3.0545
13 1.350 1.7709 2.1604 2.650 3,0123
14 1.345 1.7613 2.1448 2.624 2.9768
15 1.341 1.7530 2.1315 2.602 2.9467
16 1.337 1.7459 2.1199 2.583 2.9208
17 1.333 1.7396 2.1098 2.567 2.8982
18 1.330 1.7341 2.1009 2.552 2.8784
19 1.328 1.7291 2.0930 2.539 2.8609
20 1.325 1.7247 2.0860 2.528 2.8453
21 1.323 1.7207 2,0796 2.518 2.8314
22 1.321 1.7171 2.0739 2.508 2.8188
23 1.319 J .7-139 2.0687 2.5<X) 2.8073
24 1,318 1.7109 2.0639 2.492 2.7969
25 1.316 1.7081 2.0595 2.485 2.7874
26 . 1.315 1.7056 2.0555 2.479 2.7787
27 1.314 1.7033 2 .0 5 )8 2.473 2.7707
28 1.313 1.7011 2.0484 2.467 2.7633
29 1.311 1.6991 2,0452 2.462 2.7564
30 1.310 1.6973 2.0423 2.457 2.7500
35 1.3062 1.6896 2.0301 2.438 2.7239
40 1.3031 1.6839 2.0211 2.423 2.7045
45 1.3007 1.6794 2.0141 2.412 2.6896
50 1.2987 1.6759 2.0086 2 .4 0 J 2.6778
60 1,2959 1.6707 2.0003 2.390 2.6603
70 1.2938 1.6669 1.9945 2.381 2.6480
80 1.292?. 1.6641 1.9901 2.374 2.6388
90 1.2910 1.6620 1.9867 2.368 2.6316
100 1.2901 1.6602 1.9840 2.364 2.6260
120 1.2887 1.6577 1.9799 2.358 2.6175
140 1.2876 1.6558 1.9771 2.353 2.61 14
160 1.2869 1.6545 1.9749 2.350 2.6070
180 1.2863 1.6534 1.9733 2.347 2.6035
200 1.2858 1.6525 1.9719 2.345 2.6006
CO 1.282 1.645 1.96 2.326 2.576
Dikutip dari :
Daniel WW, B i o s t a t i s t i c s : A Foundation f o r Analysis
in The Health Sciences, 2n^ Ed, 197B.

.132
LAMPIKAN XXXI
Tabel 11 F ”
£. P d is trib u tio n { 3 « 0 .0 5 *
w in r
m / * « ^ u ^ D c ^ y ^ hftri.m fru m v ro io r D rf ire e i o f Frefdom

