NAMA : FEBRI AWALSYA

NIM : 1507123898
TUGAS PERANCANGAN PROSES TEKNIK KIMIA
CONTOH SOAL 2.3 : Manufacture of Tissue Plasminogen Activator (tPA)

Dalam proses pembuatan obat-obatan, pertimbangkan beberapa

kemungkinan produksi aktivator plasminogen, yang merupakan enzim kuat yang
memicu proteolitik (penguraian protein untuk membentuk zat yang lebih
sederhana) degradasi gumpalan darah yang menyebabkan stroke dan serangan
jantung. Sejak pertengahan 1980-an, Genentech, AS com-pany, telah diproduksi
aktivator plasminogen jaringan (TPA), yang mereka menjualnya seharga $2,000
per 100 mg dosis pada awal tahun 2000, dengan penjualan tahunan sebesar $ 300
MM / tahun (MM di unit teknik Amerika adalah seribu-seribu, atau 1 juta).
Mengingat bahwa paten mereka akan kedaluwarsa pada tahun 2003, Genentech
mengembangkan aktivator plasminogen generasi baru yang disetujui oleh Food
and Drug Administration (FDA) yang disebut TNK-tPA, yang lebih mudah dan
lebih aman untuk digunakan oleh dokter. Dengan pasar yang semakin
berkembang pesat, muncul pertanyaan apakah ada peluang bagi perusahaan lain
untuk memproduksi bentuk generik (yaitu, tanpa nama merek) yang dapat
bersaing dengan TNK-tPA. Untuk memeriksa kemungkinan ini, tim desain telah
merumuskan. Telah teridentifikasi dua alternatif potensial:
Alternatif 1. Sementara bentuk generik dari tPA mungkin tidak cocok
dengan TNK-tPA di Amerika Serikat, produk ini memungkinkan untuk
memasarkan tPA generik berbiaya rendah di pasar luar negeri, di mana urokinase
dan streptokinase adalah obat alternatif berbiaya rendah, yang dijual hanya $ 200 /
dosis, tetapi dikaitkan dengan peningkatan risiko pendarahan. Analisis pasar
menunjukkan bahwa tingkat produksi maksimum 80 kg tahun akan sesuai selama
lima tahun ke depan.
Alternatif 2. Mengingat kemungkinan perawatan kesehatan yang lebih
rendah penggantian diterima oleh rumah sakit di Amerika Serikat, mungkin
masuk akal untuk mengembangkan proses serupa yang bersaing dengan TNK-tPA
di Amerika Serikat. Alternatif lain yang menjanjikan kemungkinan akan muncul,
sering diprakarsai oleh keberhasilan di laboratorium penelitian.

Dinyatakan secara berbeda, berdasarkan penelitian yang luas di

laboratorium bio-kimia, gen tPA diisolasi dari sel melanoma manusia, dan
masalah proses sintesis pada Gambar 2.9 dibuat. Seperti yang ditunjukkan, tPA
diproduksi menggunakan sel mamalia [misalnya, Chinese hamster ovary (CHO)]
yang memiliki tPA-DNA sebagai bagian dari konten genetik (genom). Dalam
operasi bioreaksi aerobik, sel-sel tPA-CHO tumbuh dalam media nutrisi, HyQ PF-
CHO— Hyclone Media, campuran nutrisi, garam (termasuk NaHCO3), asam
amino, insulin, faktor pertumbuhan, dan transferrin, khusus untuk pertumbuhan
sel CHO. Bahan-bahan lain termasuk air yang disterilkan, udara, dan CO2. Selain
tPA, endotoksin dapat menjadi kontaminan produk, yang harus dihilangkan
karena menimbulkan berbagai respons inflamasi pada hewan. Produk sampingan
lainnya termasuk puing-puing sel, buangan limbah, dan emisi gas, terutama N2
dari udara, Otidak dikonsumsi2 yang dari udara, dan CO2, yang mengatur pH.
Sumber data penting, selain yang diambil di laboratorium biokimia, adalah paten
AS, diajukan oleh Genentech (Goeddel et al., 1988), yang memberikan informasi
kualitatif dan kuantitatif yang cukup besar. Lihat juga laporan desain oleh Audette
et al. (2000).

