09 - 206penyakit Tiroid Pada Kehamilan

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA
PENGARUH SUHU TERHADAP DAYA TAHAN

HIDUP BAKTERI PADA SEDIAAN PROBIOTIK
SKRIPSI
FAUZIAH UTAMI
109102000004
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
PROGRAM STUDI FARMASI
JAKARTA
2013
UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA
PENGARUH SUHU TERHADAP DAYA TAHAN

HIDUP BAKTERI PADA SEDIAAN PROBIOTIK
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi
FAUZIAH UTAMI
109102000004
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN
PROGRAM STUDI FARMASI
JAKARTA
2013
ii
HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS
Skripsi ini adalah hasil karya saya sendiri,
dan semua sumber baik yang dikutip maupun dirujuk
telah saya nyatakan dengan benar.
Nama : Fauziah Utami

NIM : 109102000004
Tanda tangan :
Tanggal : 30 Juli 2013
iii
HALAMAN PERSETUJUAN SKRIPSI
NIM : 109102000004
Program Studi : Farmasi
Judul Skripsi : Pengaruh Suhu Terhadap Daya Tahan Hidup Bakteri pada
Sediaan Probiotik
Menyetujui
Pembimbing I Pembimbing II
Ofa Suzanti Betha, M.Si.,Apt Yuni Anggraeni, M.Farm., Apt

NIP. 19750104 200912 001 NIP. 19831028 200901 2 008
Mengetahui,
Ketua Program Studi Farmasi
Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan
Universitas Islam Negeri Syarif idayatullah
Drs. Umar Mansur, M.Sc
iv
HALAMAN PENGESAHAN
Skripsi ini diajukan oleh :
NIM : 109102000004
Judul : Pengaruh Suhu Terhadap Daya Tahan Hidup Bakteri pada
Sediaan Probiotik
Telah berhasil dipertahankan di hadapan Dewan Penguji dan diterima

sebagai bagian persyaratan yang diperlukan untuk memperoleh gelar
Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan
Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah Jakarta
DEWAN PENGUJI
Pembimbing 1 : Ofa Suzanti Betha, M.Si., Apt ( )

Pembimbing 2 : Yuni Anggraeni, M.Farm., Apt ( )
Penguji 1 : Prof.Dr.Atiek Soemiati M.Si., Apt ( )
Penguji 2 : Nelly Suryani, Ph.D., Apt ( )
Ditetapkan di : Ciputat
Tanggal : Juli 2013
v
ABSTRAK

Judul : Pengaruh Suhu Terhadap Daya Tahan Hidup Bakteri
pada Sediaan Probiotik
Penggunaan probiotik pada sediaan farmasi dipercaya dapat menyeimbangkan

flora normal usus, meningkatkan sistem imun dan sebagai antikarsinogenik. Agar
dapat memberikan manfaat, probiotik harus memiliki viabilitas yang baik selama
proses pembuatan hingga penyimpanan, namun suhu penyimpanan seringkali
menjadi aspek yang terlupakan oleh konsumen dalam menyimpan probiotik.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh suhu penyimpanan terhadap
viabilitas tiga sediaan probiotik yaitu sampel X yang mengandung Lactobacillus
achidophilus, sampel Y yang mengandung Lactobacillus reuteri dan sampel Z
yang mengandung Lactobacillus sporogenes. Ketiga sampel disimpan pada suhu
4○C, 25○C dan 44○C selama 28 hari penyimpanan. Pengujian dilakukan dengan
menggunakan metode standar plate count dengan interval waktu pengujian 0, 1,
2, 3 dan 4 minggu penyimpanan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa suhu
penyimpanan 4○C dapat mempertahankan viabilitas sampel X, Y dan Z. Namun,
suhu penyimpanan 25○C hanya dapat mempertahankan viabilitas sampel X dan Z.
Sedangkan suhu penyimpanan 44○C menurunkan viabilitas sampel X, Y dan Z.
Kata Kunci : viabilitas, suhu, Lactobacillus achidophilus, Lactobacillus reuteri,

Lactobacillus sporogenes
vi
ABSTRACT
Name : Fauziah Utami

Programme Study : Pharmacy
Tittle : Effect of Temperature on The Viability of Bacteria in
Probiotic Preparations
Use of probiotics in pharmaceutical preparations can reliably balance the normal

intestinal flora, improve the immune system and as an anticarcinogenic. To be
able provide benefits, probiotics must have good viability during process of
manufacture to storage. However, the storage temperature is often a forgotten
aspect of a consumer store probiotics. The objective of this research is determine
effect of storage temperatures on the survival of bacteria in three samples
probiotic preparations are sample X containing Lactobacillus achidophilus,
sample Y containing Lactobacillus reuteri and sample Z containing Lactobacillus
sporogenes. All samples were stored at 4○C, 25○C and 44○C for 28 days of
storage. Tests performed by using standard plate count method with interval
testing 0, 1, 2, 3 and 4 weeks of storage. The results showed that the storage
temperature at 4○C can maintain viability of the samples X, Y and Z. However,
the storage temperature at 25○C can only maintain viability of the sample X and Z
While storage temperature at 44○C decrease viability of samples X, Y and Z.
Keyword : viability, temperature, Lactobacillus achidophilus, Lactobacillus

reuteri, Lactobacillus sporogenes
vii
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur saya panjatkan kehadirat Allah SWT, atas segala limpahan
nikmat, rahmat, dan karunia yang telah diberikan kepada saya sehingga dapat
menyelesaikan skripsi dengan judul Pengaruh Suhu terhadap Daya Tahan
Hidup Bakteri pada Sediaan Probiotik dalam rangka menyelesaikan tugas akhir
pada Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas
Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta.
. Keberhasilan dalam penyelesaian skripsi ini tidak lepas dari bantuan
serta dukungan orang-orang yang telah banyak berjasa. Pada kesempatan kali ini,
penulis ucapkan terimakasih dan penghargaan sebesar-besarnya kepada :
1. Bapak Prof.Dr.(hc) dr.M.K Tadjudin Sp.And, selaku Dekan Fakultas

Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatulah Jakarta.
2. Bapak Drs. Umar Mansur, M.Sc, selaku Ketua Program Studi Farmasi
Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatulah Jakarta
3. Ibu Yuni Anggraeni M.Farm.,Apt selaku dosen pembimbing akademik
yang telah memberi arahan dan saran selama perkuliahan.
4. Ibu Ofa Suzanti Betha M.Si.,Apt, selaku Pembimbing I yang telah
memberi arahan, masukan dan bimbingan dalam penulisan skripsi ini.
5. Ibu Yuni Anggraeni M.Farm.,Apt selaku Pembimbing II yang telah
memberi masukan, arahan dan motivasi dalam penulisan skripsi ini
6. Kedua Orangtua dan kakak saya yang selalu menyebut saya daam doanya,
yang selalu memberi motivasi dan menjadi semangat dalam penulisan
skripsi ini.
7. Para dosen yang telah membantu penulis selama mengikuti perkuliahan di
Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN
Syarif Hidayatulah Jakarta
8. Sahabat-Sahabat tercinta yang menjadi teman satu bimbingan, tempat
bertukar pikiran dan berbagi ide dalam penulisan skripsi ini yaitu Warda
Nabiela dan Nadya Zahrayny dan yang selalu membantu dalam
pengurusan berkas-berkas skripsi penulis.
viii
9. Sahabat Alfrida Tatsa Haifa yang dengan ikhlas menjadi notulen dalam
seminar proposal penulis
10. Sahabat Indah Fadlul Maula yang meluangkan waktu untuk memberi
masukan dan saran penulisan.
11. Sahabat Gian Pertela yang mengajari cara mengolah data dengan SPSS 20.
12. Sahabat Muhammad Arif yang dengan ikhlas mengantarkan membeli alat
dan bahan penelitian.
13. Para Laboran yang senantiasa membantu penulis dalam penelitian ini
yaktu kak Lisna, Kak Rani, Kak Yopi, Kak Eris, Kak Liken, Kak
Rahmadi, dan Kak Tiwi.
14. Sahabat Sahabat teman satu perjuangan yang senantiasa selalu ada
menemani saya baik dalam suka maupun duka dan selalu menghibur
dalam kebersamaan yaitu Qaffah Silma Azas, Widya Larasaty, Andy
Risky, Sonia Zulfa, Hani Haifa, Evira Vivikananda, Siti Zamilatul
Azkiyah, Mutia Sari Wardhana, Agung Priyanto, RisdaYulianti, Hissi
Fitriyah, Dina permata, Nurul Fitrializa, Nova Yanti, Vita Fitria, Putri
Assifa, Maulida Putri, Istiqomah, Muhammad Irsyad, Nurfitriyani,
Chairunnisa.
15. Dan sahabat-sahabat Farmasi Angkatan 2009 yang tak bisa disebutkan
satu per satu dan menemani perjuangan menuntut ilmu selama 4 tahun ini.
Dan kepada semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu
per satu, penulis juga menyampaikan terimakasih dan penghargaan yang
setinggi-tingginya. Karya ini merupakan persembaan terbaik penulis,
namun tiada luput dari kekurangan walau demikian penulis tetap berharap
semoga karya ini dapat bermanfaat bagi yang membacanya.
Jakarta, 30 Juli 2013
Fauziah Utami
ix
HALAMAN PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI
TUGAS AKHIR UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS
Sebagai sivitas akademik Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah

Jakarta, saya yang bertanda tangan di bawah ini :

NIM : 109102000004
Fakultas : Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan (FKIK)
Jenis Karya : Skripsi
demi perkembangan ilmu pengetahuan, saya menyetujui skripsi/karya ilmiah

saya, dangan judul :
PENGARUH SUHU TERHADAP DAYA TAHAN HIDUP BAKTERI

PADA SEDIAAN PROBIOTIK
untuk dipublikasikan atau ditampilkan di internet atau media lain yaitu Digital
Library Perpustakaan Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah
Jakarta untuk kepentingan akademik sebatas sesuai dengan Undang-Undang
Hak Cipta.
Demikian pernyataan persetujuan publikasi karya ilmiah ini saya buat dengan
sebenarnya.
Dibuat di : Ciputat
Pada Tanggal : 30 Juli 2013
Yang menyatakan,
(Fauziah Utami)
x
DAFTAR ISI
Hal
HALAMAN JUDUL ........................................................................................... ii
HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS ............................................. iii
HALAMAN PERSETUJUAN SKRIPSI ......................................................... iv
HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................. v
ABSTRAK .......................................................................................................... vi
ABSTRACT ....................................................................................................... vii
KATA PENGANTAR ....................................................................................... vii
HALAMAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ILMIAH .................................... x
DAFTAR ISI ....................................................................................................... xi
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ xiii
DAFTAR TABEL ............................................................................................ xiv
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... xv
BAB 1 PENDAHULUAN .................................................................................. 1
1.1 Latar belakang ............................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ......................................................................... 3
1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................... 3
1.4 Manfaat Penelitian ......................................................................... 3
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 4
2.1 Probiotik ........................................................................................ 4
2.2 Strain Bakteri Probiotik ................................................................. 6
2.2.1 Lactobacillus sp .................................................................... 7
2.2.2 Bifidobacteria sp .................................................................. 8
2.2.3 Enterococcus sp .................................................................... 8
2.2.4 Streptococcus sp ................................................................... 9
2.3 Terapi Probiotik ............................................................................. 9
2.4 Dosis Probiotik ............................................................................ 13
2.5 Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Viabilitas Probiotik ............ 16
BAB 3 METODE PENELITIAN .................................................................... 19
3.1 Waktu dan Lokasi Penelitian ....................................................... 19
3.2 Alat dan Bahan ............................................................................ 19
3.2.1 Alat ................................................................................... 19
3.2.2 Bahan ............................................................................... 19
3.3 Prosedur Kerja ............................................................................. 19
3.3.1 Preparasi Alat dan Bahan yang Digunakan ...................... 19
3.3.1.1 Preparasi Alat....................................................... 20
3.3.1.2 Preparasi Sampel ................................................. 20
xi
3.3.1.3 Pembuatan Medium MRSA................................. 20
3.3.2 Identifikasi Bakteri pada Sampel X, Y dan Z dengan
Pewarnaan Gram ............................................................. 20
3.3.3 Pengujian Viabilitas Bakteri pada Sampel X, Y dan Z .... 21
3.4 Analisa Data ................................................................................ 21
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................... 22
4.1 Pemilihan dan Preparasi Sampel ................................................. 22
4.2 Pertumbuhan Koloni Bakteri Sampel X, Y dan Z pada Medium
MRSA .......................................................................................... 23
4.3 Identifikasi Bakteri Sampel X, Y dan Z dengan Pewarnaan
Gram ............................................................................................ 23
4.4 Hasil Pengujian dan Analisa Data Viabilitas Sampel X pada
Penyimpanan Suhu 4○, 25○ dan 44○C ......................................... 24
4.5 Hasil Pengujian dan Analisa Data Viabilitas Sampel Y pada
Penyimpanan Suhu 4○, 25○ dan 44○C .......................................... 26
4.6 Hasil Pengujian dan Analisa Data Viabilitas Sampel Z pada
Penyimpanan Suhu 4○, 25○ dan 44○C .......................................... 28
BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................... 33
5.1 Kesimpulan ................................................................................. 33
5.2 Saran ............................................................................................ 33
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 34
xii
DAFTAR GAMBAR
Hal
Gambar 4.1 Koloni Sampel X, Y dan Z .............................................................23

Gambar 4.2 Pewrnaan Gram Sampel X, Y dan Z ..............................................24
Gambar 4.3 Hubungan Antara Waktu Penyimpanan dengan Viabilitas Sampel
X pada Penyimpanan Suhu 4○, 25○ dan 44○C ................................26
Y pada Penyimpanan Suhu 4○, 25○ dan 44○C ................................28
X pada Penyimpanan Suhu 4○, 25○ dan 44○C ................................30
xiii
DAFTAR TABEL
Hal
Tabel 2.1 Beberapa Mikroorganisme yang Berperan Sebagai Probiotik ..............6

