ISSN 2354-6565
ABSTRAK
Demensia merupakan istilah pada penyakit yang berkaitan dengan penurunan fungsi memori.
Memori merupakan proses penyimpanan dan pengambilan kembali informasi melalui sinyal-
sinyal saraf di otak oleh senyawa asetilkolin (Ach). Senyawa ACh menjadi tidak aktif oleh
aktivitas enzim asetilkolinesterase (AChE). Aktivitas AChE yang tinggi dapat menggambarkan
terjadinya demensia. Senyawa yang dapat menghambat aktivitas AChE dapat menggambarkan
potensi sebagai obat anti demensia. Tanaman yang berpotensi mengandung senyawa tersebut
adalah kunyit (Curcuma longa Linn). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi minyak
atsiri rimpang kunyit (Curcuma longa Linn) dalam menghambat aktivitas AChE pada tikus
model demensia yang diinduksi trimetiltin (TMT).Minyak atsiri diperoleh dari hasil destilasi
menggunakan metode destilasi uap air kemudia dianalisis komponen senyawa yang terkandung
menggunakan metode GC-MS. Uji penghambatan aktivitas AChE dilakukan pada tikus Sprague
dawley jantan umur ±2 bulan. Hewan uji dibagi dalam 6 kelompok. Kelompok I, II, III (normal,
kontrot dan citicoline) dan kelompok IV, V, VI (diberi minyak atsiri dosis 100, 200, dan 400
mg/kg BB). Perlakuan dilakukan selama 29 hari. Pemberian TMT i.p dosis 8 mg/kg BB
dilakukan pada hari ke-8 kecuali kelompok normal. Otak tikus diambil dan dipreparasi hingga
diperoleh supernatan. Penetapan aktivitas AChE menggunakan reagen kit (katalog #K764-100).
Analisis data menggunakan ANOVA dengan Post Hoc LSD. Komponen utama pada minyak
atsiri rimpang kunyit hasil analisi GC-MS yaitu ar-tumerone (49,47%), alpha tumerone
(19,91%), dan alpha phellandrene (4,24%). Hasil uji penghambatan aktivitas AChE pada
kelompok kontrol berbeda tidak bermakna (P>0.05) dibandingkan kelompok normal. Penurunan
aktivitas AChE kelompok pemberian citicoline berbeda bermakna (P<0.05) terhadap kelompok
kontrol. Penurunan aktivitas AChE otak pada kelompok MARK dosis 200 mg/kgBB dan 400
mg/kgBB berbeda bermakna (P<0.05) dibandingkan kelompok kontrol namun berbeda tidak
bermakna pada dosis 100 mg/kgBB. Pemberian minyak atsiri rimpang kunyit mulai dosis 200
mg/kg BB dapat menghambat aktivitas enzim AChE pada tikus model demensia yang diinduksi
TMT.
Safwan dkk.
Kartika J. Ilm. Far, Des 2014, 2 (2), 20-26 21
Safwan dkk.
22 Kartika J. Ilm. Far, Des 2014, 2 (2), 20-26
Safwan dkk.
Kartika J. Ilm. Far, Des 2014, 2 (2), 20-26 23
Gambar 1. Kromatogram minyak atsiri kunyit dengan dua puluh delapan komponen utama pengukuran
aktivitas asetilkolinesesterase
Safwan dkk.
24 Kartika J. Ilm. Far, Des 2014, 2 (2), 20-26
Pembuatan kurva baku AChE, untuk Tabel 1. Rerata ± SEM Aktivitas AChE Otak
mengetahui hubungan antara konsentras Tikus
larutan standar AChE dengan serapan. Dari Dosis Aktivitas
Kelompok
konsentrasi 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, dan 7 nmol (mg/kgBB) (U/mg protein)
diperoleh serapan 0,092 ; 0,201 ; 0,273 ; Normal - 1,759 ± 0,050
Kontrol - 1,959 ± 0,123 ♣
0,312 ; 0,403 ; 0,455 ; 0,534 ; 0,610
Citicoline 200 1,552 ± 0,123 #
diporoleh persamaan y = 0,070 x + 0,112 (r) Minyak atsiri 100 2,036 ± 0,132♣
= 0,9931. Menurut teori, untuk n = 7 dengan Minyak atsiri 200 1,596 ± 0,043 #
taraf kepercayaan 95% maka harga r tabel = Minyak atsiri 400 1,524 ± 0,121 #
0,666, kesimpulannya r = 0,9931 > r = 0,666 Keterangan: Perbedaan bermakna, #p<0,05
ini berarti telah memenuhi persyaratan, terhadap kelompok normal, *p<0,05 terhadap
sehingga dapat disimpulkan bahwa kelompok kontrol, dan ♣p<0,05 terhadap
persamaan garis yang diperoleh kelompok citicoline.