w ' * ■ 4 ‘ * f <* tf) I! u 20 24 ■ .« 40 iy>
161 4 199.5 215.7 224.6 230.2 23J.O 236* 238 9 24Q.« 2*1.9 243.9 245,9 24X(\ 2*91 250.1 251.1 '*32 2 253 3 2*41
1U.3I 1900 >9 Ift 19.25 19 3i
10.13 955 9.2i 9 12 901 I 19,371,38 1940 1941 1941 1945 ,9J’ 1946 1947I94* 1949 ]9<.
7.71 6.94 6.59 6.39 6.26 *5* ffj ?'79 8,74 J8S760 .5l'-6 * 5871 64 *-6- 8.598.57 KJI ftJ
6 .J 6 ‘6.09 6.04 6 00 5.96 .........................
5.91 *0 5^75 s!?2 5 *9 5.ftt 5ft
6.61 5 79 5 41 5 10 5.05
«.w> 4 7ft It. *.** 4'8* 4'77 4 ,4 4&* **3 *-50 4*6 443 44n i\,
5.5V
5.J4
4 74 4 X
4 53
4.12
4 >9
3 97
4-*t - 2I 4 I' 4 <<* 4 -06 4«i V9 J 3 .R7 3 JH jg j377 3 7 .- 3 jr 3ft
4 4ft 407 ; •*,7t ^ 7-' •' ^ 3.51 3 44 3 41 3 3&3.34 J.30 ' 2' 3.2.
5 32 3 K4 3 69 j.5ft 3.50 3 4J 3.3V 3.35 3.2K 3.22 3.15 3.12 3.OS3.04 301 '9 ' 2.9
3 .i: J . ’( 3fc* 3 63 ■\4> ?'■ ’ 3.29 3.23 3.IK J.J4 30* 3.01 2W 1 90 2.86 1 83 2.7^ 2.75 2.7
4 96 4.11 ' 71 3 44 3.3 * 3 2: 3 14 3 0* 3.0: 2.98 2.91 2.*5 2.77 2.74 2 70 2.66 26- ' *fc '*<
4 Si ?.9l. 3 5V 3.36 3!20 3 09 3 01 2.95 290 2 *5 2.79 2.72 2 .65 2.61 2.572 53 ->49 -*4< 2 4C
4 ■*< 3 *9 3 4<» 3 26 3 11 3 Of* 2 91 2?« 2K 0 2.75 2 69 2 62 2* 4 2JI 2 47 2 43 13V 2.34 23'
4 67 3 8! 3 4: 3. It* 3 03 2 .v : 2>- 2 77 2.71 2 67 J«> 2.53 2.4ft 2 42 2.' K 2 *4 2 '0 ■*';
4 ftfl 3.74 3.34 3.H 2 '♦ft 2 «5 2.>fr 271) 2t>5 2 w 2.53 24ft 2 3« 2.35 2.31 2.27 2.22 2? v ■
4.54 3 («ft 3.29 U v. 29*. 2 71' 271 2W 2.5** 2.54 24v 2*' 23s 1 ** >0 ** |ft 'Il '»•
4 40 3 ft3 3 2i 3.(11 2 *5 2 74 26ft 2.5V 2 .M 2 49 2 4: 2 35 2.2$ 2.2* 2^9 :T s 2-11 20> 2 0!
4 4' V«s ?.2«i 29ft 2.M 2 70 2 ft) 2.55 2 4* 2.45 2.3> 2 31 2.21 2 1« 2 1' , 10 "Oft ’ 01 1 <»r
4 41 3 5; 3 16 2.9- 2.77 JM 2 5* 2.51 24 h 241 2.>J 2.27 2.19 2.15 2U 20ft 20* 19* 19*
* 3K 3.52 • 13 2 >«• 2 7J 2.5J 2 4k 2 42 2 3* 2.31 223 2. 1* 2.11 20' 2.03 t «v l M3 I x>
4 3 49 ‘ 1*. 2 J>7 27| 2M> 25! 24< 2.39 2.35 2-2* 2.20 2 12 2.08 2.1K 1.99 19* 1 90 : 14
i 32 '>47 « r ■* 2 Si 2.A« -* 249 2-s: 2 3* 2.32 2.25 2 !? 2 10 2.05 201 1.96 1.92 | <7 | SI
J.m 3 44 U>‘ 2 •' 2W 2 f* 2 4,. 24(i 2.34 2.30 2. 2' 2 IS 2m 203 19i 194 1*9 1 «. 17*
J.2v 3 42 ■>0 - 2 *i< 2M 2.5* 2 44 2.3’ 2.32 2 27 2 20 2 13 2«5 2.01 19ft 1.91 I.Xft 1X1 i 7ft
4.2ft 3 4(1 301 2.71; 2^2 2-51 242 2.3ft 2.30 2.25 2 IS 21/ 203 J.9S 1.94 |.89 J .?4 j 7<5 j .73
4 24 3.3« 2.9m 2.7h 26 0 2 4t 2 40 2 34 12b 1 21 :.»f 2C* 2 01 1.9ft 1 92 1.87 1.82 I T J 7}
i 23 i 2 9'. 2 74 2 S'» 2*’ 2 39 2?2 2.2* 2.22 2-1 *• 20* 19« 1.95 1.90 1.85 1.80 J ?J 169
* 2) 3 1,1 2Mi' 2 77 2,5* 24(- 2.37 2.31 2.25 2.20 2- 1' 2.0ft 1.07 1.93 1.88 I . *4 1.79 J 73 I ft'
4 :<> 314 2«? 271 2.5ft 2J' l '« 2.2, < 2.24 2 19 2.12 2 (U 1 ** 191 U7 1.82 1.77 1 7| 1 ft‘
4 n 3 33 2V3 2.70 2.5.‘ 2 iX 2.35 2.2* 2.22 2.18 2.10 2 03 I «- 190 185 I.KJ 1.75 !., f« 1M
4 17 3 32 292 2 ftv 2 *1 2.12 2.33 2 21 2.21 M*> 1W 2.01 1 9> 18* 1.JU 1.79 J.74 ) w \ tZ
4 l» 3.23 2sj 2 61 2.4* 2..VJ 2.25 2.13< 2 12 2 0* 200 1 92 I fU | 7V 1.74 1.69 j.W ; M l
iV' Mf 2 7( 15.- 2.3* 2 2:' 2 1* 2.10 2.<K 1.99 1 92 I.K- 1.75 1 i.o5 1.5V 1.55 1 -7 1.39
3.92 3’6 : 2ft» 2 4* 2.2v 2.17 2fv 2.0: 19f 1.91 1.83 1.75 1.66 I ft! 1.55 1 30 |4» J >5 1.2'
7 K4 ■*f¥- 2 ftO ' \m
, 2.21 2.10 20! 1 V4 I XS 1 K» J 75 I ft' 1.5* 1.51 1.4ft t.io 132 112 ton