Tabel 2.2 Variasi Dosis Probiotik dengan Berbagai Kondisi Kesehatan ............14
Tabel 4.1 Jumlah Total Bakteri Sampel X Selama Periode Penyimpanan .........24
Tabel 4.2 Hasil Analisa Data Jumlah Bakteri Sampel X dengan Menggunakan
Metode Uji One Way Repeated Measures Anova ...............................25
Tabel 4.3 Jumlah Total Bakteri Sampel Y Selama Periode Penyimpanan .........26
Tabel 4.4 Hasil Analisa Data Jumlah Bakteri Sampel Y dengan Menggunakan
Tabel 4.5 Jumlah Total Bakteri Sampel Z Selama Periode Penyimpanan ..........28
Tabel 4.6 Hasil Analisa Data Jumlah Bakteri Sampel Z dengan Menggunakan
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Hal
Lampiran 1. Alur Penelitian ................................................................................37

Lampiran 2. Media perbenihan Man De Rogosa Sharpe Agar ..........................38
Lampiran 3 Cerficate of Analysis Medium MRSA...........................................39
Lampiran 4. Data Sampel X ................................................................................40
Lampiran 5. Data Sampel Y ................................................................................41
Lampiran 6. Data Sampel Z ................................................................................42
Lampiran 7. Skema Kerja Viabilitas Bakteri Sampel X .....................................43
Lampiran 8. Skema Kerja Viabilitas Bakteri Sampel Y .....................................44
Lampiran 9. Skema Kerja Viabilitas Bakteri Sampel Z......................................45
Lampiran 10. Perhitungan Jumlah Total Bakteri Sampel X ................................46
Lampiran 11. Perhitungan Jumlah Total Bakteri Sampel Y ................................47
Lampiran 12. Perhitungan Jumlah Total Bakteri Sampel Z .................................48
Lampiran 13. Koloni Bakteri yang Tumbuh pada Sampel X ...............................59
Lampiran 14. Koloni Bakteri yang Tumbuh pada Sampel Y ...............................51
Lampiran 15. Koloni Bakteri yang Tumbuh pada Sampel Z ................................52
Lampiran 16. Perbandingan Jumlah Total Bakteri Sampel X pada Suhu 4○ C
dengan One Way Repeated Measures Anova .................................53
Lampiran 17. Perbandingan Jumlah Total bakteri Sampel X pada Suhu 25○ C
dengan One Way Repeated Measures Anova ................................54
Lampiran 18. Perbandingan Jumlah Total bakteri Sampel X pada Suhu 44○ C
Lampiran 19. Perbandingan Jumlah Total bakteri Sampel Y pada Suhu 4○ C
Lampiran 22. Perbandingan Jumlah Total bakteri Sampel Z pada Suhu 4○ C
xv
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Probiotik didefinisikan sebagai mikroorganisme hidup non-patogenik,

yang jika dikonsumsi dalam jumlah tertentu akan memberikan efek
menguntungkan bagi inang. Probiotik dapat dikonsumsi setiap hari sebagai
suplemen makanan yang dapat menjaga keseimbangan dalam ekosistem
mikrobiota usus (WHO, 2001). Probiotik juga dapat memberikan manfaat
kesehatan seperti meningkatkan resistensi terhadap penyakit infeksi seperti diare
(WHO, 2001), menurunkan tekanan darah dan kolesterol (Yulinery, et al,. 2006),
mereduksi alergi, intoleransi laktosa (Simadibrata, 2011), meningkatkan sistem
imun tubuh (Prasetyo dan dan Purwanto, 2010) dan manfaat lainnya.
Pada dasarnya konsumsi probiotik dapat diperoleh dari tiga sumber yaitu
produk-produk susu fermentasi seperti yogurt yang mengandung sel Lactobacillus
bulgaricus dan Streptococcus termophilus, suplemen makanan dan minuman yang
mengandung satu atau beberapa macam mikroba yang bermanfaat seperti
L.acidophilus, L.reuteri, L.casei dan Bifidobacteria serta produk farmasi seperti
tablet, kapsul atau granula yang mengandung konsentrat sel bakteri (Harmayani,
et al., 2001).
Sediaan probiotik relatif mudah ditemukan di pasaran, namun hal yang
harus diperhatikan oleh konsumen adalah belum adanya jaminan mutu sediaan,
ditinjau dari jumlah probiotik sesuai dengan komposisi yang tercantum dalam
kemasan dan tetap hidupnya probiotik tersebut saat mencapai usus. Hal ini
dikarenakan jaminan mutu sediaan pada dasarnya dipengaruhi oleh karakteristik
dari probiotik itu sendiri. Untuk mengetahui jaminan mutu suatu sediaan terdapat
beberapa kriteria yang harus dipenuhi untuk suatu produk probiotik di antaranya
adalah sifat fisik yang baik dan dapat stabil selama proses pembuatan hingga
penyimpanan. Syarat lainnya adalah tidak bersifat patogen dan aman untuk
dikonsumsi. Strain probiotik juga harus tahan dan tetap hidup selama proses
pengolahan makanan dan penyimpanan, mudah diaplikasikan pada produk
1 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2
makanan serta tahan terhadap proses fisika kimia pada makanan (Saarela, et al.,
2000).
Salah satunya dilihat dari aspek viabilitas sediaan yang baik. Viabilitas
merupakan jumlah sel hidup yang diperkirakan sebagai ukuran konsentrasi sel
yang ada dalam produk (Yulinery, et al., 2009). Viabilitas yang stabil
menunjukkan ketahanan yang baik terhadap pengaruh lingkungan. Hal ini
diperlukan untuk memastikan bahwa probiotik tetap hidup dalam produk selama
masa simpan. Sayangnya aspek ini tidak selalu diperhatikan, sebagaimana
diketahui terdapat laporan yang mengatakan bahwa dalam sejumlah produk
komersial, tingkat probiotik yang layak tidak memenuhi kriteria peraturan dalam
masa penyimpanan (Malago, et al., 2011). Faktor-faktor yang mempengaruhi
pertumbuhan dan viabilitas bakteri probiotik diantaranya kondisi fisiologis, suhu,
pH, aktivitas air, dan oksigen. Sejumlah faktor-faktor tersebut perlu diperhatikan
untuk mendapat efek maksimal dari probiotik yang dikonsumsi ( Neha, et al.,
2012).
Seperti disebutkan diatas, suhu penyimpanan menjadi salah satu faktor
penting yang mempengaruhi ketahanan hidup bakteri. Selama proses pembuatan,
penggunaan suhu melebihi 45-50○C akan merusak kelangsungan hidup bakteri
probiotik karena viabilitas bubuk probiotik menurun dengan meningkatnya suhu
penyimpanan. Sedangkan pada suhu rendah (4-7○C) kelangsungan hidup bakteri
dapat dipertahankan (Yuan Kun Lee et dan Seppo Salminen, 2009). Oleh karena
itu, dibutuhkan kondisi penyimpanan yang ideal untuk mempertahankan viabilitas
probiotik sehingga memberikan efek terapeutik. Secara umum nilai minimum
yang harus dipenuhi sekitar 1x107 cfu/ml bakteri dalam sediaan (WHO, 2001).
Berdasarkan definisi probiotik yang telah disebutkan di awal, uji viabilitas
sangat diperlukan untuk menyatakan kelayakan sediaan dianggap sebagai
probiotik. Suhu penyimpanan merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi
viabilitas bakteri dalam sediaan. Oleh karena itu, uji ketahanan hidup bakteri
selama penyimpanan dalam jangka waktu tertentu dengan memperhatikan
pengaruh suhu perlu dilakukan sebagai skrining kelayakan produk untuk dapat
memberikan efek optimal. Penelitian kali ini difokuskan untuk mengetahui
pengaruh suhu dan waktu penyimpanan pada tahapan pasca distribusi, artinya
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

3
pada saat produk yang beredar sudah berada di tangan konsumen. Hal ini
didasarkan pada sejumlah fakta yang ditemui di masyarakat dimana terdapat
kelalaian dalam menyimpan produk–produk probiotik. Padahal, suhu
penyimpanan yang ideal adalah salah satu syarat penting yang harus dipenuhi
untuk mendapatkan manfaat dari kerja suatu probiotik.
1.2 Rumusan Masalah

1. Bagaimana pengaruh suhu penyimpanan terhadap viabilitas bakteri pada
beberapa sediaan probiotik yang beredar ?
2. Bagaimana pengaruh lama waktu penyimpanan terhadap viabilitas bakteri
pada beberapa sediaan probiotik yang beredar ?
1.3 Tujuan Penelitian

3. Untuk mengetahui pengaruh suhu penyimpanan terhadap viabilitas bakteri
pada beberapa sediaan probiotik yang beredar ?
4. Untuk mengetahui pengaruh lama waktu penyimpanan terhadap viabilitas
bakteri pada beberapa sediaan probiotik yang beredar ?
1.4 Manfaat Penelitian

Memberikan informasi mengenai kondisi suhu penyimpanan
optimal yang dapat mempertahankan kelangsungan hidup bakteri dari
sediaan probiotik sehingga dapat memberikan efek yang optimal bagi
konsumen.

BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Probiotik
Probiotik berasal dari bahasa Yunani yang berarti hidup. Probiotik adalah
mikroorganisme hidup non patogenik, yang jika dikonsumsi dalam jumlah
tertentu akan memberikan efek menguntungkan bagi inangnya (WHO, 2001).
Probiotik adalah suplemen makanan yang berisi mikroba hidup yang bermanfaat
bagi kesehatan konsumen dengan mempertahankan keseimbangan mikroba usus
(Saarela, et al., 2000). Suatu probiotik dapat dikatakan bermanfaat bagi kesehatan
jika memenuhi kriteria, seperti memiliki teknologi dengan metode pengolahan
yang baik sehingga dapat diimpelementasikan dalam produksi dan disatukan ke
dalam produk makanan tanpa menghilangkan fungsi dan viabilitas dan tidak
mengakibatkan rasa atau tekstur yang tidak disukai. Probiotik ini tersedia dalam
berbagai jenis produk seperti makanan, obat-obatan, dan suplemen makanan
bakteri asam laktat.
Dengan didasarkan pada “Guideline on probiotics and prebiotics” yang
disusun oleh FAO/WHO sifat–sifat dari probiotik dapat dijelaskan sebagai
berikut :
1. Tidak kehilangan sifat aslinya selama masa penyimpanan

2. Secara normal berada di saluran pencernaan manusia
3. Harus dapat bertahan hidup, dapat melawan pertahanan barrier
lambung, tahan terhadap kerja pencernaan dari getah lambung, enzim
pencernaan dan garam empedu dan berkoloni di usus. Untuk alasan
inilah, dosis efektif minimal yang sangat indikatif karena sangat
bergantung pada biakan dan preparat yang digunakan, yakni 107
cfu/hari
4. Harus bisa melekat dan berkoloni dengan sel intestinal. Struktur
membran bakteri berperan dalam mekanisme perlekatan dan
berpasangan langsung dengan mukosa, pemukaan protein dan
mungkin saja dengan yang beberapa lainnya yang berlendir.

5
5. Harus menimbulkan fungsi metabolik pada level pencernaan, yang

bermanfaat bagi kesehatan manusia, dan antagonis mikroorganisme
patogen dengan memproduksi zat anti mikrobial.
6. Tidak menimbulkan reaksi berbahaya (tidak patogen) terhadap sistem
imun atau bahaya lainnya dan juga dinyatakan aman (melalui status
GRAS tertulis “dinyatakan aman”)
7. Resistensi terhadap antibiotik
8. Harus dikelola dalam dosis yang adekuat dan memiliki rasio efikasi
biaya yang tepat dan seimbang (Malago, et al., 2011).
Mekanisme probiotik melindungi atau memperbaiki kondisi kesehatan

yaitu dengan menghambat pertumbuhan bakteri patogen melalui beberapa cara
antara lain :
1. Memproduksi substansi-substansi penghambat. Probiotik mampu
memproduksi zat-zat penghambat pertumbuhan bakteri Gram positif
maupun negatif. Zat-zat ini termasuk asam organik, hidrogen
peroksida (H2O2), bakteriosin yang mampu menghambat tidak hanya
bakteri hidup namun juga memproduksi toksin.
2. Menghambat pertumbuhan bakteri patogen dalam mukosa usus
dengan cara kompetisi untuk mengadakan perekatan dengan enterosit
(sel epitel mukosa), enterosit yang telah jenuh dengan bakteri
probiotik tidak dapat lagi mengadakan perlekatan dengan bakteri yang
lain.
3. Kompetisi nutrisi. Bakteri-bakteri yang menguntungkan (probiotik)
akan berkompetisi dengan bakteri patogen dalam hal memperebutkan
nutrisi pada saluran cerna.
4. Kemampuan untuk mendegradasi prokarsinogen, senyawa
antimutagenik, memodulasi enzim karsinogenik dalam usus, dan
menekan tumor dengan mekanisme respon imun.
5. Memperbaiki respon imun melalui peningkatan ekspresi dari limfosit
B dan sekresi imunoglobulin A baik secara lokal maupun sistemik.
Ketika probiotik berkontak dengan usus yang berasosiasi dengan
jaringan limfoid maka dapat merangsang peningkatan sistem imun

6
dengan menstimulasi respon IgA dan merangsang aktivitas fagositosis

(Simadibrata, 2011).
2.2 Strain Bakteri Probiotik

Strain utama yang digunakan sebagai probiotik untuk manusia adalah
bakteri dari genus Lactobacillus, Bifidobacterium, Enteroccocus, Streptoccocus
dan ragi Saccharomyces. Di antara berbagai mikroorganisme, bakteri dari genus
Lactobacillus dan Bifidobacterium yang paling sering digunakan sebagai
probiotik (Malago, et al., 2011).
Bakteri asam laktat merupakan bakteri yang biasa digunakan sebagai
probiotik. Bakteri ini bersifat nonpatogenik, nontoksikogenik, Gram positif, tidak
menghasilkan spora, bakteri fermentasi yang berkaitan dengan produksi asam
laktat dari karbohidrat (Desai, 2008).
Tabel 2.1 Beberapa Mikroorganisme yang Berperan Sebagai Probiotik

