Abstrak :

Fraksi polisakarida sulfat dari alga merah Gracilaria intermedia (PLS) diperoleh dengan
papain digestion (60 ° C, 30 menit). Ekstrak dikenai analisis kolorimetri dan turbidimetri,
spektroskopi Fourier transform infrared (FTIR), 1H, 13C dan 2D 1H COZY nuclear magnetic
resonance (NMR) dan kromatografi gas / analisis spektrometri massa. Uji aktivitas
antioksidan dilakukan (chelation ion ferrous, kapasitas antioksidan total, dan pemulungan
radikal DPPH); aktivitas yang signifikan dari ekstrak menunjukkan bahwa polisakarida ini
dapat digunakan sebagai antioksidan non-sintetik. Perilaku reologi larutan polisakarida
berair dipelajari pada 25 ± 1 ° C menggunakan pengukuran oscillatory geser-geser dan
dinamis. Semua solusi dianalisis menunjukkan perilaku pseudoplastik dan potensial untuk
bertindak sebagai agen pengental, sebagaimana dibuktikan melalui perbandingan awal
dengan produk komersial yang digunakan untuk aplikasi ini.

Pendahuluan
Polisakarida adalah polimer yang menunjukkan berbagai sifat tergantung pada komposisi monomernya dan
memiliki aplikasi dalam berbagai jenis industri. Aplikasi termasuk penggunaan sebagai zat penstabil, pengental,
flokulan, dan penahan air dalam industri tekstil, makanan, farmasi, dan bioteknologi.

Karbainenans dan agarans adalah polisakarida sulfat yang diperoleh dari alga merah. Aplikasi industri polimer
ini sangat bergantung pada sifat reologi mereka. Sifat-sifat tersebut membuat dua polimer ini agen gelling dan
pengental yang penting, terutama dalam industri makanan [5]. Polisakarida tersulfat juga menunjukkan berbagai
aktivitas biologis, termasuk aktivitas antioksidan, antara lain [6-9]. Oleh karena itu, mereka juga memiliki
aplikasi potensial sebagai agen untuk mengurangi kerusakan sel dan memperpanjang waktu simpan makanan;
ini adalah area di mana senyawa dengan aktivitas antioksidan saat ini sangat diminati [10-12]. Senyawa non-
sintetik, terutama polisakarida, dengan potensi antioksidan saat ini sedang diselidiki oleh beberapa kelompok
penelitian [13-18] sebagai alternatif untuk senyawa antioksidan sintetis yang secara tradisional digunakan dalam
industri makanan dan farmasi seperti butylated hydroxytoluene (BHT), hydroxyanisole butylated ( BHA), dan
tert-butil hidrokuinon (TBHQ) karena mereka diduga merusak jaringan hati dan potensi karsinogenik

Ganggang merah dari genus Gracilaria secara ekonomi penting dalam industri phycocolloids [20] dan saat ini
sumber sekitar 65% dari 7,5 ton agar diproduksi setiap tahun di seluruh dunia [21]. Polisakarida tersulfat yang
diperoleh dari spesies genus Gracilaria mengandung 3-linked-β-D-galactopyranose (unit G) dan 4-linked- 3,6-
anhydro-α-L-galactopyranose (unit LA) [22-25] dengan substitusi gugus hidroksil oleh ester sulfat, gugus metil,
dan asam piruvat [23-26] (Gambar 1). Gracilaria sangat umum di pantai Brasil Timur Laut dan ekstraksi telah
ditunjuk sebagai alternatif untuk masuknya ekonomi bagian dari populasi di wilayah ini.

Hasil ekstraksi dan sifat akhir agaran sangat bergantung pada spesies rumput laut,
metodologi ekstraksi polisakarida, variasi musiman dan tempat asal spesimen. Jadi
karakterisasi kimia, struktural, dan reologi polisakarida diekstrak dari rumput laut diperlukan
[26,28]. Dalam kasus spesifik dari spesies Gracilaria intermedia, penelitian ilmiah terkait
Gracilaria intermedia masih langka. Untuk pengetahuan penulis, hanya studi tentang
taksonomi [28-31] dan aspek ekologi [32] telah dilaporkan.

