Langkah pertama adalah fosforilasi glukosa (penambahan gugus fosfat). Reaksi ini
dimungkinkan oleh enzim heksokinase, yang memisahkan satu gugus fosfat dari ATP
(Adenosine Triphsophate) dan menambahkannya ke glukosa, mengubahnya menjadi
glukosa 6-fosfat. Dalam proses satu molekul ATP, yang merupakan sumber energi tubuh,
digunakan dan akan berubah menjadi ADP (Adenosin difosfat), karena pemisahan satu
gugus fosfat. Seluruh reaksi dapat diringkas sebagai berikut:
Langkah kedua adalah produksi fruktosa 6-fosfat. Hal ini dimungkinkan oleh aksi dari
enzim fosfoglukoisomerase. Kerjanya pada produk dari langkah sebelumnya, glukosa 6-
fosfat dan mengubahnya menjadi fruktosa 6-fosfat yang merupakan isomer nya
(Isomer adalah molekul yang berbeda dengan rumus molekul yang sama tetapi pengaturan
yang berbeda dari atom). Seluruh reaksi diringkas sebagai berikut:
Pada langkah keempat, enzim adolase melahirkan satu pemisahan Fruktosa 1, 6-difosfat
menjadi dua molekul gula yang berbeda yang keduanya isomer satu sama lain. Kedua gula
yang terbentuk adalah gliseraldehida fosfat dan dihidroksiaseton fosfat. Reaksi berjalan
sebagai berikut:
Dihidroksiaseton fosfat adalah molekul berumur pendek. Begitu dibuat, itu akan
dikonversi menjadi gliseraldehida fosfat oleh enzim yang disebut fosfat triose. Jadi dalam
totalitas, langkah keempat dan kelima dari glikolisis menghasilkan dua molekul
gliseraldehida fosfat.
Langkah keenam melibatkan dua reaksi penting. Pertama adalah pembentukan NADH dari
NAD +(nikotinamida adenin dinukleotida) dengan menggunakan enzim fosfat
dehidrogenase triose dan kedua adalah penciptaan asam 1,3-diphoshoglyceric dari molekul
fosfat dua gliseraldehida dihasilkan pada langkah sebelumnya. Kedua reaksinya adalah
sebagai berikut:
Langkah ketujuh melibatkan penciptaan 2 molekul ATP bersama dengan dua molekul
asam 3-fosfogliserat dari reaksi phosphoglycerokinase pada dua molekul produk asam 1,3-
difosfogliserat, dihasilkan dari langkah sebelumnya.
Langkah delapan adalah reaksi penataan ulang sangat halus yang melibatkan relokasi dari
atom fosfor dalam asam 3-fosfogliserat dari karbon ketiga dalam rantai untuk karbon
kedua dan menciptakan 2 – asam fosfogliserat. Seluruh reaksi diringkas sebagai berikut:
Enzim enolase berperan penting dan menghilangkan sebuah molekul air dari asam 2-
fosfogliserat untuk membentuk asam lain yang disebut asam fosfoenolpiruvat (PEP).
Reaksi ini mengubah kedua molekul asam 2-fosfogliserat yang terbentuk pada langkah
sebelumnya.
Langkah ini melibatkan pembentukan dua molekul ATP bersama dengan dua molekul
asam piruvat dari aksi piruvat kinase enzim pada dua molekul asam fosfoenolpiruvat
dihasilkan pada langkah sebelumnya. Hal ini dimungkinkan oleh transfer atom fosfor dari
asam fosfoenolpiruvat (PEP) menjadi ADP (Adenosin trifosfat).
Seperti yang Anda lihat, semua kebanyakan langkah melibatkan manipulasi kelompok
fosfat dan kemudian atom fosfor yang dimungkinkan oleh berbagai enzim dalam
sitoplasma. Enzim seperti katalis yang membuat reaksi mungkin dan kemudian
melepaskan diri.
Pertama-tama, molekul asam cuka yang dihasilkan reaksi glikolisis akan melepaskan satu
gugus karboksilnya yang sudah teroksidasi sempurna dan mengandung sedikit energi,
yaitu dalam bentuk molekul CO2. Setelah itu, 2 atom karbon yang tersisa dari piruvat akan
dioksidasi menjadi asetat (bentuk ionisasi asam asetat). Selanjutnya, asetat akan mendapat
transfer elektron dari NAD+ yang tereduksi menjadi NADH. Kemudian, koenzim A (suatu
senyawa yang mengandung sulfur yang berasal dari vitamin B) diikat oleh asetat dengan
ikatan yang tidak stabil dan membentuk gugus asetil yang sangat reaktif, yaitu asetil
koenzim-A, yang siap memberikan asetatnya ke dalam siklus Krebs untuk proses oksidasi
lebih lanjut.
Selama reaksi transisi ini, satu molekul glukosa yang telah menjadi 2 molekul asam
piruvat lewat reaksi glikolisis menghasilkan 2 molekul NADH.
Siklus Krebs terjadi di mitokondria dengan menggunakan bahan utama berupa asetil-CoA,
yang dihasilkan dari proses dekarboksilasi oksidatif. Ada delapan tahapan utama yang
terjadi selama siklus Krebs.
1. Kondensasi
2. Isomerase sitrat
3. Produksi CO2
Dengan bantuan NADH, enzim isositrat dehidrogenase akan mengubah isositra menjadi
alfa-ketoglutarat. Satu molekul CO2 dibebaskan setiap satu reaksi.
Respirasi seluler juga menghasilkan ATP dari tahapan ini. Reaksi pembentukan ATP
inilah yang dinamakan dengan fosforilasi, karena satu gugus posfat akan ditambahkan ke
ADP menjadi ATP. Pada awalnya, suksinil-CoA akan diubah menjadi suksinat, dengan
mengubah GDP + Pi menjadi GTP. GTP tersebut akan digunakan untuk membentuk ATP.
6. Dehidrogenasi
Suksinat yang dihasilkan dari proses sebelumnya akan didehidrogenasi menjadi fumarat
dengan bantuan enzim suksinat dehidrogenase.
Dua tahapan ini merupakan akhir dari Siklus Krebs. Hidrasi merupakan penambahan atom
hidrogen pada ikatan ganda karbon (C=C) yang ada pada fumarat sehingga menghasilkan
malat. Malat dehidrogenase mengubah malat menjadi oksaloasetat. Oksaloasetat yang
dihasilkan berfungsi untuk menangkap asetil-CoA, sehingga siklus Krebs akan terus
berlangsung. Adapun hasil dari Siklus Krebs adalah ATP, FADH2, NADH dan CO2.
Siklus akan menghasilkan 2 molekul CO2, yang dilepaskan. Jumlah molekul NADH yang
dihasilkan adalah 6 molekul, sedangkan FADH adalah 2 molekul. ATP yang diproduksi
secara langsung ada sebanyak 2 molekul, yang merupakan hasil dari reaksi fosforilasi
tingkat substrat. FADH2 dan NADH adalah molekul yang digunakan dalam tahapan
transpor elektron. Setiap molekul NADH akan dioksidasi lewat transpor elektron sehingga
menghasilkan 3 ATP per molekul, sedangkan satu molekul FADH2 menghasilkan 2
molekul ATP.