Lactobacillus Bifidobacteria Enterococcus Streptococcus Lactococcus
L.acidophilus B.adolescentis E.faecalis S.termophilus L.lactis
L.brevis B.animalis E.faecium subsp.cremor
L.casei B.bifidum is
L.curvatus B.breve L.lactis
L.fermentum B.infantis subsp.lactis
L.gasseri B.longum
L.johnsonii B.thermophilum
L.reuteri
L.rhamnosus
L.salivarius
Propionibacterium Yeast Other

P.freudenreichii Kluyveromyces Leunococcus
P.freudenreichii lactis mesenteroides
subs.thermanii Saccharomyces Pediococcus
P.jensenii boulardii acidilactici
Saccharomyces
cerevisiae
Sumber: (Baffoni dan Biavati, 2008)
Klasifikasi bakteri asam laktat dalam genus yang berbeda sebagian besar
didasarkan pada perbedaan morfologi, cara fermentasi glukosa, pertumbuhan pada
suhu yang berbeda, dan konfigurasi dari asam laktat yang dihasilkan, kemampuan

7
untuk tumbuh pada konsentrasi garam tinggi, dan toleransi terhadap asam atau
basa (Desai, 2008).
Karakteristik penting yang digunakan untuk membedakan genus bakteri
asam laktat yaitu dengan cara fermentasi glukosa yaitu pada saat keterbatasan
konsentrasi glukosa dan faktor pertumbuhan (asam amino, vitamin dan prekursor
asam nukleat) serta terbatasnya ketersediaan oksigen. Dengan kondisi tersebut,
bakteri asam laktat dapat dibagi menjadi dua kelompok yaitu bersifat
homofermentatif (yang mengubah glukosa hampir seluruhnya menjadi asam
laktat) dan heterofermentatif (yang mengubah glukosa fermentasi menjadi asam
laktat, etanol / asam asetat, dan CO2) (Desai, 2008).
2.2.1 Lactobacillus sp
Lactobacillus merupakan bakteri Gram positif fakultatif, tidak membentuk
spora, berbentuk batang atau coccobacilli dan tidak berflagela. Lactobacilli
berbentuk batang yang merupakan bakteri filogenetis yang masuk ke dalam filum
Firmicutes (De vos, et al., 2009). Bakteri ini ditemukan pada tumbuhan dan
berperan penting dalam memberikan kontribusi proses pengasaman dan
pengawetan, aroma dan pengembangan tekstur pada fermentasi makanan namun
kebanyak strain Lactobacillus ini berasal dari manusia. Bakteri ini memiliki
kemampuan untuk memfermentasi laktosa dan monosakarida lainnya menjadi
asam laktat. Contoh bakteri golongan Lactobacillus yang digunakan sebagai
probiotik yaitu L. acidophilus, L. delbrueckii subsp. bulgaricus, L. casei, L.
fermentum, L. plantarum, L. reuteri.
Namun, yang paling banyak digunakan sebagai probiotik adalah
Lactobacillus acidophilus yang bersifat homofermentatif. L. acidophilus bersifat
non motil, tidak berflagela, dan tidak berspora. Bakteri ini merupakan anaerob
fakultatif dan berbentuk batang Gram positif. Bakteri ini memiliki lebar sekitar
0,6-0,9 μm dan panjang 1,5-6,0 μm dengan ujung bulat. Sel mungkin muncul
dalam bentuk tunggal atau berpasangan serta dalam rantai pendek. Pertumbuhan
optimal terjadi pada suhu 35-40°C tetapi dapat mentoleransi suhu sampai 45°C.
pH optimum untuk pertumbuhan adalah antara 5,5-6.

8
2.2.2 Bifidobacteria sp
Bifidobacteria merupakan bagian utama dari flora normal usus yang ada di
sepanjang hidup manusia. Mereka muncul dalam tinja beberapa hari setelah
kelahiran dan meningkat jumlahnya setelah bayi menyusui. Mereka dominan
berada dalam usus besar yang berkontribusi sekitar 6-36% dari mikroflora usus
pada orang dewasa, namun Bifidobacteria jumlahnya menurun dengan
meningkatnya usia.
Bifidobacteria memiliki ciri-ciri seperti non-motil, tidak bersporulasi,
berbentuk batang Gram positif dengan berbagai penampilan, termasuk batang
melengkung pendek, batang berbentuk club dan batang bercabang Y.
Kebanyakan dari bakteri ini bersifat anaerob, namun beberapa dapat mentoleransi
oksigen. Contoh spesies Bifidobacteria seperti B. adolescentis, B. angulatum, B.
bifidum, B. breve, B. catenulatum, B. denticolens, B. dentium, B. gallicum, B.
infantis, B. inopinatum, B. lactis, B. longum, B. Pseudocarenulatum.
Bifidobacteria memproduksi asam asetat dan laktat dalam proses
fermentasi di mana dua mol glukosa menghasilkan tiga mol asetat dan dua mol
laktat. Mereka dapat memfermentasi galaktosa, laktosa dan fruktosa karena
memiliki enzim fruktosa 6 phosphoketolase fosfat.
Bifidobacteria masuk ke dalam kelompok probiotik karena memiliki efek
menguntungkan pada kesehatan inang, termasuk sintesis vitamin. pH optimum
untuk pertumbuhannya adalah 6-7, namun Bifidobacteria lactis BB12
menunjukkan kemampuan untuk tumbuh sampai pH 4,2. Suhu optimum untuk
pertumbuhan adalah 37-41°C (Desai, 2008).
2.2.3 Enterococcus sp
Genus bakteri ini kurang dikenal karena hanya memiliki kurang dari 20
spesies. Sel cenderung membentuk rantai dan bersifat aerotolerant anaerob/
fermentor obligat dan katalase negatif. Bakteri ini Gram positif dengan sel
berbentuk seperti telur dalam bentuk tunggal, berpasangan atau rantai pendek dan
tidak membentuk spora. Strain bakteri yang paling sering digunakan adalah
Enterococcus faecalis. Pertumbuhan optimal pada suhu 35-37°C dan kebanyakan
spesies dapat tumbuh pada suhu 42-45°C. Bakteri ini bersifat homofermetatif
yang mengubah glukosa seluruhnya menjadi asam laktat (De vos, et al., 2009).

9
Strain Enterococci kebanyakan digunakan sebagai nutrisi untuk babi dan unggas.
Namun, tersedia pula produk farmasi yang mengandung Enterococcus sebagai
probiotik bagi manusia dalam terapi klinis. Genus Enterococcus memiliki spesies
yang berbeda-beda tetapi hanya dua dari mereka yang penting sebagai probiotik
yaitu Enterococcus faecium diaplikasikan pada manusia dan hewan dan
sementara Enterococcus faecalis terutama digunakan sebagai probiotik untuk
manusia (Bhantinon dan Anthimia, 2010).
2.2.4 Streptococcus sp
Genus ini memiliki kurang dari 20 spesies dan kurang dikenal. Yang
termasuk pada spesies ini adalah Streptococcus thermophilus, Streptococcus mitis,
Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus salivarius,
Streptococcus agalactiae. Streptococcus merupakan Gram positif dalam bentuk
cocci dengan diameter 0,5-2,0 μm, bentuknya tunggal, berpasangan, atau rantai.
Bakteri ini tidak membentuk spora, non motil dan katalase negatif. Bersifat
Kemo-organotrofik (metabolisme fermentasi memproduksi terutama laktosa
secara anaerob). Pertumbuhan optimum pada suhu 37°C, kebanyak bersifat
komensal pada manusia dan hewan. Pada umumnya semua spesies bersifat
anaerob fakultatif dan beberapa membutuhkan CO2 untuk pertumbuhan (De vos,
et al., 2009).
2.3 Terapi Probiotik

Probiotik dapat digunakan untuk mengatasi berbagai gangguan kesehatan
seperti :
1. Diare
Beberapa penelitian menunjukan bahwa probiotik dapat
mereduksi gejala diare. Hal ini telah dibuktikan dengan mengkonsumsi
probiotik yang mengandung strain Lactobacillus rhamnosus GG dan
Bifidobacterium lactis BB-12 dapat mencegah dan menjadi pilihan
terapi diare akut pada anak yang disebabkan oleh rotavirus. Selain
rotavirus, probiotik juga dapat menghambat bakteri patogen lain
seperti Salmonella dengan menghambat pertumbuhan bakteri patogen

10
dalam mukosa usus dengan cara kompetisi dalam mengadakan

perlekatan dengan enterosit (sel epitel mukosa) dengan bakteri patogen
(WHO, 2001).
2. Melawan infeksi Helicobacter pylori
Helicobacter pylori adalah bakteri Gram negatif yang
menyebabkan gastritis tipe B, tukak lambung dan kanker lambung.
Penggunaan bakteri asam laktat dapat menghambat pertumbuhan
bakteri patogen ini dengan menurunkan aktivitas enzim urease yang
diperlukan patogen untuk tetap berada di lingkungan asam lambung
(WHO, 2001). Adanya asam organik, hidrogen peroksida dan
bakteriosin yang diproduksi oleh bakteri asam laktat di duga menjadi
zat anti mikroba yang digunakan untuk melawan Helicobacter pylori
(WHO, 2001).
3. Kanker
Mikroorganisme probiotik dapat mencegah atau menunda
timbulnya kanker tertentu. Hal ini berdasarkan bahwa mikroflora usus
dapat menghasilkan zat karsinogen seperti nitrosamin. Oleh karena itu,
pemberian Lactobacillus dan Bifidobacteria secara teoritis dapat
memodifikasi flora yang mengarah ke penurunan β- glukuronidase.
Penurunan resiko kanker usus besar mungkin diperoleh
melalui kontrol pertumbuhan bakteri patogen seperti E.coli, S. faecalis
dan C. paraputrificum pada usus melalui kompetisi alat penempelan
dan nutrisi. Dinding sel bakteri asam laktat menunjukan
kemampuannya menstimulir fagositosis dari magrofag sehingga
menekan terbentuknya tumor dan kanker usus. Enzim-enzim yang
berperan untuk mengubah komponen-komponen prokarsinogen
menjadi komponen karsinogen seperti β-glukosidase, β-glukoronidase,
nitroreduktase, dan azoreduktase terbukti ditekan jumlahnya dengan
konsumsi susu fermentasi yang mengandung Bifidobacteria longum
dan Lactobacillus acidophilus. Namun, masih terlalu dini untuk
membuat kesimpulan klinis definitif mengenai kemampuan probiotik
dalam pencegahan kanker (WHO, 2001).

11
4. Gejala IBS (Irritable Bowel Sindrome)

Ada beberapa mekanisme yang diduga menjelaskan
pengurangan gejala IBS dengan probiotik. Probiotik dapat
mempengaruhi gejala dengan menyeimbangkan mikrobiota, dan
dengan mengembalikan kemungkinan penyimpangan produksi gas
atau produksi asam lemak rantai pendek. Banyak probiotik dapat
memodulasi sistem kekebalan tubuh misalnya dengan
menyeimbangkan rasio antara pro-inflamasi dan anti-inflamasi sitokin,
sehingga dapat mengurangi kemungkinan tingkat peradangan. Selain
menyeimbangkan mikrobiota dan efek imunomodulator, studi terbaru
juga menunjukkan bahwa probiotik dapat mempengaruhi motilitas
usus. Penelitian secara in vitro pada usus yang diisolasi dari kelinci
percobaan telah menunjukan bahwa probiotik, khususnya
Bifidobacteria memiliki efek relaksasi pada usus (WHO, 2001).
5. Konstipasi
Beberapa mekanisme probiotik dan prebiotik diketahui berperan
dalam menimbulkan efek pencahar. Probiotik dan prebiotik dapat
memodulasi flora normal usus. Flora normal usus dan komposisinya
diketahui mempengaruhi fungsi usus terutama motilitas usus. Namun
mekanime dibalik ini belum diketahui secara jelas. Modulasi dari flora
normal usus juga mengubah aktivitas metabolisme usus, seperti
produksi gas dan asam lemak rantai pendek. Ada bukti yang
menunjukkan bahwa asam lemak rantai pendek berkorelasi dengan
waktu transit usus (Yuan Kun Lee dan Seppo Salminen, 2009).
6. Meningkatkan Imunitas saluran Cerna
Probiotik akan berinteraksi dengan sistem imunitas saluran cerna
dengan menimbulkan respon imun lokal. Pada dua penelitian terpisah
L. johnsonii LJ-1 (previously L. acidophilus LA1) dan L. salivarius
UCC 118 terbukti dapat menstimulasi respon IgA mukosa dan
meningkatkan aktivitas makrofag (WHO, 2001).
Sekitar 80% dari total sel yang memproduksi imunoglobulin
berada dalam lamina propia usus. Enterosit merupakan sel

12
imunokompeten saluran pencernaan yang beperan pada berbagai reaksi

lokal terhadap mikroorganisme patogen. Interaksi antara enterosit dan
faktor di sekitarnya akan mengaktivasi ekspresi molekul adhesi, MHC
kelas I dan II, presentasi antigen terhadap limfosit, produksi sitokin,
transportasi sIg, dan kompleks sIgA. Probiotik akan memicu aktivasi
sel imunokompeten baik makrofag maupun sel dendrit sehingga
jaringan limfoid (gut-associated lymphoid tissues/ GALT) yang ada
pada lamina propia akan memicu sel plasma untuk memproduksi IgA
yang berperan dalam sistem imun mukosa (Prasetyo dan Purwanto,
2010).
7. Alergi
Mekanisme probiotik dalam mengatasi alergi diduga dengan
meningkatan permeabilitas usus, meningkatkan respon spesifik IgA,
meningkatkan penghalang usus melalui restorasi mikroba normal, dan
meningkatkan faktor pertumbuhan beta dan produksi interleukin 10
dan sitokin yang mempengaruhi peningkatan produksi antibodi IgE
(WHO,2001).
8. Sistem Kardiovaskular
Ada bukti awal bahwa penggunaan probiotik Lactobacillus
berpotensi memberi manfaat bagi jantung, termasuk pencegahan dan
terapi berbagai sindrom iskemik jantung dan menurunkan serum
kolesterol (WHO, 2001).
Lactobacillus dapat mengurangi kadar kolesterol serum
melalui asimilasi dan dekonjugasi garam empedu. Asam lemak rantai
pendek yang dihasilkan oleh Lactobacillus juga dapat menghambat
sintesis kolesterol hati dan distribusi kolesterol dalam plasma dan hati.
Akibat kekurangan asam empedu ini maka Lactobacillus acidophilus
akan memetabolisme kolesterol dalam darah menjadi asam empedu
sehingga menurunkan konsentrasi kolesterol darah (Yulinery, et al.,
2006).