Dalam konteks ini, tujuan dari makalah ini adalah untuk mengkarakterisasi polisakarida sulfat yang diekstrak
dari rumput laut merah Gracilaria intermedia. Karakterisasi ini dilakukan dengan metode spektroskopi,
turbidimetri dan kolorimetri. Aktivitas antioksidan dari polimer dan perilaku reologi dalam larutan juga
dievaluasi.

Material and method

Material
Papain, sistein dan cetylpyridinium chloride (CPC) yang diperoleh dari Vetec (Brasil), amonium molybdate
dibeli dari Dinamica (Brasil) dan D-galaktosa dari Acros Organics (AS). Ferrozine, 1, 1-difenil-2 -
picrylhydrazyl (DPPH) dan bovine serum albumin (BSA) dibeli dari Sigma-Aldrich (USA). Asam askorbat
diperoleh dari Synth (Brazil) dan Carboxymethyl cellulose diperoleh dari Mix (Brazil). Semua pelarut dan
bahan kimia lainnya adalah kelas analitis.
Ekstraksi polisakarida sulfat
Spesimen G. intermedia dikumpulkan pada April 2013 di pantai Atlantik Brasil (pantai Taiba, São Gonçalo -
Ceará). Rumput laut yang dikumpulkan dibersihkan dari epiphytes, dicuci dengan air suling, dan disimpan pada
-20 ° C. Spesimen kupon (n ° 2386) disimpan di Herbarium phikologis Laboratorium Ilmu Kelautan,
Universidade Federal do Ceará, Brasil.

Ekstraksi enzimatik polisakarida dilakukan sesuai dengan metodologi Farias dkk [33], dengan
beberapa modifikasi. Jaringan kering (5 g) disuspensikan dalam 250 mL 0,1 mol. L-1 buffer natrium
asetat (pH 5.0), mengandung 1 g papain, 5 × 10-3 mol.L-1 EDTA, dan 5 × 10- 3 mol. L-1 cysteine,
dan diinkubasi pada 60 ° C selama 30 menit. Larutan inkubasi kemudian disaring melalui membran
nilon, dan homogenat dipertahankan. Polisakarida dalam larutan diendapkan dengan 16 mL larutan
10% cetylpyridinium chloride (CPC). Setelah 24 jam pada suhu kamar (25 ° C), campuran
disentrifugasi pada 2.560 × g selama 20 menit pada 20 ° C. Polisakarida dicuci dengan 500 mL
larutan 0,05% CPC, dilarutkan dengan 100 mL campuran 2 mol.L-1 NaCl-etanol (100: 15, v / v), dan
kelebihan garam dihilangkan dengan pengendapan dan pencucian. dengan 200 mL etanol absolut.
Setelah 24 jam pada 4 ° C, endapan dikumpulkan dengan sentrifugasi (2.560 × g selama 20 menit
pada 20 ° C), dicuci secara ekstensif dengan etanol-80%, kemudian etanol absolut. Setelah ini,
polisakarida (PLS) dicuci dengan aseton, yang diikuti dengan pengeringan udara panas (60 ºC)
sampai semua aseton dihilangkan.

Analisis kimia
Kandungan sulfat dari PLS ditentukan oleh metode barium-gelatin [34] setelah hidrolisis
sampel dalam 1 mol. L-1 HCl (5 jam, 105 ° C) menggunakan natrium sulfat (Na2SO4)
sebagai standar. Untuk mengukur jumlah total karbohidrat netral, metode fenol-sulfur
dilakukan [35] dengan kurva standar yang disiapkan dengan D-galaktosa. Kandungan
protein diukur dengan metode Bradford [36] menggunakan bovine serum albumin (BSA)
sebagai standar.

Komposisi monosakarida
Sampel dari polisakarida diekstrak dari G. intermedia (5 mg) dihidrolisis dengan 5 mol.L-1 asam trifluoroasetat
selama 4 jam pada 100 ° C, dikurangi dengan borohidrida, dan alditol diasetilasi dengan anhidrida asetat: piridin
(1: 1 , v / v). The alditols acetates dilarutkan dalam kloroform dan dianalisis dalam spektrometer gas-cair
chromatograph / mass (GCMS-QP2010 Shimadzu, Jepang) dengan kolom DB-5ms (Agilent)

Spektroskopi inframerah
Transformasi Fourier spektrum inframerah (FTIR) diperoleh dengan spektrofotometer IR Shimadzu (FTLA
2000, ABB - BOMEM, Kanada) dengan pengukuran dalam rentang bilangan gelombang 400-4000 cm-1
menggunakan 20 scan. Sampel dianalisis sebagai pelet KBr.