Fulltext 2 PDF

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Fulltext 2 PDF

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI GAS

FA K U LTA S FARM AS1

PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI GAS

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

Dengan rasa syukur kepada Tuhan Yang Kaha Esa, yang

telah melimpahkan berkatNya dan iremperkenankan ksmi untuk

Pada kesempatan i n i perkenankan kami menyampaikan

Airlprigga, dengan harapan s k rip s i i n i uapat t.e rrr.anfeat

Semoga Tuhf-n Yang ^ h a n.tlimpahkan rahrr.at atas

Surabaya, Desember 1987

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

KATA PENGANTAR..............................................., , ................i i

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

BAB V II.D A F T A R PUSTAKA............ 71

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

1. Kromatogram nipagin dengan standar eks-

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

12. Kromatogram nipagin dan nipasol dalam

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

Lampiran Hala man

Dewasa i n i , pengawet memegang peranan penting

duksi makanan-minuman, kosmetik, maupun preparat-

preparat farmasi kadar maksimum 0,2 %♦ ( 1, 2,3» k )

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

sediaan akan b e r s i f a t toksis dan berbahaya terhadap

kesehatan manusia. Dengan demikian masalah kadar

pengawet it u adalah sesuatu hal yang amat penting.

Diantara berbagai macam pengawet, yang umum

Metode penetapan kadar nipagin dan nipasol da­

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

Metode i n i memerlukan pelaru t-pelaru t yang harganya

Metode kromatografi la i n untuk penetapan ka­

( 5 , 6, 7» 8j 9 )• Tetapi berdasarkan kenyataan bahwa

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

Metode standar eksternal berdasarkan prinsip

dapat ditentukan dengan menentukan luas puncak kroma­

tentukan dengan car^ perbandingan lu«*s puncak kroma­

Pada metode standar eksternal terdapat kelemah-

an dapat mencapai 5 ~ 10 # C 10 ) . Untuk m e n ^ ta s i

dar terhadap luas puncak standar in t e r n a l terhadap

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

lara persamaan r e g r e s i kurva k a l i b r a s i atau dapat pula

dar i n t e r n a l terhadap perbandingan luas puncak kro­

matogram z a t standar terhadap luas puncak kromatogram

Telah dilaporkan dalam l i t e r a t u r , standar i n t e r ­

z y l benzoat dan phenanthrene. ( 5 ,6,7 ,8 ,9 ) . Pada da-

salnya b u t i l paraben atau senyawa f e n o l i s l a i n , misal-

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

C % Recovery ) . Hasil penetapan kadar disebut

mempunyai ketepatan yang baik, jika tidak ada

tu ) antara harga yang dianggap benar dengan

kadar yang diperoleh kembali. Adapun sebagai

1.2. Tu.iuan -penelitian

Untuk menjawab permasalahan tersebut perlu

1. Menentukan ketepatan dan k e t e l i t i a n h a s i l pe­

Kara pan d a r i p e n e litia n i n i adalah : de­

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

baik, maka metode kromatografi gas dapat digu­

nakan untuk a n a l i s i s k u a n t i t a t i f senyawa-senyawa

Metode penetapan kadar nipagin dan nipasol da

Metode kromatografi la i n untuk penetapan ka

dapat ditentukan dengan menentukan luas puncak kroma

tentukan dengan car^ perbandingan lu«*s puncak kroma

dar i n t e r n a l terhadap perbandingan luas puncak kro

Telah dilaporkan dalam l i t e r a t u r , standar i n t e r

1. Menentukan ketepatan dan k e t e l i t i a n h a s i l pe

Kara pan d a r i p e n e litia n i n i adalah : de

baik, maka metode kromatografi gas dapat digu

Sebagai v a r i a b e l bebas dalam p e n e litia n i n i ada

sebagai berikut : ketepatan metode dikatakan ba

Dari persamaan d i a t a s , dapat d i l i h a t bahwa b i l a kon

\ / Ai s t ^ perbandingan luas puncak kromato

A6t^Ai s t : Perbandingan luas puncak kromato