13
9. Intoleransi Laktosa
Probiotik sebagai bakteri asam laktat secara aktif merubah
laktosa menjadi asam laktat. Oleh karena itu, probiotik dapat
memperbaiki pencernaan laktosa dengan mengurangi gejala intoleransi
dan memperlambat waktu transit makanan. Pemberian probiotik juga
dapat meningkatkan enzim laktase di lumen usus sehingga
memfasilitasi proses pencernaan dan memperbaiki intoleransi laktosa
(Simadibrata, 2011).
10. Bakteri Vaginosis
Ada beberapa penelitian klinik menunjukkan bahwa pemberian
oral dan vaginal Lactobacillus dapat membasmi asimtomatik dan
gejala bakteri vaginosis. Sediaan oral Lactobacillus acidophilus dan
yogurt telah digunakan dalam pencegahan dan terapi vaginitis
kandidiasis). Diduga karena bakteri probiotik menghasilkan hidrogen
peroksida yang mampu membunuh bakteri penyebab vaginosis (WHO,
2001).
2.4 Dosis Probiotik

Bentuk yang paling umum dalam produk probiotik adalah susu fermentasi
dan probiotik dalam makanan. Namun ada pula probiotik dalam bentuk tablet,
kapsul, dan sachet yang mengandung bakteri dalam bentuk beku-kering. Dosis
yang dibutuhkan untuk probiotik sangat bervariasi tergantung pada strain dan
produk. Sejumlah penelitian klinis yang telah terbukti menunjukan bahwa strain
probiotik dapat bermanfaat dan efektif untuk kesehatan dan terapi beberapa
penyakit. Dosis probiotik dapat bervariasi pada indikasi yang berbeda. (Yuan Kun
Lee dan Seppo Salminen, 2009)
Probiotik dapat diberikan dengan berbagai variasi berdasarkan :
1. Tipe Probiotik ( Lactobacilli, Bifidobacteria, Yeast, atau Enterococcus)

2. Dosis Harian (107-1010 cfu)
3. Frekuensi pemberian 1-4x sehari
4. Waktu pemberian (sebelum,selama, atau setelah makan)
5. Durasi pemberian (1 hari atau beberapa bulan)

14
6. Bentuk sediaan (makanan fermentasi, minuman, kapsul, tablet atau

serbuk)
7. Viabilitas
Tabel 2.2 Variasi Dosis Probiotik dengan Berbagai Kondisi Kesehatan
X Product Dosis yang

direkomendasikan
Infeksi diare akut L.rhamnosus GG 1010-1011cfu 2x sehari
pada anak L.reuteri ATTC 55730 1010-1011 cfu 2x sehari
L.acidophilus + B. Infantis 109 cfu 3x sehari
S.cerevisiae (boulardii) 200 mg 3x sehari
Infeksi diare akut Enterococcus faecium LAB 8F68 108 3x sehari
pada dewasa
Pencegahan S.cerevisiae (boulardii) 250 mg 2x sehari
antibiotik asociated L.rhamnosus GG 1010 cfu 1 atau 2x sehari
pada diare anak B.lactis Bb12+S.themophilus 107+10* cfu/g dari formula
Pencegahan Enterococcus faecium LAB 8F68 108 2x sehari

antibiotik asociated S.cerevisiae (boulardii) Iyo
pada diare dewasa L.rhamnosus GG 1 g atau 3x 1010 per hari
L.casei DN-114 dalam susu
fermentasi dengan L. bulgaricus
dan S.thermophilus
B.clausii
L.acidophilus CL128S + L.casei 2x109 3x sehari
Lbc80r
5x1010 1x sehari
Pencegahan diare L.rhamnosus GG 1010-1011 cfu 2 sehari
nosokomial pada B.lactis Bb12+S.themophilus 106-107 cfu/g dari formula
anak B.lactis Bb12 109 cfu 2x sehari
L.reuteri ATTC 55730 109 cfu 2x sehari
Pencegahan diare L.casei DN-114 001 dalam susu 1010 cfu/g 2x sehari
yang disebabkan fermentasi dengan L. bulgaricus
C. difficile pada dan S.thermophilus
dewasa L.acidophilus + B. bifidum 2 x1010 cfu 1x sehari
S.cerevisiae (boulardii) 2 x1010 cfu per hari
Oligofructosa 4 g 3x sehari
Terapi dalam L.rhamnosus GG 6x109 cfu 2x sehari

membasmi H.pylori B. clausil 2x109 3x sehari
AB yogurt dengan Lactobacillus
dan Bifidobacteria (tidak spesifik) 5-109 2x sehari
S.cerevisiae

15
L.casei DN-114 001 dalam susu

fermentasi dengan L. bulgaricus 1g atau 5x 109 cfu per hari
dan S.thermophilus 109 cfu 5x sehari
Mengurangi yogurt dengan L. bulgaricus dan
intoleransi laktosa S.thermophilus
Mengurangi gejala B.infantis 35624 108 cfu 1x sehari

Irritable Bowel L.rhamnosus GG 6 x 109 2x sehari
Sindrome VOL#mixture 4,5x 1011 2x sehari
L.rhamnosus GG 1010 cfu 1 x sehari
L.rhamnosus LC705, B.breve
Bb99, dan Propioibacterium
ssp.shermanii
B.animalis DN-173 D10 dalam 1 x1010 cfu 2x sehari
susu fermentasi dengan dengan L.
bulgaricus dan S.thermophilus
Pencegahan dan V8L#3 dicampur dalam 8 strain (1 4,5 X 1011 cfu 2x sehari
pemulihan S. thermophilus, 4 Lactobacillus,
pouchitis 3 Bifidobacterium)
Pengobatan Lactulosa 20-40 g per hari

konstipasi Oligofructosa >20 g per hari
Pencegahan dan B.infantis, S.termophilus, B. 0,35 x 109 cfu 1x sehari

necrolizing Bifidum
enterocolitis pada L.achidophilus + B.infantis 109 cfu 2x sehari
bayi prematur
Pencegahan dari Sinbiotik 2000 : 4 bacteria dan 1010 cfu + 10 g serat 2x
infeksi serat yang mengandung inulin sehari
pembedahan
Pengobatan Lactulosa 45-50 g per hari
hepatik
Sumber: Guarner, et al., 2008 (World Gastroenterology Organisation Practice Guideline)
Untuk meningkatkan efek probiotik, maka dibutuhkan jumlah yang tepat

untuk sampai pada saluran cerna. Bentuk sediaan yang berbeda dengan dosis yang
sama dilaporkan dapat memberikan efek kesehatan yang sama. Durasi pemberian
sebagian besar bergantung dari penyakit yang diderita. Namun belum ada
informasi mengenai waktu terbaik untuk pemberian probiotik.
Secara logika, probiotik diberikan secara oral sebelum makan untuk
mampu bertahan pada kondisi pH ekstrim dan enzim pencernaan serta adanya
garam empedu pada saluran pencernaan. Probiotik yang diberikan beserta

16
makanan akan mencair dengan bahan makanan dan mampu mereduksi

kesempatan dan frekuensi paparan antara bakteri probiotik dan mukosa reseptor.
Matriks makanan juga bisa menghalangi probiotik untuk melekat dengan mukosa
reseptor. Untuk itu dibutuhkan waktu yang tepat untuk mengkonsumsi probiotik
yaitu diantara dua waktu makan (Yuan Kun Lee dan Salminen Seppo, 2009).
2.5 Faktor yang Mempengaruhi Viabilitas Probiotik

Sebagaimana telah disebutkan di atas, probiotik berisi mikroorganisme
hidup, oleh karena itu kelangsungan hidup bakteri tersebut harus dipertahankan
selama proses produksi dan bahkan ketika sampai di saluran gastrointestinal (GI).
Kehilangan viabilitas merupakan hal yang tidak terhindarkan selama proses
tahapan pembuatan. Masalah-masalah yang terjadi dalam teknologi pembuatan
probiotik yaitu kesulitan dalam memperoleh konsentrasi sel yang tinggi selama
masa pertumbuhan, dan mempertahankan kelangsungan hidup selama proses hilir,
proses pengolahan dan formulasi dalam bentuk produk akhir (Malago, et al.,
2011).
Faktor –faktor yang mempengaruhi viabilitas bakteri probiotik yaitu :
1. Kondisi fisiologis
Kondisi fisiologis bakteri ketika dipreparasi dan terkandung dalam
produk itu sendiri merupakan faktor penting dalam ketahanan probiotik.
Pengeringan dalam produk makanan dapat menjaga stabilitas bakteri selama
penyimpanan, sedangkan produk dalam bentuk cair memungkinan adanya
aktivitas metabolit aktif dari bakteri. Keadaan lingkungan bakteri akan
mempengaruhi masa simpan bakteri tersebut, contohnya pada suhu rendah
dapat memperpanjang ketahanan dari bakteri (Neha, 2012).
2. Suhu
Suhu untuk pertumbuhan optimum probiotik dibutuhkan dalam proses
fermentasi makanan. Suhu optimum probiotik antara 37-43○C. Selama proses
pembuatan, penggunaan suhu melebihi 45-50○C akan merusak daya tahan
hidup bakteri, penggunaan suhu yang lebih tinggi memungkinkan pemaparan
pada periode waktu yang lebih pendek dapat menurunkan jumlah bakteri
yang hidup. Rentang waktu jam atau menit pada 45-55○C pada paparan suhu

17
yang kedua kalinya. Oleh karena itu, jelaslah bahwa probiotik seharusnya
ditambahkan sedikit demi sedikit selama proses pembuatan atau pasteurisasi
(Yuan Kun Lee dan Seppo Salminen, 2009).
3. pH
Beberapa bakteri seperti Lactobacillus dan Bifidobacteria dapat
bertahan pada pH rendah karena menghasilkan senyawa organik dari
metabolisme karbohidrat. Sejumlah penelitian membuktikan bahwa pada
cairan lambung bakteri probiotik dapat bertahan hidup di mana bakteri
terpapar pH yang rendah yakni 2.0 dalam waktu 1 sampai 2 jam. Pada produk
makanan, Lactobacillus dan Bifidobacteria dapat tumbuh dan bertahan
dengan pH diantara 3,7 dan 4,3. Namun Bifidobacteria cenderung kurang
dapat mentoleransi asam pada produk fermentasi (Neha, 2012).
4. Aktivitas Air
Kadar kelembaban dan aktivitas air yang tinggi akan menurunkan
daya tahan probiotik. Adanya interaksi antara aktivitas air dengan suhu yang
mempengaruhi kehidupan probiotik. Sediaan probiotik dapat memiliki masa
simpan yang lama pada bentuk kering ketika disimpan pada suhu kamar jika
kadar kelembabannya rendah (dibawah 0,2-0,3). Pada umumnya aktivitas air
yang rendah akan memberikan ketahanan hidup yang baik. Ketahanan
probiotik dalam makanan dapat dipertahankan dengan adanya aktivitas air
sekitar 0,4-0,7. Solusi yang dapat dilakukan dalam meningkatkan ketahanan
bakteri terhadap aktivitas air yaitu dengan cara mikroenkapsulasi.
5. Oksigen
Lactobacillus dan Bifidobacteria tidak dapat tumbuh dengan baik
karena adanya oksigen. Walau bagaimanapun tingkat sensitivitas terhadap
oksigen akan berbeda-beda tiap strain bakteri. Sebagian besar Lactobacillus
merupakan aerofilik, yang lebih mentoleransi oksigen dibanding
Bifidobacteria. Walaupun Bifidobacteria memiliki mekanisme enzimatik
(melalui NADH-oksidase dan NADH peroxidase) untuk membatasi toksisitas
oksigen (Neha, 2012).
Untuk strain bakteri yang sensitif terhadap oksigen ada beberapa
strategi yang tersedia untuk mencegah toksisitas oksigen dalam produk

18
makanan. Bahan antioksidan seperti asam askorbat atau sistein serta

penggunaan penghalang oksigen dalam imodifikasi kemasan telah terbukti
dapat meningkatkan kelangsungan hidup probiotik karena toksisitas oksigen
ini kadang-kadang bisa mempengaruhi kelangsungan hidup probiotik,
disarankan untuk meminimalkan proses aerasi, terutama dalam penggunaan
Bifidobacteria (Yuan Kun Lee dan Seppo Salminen, 2009).