Spektroskopi resonansi magnetik nuklir (NMR)

Teknik spektroskopi resonansi magnetik nuklir (NMR) adalah metode yang biasa digunakan
untuk karakterisasi struktural polisakarida rumput laut [38-41]. 1H, 13C dan 2D 1H COZY
NMR spectra di D2O dicatat pada 353 K pada transformasi Fourier spektrometer (Bruker
Avance DRX 500, USA) dengan inverse multinuclear probe probe-kepala dilengkapi dengan
kumparan gradien z-terlindung.

Penentuan aktivitas antioksidan

Kapasitas total antioksidan
Uji kapasitas antioksidan total, berdasarkan pengurangan Mo6 + hingga Mo5 +, dilakukan oleh metodologi yang
diusulkan oleh Prieto, Pineda & Aguilar [42]. Aliquots dari larutan polisakarida (0,1 mL) dari konsentrasi yang
berbeda (0,1% hingga 1,5%) dicampur dengan 1 mL larutan reagen (0,6 mol. L-1 asam sulfat, 28x10-3 mol.L-1
natrium fosfat , dan 4 × 10-3 mol.L-1 ammonium molybdate). Langkah ini diikuti oleh inkubasi pada 95 ° C
selama 90 menit. Selanjutnya, absorbansi dibaca pada 695 nm. Kurva standar di bawah kondisi yang sama
disiapkan dengan larutan asam askorbat. Dengan demikian, hasilnya disajikan sebagai kesetaraan asam askorbat
(mg / g EAAsc)
Aktivitas chelating besi (Fe 2+)
Ion besi dikaitkan dengan peroksidasi lipid karena reaksi Fenton. Proses ini terkait dengan serangkaian penyakit
[43-45]. Antioksidan membentuk kompleks dengan ion ini, sehingga mencegah kerusakan sel [46]. Aktivitas
chelation ion ferrous dari PLS diselidiki sesuai dengan metodologi yang digunakan oleh Zhang et al. [18].
Aliquot dari 1 mL larutan polisakarida pada konsentrasi yang berbeda (0,1% hingga 1,5%) dicampur dengan
0,05 mL FeCl2 (2 × 10-3 mol.L-1), 0,2 mL ferrozine (5 × 10-3 mol). L-1), dan 2,75 mL air. Solusinya adalah
gelisah dan diinkubasi pada suhu kamar selama 10 menit. Absorbansi larutan pada 562 nm diukur. Aktivitas
chelating dihitung menggunakan Persamaan 1 berikut:

di mana A0 adalah absorbansi kosong, A1 adalah absorbansi larutan uji, dan A2 adalah absorbansi larutan
identik dengan A1 dengan substitusi FeCl2 untuk alikuot air yang sama. Asam askorbat digunakan sebagai
kontrol positif.

Pemulungan radikal DPPH The 1,1-difenil-2-picrylhydrazyl radikal bebas (DPPH) aktivitas pemulungan PLS
diukur dengan menggunakan metode yang digunakan oleh Wu et al. [16]. Asam askorbat digunakan sebagai
kontrol positif. Penghambatan (%) dihitung menggunakan Persamaan 2 berikut:

di mana A0 dan A1 adalah absorbansi kosong dan sampel, masing-masing. 2.8 Perilaku rheologi Pengukuran-
pengukuran remologis dilakukan dalam rheometer rotasi (Ares, Instrumen TA, New Castle, DE, USA),
menggunakan geometri cone-plate (diameter 50 mm, sudut kerucut 0,0399 rad, gap 0,0553 mm). Semua
pengukuran dijalankan pada 25 ± 1 ° C. Tes dinamis dilakukan untuk mengevaluasi perilaku penyimpanan (G ’)
dan kerugian (G) moduli sebagai fungsi frekuensi. Tes sweep frekuensi dilakukan di wilayah viskoelastik linier
(LVR), ditentukan melalui uji regangan. Tiga sampel yang mengandung PLS sulfat diekstrak (1,0%, 1,25%, dan
1,5%) dianalisis. Kurva aliran diperoleh dengan merekam nilai tegangan geser ketika memotong sampel pada
laju geser yang meningkat dari 0,1 hingga 100 dtk 1 dengan kenaikan 4 s-1 dan kemudian menguranginya
melalui jalur yang sama. Tes ini dilakukan untuk sampel yang mengandung PLS dalam konsentrasi yang
berbeda (1,0%, 1,25%, dan 1,5%). Selain itu, untuk menguji potensi PLS sebagai agen pengental, solusi yang
mengandung karboksimetilselulosa (CMC), agen penebalan terkenal, dan campuran CMC dan PLS juga
dianalisis. Konsentrasi larutan CMC yang dimaksud adalah 0,75% dari CMC dan 1,5%. Dalam kasus campuran,
dua formulasi disiapkan, satu mengandung 1,0% PLS dan 0,5% dari CMC dan yang lain mengandung 0,75%
PLS dan 0,75% dari CMC.