menunjukkan adanya hubungan yang
signifikan antara konsentrasi larutan standar Berdasarkan analisis statistik, peningkatan
AChE dengan absorbansi. aktivitas AChE pada kelompok kontrol
Data aktivitas AChE otak tikus berbeda tidak bermakna (P>0,05)
terdistribusi normal p=0,982 (p>0,05) dan dibandingkan kelompok normal. Penurunan
homogen p=0,728 (p>0,05). Hasil uji aktivitas AChE kelompok pemberian
ANOVA menunjukkan berbeda bermakna citicoline berbeda bermakna (P<0,05)
p=0,008 (p<0,05). Hal ini menunjukkan terhadap kelompok kontrol. Penurunan
bahwa perbedaan perlakuan menyebabkan aktivitas AChE otak pada kelompok MARK
perbedaan aktivitas AChE otak tikus pada dosis 200 mg/kgBB dan 400 mg/kgBB
masing–masing kelompok perlakuan. Kadar berbeda bermakna (P<0,05) dibandingkan
rata-rata dan histogram aktivitas AChE otak kelompok kontrol namun berbeda tidak
tikus masing-masing terlihat pada Tabel I bermakna pada dosis 100 mg/kgBB.
dan dan Gambar 2.
Safwan dkk.
Kartika J. Ilm. Far, Des 2014, 2 (2), 20-26 25
atsiri dosis 400 mg/kgBB dapat menurunkan asetilkolinesterase pada penderita demensia
aktivitas AChE lebih besar dibandingkan (Amoo et al., 2012). Asetilkolinesterase
dengan dosis 200 mg/kgBB namun tidak ada merupakan enzim yang memecah asetilkolin
perbedaan yang bermakna antara dua menjadi bentuk tidak aktif (Lane et al.,
kelompok tersebut, hal ini menunjukkan 2006). Donepezil, rivastigmine dan
bahwa pemberian minyak atsiri rimpang galantamine merupakan obat penghambat
kunyit dosis 200 mg/kgBB dapat aktivitas enzim esetilkolinesterase yang telah
menghambat aktivitas AChE pada tikus digunakan di Amerika Serikat dan telah
model demensia dan peningkatan dosis lebih direkomendasi oleh Food and Drug
dari 200 mg/kgBB tidak dapat menurunkan Administration (FDA) (Lukiw, 2012;
aktivitas AChE secara signifikan. Salomone et al., 2012).
Pada penelitian ini, pemberian TMT tidak
mampu meningkatkan aktivitas AChE secara KESIMPULAN
signifikan, hal ini kemungkinan karena jarak
Pemberian minyak atsiri rimpang kunyit
pemberian TMT dengan hewan uji
dosis 200 mg/kg BB dapat menghambat
dikorbankan terlalu singkat yaitu 21 hari.
aktivitas enzim AChE pada tikus model
Hasil ini didukung hasil penelitian oleh Kim
demensia yang diinduksi TMT. Komponen
et al., (2011) dimana jarak pemberian TMT
utama pada minyak atsiri rimpang kunyit
dengan hewan uji dikorbankan yaitu selama
hasil analisi GC-MS yaitu ar-tumerone
48 hari. TMT merupakan senyawa
(49,47%), alpha tumerone (19,91%), dan
organotoksin dengan efek neurotoksikan kuat
alpha phellandrene (4,24%).
yang sangat berguna untuk mempelajari
respon terhadap cedera otak karena pola yang
DAFTAR PUSTAKA
berbeda dari degenerasi saraf di otak tikus
(Jung et al., 2013). TMT dapat menyebabkan Amoo, S. O., Aremu, A. O., Moyo, M., &
gangguan pada fungsi memori. Gangguan Van Staden, J. (2012). Antioxidant and
memori ini sesuai dengan mekanisme TMT acetylcholinesterase-inhibitory properties
yang dapat menyebabkan perubahan dalam of long-term stored medicinal plants.
neurotransmisi kolinergik melalui gangguan BMC Complementary and Alternative
reseptor muskarinik dan menyebabkan Medicine, 12, 87. doi:10.1186/1472-6882-
penurunan aktivitas AChE di otak (Kim et 12-87
al., 2011). ACh dilepaskan dalam otak Anonim. (2008). Citicoline. Retrieved from
selama pembelajaran dan sangat penting http://www.biomedsearch.com/article/Alz
untuk pembentukan memori baru sehingga heimers-disease-amnestic-mild
bila terjadi penurunan ACh maka akan terjadi cognitive/181714351.html
gangguan memori (Buchanan et al., 2011).