BAB 3
METODE PENELITIAN
3.1 Waktu dan Lokasi Penelitian

Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Pharmacy Sterile Technology
(PST), Laboratorium Pharmacy Solid Preparation (PSO), Laboratorium
Pharmacy Natural Product Chemistry (PNA), Laboratorium Mikrobiologi dan
Laboratorium Biologi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif
Hidayatullah Jakarta. Penelitian berlangsung selama bulan April-Mei 2013.
3.2 Alat dan Bahan

Alat dan bahan yang digunakan adalah sebagai berikut:
3.2.1 Alat
Cawan petri, batang spreader, labu ukur, erlemeyer 1000 ml, spuit, gelas
piala 250 ml, tabung reaksi (pyrex), kaca objek, jarum ose, batang pengaduk,
spatula, mikropipet, alumunium foil, vortex, neraca analitik, oven (Memmert),
autoklaf, termometer, termohigrometer, inkubator (France Etuvers/C3000),
refrigerator (Sanyo Medicool), api bunsen, Laminar air flow (Clean Beach),
Mikroskop (Olympus CX21).
3.2.2 Bahan
Sampel dari 3 macam produk probiotik yang berisi strain tunggal bakteri
probiotik yaitu sampel X yang berisi Lactobacillus acidophilus (3 x 108 cfu/g),
sampel Y yang berisi Lactobacillus reuteri ( 1x 108 cfu/g) dan sampel Z yang
berisi Lactobacillus sporogenes (5 x 107 cfu/g), medium MRSA (Oxoid), NaCl
fisiologis 0,9%, kristal violet, lugol, alkohol 96%, dan safranin.
3.3 Prosedur Kerja

Prosedur kerja yang akan dilakukan adalah sebagai berikut :
3.3.1 Preparasi Alat dan Bahan yang Digunakan

20
3.3.1.1 Preparasi Alat

Peralatan gelas seperti cawan petri, batang spreader, batang pengaduk,
spatula, erlemeyer 500 ml, gelas piala 250 ml dibungkus dengan kertas roti dan
kemudian disterilkan dengan menggunakan oven pada suhu 180○C selama 120
menit (Collin, et al., 2004).
3.3.1.2 Preparasi Sampel

Tiga produk (sampel X, Y dan Z) disimpan dalam kemasan asli pada tiga
kondisi suhu 4○C (di lemari pendingin ), 25○C (di ruangan yang diatur suhunya)
dan 44○C (di oven) selama 4 minggu dengan interval pengujian viabilitas 0, 1, 2,
3, dan 4 minggu.
3.3.1.3 Pembuatan Medium MRSA (DeMan Rogosa Sharpe)

Sejumlah 62 gram serbuk MRS ditimbang dan kemudian dilarutan dalam
1 liter air destilasi dan dipanaskan pada suhu 60○C. Lalu media disterilkan
menggunakan autoklaf pada suhu 115○C, tekanan 1 atm selama 30 menit. Setelah
dikeluarkan dari autoklaf, media didiamkan beberapa saat hingga suhunya
menurun sampai sekitar 45○C kemudian media dituangkan ke dalam cawan petri
steril yang dilakukan di dalam Laminar Air Flow (Bridson, 1998).
3.3.2 Identifikasi Bakteri pada Sampel X, Y dan Z dengan Pewarnaan

Gram
Ketiga sampel disuspensikan dalam NaCl fisiologis 0,9% dan dibuat
konsentrasi 10-1. Kemudian disebar pada medium MRSA dan diinkubasi selama
24 jam. Isolat bakteri yang terbentuk dari masing-masing sampel diletakkan
pada kaca objek dan dibuat film tipis lalu dibiarkan kering (Collins, et al., 2004).
Permukaan preparat diberi tetesan kristal violet dan dibiarkan selama 1 menit
lalu dibilas dengan air mengalir. Preparat diberi tetesan lugol dan dibiarkan
selama 1 menit lalu dibilas dengan air mengalir. Kemudian preparat dicuci
dengan alkohol 96% sampai kristal violet pada preparat tidak luntur lagi lalu
dibilas dengan air mengalir. Selanjutnya preparat diberi tetesan zat warna
safranin dan dibiarkan selama 45 detik lalu dibilas dengan air mengalir. Preparat

21
dikeringkan dengan membiarkan didekat nyala api atau menekan-nekan preparat

secara perlahan-lahan dengan tissue. Selanjutnya preparat diamati di bawah
mikroskop cahaya dengan perbesaran 1000x.
3.3.2 Pengujian Viabilitas Bakteri pada Sampel X, Y dan Z

Viabilitas bakteri diamati berdasarkan metode Standart Plate Count (S.
Mulyani, et al., 2008). Sampel dari masing-masing suhu penyimpanan
disuspensikan dalam NaCl Fisiologis 0,9% secara aseptis dan dibuat konsentrasi
10-1. Untuk sampel X yakni sebanyak 1 gram di cukupkan sampai 10 ml NaCl
fisiologis Kemudian dibuat pengenceran sampai 10-10, untuk sampel Y yakni
sebanyak 0,5 gram sampel dicukupkan sampai 5 ml NaCl fisiologis dan dibuat
pengenceran sampai 10-8, 10-7 untuk sampel Z. Dari masing-masing pengenceran
diambil 1 ml untuk sampel X dan 0,5 ml untuk sampel Y dan Z kemudian di
masukkan ke cawan petri, dan dilakukan dengan tiga kali pengulangan. Kemudian
disebar ke MRS agar. Sampel diratakan di permukaan agar menggunakan
spreader. Dibiarkan hingga cairan dalam cawan petri membeku, semua cawan
petri dimasukkan dengan posisi terbalik ke dalam inkubator dan diinkubasi pada
suhu 37○C ± 1○C selama 24 jam. Pertumbuhan bakteri koloni dicatat, pada setiap
cawan petri yang mengandung 30-300 koloni. Kemudian dilakukan perhitungan
jumlah total koloni dengan rumus (Depson, 2012). :
1 1
Cfu/gram = total koloni x �� x ��
Kemudian jumlah bakteri setelah perlakuan dibandingkan dengan komposisi

jumlah bakteri pada produk sampel yang tercantum dalam kemasan.
3.4 Analisa Data

Data jumlah total Koloni dari masing-masing sampel dianalisis secara
statistik dengan menggunakan perangkat lunak SPSS 20.0 for windows dengan
metode One Way Repeated Measures Anova untuk mengetahui perbandingan dari
penggunaan ketiga suhu penyimpanan.

BAB 4
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Pemilihan dan Preparasi Sampel

Pada dasarnya probiotik merupakan makhluk hidup, di mana daya tahan
hidupnya dipengaruhi oleh faktor lingkungan. Salah satu faktor tersebut adalah
suhu penyimpanan. Berdasarkan laporan menyebutkan bahwa suhu seringkali
menjadi aspek yang terlupakan oleh konsumen dalam menyimpan produk
probiotik dan beberapa laporan mengatakan bahwa dalam beberapa produk
komersial, tingkat probiotik yang layak tidak memenuhi kriteria peraturan pada
akhir penyimpanan (Mallago, et al., 2011). Oleh karena itu, dilakukan penelitian
terhadap 3 produk probiotik yang beredar di Apotek yang berada di wilayah
Ciputat. Produk probiotik yang dipilih adalah sampel X yang berisi Lactobacillus
achidophilus dengan jumlah bakteri 3,0 x 1010 cfu dalam bentuk granul, sampel Y
berisi Lactobacillus reuteri dengan jumlah bakteri 1 x 108 cfu dalam bentuk tablet
kunyah dan sampel Z yang berisi Lactobacillus sporogenes dengan jumlah
bakteri 5 x 107 cfu dalam bentuk tablet.
Penelitian terhadap ketiga sampel dilakukan pada tiga suhu yang berbeda
yaitu pada suhu 4○C, 25○C dan 44○C. Suhu 4○C merupakan suhu penyimpanan
ideal probiotik pada lemari pendingin, suhu 25○C dikondisikan sebagai suhu
ruangan, dan suhu 44○C diadaptasi dengan kondisi iklim terpanas yang pernah
terjadi di Indonesia yakni di Bojonegoro pada tahun 2010.
Medium yang digunakan untuk menumbuhkan bakteri yaitu MRSA
dengan komposisi pepton, lab-lemco powder, yeast extract, glukosa, sorbitan
mono-oleat, dipotassium hidrogen posfat, sodium asetat 3H2O, triamonium sitrat,
magnesium sulfat 7H2O, mangan sulfat 4H2O. MRS Agar merupakan medium
selektif yang digunakan untuk menumbuhkan Lactobacillus (De vos, et al., 2009).
Metode yang digunakan untuk menghitung viabilitas atau ketahanan hidup
bakteri pada penelitian ini adalah metode Standart Plate Count dengan prinsip
apabila sel bakteri yang masih hidup ditumbuhkan pada medium yang cocok

23
maka sel bakteri akan berkembang biak dan membentuk koloni yang dapat terlihat
langsung oleh mata sehingga bisa langsung dihitung (Collin, et al., 2004).
4.2 Pertumbuhan Koloni Bakteri Sampel X, Y dan Z pada Medium MRSA

Pengamatan visual terhadap koloni bakteri yang terbentuk dari masing-
masing sampel yaitu berbentuk bulat dengan tepi menyeluruh, halus, berwarna
putih keruh dan tidak menimbulkan aroma. Dari ketiga sampel terbentuk koloni
yang hampir sama karena ketiga sampel ini berasal dari keluarga Lactobacillus
yang secara morfologi memiliki bentuk yang sama.
Keterangan : a). koloni sampel X (kiri), b). koloni sampel Y(tengah), c). koloni sampel Z (kanan)
Gambar 4.1 Koloni Sampel X, Y dan Z
4.3 Identifikasi Bakteri Sampel X, Y dan Z dengan Pewarnaan Gram

Pewarnaan Gram yang dilakukan menunjukkan bahwa ketiga sampel
berbentuk batang dan merupakan kelompok bakteri Gram positif yang
menghasilkan warna ungu. Mekanisme pewarnaan Gram didasarkan pada
perbedaan permeabilitas di antara kedua kelompok dinding sel bakteri. Dinding
sel bakteri Gram negatif mengandung peptidoglikan jauh lebih sedikit dan kurang
ekstensif dibandingkan dinding sel bakteri Gram positif, sehingga pori-pori pada
peptidoglikan bakteri Gram negatif tetap cukup besar dan tidak dapat
mempertahankan kompleks Ungu Kristal-Yodium (UKY). Sedangkan pada
bakteri Gram positif, kompleks Ungu Kristal-Yodium terperangkap di dalam
dinding sel dan menghasilkan warna ungu (Pelczar dan Chan, 2008).

24
Keterangan : a). sampel X (kiri), b). sampel Y (tengah), c). sampel Z (kanan)
Gambar 4.2 Pewarnaan Gram Sampel X, Y dan Z
4.4 Hasil Pengujian dan Analisa Data Viabilitas Bakteri Sampel X pada
Penyimpanan Suhu 4○, 25○ dan 44○C
Hasil uji viabilitas bakteri sampel X pada penyimpanan suhu 4○, 25○ dan
44○C selama 4 minggu penyimpanan dapat dilihat pada tabel 4.1
Tabel 4.1 Jumlah Total Bakteri Sampel X Selama Periode Penyimpanan

Suhu Minggu 0 Minggu 1 Minggu 2 Minggu 3 Minggu 4
(cfu) (cfu) (cfu) (cfu) (cfu)
4○C 3,05 x 1010 3,04 x 1010 3,02 x 1010 3,00 x 1010 3,03 x 1010
3,15 x 1010 3,01 x 1010 2,99 x 1010 3,02 x 1010 3,02 x 1010
3,05 x 1010 3,01 x 1010 3,02 x 1010 3,04 x 1010 3,00 x 1010
Rata-rata 3,08 x 1010 3,02 x 1010 3,01 x 1010 3,02 x 1010 3,01 x 1010
25○C 3,05 x 1010 3,04 x 1010 3,01 x 1010 3,04 x 1010 3,01 x 1010
3,15 x 1010 2,99 x 1010 3,01 x 1010 3,02 x 1010 2,99 x 1010
3,05 x 1010 3,06 x 1010 3,04 x 1010 3,01 x 1010 3,02 x 1010
Rata-rata 3,08 x 1010 3,03 x 1010 3,02 x 1010 3,02 x 1010 3,00 x 1010
44○C 3,05 x 1010 3,00 x 107 2,01 x 107 2,96 x 106 2,55 x 106
3,15 x 1010 3,00 x 107 2,10 x 107 2,96 x 106 2,60 x 106
3,05 x 1010 3,11 x 107 2,11 x 107 2,97 x 106 2,56 x 106
Rata-rata 3,08 x 1010 3,03 x 107 2,07 x 107 2,96 x 106 2,57 x 106
Jumlah total bakteri sampel X dianalisis dengan One Way Repeated

Measures Anova dengan membandingkan perbedaan penggunaan ketiga suhu
penyimpanan yang berpengaruh pada sampel X. Penyimpanan pada suhu 4 ○C dan
25○C tidak menunjukkan perubahan jumlah total bakteri yang signifikan (p>0,05),
yang berarti penyimpanan pada suhu 4○C dan 25○C dapat mempertahankan
jumlah total bakteri. Hasil yang berbeda secara signifikan tampak ketika
membandingkan antara penyimpanan suhu 44○C dengan suhu 4○C. Hal yang sama

25
juga ditemui ketika membandingkan penyimpanan suhu 44○C dengan suhu 25○C,
menunjukkan hasil yang signifikan berbeda (p<0,05) di mana pada penyimpanan
suhu 44○C terjadi perubahan jumlah total bakteri selama periode 4 minggu
penyimpanan. Hal ini dapat dilihat pada tabel 4.2.
Tabel 4.2 Hasil Analisa Data Viabilitas Bakteri Sampel X dengan Menggunakan
Metode Uji One Way Repeated Measures ANOVA
Pairwise Comparison
Measure: MEASURE_1
95% confidence Interval for
Mean Std Differenceb
(I)Suhu (J) Suhu Sig b
Difference (I-J) Error Lower
Uppe Bound
Bound
4 25 -,084* ,441 ,856s -1,163 ,996
44 4,010 ,441 ,000 2931 5,090
25 4 ,084* ,441 ,856 -996 1,163
44 4,094 ,441 ,000 3,015 5,174
44 4 -4,010* ,441 ,000 -5,090 -2,931
25 -4,094* ,441 ,000 -5,174 -3,015
*Keterangan: Signifikansi <0,05, viabilitas bakteri berbeda secara signifikan
Signifikansi >0,05, viabilitas bakteri tidak berbeda secara signifikan
Stabilitas penyimpanan pada masing-masing suhu juga dianalisis dengan

menggunakan One Way Repeated Measures Anova, yaitu dengan
membandingkan antara jumlah total koloni dari awal pengujian yakni sebelum
penyimpanan sampai dengan 4 minggu periode penyimpanan. Hasil analisa
penyimpanan sampel X pada suhu 4○C tidak mengalami perubahan jumlah total
koloni dari awal pengujian sampai dengan akhir pengujian. Begitu pula yang
terjadi dengan penyimpanan pada suhu 25○C. Sedangkan stabilitas penyimpanan
suhu 44○C mengalami penurunan jumlah total bakteri yang signifikan dari awal
pengujian sampai dengan minggu ke empat, hal ini tampak pada Lampiran 16, 17
dan 18.

