Pendahuluan

Obat transfusi telah ditetapkan sebagai jenis perawatan pasien yang aman dan efektif. Peningkatan
fokus pada keselamatan pasien telah membantu mengidentifikasi dan mengendalikan berbagai
faktor risiko yang terkait, membatasi kejadian reaksi transfusi imunologis dan non-imunologis akut
dan tertunda. Panduan hemo-keuangan modern dan perbankan darah telah diterapkan dan terus
membaik dalam pengobatan manusia. Upaya-upaya tersebut tercermin dalam kedokteran hewan
yang diizinkan oleh pertimbangan ekonomi dan logistik, yang memungkinkan terapi tersebut
memainkan penting peran dalam perawatan kesehatan kucing.14 Salah satu aspek peningkatan
keamanan dalam kedokteran transfusi adalah pembentukan pengujian pra-transfusi rutin. 5
Sejumlah sistem pengetikan darah di tempat perawatan telah dikembangkan dan dievaluasi untuk
digunakan pada pasien kucing.6-10 Namun, karena perangkat pengetikan darah hanya mendeteksi
antigen yang diketahui spesifik pada sel darah merah penerima dan donor (RBC), mereka tidak dapat
menjelaskan antigen di luar sistem AB atau untuk semua antibodi yang ada pada penerima.

Alloimunisasi pasca transfusi adalah komplikasi umum dalam pengobatan manusia. Ini, sampai saat
ini, tidak dapat dihindari dan dapat menimbulkan bahaya keselamatan bagi pasien manusia yang
sebelumnya ditransfusikan. Aloimunisasi semacam itu juga telah didokumentasikan untuk anjing dan
kuda dalam kedokteran hewan. 12–14 Pencocokan silang adalah metode standar untuk mendeteksi
ketidaksesuaian serologis antara penerima dan donor.15 Indikasi saat ini untuk pencocokan silang
(CM) pada anjing dan kucing adalah ketika pasien memiliki riwayat transfusi yang tidak diketahui,
telah menunjukkan reaksi transfusi sebelumnya dan atau jika transfusi darah sebelumnya diberikan
⩾4 hari sebelum transfusi yang direncanakan.16–18 Beberapa penulis telah menyatakan gagasan
bahwa pencocokan silang rutin harus diperkenalkan untuk semua pengujian pra-transfusi pada
kucing, 15 , 19 karena antibodi yang secara klinis relevan secara alami pada spesies itu, 20 serta
adanya golongan darah yang berpotensi tidak diketahui, sebagaimana dibuktikan oleh penemuan
antigen erythrocyte Mik.21 Sepengetahuan kami, tidak ada penelitian dengan pencocokan silang
secara serial yang dilakukan secara serial. telah dilakukan yang menentukan status keberadaan
alloantibody pada pasien kucing yang sebelumnya ditransfusikan atau sebelumnya ditransfusikan,
dan tidak ada titik yang ditentukan pada saat ch pasien tersebut akhirnya dapat mengembangkan
aloantibodi setelah transfusi pertama mereka. Makalah ini melaporkan penelitian yang dirancang
untuk mendokumentasikan terjadinya hasil CM positif, serta kegunaan dari cross-matching rutin
pada pasien transfusi kucing yang dipresentasikan di Small Animal Clinic di Free University of Berlin.

