6.

2 Cairan Superkritis sebagai Fase Gerak

Karbon dioksida adalah standar dalam SFC karena keadaan superkritisnya relatif
mudah dijangkau (Tc = 31 C dan Pc = 7400 kPa) (Gambar 6.1). Di luar nilai-nilai ini, domain
superkritis tercapai. Senyawa berbiaya rendah ini tidak terlalu beracun, tidak mudah terbakar,
tidak korosif. Kerugian utama adalah ketidakmampuan untuk mengelabui sangat senyawa
polar atau ionik.
Lebih jarang digunakan adalah nitrous oxide (N 2O Tc = 36 C Pc = 7100 kPa atau
amonia NH3 Tc = 132 C Pc = 11 500 kPa.
Kepadatan dan kekuatan solvasi cairan superkritis bervariasi sesuai dengan tekanan
yang mereka ajukan. Sebagai akibatnya, gradien tekanan di SFC setara dengan gradien elusi
di HPLC, atau gradien suhu di GC.
Jika kromatografi dapat mengakomodasi gradien ganda suhu yang ditekan,
dikombinasikan dengan pengubah organik (untuk menggantikan koordinat dari titik kritis),
menjadi mungkin untuk menyempurnakan tune analit dan oleh karena itu untuk memodifikasi
selektivitas mereka (Gambar 6.2).
Gambar 6.2 Kepadatan untuk karbon dioksida sebagai fungsi tekanan pada empat
temperatur yang berbeda. Pada titik kritis, kerapatan CO 2 adalah 0 46 g / cm3. Benar, sosok
itu mewakili variasi faktor retensi k untuk tiga alkaloid yang dianalisis di bawah kondisi dan
tekanan yang sama, ditetapkan oleh pembatas pada saluran keluar kolom (T = 40 C,
pengubah 5% air dan 15% metanol; 1: kodein, 2: tebain dan 3: papaverine). Semakin besar
peningkatan tekanan semakin jauh faktor retensi berkurang.
Pada 16.000 kPa dan 60 C karbon dioksida memiliki kerapatan 0,7 g / mL (Gambar
6.2). Inilah alasan ekspresi 'gas padat', digunakan untuk menunjukkan bahwa itu bukan gas
klasik. Untuk mengkompensasi polaritasnya yang rendah, yang dalam kondisi ini mirip
dengan toluena, pengubah organik (atau agen peningkat) seperti metanol, asam format atau
asetonitril sering ditambahkan.

6.4 Perbandingan SFC dengan HPLC dan GC

SFC melengkapi teknik klasik lain GC atau HPLC fase normal. Migrasi zat terlarut
dihasilkan dari mekanisme distribusi antara fase stasioner apolar dan fase gerak elut yang
sedikit polar. Kapasitas solvasi fase gerak diatur oleh suhu dan tekanan cairan superkritis.
Oleh karena densitas fasa fluida superkritis meningkat, komponen yang ditahan dalam kolom
dapat dibuat untuk mengelusi. Ketahanan terhadap perpindahan massa antara stasioner dan
fase gerak lebih kecil daripada di HPLC karena difusi sekitar sepuluh kali lebih besar
daripada di dalam cairan. Faktor C dalam persamaan Van Deemter menjadi lebih kecil,
kecepatan fase gerak dapat ditingkatkan tanpa kehilangan efisiensi yang cukup besar
(Gambar 6.5). Selain itu, karena viskositas fasa gerak dekat dengan gas, GC kolom kapiler
dapat digunakan. Namun, sebagai konsekuensi dari posisi pembatas, penurunan tekanan di
kolom memodifikasi koefisien distribusi senyawa antara awal dan akhir migrasi mereka. Ini
menyebabkan pelebaran puncak. Untuk alasan ini SFC dapat memberikan pemisahan pada
suhu rendah tetapi efisiensi yang dipenuhi dalam GC kapiler tidak dapat direalisasikan
dengan SFC.
Gambar 6.5 Perbandingan antara HPLC dan SFC. Kedua kurva eksperimental telah diperoleh
menggunakan senyawa yang sama pada kolom yang sama, tetapi, dalam satu, fase cair klasik
dan dalam lainnya, karbon dioksida dalam keadaan superkritis. HETP sebanding - tetapi
pemisahannya bisa hingga tiga kali lebih cepat oleh SFC, sehingga menghemat waktu
analisis.
Gambar 6.6 Perbandingan SFC dengan kolom dikemas HPLC. Ketika dicampur dengan
metanol dan aditif, karbon dioksida superkritis memungkinkan pembangunan kembali
seluruh rentang polaritas yang diperlukan oleh jenis utama analit.
Gambar 6.7 Kromatogram SFC Spektakuler dari campuran oligomer polysiloxane
(direproduksi milik Fisons Instruments Inc.). Setiap senyawa mengarah ke puncak yang unik
pada kromatogram, sehingga memungkinkan penentuan distribusi bentuk molekul dalam
reaksi polimerisasi.