26
1000
cfu 106 100

suhu 4°C
suhu 25°C
10
suhu 44°C
1
0 1 2 3 4
Waktu Penyimpanan
Grafik 4.3 Hubungan Antara Waktu Penyimpanan dengan Viabilitas Sampel X

pada Penyimpanan Suhu 4○, 25○ dan 44○C
4.5 Hasil Pengujian dan Analisa Data Viabilitas Bakteri Sampel Y pada
Hasil uji viabilitas bakteri sampel Y pada penyimpanan suhu 4○, 25○ dan
Tabel 4.3 Jumlah Total Bakteri Sampel Y Selama Periode Penyimpanan

4○C 1,00 x 108 1,02 x 108 1,01 x 108 1,00 x 108 1,02 x 108
9,61 x 107 9,99 x 107 9,99 x 107 1,02 x 108 1,03 x 108
1,22 x 108 1,02 x 108 1,03 x 108 9,96 x 107 9,9 x 107
Rata-rata 1,08 x 108 1,01 x108 1,01 x 108 1,00 x 108 1,01 x 108
25○C 1,00 x 108 9,21 x 107 8,89 x 107 7,94 x 107 7,42 x 107
9,61 x 107 9,19 x 107 8,89 x 107 7,72 x 107 8,4 x 107
1,22 x 108 9,23 x 107 8,93 x 107 7,72 x 107 7,45 x 107
Rata- rata 1,08 x 108 9,21 x 107 8,90 x 107 7,79 x 107 7,75 x 107
44○C 1,00 x 108 3,36 x 107 2,71 x 107 2,41x 106 1,32 x 106
9,61 x 107 3,36 x 107 2,71 x 107 2,30 x 106 1,32 x 106
1,22 x 108 3,36 x 107 2,71 x 107 2,35 x 106 1,32 x 106
Rata-rata 1,08 x 108 3,36 x 107 2,71 x 107 2,35 x 106 1,32 x 106
Analisa data jumlah total bakteri sampel Y dengan One Way Repeated
Measures ANOVA membandingkan perbedaan penggunaan ketiga suhu
penyimpanan yang berpengaruh pada sampel Y. Perbandingan antara penggunaan
suhu penyimpanan 4○C dan 25○C menunjukkan perbedaan yang signifikan

27
(p<0,05). Begitu pula dengan perbandingan antara penggunaan suhu 25○C dan
44○C yang juga menunjukkan perbedaaan yang signifikan. Dari ketiga suhu
penyimpanan menunjukkan perbedaan jumlah total koloni yang signifikan,
dimana hanya pada suhu penyimpanan 4○C yang memberikan ketahanan jumlah
bakteri pada sampel Y sementara pada penyimpanan suhu 44○C dan suhu 25○C
terjadi perubahan jumlah total bakteri yang selama periode pengujian. Hal ini
tampak pada tabel 4.4.
Tabel 4.4 Hasil Analisa Data Jumlah Bakteri Sampel Y dengan Menggunakan
Pairwise Comparison
Measure: MEASURE_1
95% confidence Interval for
Mean Std
(I)Suhu (J) Suhu Sig b Differenceb
Difference (I-J) Error
Lower Bound Uppe Bound
4 25 ,081 ,003 ,000 ,073 ,089

44 1,142 ,003 ,000 1,134 1,150
25 4 -,084* ,003 ,000 -,089 -,073
44 1,061 ,003 ,000 1,053 1,069
44 4 -1,142* ,003 ,000 -1,150 -1,134
25 -1,061* ,003 ,000 -1,069 -1,053


menunjukkan stabilitas penyimpanan suhu 4○C, tidak terjadi perubahan total
bakteri yang signifikan dari awal pengujian sampai dengan minggu keempat.
Sedangkan pada suhu 25○C dan 44○C terjadi perubahan total bakteri yang
signifikan pada perbandingan 0 minggu penyimpanan sampai dengan minggu
keempat penyimpanan. Hal ini dapat dilihat pada Lampiran 19, 20 dan 21.

28
0,12
cfu (106) Thousands

0,1
0,08
0,06 suhu 4°C
0,04 suhu 25°C
0,02 suhu 44°C
0
0 1 2 3 4
Waktu penyimpanan (minggu)
Grafik 4.4 Hubungan Antara Waktu Penyimpanan dengan Viabilitas Sampel Y

4.6 Hasil Pengujian dan Analisa Data Viabilitas Bakteri Sampel Z pada
Hasil uji viabilitas bakteri sampel Z pada penyimpanan suhu 4○C, 25○C dan
Tabel 4.5 Jumlah Total Bakteri Sampel Z Selama Periode Penyimpanan

4○C 5,00 x 107 5,04 x 107 5,05 x 107 4,98 x 107 5,19 x 107
5,03 x 107 5,04 x 107 5,02 x 107 5,01x 107 5,06x 107
4,97 x 107 5,07 x 107 5,02 x 107 5,05x 107 4,98 x 107
Rata-rata 5,00 x 107 5,05 x 107 5,03 x 107 5,01 x 107 5,07x 107
25○C 5,00 x 107 5,01 x 107 5,02 x 107 5,02 x 107 5,00 x 107
5,03 x 107 5,01 x 107 4,99 x 107 4,99 x 107 5,01 x 107
4,97 x 107 4,98 x 107 5,00 x 107 5,03 x 107 4,98 x 107
Rata-rata 5,00 x 107 5,00 x 107 5,00 x 107 5,01 x 107 5,00 x 107
44○C 5,00 x 107 3,4 x 106 1,64 x 10-6 5,07 x 105 2,10 x 105
5,03 x 107 3,4 x 106 1,64 x 10-6 3,45 x 105 2,09 x 105
4,97 x 107 3,4 x 106 1,64 x 10-6 3,32 x 105 2,22 x 105
Rata-rata 5,00 x 107 3,4 x 106 1,64 x 10-6 3,94 x 105 2,13 x 105
Analisa data jumlah total bakteri sampel dengan One Way Repeated
Measures ANOVA membandingkan perbedaan penggunaan ketiga suhu
penyimpanan yang berpengaruh pada sampel Z. Penyimpanan pada suhu 4 ○C dan
25○C tidak menunjukan perubahan jumlah total bakteri yang signifikan (p>0,05),

29
yang berarti penyimpanan pada suhu 4○C dan 25○C dapat mempertahankan
jumlah bakteri. Hasil yang berbeda secara signifikan tampak ketika
○ ○
membandingkan antara penyimpanan suhu 44 C dengan suhu 4 C. Hal yang sama
juga ditemui ketika membandingkan penyimpanan suhu 44○C dengan suhu 25○C,
menunjukkan hasil yang signifikan berbeda (p<0,05) dimana pada penyimpanan
suhu 44○C terjadi perubahan jumlah total bakteri selama periode 4 minggu
penyimpanan. Hal ini tampak pada tabel 4.6.
Tabel 4.6 Hasil Analisa Data Jumlah Bakteri Sampel Z dengan Menggunakan
Pairwise Comparison
Measure: MEASURE_1
(I)Suhu (J) Suhu Mean Std Sig b 95% confidence Interval for
Difference (I-J) Error Differenceb
Lower Bound Uppe Bound
4 25 ,003* ,011 ,775 -,024 ,031
44 1,787 ,011 ,000 1,759 1,814
25 4 -,003* ,011 ,775 -,031 0,24
44 1,783 ,011 ,000 1,756 1,811
44 4 -1,787* ,011 ,000 -1,814 -1,759
25 -1,783* ,011 ,000 -1,811 -1,756

penyimpanan sampel Z pada suhu 4○C dan 25○C tidak mengalami perubahan
jumlah total koloni dari awal pengujian sampai dengan akhir pengujian.
Sedangkan stabilitas penyimpanan suhu 44○C mengalami penurunan jumlah total
bakteri yang signifikan dari awal pengujian sampai dengan minggu ke empat, hal
ini tampak pada Lampiran 22, 23 dan 24.

30
600
500
Cfu (105) 400
300 suhu 4°C

200 suhu 25°C
100 suhu 44°C
0
0 1 2 3 4
Waktu Penyimpanan (minggu)
Grafik 4.5 Hubungan Antara Waktu Penyimpanan dengan Viabilitas Sampel Z

Penggunaan suhu 4○C dapat mempertahankan viabilitas dari ketiga

sampel. Suhu 4○C merupakan suhu yang dianjurkan untuk penyimpanan
probiotik karena pada suhu ini dapat menghambat reaksi-reaksi enzimatis,
kimiawi dan biokimia sel. Dalam buku Bergey Manual of Sistematic Bacteriology
disebutkan bahwa untuk pemeliharaan dan penyimpanan bakteri Lactobacillus
dianjurkan pada suhu 4-7○C. Karena sejumlah alasan inilah yang diduga
menyebabkan ketiga sampel dapat mempertahankan jumlah bakteri yang
terkandung di dalamnya.
Pengujian sampel pada suhu ruang dapat mempertahankan viabilitas
sampel X dan Z akan tetapi sampel Y mengalami penurunan jumlah total bakteri.
Menurut buku Handbook of Probiotic, sediaan probiotik dalam bentuk kering,
bakteri berada dalam keadaan immobilisasi, dimana viabilitas bakteri dapat dijaga
pada temperatur kamar selama 12 bulan atau lebih. Sediaan probiotik dalam
bentuk kering diolah dengan pengawetan kultur bakteri dengan metode
pengeringan. Prinsip metode pengeringan kultur bakteri probiotik ini adalah
mengeluarkan sebagian besar air dari bahan sehingga air yang tertinggal
merupakan air ikatan yang tidak dapat berperan dalam reaksi-reaksi kimia dalam
sel, pada saat ini semua aktivitas metabolisme dan respirasi akan berhenti.
Apabila kondisi kering dapat dipertahankan maka viabilitas kultur kering dapat
terjaga namun apabila terjadi peningkatan kadar air maka proses metabolisme
kembali aktif dan akan menurunkan viabilitas selama penyimpanan. Oleh karena

31
itu kadar kelembaban ruangan juga harus tetap terjaga untuk menghindari
peningkatan kadar air sediaan karena pengaruh lembab ruangan.
Pengukuran kadar kelembaban dengan menggunakan termohigrometer dan
di dapat nilai kelembaban ruang sebesar 65%. Penelitian yang dilakukan Bora
dengan mengkondisikan kelembaban relatif dari 20 sampai 100 %, diketahui
bahwa kelembaban relatif 75 % terjadi menurunkan viabilitas Lactobacillus sp.
Jadi diketahui bahwa suhu ruangan dengan kelembaban 65% masih dapat
mempertahankan viabilitas bakteri sediaan probiotik. Namun penurunan jumlah
bakteri sampel Y pada suhu ruang tidak diketahui penyebabnya.
Penurunan jumlah bakteri yang terjadi pada ketiga sampel saat
penyimpanan 44○C diduga karena adanya peningkatan suhu penyimpanan.
Peningkatan suhu penyimpanan akan memberikan efek merusak pada stabilitas
selama produk dalam proses pengiriman dan penyimpanan. Pada penyimpanan
suhu 44○C menyebabkan tablet mengalami perubahan warna menjadi agak
kekuningan dan granul menjadi lebih kering. Selama penyimpanan pada suhu
44○C diduga terjadi pengeringan bahan dan rusaknya eksipien yang melindungi
bakteri sehingga terjadi pemaparan langsung antara panas dan bakteri.
Menurut Desmond (dikutip dalam penelitian Rizqiati, et al., 2008),
viabilitas bubuk probiotik menurun dengan meningkatnya suhu penyimpanan.
Pada peningkatan panas terjadi dehidrasi sel yang mengakibatkan sel menderita
shock osmotik dan terjadinya kebocoran sel. Panas telah dilaporkan merusak
berbagai stuktur sel termasuk kerusakan membran sel, ribosom, DNA, RNA dan
enzim. DNA masih ditetapkan sebagai molekul sasaran letal. Oleh karena itu
penyimpanan pada suhu tinggi tidak dianjurkan pada produk probiotik baik dalam
bentuk cair ataupun yang kering.
Menurut International Dairy Federation, jumlah minimal sel probiotik
hidup yang dapat berperan dalam meningkatkan kesehatan pencernaan adalah
sebanyak 106-107 cfu/gram (Puspawati, 2008). Penyimpanan pada suhu 44○C
pada sampel X dan Y tetap memberikan manfaat kesehatan seperti meningkatnya
sistem imun saluran cerna sampai 4 minggu penyimpanan, sementara sampel Z
dapat memberikan manfaat sampai 2 minggu penyimpanan. Namun manfaat
sampel sebagai antidiare menjadi kurang efektif setelah penyimpanan pada suhu

32
ini, karena menurut Yuan Kun Lee, untuk mengobati diare dibutuhkan dosis 4 x
107 sampai 6 x 1010 cfu/gram.

BAB 5
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
1. Penyimpanan ketiga sampel probiotik pada suhu 4○C dapat

mempertahankan viabilitas dari ketiga sampel selama 4 minggu periode
pengujian.
2. Penyimpanan ketiga sampel probiotik pada suhu 25○C menunjukkan
viabilitas yang baik pada sampel X dan Z, sedangkan sampel Y
memperlihatkan penurunan selama 4 minggu periode pengujian.
3. Penyimpanan ketiga sampel probiotik pada suhu 44○C menunjukkan
penurunan viabilitas bakteri sampel X, Y dan Z selama 4 minggu periode
penyimpanan.
5.2 Saran
Pada penelitian selanjutnya, Penulis menyarankan untuk melakukan

adanya uji identifikasi spesies bakteri pada sampel probiotik sebelum melakukan
enumerasi bakteri.