Data kurva aliran dipasang menggunakan model Ostwald - de Waele (power-law), Persamaan 3:

di mana: adalah viskositas geser (Pa⋅s), K adalah indeks konsistensi (Pa.s); adalah laju geser (s-1), n adalah
indeks kekuatan hukum (tanpa dimensi) dan K adalah indeks konsistensi (Pa.s). Perkiraan parameter K dan n
dilakukan menggunakan metode least-square, dalam perangkat lunak Microsoft Excel.

Result dan discussion

Hasil dan analisis kimia

Hasil polisakarida oleh massa rumput laut Gracilaria intermedia adalah 17,0 ± 1,18%. Studi yang
ekstraksi berlangsung oleh pencernaan enzimatik rumput laut Gracilaria kornea (Brasil) mencapai
hasil 18,0% [28] dan 11,0 hingga 21,4% [47]. Souza dkk. [12] di Brasil memperoleh hasil polisakarida
sebesar 27,2% untuk rumput laut Gracilaria birdeae sementara Freile-Pelegrin dan Robledo [48],
pada sebuah studi musiman di Meksiko, memperoleh hasil dari 25,0 hingga 39,3% untuk servicornis
Gracilaria. Dalam ekstraksi dilakukan pada suhu kamar, di Brasil, Maciel et al. [23] mampu
menghasilkan 6,5% polisakarida dari rumput laut Gracilaria birdeae. Pembuatan ekstraksi
polisakarida dengan autoklaf di India, hasil 14,8% untuk Gracilaria debilis dan 15,2% untuk Gracilaria
Salicornia [49] tercapai.

Polisakarida dari Gracilaria intermedia (PLS) menunjukkan 6,60 ± 0,13% sulfat, yang berada dalam kisaran
kandungan polisakarida sulfat dari spesies Gracilaria lainnya (2,30-8,90%) [23]. Studi yang lebih baru
menunjukkan bahwa interval ini sebenarnya lebih luas, karena persentase sulfat 0,76 ± 0,08% (Gracilaria
debilis, India) [49], 1,00 ± 0,05% (Gracilaria caudata, Brasil) [26], dan 15,66% (Gracilaria kornea , Brasil) [28]
telah dilaporkan.

Kandungan karbohidrat adalah 54,64 ± 1,19%, konsisten dengan nilai persentase D - galaktosa yang ditemukan
pada spesies Gracilaria lainnya. Amorin dkk. [50] melakukan uji fenol sulfur dalam berbagai fraksi Gracilaria
ornata, Brasil, dan menemukan kadar gula berkisar antara 33,14 dan 62,20%. Dalam fraksi polisakarida rumput
laut Gracilaria birdeae, Brasil, kandungan gula antara 30,8 dan 68,2% [51] ditemukan.

Protein tidak terdeteksi pada fraksi polisakarida yang diperoleh dari rumput laut Gracilaria intermedia.

Komposisi monosakarida
Komposisi monosakarida dari polisakarida yang diekstrak dari G.intermedia ditentukan berdasarkan analisis
kromatografi gas / spektrometri massa dari alditol asetat yang terbentuk setelah hidrolisis asam. Monosakarida
utama yang terdeteksi adalah galaktosa. Temuan ini sesuai dengan hasil yang disajikan oleh Pomin & Mourão
yang menggambarkan keberadaan galactan sulfat dalam ganggang merah. Tidak ada gula lain yang terdeteksi
hingga batas <2% sebagai% dari berat kering, memastikan kemurnian bahan.