Langkah 1 Hilangkan Perbedaan dalam Tipe Molekul:

Dalam pembuatan faktur makromolekul seperti tPA sederhana, seperti
vinil klorida. Dalam hal reaksi global untuk membuat tPA, dua jalur reaksi utama
disediakan oleh para ahli biokimia, sebagai berikut:
1. Sel Mamalia. Ke dalam sel CHO, tPA-DNA urutan harus dimasukkan dan
diekspresikan. Sel-sel tPA-CHO yang dihasilkan adalah sel-sel CHO yang dipilih
secara khusus dengan banyak salinan tPA-DNA yang dimasukkan ke dalam
genomnya, dan yang mengeluarkan tPA tingkat tinggi. Langkah penyisipan tPA-
DNA ini dirangkum dalam reaksi:

Produk dari "persiapan katalis" ini adalah stok induk sel tPA-CHO, yang
disiapkan di laboratorium dan disimpan dalam 1-mL alikuot pada –70∘C untuk
digunakan sebagai inokulum untuk bioreaksi:
 2. Sel Bakteri. Alternatif yang menjanjikan adalah memasukkan Urutan tPA-
DNA ke dalam genom Escherichia coli (E. coli) sel, seperti yang dirangkum oleh
reaksi:

Kemudian Bakteri E.coli yang tumbuh di laboratorium, dibekukan dalam alikuol

pada suhu -70∘C untuk digunakan sebagai inokulum untuk reaksi fermentasi:

Kembali ke jalur reaksi dengan sel-sel CHO, menggunakan data laboratorium,

operasi reaksi dimasukkan ke lembar aliran, seperti yang ditunjukkan pada
Gambar 2.10. Pada tingkat produksi 80 kg / tahun tPA, lab melaporkan bahwa
bahan-bahan berikut dikonsumsi dan produk limbah diproduksi:

Langkah 2 Mendistribusikan Bahan Kimia

Pada langkah ini, sumber untuk setiap spesies pada Gambar 2.10
dicocokkan sehingga laju aliran massa total ke dalam operasi reaksi sama dengan
laju aliran massa keluar. Ini sering memerlukan pengenalan operasi pencampuran,
seperti yang diilustrasikan dalam contoh sebelumnya untuk vinil klorida.
Dalam hal ini, hanya satu operasi pencampuran diperkenalkan, di mana
media bubuk HyQ PF-CHO dicampur dengan air, seperti yang ditunjukkan pada
Gambar 2.11. Jika tidak, sumber dan sink akan dicocokkan secara langsung.
Namun, limbah dari pertumbuhan sel, reaktor produksi tPA harus dipisahkan
sebelum spesiesnya dicocokkan dengan produk yang tenggelam.

Langkah 3 Hilangkan Perbedaan dalam Komposisi

Untuk sebagian besar distribusi bahan kimia, ada perbedaan komposisi
antara aliran yang akan dipisahkan dan bak cuci tempat spesies ini dikirim. Jelas,
pada Gambar 2.11, limbah dari pertumbuhan sel, reaktor produksi tPA harus
dipisahkan.
Ada banyak kemungkinan sistem pemisahan, dengan satu yang disediakan
pada Gambar 2.12. Di sini, efluen reaktor dikirim ke separator untuk memulihkan
emisi gas dari campuran cair, dengan yang terakhir dikirim ke centrifuge untuk
menghilangkan puing sel basah dari media panen atau kaldu. Perhatikan bahwa
karena protein kehilangan aktivitasnya pada suhu di atas ∼0∘C, centrifuge, dan
semua operasi pemisahan lainnya, dioperasikan pada 4∘C, sedikit di atas titik beku
air.

Langkah 4 Hilangkan Perbedaan Pada Suhu, Tekanan dan Fasa

Fase : Dalam pembuatan tPA, bahan diasumsikan tersedia pada 20∘C, air
dicampur dengan media serbuk HyQ-PF-CHO pada 4oC. Produksi sel terjadi pada
37oC dan pemisahan terjadi pada 4oC. Panas eksotermis dihapuskan pada 37oC.

Langkah 5 Task Integration

Pada tahap ini dalam sintesis berbagai peralatan yang dipilih, sering
menggabungkan dua atau lebih operasi berdekatan yang menjadi peralatan item
tunggal yang dinamakan Task Integration. Kunci utama melibatkan apakah proses
berlangsung secara kontiniu atau Batcth.
Pohon Sintesis
Jelas, pada setiap langkah dalam sintesis proses aliran, alternatif dihasilkan
dan pohon sintesis termasuk didalamnya. Untuk proses tPA, skema pohon sintesis
ditunjukkan pada Gambar 2.15. Perhatikan bahwa cabang tebal sesuai dengan
lembar alur pada Gambar 2.10–2.14. Dalam sintesis desain, insinyur berusaha
mengidentifikasi alternatif yang paling menjanjikan, menghilangkan alternatif
yang paling tidak menjanjikan dengan inspeksi, sedapat mungkin. Awalnya,
aturan heuristik membantu untuk membuat pilihan. Akhirnya, metode algoritmik
yang melibatkan optimisasi dapat diperkenalkan untuk memeriksa heuristik dan
mengidentifikasi alternatif yang lebih menjanjikan.