34
DAFTAR PUSTAKA
Batrinon, Anthimia. (2010). The Use of Lactic Acid Bacteria in Probiotic

Bacteria. Thei of Athena.
Bora S Pushpak. Puri V, Bansal A. (2009). Physicochemical properties and
excipient compatibility studies of probiotic Bacillus coagulan spores.
Scientia Pharmaceutica, 627.
Bridson, E.Y. (1998). The Oxoid Manual 8th Edition. Oxoid Limited Wade Road.
Basingstoke Hamshire RG24 8PW : England
Collin and Lyne’s. (2004). Microbiological Methods Eight Edition. Arnold, a
member of the Hodder Headline Group, 338 Euston Road, London NW1
3BH
Depson, Ronald. (2012). Identifikasi molekular dan pengaruh pemberian
potensial probiotik bakteri asam laktat asal dadih terhadap kolesterol
daging itik bayang sumber daya genetik Sumatera Barat.Universitas
Andalas, 6.
Desai, Ankur. (2008). Strain Identification, Viability and Probiotics Properties of
Lactobacillus casei.School of Biomedical and Health Science Victoria
University, Werribee Campus Victoria Australia.
De Vos P, Garrity M G, Jones D, Krieg N, Ludwig W, Rainey A, Scleifer H Karl,
Witman W. (2009). Bergey’s Manual of Systematic Bacteria Second
Edition. Springer Dordrecht Heidelberg London New York.
Food and Agriculture Organisation of the United Nations and World Health
Organization. (2001). Health and Nutrition Properties of Probiotics in
Food including Powder Milk with Live Lactic Acid Bacteria. Report of a
joint FAO/WHO Expert Concultation on Evaluation of Health and
Nutrition Properties of Probiotics in Food including Powder Milk with
Live Lactic Acid Bacteria. World Health Organization.
Guarner F, Khan A, Garisch J, Gangl A, Eliakim R, Gang A, Tomson A,
Krabshuis J, Le Mair T. (2008). World Gastroenterology Organisation
Practice Guideline. World Gastroenterology Organisation.
UIN
35
Harmayani N, Rahayu E, Utami T. (2001). Ketahanan dan viabilitas probiotik

Bakteri Asam Laktat Selama Proses pembuatan kulture kering dengan
Metode Freeze drying dan Spray Drying. Jurnal Teknologi Pangan Vol
XII Universitas Gajah Mada, 126.
Malago Joshua J, Koninkx JG Logar, Marinsek R. (2011). Probiotic Bacteria and
Enteric Infection. Cyoptoprotection of Probiotic Bacteria. Springer
Dordrecht Heidelberg London New York.
Mi Sun Kang, Youn-Shin Kim, Hyun Chul Lee, Hoi Soon Lim and Jong Suk Oh.
(2012). Comparison of temperature and additictive affecting the stability
of the probiotic Weissela cicaria. Chonnan Medical Jounal : Korea, 167.
Neha A, Kamaljit S, Ajay B, Tarung G. (2012). Probiotic as effective treatment of
disease. International Research Journal Of Pharmacy : India ISSN :
2230-8407, 98.
Pelczar, Michael J dan Chan,E.C.S. (2008). Dasar-Dasar Mikrobiologi. Penerbit
Universitas Indonesia (UI-Press).
Prasetyo, Diding Heri. Purwanto Bambang. (2010). Efek Probiotik pada Kadar
IgA Mencit Model Sepsis. Fakultas Kedokteran Sebelas Maret Surakarta.
MKB, Volume 42 No 4, 178.
Puspawati, Ni Nyoman. (2008) Penggunaan berbagai Jenis Bahan Pelindung
Untuk Mempertahankan Viabilitas Bakteri Asam Laktat yang Diisolasi
Dari Air Susu Ibu Pada Proses Pengeringan Beku dan Penyimpanan.
Institut Pertanian Bogor. Hal: 76.
Rizqiati H, Sri Laksmi B, Nurhidayat N, Nurwitri C. (2008). Ketahanan dan
Viabilitas Lactobacillus plantarum yang Dienkapsulasi dengan Susu
Skim dan Gum Arab Setelah Pengeringan dan Penyimpanan. lSSN 141 1
– 2027 Terakreditasi No 56/DIKTI/Kep/2005, 186.
Saarela, Maria. (2007). Functional Dairy Product Volume 2. Woodhead
Publishing in Food Scince,Technology and Nutrition Ltd, Abington Hall,
Abington, Cambridge CB21 6AH, England.
Saarela M, Mogensen G, Fonde R, Matto J. (2000). Probiotic bacteria: Safety,
Functional, and Technological Properties. Journal of Biotechnology 84:
197-215.197, 199,208
UIN
36
Simadibrata, Marcelius. (2011). Probiotik dan Peranannya dalam Dunia Medis.

Divisi Gasatroenterologi Departemen Ilmu Penyakit Dalam.Fakultas
kedokteran Universitas Indonesia/RS Cipto Mangunkusumo Jakarta, 65-
66.
S. Mulyani, A.M. Legowo dan A.A. Mahanani. (2008). Viabilitas Bakteri Asam
Laktat, Keasaman dan Waktu Pelelehan Es Krim Probiotik
Menggunakan Starter Lactobacillus casei dan Bifidobacterium bifidum.
Fakultas Peternakan Universitas Diponegoro, Semarang, 121-122.
Swidan, Nedal. (2009). Factor Affecting The Growth And Survival of Probiotic in
Milk. Cardiff School of Health Science University of Wales Institute,
Cardiff United Kingdom, 21-22
Yuan Kun Lee and Seppo Salminen.(2009). Handbook of Probiotics and
Prebiotics Second Edition A John Wiley & Sons Inc All rights reserved
Published by John Wiley & Sons, Inc., Hoboken, New Jersey Published
simultaneously in Canada, 60-66.
Yulinery, Titin, N. Nurhidayat. (2012). Analisis Viabilitas Probiotik Lactobacillus
Terenkapsulasi Dalam Penyalut Dekstrin dan Jus Markisa. Bidang
Mirobiologi : LIPI, 111.
Yulinery, Titin. Yulianto, Eko. Nurhidayat, Novik. (2006). Uji Fisiologis
Probiotik Lactobacillus sp. Mar 8 yang Telah Dienkapsulasi dengan
Menggunakan Spray Dryer untuk Menurunkan Kolesterol. Bidang
Mikrobiologi, Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan
Indonesia (LIPI). ISSN: 1412-033X, 121.
UIN
37
Lampiran 1. Alur Penelitian
PROSEDUR KERJA
PREPARASI PREPARASI PREPARASI

ALAT SAMPEL BAHAN
STERILISASI SUHU SUHU SUHU PEMBUATAN PEMBUATAN

4o C 25oC o MEDIUM PELARUT
DENGAN OVEN 44 C
IDENTIFIKASI BAKTERI
DENGAN PEWARNAAN GRAM
UJI VIABILITAS BAKTERI
DENGAN METODE STANDART PLATE

COUNT

38
Lampiran 2. Media Perbenihan Man De Rogosa Sharpe Agar
Formula:
Peptone 10 g
Lab-Lemco powder 8,0 g
Yeast extract 4g
Glucosa 20 g
Sorbitan mono-oleat 1 ml
Dipotassium Hidrogen posfat 2,0 g
Sodium Acetat 3H2O 5,0 g
Triamonium Citrat 2,0 g
Magnesium Sulfat 7H2O 0,2 g
Mangan sulfat 4H2O 0,05 g
pH 6,2 ± 0,2
dilarutkan 62 gram serbuk MRS dalam 1 liter air destilasi pada suhu 60○ C hingga
larut sempurna kemudian disterilkan menggunakan autoklaf pada suhu 121○ C
selama 15 menit.

39
Lampiran 3. Certificate of Analysis Medium MRS

40
Lampiran 4. Data Sampel X
Sampel X berisi bakteri asam laktat dan metabolit produk dari kultur dalam
media lactoserum. Sampel X merupakan Lyophilized yang berbentuk kering.
Sampel x dapat membantu menjaga keseimbangan flora normal usus dan
mengobati macam macam penyakit saluran cerna. Sampel X juga stabil pada
temperatur tinggi dan kelembaban tinggi dan dapat disimpan di suhu ruang.
Komposisi :
Tiap Sachet ( 1 gram ) berisi:
Latobacillus achidophillus .......................................................................... 340 mg
Dekstrosa..................................................................................................... 322 mg
Serbuk Vegetable cream ............................................................................ 45,1 mg
Kalsium susu ................................................................................................. 20 mg
Serbuk strawberry Fragrance ....................................................................... 200mg
Serbuk strawberry flavor............................................................................... 40 mg
Niacin .............................................................................................................. 1 mg
Zinc oksida ................................................................................................... 1,3 mg
Thiamin Hidroklorida ..................................................................................... 3 mg
Riboflavin .................................................................................................... 0,3 mg
Piridoksin hidroklorida ................................................................................ 0,3 mg
Sukrosa ............................................................................................................ 1 mg
Steviosida ........................................................................................................ 1 mg
Asam askorbat ............................................................................................... 25 mg
Efikasi :
Memelihara fungsi normal saluran cerna pada anak dan dewasa.
Aturan Penggunaan:
Dewasa dan anak-anak:
Pemberian oral : 2-4 sachet perhari( 340 mg L.acidophilus setara dengan 3,0 x
1010 cfu/g)
Untuk anak-anak, sampel X dapat dicampur dengan air ataupun susu
Pemakaian sampel X dapat dikurangi atau ditambah tergantung umur dan gejala.
Perhatian :
1. Pemakaian secara hati-hati oleh pasien
Pasien dibawah pengobatan
2. Pemakaian sesuai indikasi
Reg No : POM SI.04 216 731
No Batch : IN03M03
Tanggal Produksi : 03 2012
Tanggal Kadaluarsa : 03 2014

41
Lampiran 5. Data Sampel Y
Sampel Y adalah Probiotik yang mengandung Lactobacillus reuteri hidup, yang

merupakan flora normal yang baik untuk kesehatan saluran cerna, membantu
bakteri baik untuk mengembalikan keseimbangan alamiah dalam saluran cerna
untuk melawan mikroorganisme patogen.
Komposisi:
tiap tablet kunyah mengandung Lactobacillus reuteri Protectis 108 cfu.
Kegunaan :
Memelihara kesehatan saluran cerna
Dosis dan Cara pemberian :

Kunyah 1 tablet perhari atau sesui anjuran dokter. Dosis yang lebih tinggi aman
diberikan.
Simpan dibawa suhu 25○ C
Reg No : POM SI.064 523 821

No Batch : 3TQP014

42
Lampiran 6. Data Sampel Z
Sampel Z mengandung suatu spesies baru dari Lactobacillus sporogenes yang

dapat membantu pemeliharaan/pengaturan kelancaran fungsi usus. Pada
penyimpanan lama tidak terjadi penurunan jumlah bakteri dalam sampel Z.
Sifat dan Komposisi:

Lactobacillus sporogenes yang terdapat dalam sampel Z pertama kali diisolasi
dari minuman hijau dan dinamakan Lactobacillus sporogenes , suatu spesies dari
Bacillus coagulans yang termasuk kelompok organisme gram positif. Tiap-tiap
tablet mengandung tidak kurang dari 50.000.000 Lactobacillus sporogenes hidup.
Indikasi:
Radang akut maupun kronis pada selaput lendir (katarrh), diare, sembelit,
fermentasi abnormal dalam usus, dispepsia, tinja hijau pada bayi flora usus yang
tidak seimbang akibat pengobatan jangka panjang dengan antibiotika atau
khemoterapika, gatal-gatal, eksema, dan strophulus.
Dosis :
Umumnya : bayi : 3 x sehari 1 sachet
Anak-anak : 3 x sehari 2 tablet
Dewasa : 3 x sehari 4 tablet
Dosis ini hendaknya disesuaikan dengan umur dan kondisi tubuh.
Perhatian
Penyimpanan Sampel Z harus dilakukan dalam wadah tertutup rapat, terlindung
dari kelembaban.
Kemasan
Dalam dus @100 tablet masing-masing dalam strip @ 10 tablet.
Reg No : DKL7212423910A1
No Batch : Cb09711
Tanggal Produksi : 03 2012

43
Lampiran 7. Skema Kerja Viabilitas Bakteri Sampel X
1 sampel X dicukupkan sampai 10 ml NaCl

Fisiologis dan di buat 10 seri pengenceran
10 –1
10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7 10-

8
10-9 10-10
Dinkubasi selama 24 jam pada suhu

37○ C
Di hitung jumlah koloni yang

tumbuh pada petri

44
Lampiran 8. Skema Kerja Viabilitas Bakteri Sampel Y

45
Lampiran 9. Skema Kerja Viabilitas Bakteri Sampel Z

46
Lampiran 10. Perhitungan Sampel X
Tiap Sachet berisi 1 gram serbuk yang terdiri dari 3 x 1010 cfu/g bakteri
Lactobacillus achidophilus. Dibuat pengenceran sampai 1010 dengan pengulangan
3x.
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7 10-8 10-9 10-10
over over over Over 235 135 150 291 120 29
Perhitungan pertama :
1
= Jumlah koloni x
��
= 235 x 1/10-5 + 135 x 1/10-6 + 150 x 1/10-7 + 291 x 1/10-8 +120 x 1/10-9
= 235 x 105 + 135 x 106 + 150 x 107 + 291 x 108 + 120 x 109
= 1507585 x 105
= 301517 x 105
= 3,01 x 1010 cfu

47
Lampiran 11. Perhitungan Sampel Y
0,5 gram tablet yang berisi 1 x 108 cfu/g bakteri Lactobacillus reuteri. Dibuat
pengenceran sampai 1 x 108 dengan pengulangan 3x.
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7 10-8

over over 292 135 150 175 30 2
over over 291 140 150 172 31 2
over over 294 130 157 177 28 6
perhitungan pertama :
1
= Jumlah koloni x ��
= 292 x 1/10-3 + 135 x 1/10-4 + 150 x 1/10-5 + 175 x 1/10-6+ 30 x 1/10-7
= 292 x 103 + 135 x 104 + 150 x 105 + 175 x 106 + 30 x 107
= 501645 x 103
= 100.329 x 103
= 1,00 x 108 cfu

48
Lampiran 12. Perhitungan Sampel Z
0,5 gram tablet yang berisi dari 5 x 107 cfu/g bakteri Lactobacillus sporogenes.
Dibuat pengenceran sampai 10-7 dengan pengulangan 3x.
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7

Over over Over 291 267 121 21
Over over Over 281 270 121 21
Over over over 299 263 125 23
Perhitungan Pertama:
1
= Jumlah koloni x ��
= 291 x 1/10-4 + 267 x 1/10-5 + 121 x 1/10-6
= 291 x 104 + 267x 105 + 121x 106
= 15061 x 104
= 5020 x 104
= 5,02 x 107 cfu

49
Lampiran 13. Koloni yang Tumbuh pada Sampel X
Pengenceran 10-1 Pengenceran 10-2

50

51
Lampiran 14.Koloni yang tumbuh pada Sampel Y
Pengenceran 10-1 pengenceran 10-2

52
Lampiran 15.Koloni yang Tumbuh pada Sampel Z
Pengenceran 10-1 pengenceran 10-2
Pengenceran 10-7

53
Lampiran 16. Perbandingan Jumlah Total Bakteri Sampel X pada suhu 4○ C

dengan One Way Repeated Measures ANOVA
Pairwise Comparisons
Measure: MEASURE_1
a
(I) minggu (J) minggu Mean Std. Error Sig. 95% Confidence Interval for
a
Difference (I-J) Difference
Lower Bound Upper Bound

2 .003 .003 .440 -.011 .018
3 .001 .001 .452 -.005 .007
1
4 .003 .004 .500 -.014 .020
5 .337 .332 .417 -1.092 1.766

1 -.003 .003 .440 -.018 .011
3 -.002 .003 .569 -.014 .010
2
4 -6.667E-005 .003 .984 -.013 .013
5 .334 .334 .423 -1.103 1.770
1 -.001 .001 .452 -.007 .005
2 .002 .003 .569 -.010 .014
3
4 .002 .002 .532 -.009 .013
5 .336 .334 .420 -1.100 1.771
1 -.003 .004 .500 -.020 .014
2 6.667E-005 .003 .984 -.013 .013
4
3 -.002 .002 .532 -.013 .009
5 .334 .336 .425 -1.112 1.779
1 -.337 .332 .417 -1.766 1.092
2 -.334 .334 .423 -1.770 1.103
5
3 -.336 .334 .420 -1.771 1.100
4 -.334 .336 .425 -1.779 1.112

Based on estimated marginal means
a. Adjustment for multiple comparisons: Least Significant Difference (equivalent to no adjustments).