Spektroskopi inframerah
Gambar 2 menunjukkan spektrum FTIR dari fraksi polisakarida yang diekstraksi, diperluas di wilayah antara
1400 dan 700 cm-1 untuk lebih mengidentifikasi band-band kelompok sulfat. Band-band yang ditemukan pada
1375 dan 1258 cm-1 dapat dikaitkan dengan kelompok ester sulfat [51,52], band pada 1075 cm-1 sesuai dengan
galactan [53,54], dan pita pada 892 cm-1 sesuai dengan band agar-spesifik [55]. Band pada 931 cm-1 sesuai
dengan gugus C-O-O yang ada dalam 3,6 -anhydrogalactose, dan pita antara 820 dan 860 cm-1 menunjukkan
adanya gugus sulfat

Spektroskopi NMR
Gambar 3 dan 4 menunjukkan masing-masing spektrum 1D (1H dan 13C) dan 2D NMR dari fraksi polisakarida
yang diekstrak dari G.intermedia. Spektrum 1H NMR agak kompleks karena tumpang tindih dan pembesaran
tanda-tanda (Gambar 3a). Ini menunjukkan sinyal dari α-anomeric proton di δ 5.62, 5.14 dan 4.69 (ditugaskan,
masing-masing, untuk 3,6-α-Lanhydrogalactose terkait dengan β-D-galaktosa, α-L - galactose- 6-sulfate terkait
dengan β -D-galaktosa dan β-D - galaktosa terkait dengan 3,6-α-L-anhydrogalactose), dan dari H-1 β-D-
galaktosa terkait dengan 3,6-α-L-anhydrogalactose dengan sinyal di δ 4,69 [23,26,38-41,58]. Namun, H-1 β-D-
galaktosa terkait dengan α-L-galaktosa-6-sulfat tidak terdeteksi, mungkin karena sinyal tumpang tindih. Studi
lain menyatakan bahwa ketika unit ini terkait dengan α-3,6-anhydrogalactose dan L-α-Lgalactose- 6-sulfate, ada
variasi kimia kecil di wilayah 4,65-3,90 ppm. Karena itu, identifikasi sulit

Wilayah anomer 13C NMR (90-110 ppm) menunjukkan empat sinyal utama (Gambar 3b), yang ditugaskan
berdasarkan data literatur [23,26,38-41,58,60,61], sama seperti karbon lainnya. diamati di wilayah 59 - 85 ppm
(Tabel 1). C-1 dari β-D-galaktosa terkait dengan α-L-galaktosa-6-sulfato pada δ 103,7; C-1 dari β-D-galaktosa
terkait dengan 3,6-α-L-anhydrogalactose pada δ 102,5; C-1 dari α-L-galactose-6-sulfato terkait dengan β-D -
galactose di δ 101,25 dan C-1 dari 3,6-α-L-anhydrogalactose terkait dengan β-D-galactose pada δ 98,4.

2D COZY digunakan untuk menentukan urutan resonansi proton (Gambar 4). Mengenai dimer yang dibentuk
oleh 3,6-α-L-anhidrogalaktosa yang terkait dengan ikatan β-D-galaktosa yang berhubungan dengan 3,6-α-L-
anhydrogalactose u dan dua kopling yang diberikan β-D-galaktosa yang diamati. Proton yang digabungkan
adalah H-1 (3,6-α-L-anhidrogalaktosa) / H-2 (3,6-α-L-anhydrogalactose) pada δ 5.62 / 4.60; H-2 (3,6-α-L-
anhydrogalactose) / H-3 (3,6-α-L-anhydrogalactose) pada δ 4.60 / 5.04; H-3 (3,6-α-L-anhydrogalactose) / H-4
(3,6-α-L-anhydrogalactose) pada δ 5,04 / 4,11; H-4 (3,6-α-L-anhydrogalactose) / H-5 (3,6-α-L-
anhydrogalactose) pada δ 4.11 / 4.26; H-1 (β-D-galactose) / H-2 (β-D-galactose) pada δ 4.69 / 4.44 dan H-2 (β-
D-galactose) / H-3 (β-D-galactose) di δ 4.44 / 3.91. Untuk dimer α-L-galaktosa-6-sulfat yang terkait dengan β-
D-galaktosa, kopling diamati untuk H-1 (α-L - galactose-6-sulfato) / H-2 (α-L-galactose- 6-sulfato) pada δ 5.14 /
5.05. Meskipun keterlibatan lain dapat diamati, tidak mungkin untuk mengidentifikasi urutan hidrogen karena
spektrum 1H 1-dimensi menimpa mereka.