Pemberian citicoline 200 mg/kgBB secara Araujo CAC, Leon LL, Biological activities
signifikan dapat meningkatkan memori tikus. of Curcuma loga L, J Mem Inst Oswaldo
Hasil tersebut dapat dilihat dari data uji Cruz 2001;96(5):723-728.
penghambatan aktivitas AChE. Citicoline Buchanan, K.A., Petrovic, M.M.,
menunjukkan kemampuan untuk Chamberlain, S.E., Marrion, N.V.,
meningkatkan kemampuan kognitif, terutama Mellor, J.R., 2011, Facilitation of long-
kemampuan orientasi spasial pada penderita term potentiation by muscarinic M1
Alzheimer's disease (Anonim, 2008). Pada receptors is mediated by inhibition of SK
penelitian ini, pemberian minyak atsiri channels, Neuron., 69, 1037.
rimpang kunyit dosis 200 mg/kg BB secara
signifikan dapat menghambat aktivitas Hales, Robert E., Stuart C. Yudofsky, Glen
AChE. Penghambatan aktivitas O. Gabbard, and Eric D. 2010. Essentials
asetilkolinesterase otak telah menjadi target of Psychiatry. American Psychiatric Pub.
terapi dalam menigkatkan kadar ACh pada Kim, J.K., Choi, S.J., Bae, H., Kim, C.R.,
penderita demensia (Lane et al., 2006). Cho, H.Y., Kim, Y.J., Lim, S.T., Kim,
Keseimbangan kadar ACh otak merupakan C.J., Kim, H.K., Peterson, S., And Shin,
tujuan dalam menghambat aktivitas
Safwan dkk.
26 Kartika J. Ilm. Far, Des 2014, 2 (2), 20-26
D.H., 2011, Effects of Methoxsalen from Liang YZ, Guo FQ. Analysis of volatil oil in
Poncirus trifoliata on Rhizoma ligustici chuanxiong-radix
Acetylcholinesterase and Trimethyltin- paeoniae rura by gas chromatography-
Induced Learning and Memory mass spectrometry and chemometric
Impairment, Biosci. Biotechnol. Biochem., resolution 1. J. Acta Phar Si 2006;
75, 1984-89. 27(4):491-498.
Lane, R. M., Potkin, S. G., & Enz, A. (2006). Lynch, M. A. 2004. “Long-Term
Targeting acetylcholinesterase and Potentiation and Memory.” Physiological
butyrylcholinesterase in dementia. The Reviews 84 (1): 87–136.
International Journal of
Park, Sang Eun, Nam Deuk Kim, and Young
Neuropsychopharmacology / Official
Hyun Yoo. 2004. “Acetylcholinesterase
Scientific Journal of the Collegium
Plays a Pivotal Role in Apoptosome
Internationale
Formation.” Cancer Research 64 (8):
Neuropsychopharmacologicum (CINP),
2652–55.
9(1), 101–124.
Rathore, Priyanka, Preeti Dohare, Saurabh
Liju, Vijayastelter B., Kottarapat Jeena, dan
Varma, Aparajita Ray, Uma Sharma, N R
Ramadasan Kuttan. 2011. “An Evaluation
Jagannathan, N R Jaganathanan, and
of Antioxidant, Anti-inflammatory, and
Madhur Ray. 2008. “Curcuma Oil:
Antinociceptive Activities of Essential Oil
Reduces Early Accumulation of Oxidative
from Curcuma Longa. L.” Indian Journal
Product and Is Anti-apoptogenic in
of Pharmacology 43 (5): 526–31.
Transient Focal Ischemia in Rat Brain.”
Lukiw, W. J. (2012). Amyloid beta (A?) Neurochemical Research 33 (9): 1672–
peptide modulators and other current 82.
treatment strategies for Alzheimer’s
Salomone, S., Caraci, F., Leggio, G. M.,
disease (AD). Expert Opinion on
Fedotova, J., & Drago, F. (2012). New
Emerging Drugs. Retrieved from
pharmacological strategies for treatment
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles
of Alzheimer’s disease: focus on disease
/PMC3399957/
modifying drugs. British Journal of
Jung, E.-Y., Lee, M.-S., Ahn, C. J., Cho, S.- Clinical Pharmacology, 73(4), 504–517.
H., Bae, H., & Shim, I. (2013). The
Smart, J., 2006, Curcumin: A Powerful Brain
Neuroprotective Effect of Gugijihwang-
Protection Supplement, Available from:
Tang on Trimethyltin-Induced Memory
URL:http://accelerating.org/articles/curcu
Dysfunction in the Rat. Evidence-based
min.html.
Complementary and Alternative
Medicine : eCAM, 2013. Retrieved from Shah, Nirish, Sandeep Khurana, Kunrong
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles Cheng, and Jean-Pierre Raufman. 2009.
/PMC3687724/ “Muscarinic Receptors and Ligands in
Cancer.” American Journal of Physiology
Lim, Giselle P., Teresa Chu, Fusheng Yang,
- Cell Physiology 296 (2): C221–C232.
Walter Beech, Sally A. Frautschy, and
Greg M. Cole. 2001. “The Curry Spice Weuve, Jennifer, Paul A Scherr, Denis A
Curcumin Reduces Oxidative Damage Evans, and liesi Hebert. 2013. “Alzheimer
dan Amyloid Pathology in an Alzheimer Disease in the United States (2010-2050)
Transgenic Mouse.” The Journal of Estimated Using the 2010 Census.”
Neuroscience 21 (21): 8370–77. Neurology 80 (19): 1778–83.
Safwan dkk.