54
Measure: MEASURE_1
a
a
2 .000 .003 .888 -.012 .013

3 .001 .003 .867 -.012 .013
1
4 .002 .003 .590 -.012 .016
5 .001 .002 .583 -.008 .011

1 .000 .003 .888 -.013 .012
3 1.000E-004 .000 .478 .000 .001
2
4 .002 .001 .186 -.002 .005
5 .001 .001 .362 -.003 .005
1 -.001 .003 .867 -.013 .012
2 -1.000E-004 .000 .478 -.001 .000
3
4 .002 .001 .238 -.002 .005
5 .001 .001 .444 -.003 .005
1 -.002 .003 .590 -.016 .012
2 -.002 .001 .186 -.005 .002
4
3 -.002 .001 .238 -.005 .002
5 -.001 .001 .610 -.005 .004
1 -.001 .002 .583 -.011 .008
2 -.001 .001 .362 -.005 .003
5
3 -.001 .001 .444 -.005 .003
4 .001 .001 .610 -.004 .005


55
Measure: MEASURE_1
b
b

*
2 3.001 .008 .000 2.968 3.034
*
3 3.166 .007 .000 3.135 3.197
1 *
4 4.011 .003 .000 3.997 4.026
*
5 4.073 .002 .000 4.066 4.080
*
1 -3.001 .008 .000 -3.034 -2.968
*
3 .165 .006 .001 .138 .192
2 *
4 1.011 .005 .000 .990 1.031
*
5 1.072 .006 .000 1.044 1.100
*
1 -3.166 .007 .000 -3.197 -3.135
*
2 -.165 .006 .001 -.192 -.138
3 *
4 .845 .007 .000 .816 .875
*
5 .907 .006 .000 .883 .932
*
1 -4.011 .003 .000 -4.026 -3.997
*
2 -1.011 .005 .000 -1.031 -.990
4 *
3 -.845 .007 .000 -.875 -.816
*
5 .062 .003 .002 .050 .074
*
1 -4.073 .002 .000 -4.080 -4.066
*
2 -1.072 .006 .000 -1.100 -1.044
5 *
3 -.907 .006 .000 -.932 -.883
*
4 -.062 .003 .002 -.074 -.050

*. The mean difference is significant at the ,05 level.
b. Adjustment for multiple comparisons: Least Significant Difference (equivalent to no adjustments).

56
Lampiran 19 . Perbandingan Jumlah Total Bakteri Sampel Y pada Suhu 4○ C

Measure: MEASURE_1
a
a

2 .003 .003 .423 -.010 .016
3 .003 .004 .513 -.014 .020
1
4 .006 .003 .188 -.007 .020
5 .003 .003 .423 -.010 .016
1 -.003 .003 .423 -.016 .010
3 3.333E-005 .002 .990 -.011 .011
2
4 .003 .006 .654 -.023 .030
5 .000 .005 1.000 -.023 .023
1 -.003 .004 .513 -.020 .014
2 -3.333E-005 .002 .990 -.011 .011
3
4 .003 .007 .687 -.026 .033
5 -3.333E-005 .007 .997 -.029 .029
1 -.006 .003 .188 -.020 .007
2 -.003 .006 .654 -.030 .023
4
3 -.003 .007 .687 -.033 .026
5 -.003 .003 .341 -.014 .008
1 -.003 .003 .423 -.016 .010
2 .000 .005 1.000 -.023 .023
5
3 3.333E-005 .007 .997 -.029 .029
4 .003 .003 .341 -.008 .014


57
Lampiran 20. Perbandingan Jumlah Total Bakteri Sampel Y pada Suhu 25○ C
Measure: MEASURE_1
b
b
*
2 .044 .001 .000 .042 .047
*
3 .059 .001 .000 .056 .062
1 *
4 .089 .001 .000 .084 .094
*
5 .098 .000 .000 .097 .099
*
1 -.044 .001 .000 -.047 -.042
*
3 .015 .000 .000 .013 .016
2 *
4 .044 .002 .001 .037 .052
*
5 .054 .000 .000 .052 .055
*
1 -.059 .001 .000 -.062 -.056
*
2 -.015 .000 .000 -.016 -.013
3 *
4 .030 .002 .004 .022 .037
*
5 .039 .000 .000 .037 .041
*
1 -.089 .001 .000 -.094 -.084
*
2 -.044 .002 .001 -.052 -.037
4 *
3 -.030 .002 .004 -.037 -.022
*
5 .009 .001 .022 .003 .016
*
1 -.098 .000 .000 -.099 -.097
*
2 -.054 .000 .000 -.055 -.052
5 *
3 -.039 .000 .000 -.041 -.037
*
4 -.009 .001 .022 -.016 -.003

58
Lampiran 21. Perbandingan Jumlah Total Bakteri Sampel Y pada Suhu 44○ C
Measure: MEASURE_1
b
b
*
2 .493 .008 .000 .459 .527
*
3 .577 .000 .000 .576 .577
1 *
4 1.637 .006 .000 1.612 1.662
*
5 1.888 .000 .000 1.887 1.889
*
1 -.493 .008 .000 -.527 -.459
*
3 .083 .008 .009 .050 .117
2 *
4 1.144 .013 .000 1.088 1.199
*
5 1.395 .008 .000 1.360 1.430
*
1 -.577 .000 .000 -.577 -.576
*
2 -.083 .008 .009 -.117 -.050
3 *
4 1.060 .006 .000 1.035 1.086
*
5 1.312 .000 .000 1.311 1.313
*
1 -1.637 .006 .000 -1.662 -1.612
*
2 -1.144 .013 .000 -1.199 -1.088
4 *
3 -1.060 .006 .000 -1.086 -1.035
*
5 .251 .006 .001 .227 .276
*
1 -1.888 .000 .000 -1.889 -1.887
*
2 -1.395 .008 .000 -1.430 -1.360
5 *
3 -1.312 .000 .000 -1.313 -1.311
*
4 -.251 .006 .001 -.276 -.227

59
Lampiran 22. Perbandingan Jumlah Total Bakteri Sampel Z pada Suhu 4○ C

Measure: MEASURE_1
a
a

2 .001 .001 .499 -.005 .007
3 .002 .002 .375 -.005 .008
1
4 .003 .001 .086 -.001 .007
5 -.002 .006 .744 -.028 .023

1 -.001 .001 .499 -.007 .005
3 .001 .000 .245 -.001 .002
2
4 .002 .002 .483 -.008 .012
5 -.003 .005 .537 -.023 .016
1 -.002 .002 .375 -.008 .005
2 -.001 .000 .245 -.002 .001
3
4 .001 .002 .624 -.009 .012
5 -.004 .004 .465 -.023 .015
1 -.003 .001 .086 -.007 .001
2 -.002 .002 .483 -.012 .008
4
3 -.001 .002 .624 -.012 .009
5 -.005 .007 .517 -.035 .024
1 .002 .006 .744 -.023 .028
2 .003 .005 .537 -.016 .023

5
3 .004 .004 .465 -.015 .023
4 .005 .007 .517 -.024 .035


60
Measure: MEASURE_1
a
a

2 .004 .002 .130 -.003 .012
3 .004 .001 .087 -.001 .010
1
4 .003 .001 .054 .000 .006
5 .005 .002 .102 -.002 .012

1 -.004 .002 .130 -.012 .003
3 .000 .001 .798 -.005 .004
2
4 -.001 .002 .571 -.009 .006
5 .000 .000 .423 -.001 .002
1 -.004 .001 .087 -.010 .001
2 .000 .001 .798 -.004 .005
3
4 -.001 .001 .423 -.005 .003
5 .001 .001 .654 -.004 .006
1 -.003 .001 .054 -.006 .000
2 .001 .002 .571 -.006 .009
4
3 .001 .001 .423 -.003 .005
5 .001 .002 .488 -.006 .009
1 -.005 .002 .102 -.012 .002
2 .000 .000 .423 -.002 .001

5
3 -.001 .001 .654 -.006 .004
4 -.001 .002 .488 -.009 .006


61
Measure: MEASURE_1
b
b

*
2 1.172 .001 .000 1.168 1.176
*
3 1.488 .001 .000 1.485 1.492
1 *
4 2.149 .026 .000 2.036 2.261
*
5 2.374 .008 .000 2.341 2.406
*
1 -1.172 .001 .000 -1.176 -1.168
3 .317 .000 . .317 .317
2 *
4 .977 .026 .001 .866 1.087
*
5 1.202 .008 .000 1.166 1.238
*
1 -1.488 .001 .000 -1.492 -1.485
2 -.317 .000 . -.317 -.317
3 *
4 .660 .026 .002 .550 .770
*
5 .885 .008 .000 .849 .921
*
1 -2.149 .026 .000 -2.261 -2.036
*
2 -.977 .026 .001 -1.087 -.866
4 *
3 -.660 .026 .002 -.770 -.550
*
5 .225 .031 .019 .090 .360
*
1 -2.374 .008 .000 -2.406 -2.341
*
2 -1.202 .008 .000 -1.238 -1.166
5 *
3 -.885 .008 .000 -.921 -.849
*
4 -.225 .031 .019 -.360 -.090

09 - 206penyakit Tiroid Pada Kehamilan

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Deskripsi Asli:

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

09 - 206penyakit Tiroid Pada Kehamilan

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

PENGARUH SUHU TERHADAP DAYA TAHAN

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

PROGRAM STUDI FARMASI

PENGARUH SUHU TERHADAP DAYA TAHAN

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

PROGRAM STUDI FARMASI

Skripsi ini adalah hasil karya saya sendiri,

dan semua sumber baik yang dikutip maupun dirujuk

telah saya nyatakan dengan benar.

Nama : Fauziah Utami

Nama : Fauziah Utami

Program Studi : Farmasi

Ofa Suzanti Betha, M.Si.,Apt Yuni Anggraeni, M.Farm., Apt

Drs. Umar Mansur, M.Sc

Telah berhasil dipertahankan di hadapan Dewan Penguji dan diterima

Pembimbing 1 : Ofa Suzanti Betha, M.Si., Apt ( )

Tanggal : Juli 2013

Nama : Fauziah Utami

Penggunaan probiotik pada sediaan farmasi dipercaya dapat menyeimbangkan

Kata Kunci : viabilitas, suhu, Lactobacillus achidophilus, Lactobacillus reuteri,

Name : Fauziah Utami

Use of probiotics in pharmaceutical preparations can reliably balance the normal

Keyword : viability, temperature, Lactobacillus achidophilus, Lactobacillus

1. Bapak Prof.Dr.(hc) dr.M.K Tadjudin Sp.And, selaku Dekan Fakultas

Jakarta, 30 Juli 2013

Sebagai sivitas akademik Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah

Nama : Fauziah Utami

demi perkembangan ilmu pengetahuan, saya menyetujui skripsi/karya ilmiah

PENGARUH SUHU TERHADAP DAYA TAHAN HIDUP BAKTERI

Gambar 4.1 Koloni Sampel X, Y dan Z .............................................................23

Tabel 2.1 Beberapa Mikroorganisme yang Berperan Sebagai Probiotik ..............6

Lampiran 1. Alur Penelitian ................................................................................37

1.1 Latar Belakang

Probiotik didefinisikan sebagai mikroorganisme hidup non-patogenik,

1 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

1.2 Rumusan Masalah

1.3 Tujuan Penelitian

1.4 Manfaat Penelitian

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

1. Tidak kehilangan sifat aslinya selama masa penyimpanan

4 UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

5. Harus menimbulkan fungsi metabolik pada level pencernaan, yang

Mekanisme probiotik melindungi atau memperbaiki kondisi kesehatan

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

dengan menstimulasi respon IgA dan merangsang aktivitas fagositosis

2.2 Strain Bakteri Probiotik

Tabel 2.1 Beberapa Mikroorganisme yang Berperan Sebagai Probiotik

Propionibacterium Yeast Other

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.3 Terapi Probiotik

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

dalam mukosa usus dengan cara kompetisi dalam mengadakan

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

4. Gejala IBS (Irritable Bowel Sindrome)

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

imunokompeten saluran pencernaan yang beperan pada berbagai reaksi

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2.4 Dosis Probiotik