Penentuan aktivitas antioksidan

Kapasitas antioksidan total ditentukan dengan membentuk kompleks phosphomolybdenum ketika Mo6 +
direduksi menjadi Mo5 +; PLS menunjukkan aktivitas dengan 28,98 ± 1,86 mg / g EAAsc. Dalam penelitian
yang dilakukan oleh Costa et al. [62] jumlah asam askorbat dalam rumput laut Codium isthmocladum dan
Spatoglossum schroederi adalah (9,2 mg / g EAAsc) dan (14,4 mg / g EAAsc) masing-masing. Nilai-nilai ini
adalah jumlah yang lebih rendah daripada yang dipamerkan oleh polisakarida yang diekstrak dari G. intermedia.

Kemampuan PLS untuk berkelat ion besi (II) bergantung pada dosis. Meskipun PLS menyebabkan
persentase chelation lebih tinggi daripada yang diperoleh dari asam askorbat (Gambar 5a),
aktivitasnya rendah jika dibandingkan dengan polisakarida lain yang diekstrak dari rumput laut. Nilai
untuk PLS adalah 11,64 ± 0,83% (PLS 0,1%) dan 2819 ± 0,97% (PLS 1,5%). Costa et al. [62]
menemukan nilai 40,2% dari besi (III) chelation dalam larutan 1,5 mg.mL-1 polisakarida dari
Gracilaria caudata. Wang et al. [63] mempelajari fraksi polisakarida yang berbeda dari Laminaria
japonica dan menemukan nilai 29,48% untuk quelation dalam larutan 1,17 mg.mL-1.

Kapasitas radikal DPPH pemulungan PLS juga tergantung dosis, dengan penyumbatan bervariasi
dari 9,89 ± 1,32% (pada konsentrasi 0,1%) menjadi 41,83 ± 0,97% (pada konsentrasi 1,5%).
Meskipun signifikan, kapasitas penangkapan PLS DPPH radikal lebih rendah daripada asam askorbat
selama rentang konsentrasi yang diuji (Gambar 5b) dan juga lebih rendah dari aktivitas polisakarida
lain dari rumput laut. Dore dkk. [14], dengan polisakarida dari Sargassum vulgare, menemukan nilai
10,0 ± 0,7% 22,0 ± 0,6% dalam larutan yang bervariasi dari 0,15 hingga 3,0 mg.mL-1

Karakterisasi rematik
Berdasarkan uji regangan yang dilakukan untuk menentukan perilaku viskoelastik linear dari sampel dalam uji
osilasi dinamis, pengujian frekuensi sweep (FS) dilakukan pada 8% deformasi. Hasil tes FS disajikan pada
Gambar 6, di mana dapat dilihat bahwa nilai-nilai kehilangan modulus (G) lebih tinggi dari pada modulus
penyimpanan (G ’) pada semua konsentrasi dan frekuensi yang diuji. Hasil ini menunjukkan bahwa fraksi
polisakarida yang diekstraksi tidak menyebabkan larutan seperti gel. Perilaku ini dapat dikaitkan dengan
peningkatan jumlah sulfat yang diamati pada polisakarida yang diperoleh oleh pencernaan papain. Struktur
agarans sangat dipengaruhi oleh kehadiran kelompok bermuatan yang berpartisipasi dalam ikatan hidrogen
intermolekular [48]; kekuatan gel polimer ini berbanding terbalik dengan jumlah sulfat yang ada dalam
strukturnya

Respon yang paling kental tercermin dalam uji dinamik dan steady state menunjukkan bahwa penggunaan
potensial untuk polisakarida yang diekstraksi dari rumput laut merah Gracilaria intermedia adalah sebagai zat
pengental, terutama untuk aplikasi di mana aktivitas antioksidan dan tidak adanya warna dan bau adalah
persyaratan wajib. Untuk memeriksa hipotesis ini, kurva aliran pada 25 ± 1 ° C larutan polisakarida yang
diekstraksi, baik murni atau dalam campuran dengan karboksimetilselulosa (CMC), dibandingkan dengan dua
larutan yang mengandung CMC murni. Konsentrasi larutan CMC murni adalah 0,5% dan 1,5%, sesuai, masing-
masing, ke batas bawah dan atas rentang konsentrasi yang biasanya digunakan dalam aplikasi komersial CMC
sebagai agen pengental. Dalam campuran CMC dengan polisakarida yang diekstraksi, konsentrasi total zat
pengental adalah 1,5%. Kurva aliran yang diperoleh disajikan pada Gambar 7.

Gambar 7 menunjukkan bahwa semua solusi yang diuji menyajikan perilaku pseudoplastik, karena peningkatan
laju geser menyebabkan penurunan viskositas. Selain itu, untuk semua sampel, kurva ke atas dan ke bawah
(tidak ditampilkan) dari tegangan geser vs laju geser identik, tanpa perilaku histeresis yang diamati. Oleh karena
itu, larutan fraksi polysaccahride yang diekstraksi, serta dua solusi dengan CMC murni, tidak menunjukkan
thixotropy dalam kisaran konsentrasi yang diuji.

Dalam kasus larutan fraksi polisakarida yang diekstraksi, perilaku pseudoplastik kemungkinan disebabkan oleh
pecahnya struktur heliks ganda yang ada pada ganggang [65]. Selain itu, fakta bahwa ruptur ini hanya terjadi di
atas nilai tegangan tertentu (tcrit) [65] sesuai dengan pola dua wilayah yang diamati dalam kurva aliran, dengan
viskositas konstan pada laju geser rendah (dataran tinggi Newton) dan shear- perilaku menipis pada yang lebih
tinggi. Semakin tinggi konsentrasi polisakarida, semakin rendah batas atas dataran tinggi Newtonian karena
peningkatan viskositas menyebabkan tcrit dicapai pada nilai laju geser yang lebih rendah.

Selain itu, data yang sesuai dengan daerah penipisan geser semua kurva aliran yang disajikan pada
Gambar 7 dipasangkan ke model hukum daya. Nilai indeks konsistensi (K) dan indeks kuasa hukum
(n) disajikan pada Tabel 2. Terlihat bahwa peningkatan konsentrasi polisakarida dalam larutan PLS
menyebabkan peningkatan indeks konsistensi dan pengurangan kekuatan hukum indeks.
Mempertimbangkan bahwa indeks konsistensi terkait dengan resistensi cairan ke aliran dan indeks
kuasa hukum menunjukkan seberapa cepat viskositas berkurang dengan peningkatan laju geser,
peningkatan K dan pengurangan n dengan peningkatan konsentrasi PLS dalam larutan dapat
dijelaskan dalam hal peningkatan tingkat interaksi antara molekul polisakarida yang dihasilkan dari
peningkatan konsentrasi. Seperti yang diamati pada Gambar 7, meskipun CMC murni menyebabkan
viskositas tertinggi, baik PLS murni dan campuran PLS / CMC mampu menghasilkan peningkatan viskositas
yang signifikan. Sebenarnya, di seluruh rentang tingkat regangan yang dipelajari, PLS murni dan campuran PLS
/ CMC memberikan nilai viskositas lebih dekat ke yang diperoleh dengan larutan CMC 1,5% dibandingkan
dengan yang diperoleh dengan 0,5%. Hasil ini mengkonfirmasi potensi PLS sulfat yang diekstrak untuk
digunakan sebagai zat pengental.
Kesimpulan
Dalam penelitian ini, polisakarida yang larut dalam air berhasil diekstrak dari rumput laut merah Gracilaria
intermedia. Data yang diperoleh dengan metode spektroskopi menunjukkan bahwa bahan polimer yang
diekstrak kaya akan agaran. Studi in vitro menunjukkan bahwa PLS memiliki aktivitas antioksidan, yang dapat
digunakan untuk perlindungan seluler terhadap radikal bebas dan untuk meningkatkan kelangsungan hidup
produk. Karakteristik rheologi dari PLS menunjukkan bahwa itu dapat digunakan sebagai pengubah viskositas
dalam proses industri. Karakteristik antioksidan dan perilaku reologi dikombinasikan dengan sifat organoleptik
yang diamati (tidak ada warna dan bau) membuat polisakarida dari rumput laut Gracilaria intermedia agen yang
menjanjikan untuk digunakan dalam proses manufaktur makanan dan farmasi.