Pencocokan-silang

Pengujian pra-transfusi rutin mencakup pencocokan-silang (kontrol mayor, minor dan penerima)
ketika seorang pasien telah menerima transfusi lebih dari 3 hari sebelum transfusi yang
direncanakan. Dalam semua kasus lain, pencocokan silang adalah bagian dari studi percontohan
yang mengevaluasi kegunaan termasuk pencocokan silang dalam pengujian pra-transfusi rutin pada
pasien anemia, di mana pemantauan diperlukan pengambilan sampel secara rutin dan sadar volume.
Crossmatching dilakukan oleh peneliti yang sama sesuai dengan protokol in-house yang ditetapkan,
serta mengikuti data terbaru yang dipublikasikan untuk prosedur tabung sederhana yang umum
dalam kedokteran hewan.16–18,23 Darah utuh dari kedua donor (sampel antikoagulan EDTA ) dan
penerima (sampel yang diawetkan CPDA-1) dicuci sebelum pengujian sebagai berikut: plasma
pertama kali diekstraksi dengan sentrifugasi pada 385 g selama 2 menit. Sel darah merah yang
tersisa kemudian dicuci dengan mencampurkannya dengan 500 μl larutan buffer-phosphate saline
(PBS) dan selanjutnya memusatkan suspensi pada 96 g selama 1 menit. Proses ini diulang tiga kali.
Baik plasma penerima maupun donor diperiksa derajat hemolisis menurut skala berikut: tidak ada
hemolisis yang terlihat oleh mata manusia (0) hingga hemolisis yang tidak memungkinkan
diferensiasi visual sel darah merah dari plasma (4+) (Tabel 1). Substrat untuk pencocokan silang
adalah plasma dan sel darah merah tergantung pada konsentrasi 3-5% dalam larutan PBS. MCM
membutuhkan 40 μl plasma penerima yang dicampur dengan 20 μl larutan RBC donor yang
disiapkan 3-5%. CM minor menggunakan 40 μl plasma donor yang dicampur dengan 20 μl disiapkan
larutan RBC penerima 3-5%. Untuk mengendalikan aglutinasi otomatis, plasma penerima 40 μl juga
dicampur dengan larutan RBC penerima 3-5%. Substrat kemudian diinkubasi pada suhu 37 ° C
selama 15 menit. Setelah 15 detik sentrifugasi pada 865 g, supernatan diperiksa untuk hemolisis dan
dibandingkan dengan plasma yang awalnya digunakan. Pelet kemudian diresuspensi melalui agitasi
lembut sambil memeriksa aglutinasi dalam tabung dengan latar belakang putih, serta pada slide di
bawah mikroskop, jika pemeriksaan makroskopik negatif. Aglutinasi makroskopis dan mikroskopis
dicatat sesuai dengan skala berikut: tidak ada aglutinat (0) sampai 1–2 aglutinat besar dengan
plasma bening (4+) (Tabel 2). Penilaian mikroskopis membutuhkan pemeriksaan sel darah merah
yang ditangguhkan dalam waktu 60 detik dari penempatan setetes larutan RBC pada slide dan agitasi
slide untuk melihat RBC dan kemungkinan RBC diaglutinasikan dalam gerakan. Timbangan yang
digunakan di sini diadaptasi dari penelitian yang menilai tingkat aglutinasi dalam pengetikan darah. 6
Tes dilakukan, bila mungkin, sebelum dan secara seri setiap 2 hari setelah transfusi darah,
tergantung pada ketersediaan sampel. CM dianggap positif jika hemolisis atau reaksi aglutinasi
diamati secara makroskopik. Jika tidak ada reaksi yang jelas, evaluasi mikroskopis selalu disertakan.
Jika kontrol penerima ditampilkan autoaglutinasi, CM dianggap tidak valid. Dalam semua kasus, Hct
sebelum transfusi dibandingkan dengan yang diukur secara rutin 10-72 jam setelah transfusi dan
dibandingkan dengan Hct yang diharapkan berdasarkan pada formula yang disarankan di tempat
lain.

Diskusi
Penelitian ini membahas perlunya pencocokan silang sebagai langkah untuk menghindari reaksi
transfusi potensial pada kucing. Berdasarkan pada kejadian MCM positif yang dilaporkan di sini, 25%
pasien mungkin telah mengembangkan alloantibodi terhadap antigen eritrosit. Kejadian paling awal
dari aloimunisasi tersebut didokumentasikan 2 hari setelah transfusi darah AB-kompatibel pertama
diberikan. Salah satu batasan pencocokan silang dalam pengaturan klinis adalah pengambilan
sampel darah secara hati-hati dari kucing anemia; yaitu, dokter yang bertanggung jawab untuk
kucing anemia rumah sakit cenderung untuk mengambil sampel sesedikit mungkin untuk memantau
perkembangan Hct dan, dengan demikian, jumlah yang tersisa untuk pencocokan silang sering
sangat kecil. Dalam pengalaman kami, bagaimanapun, sesedikit 250 μl darah cukup untuk
melakukan CM secara memadai. Oleh karena itu realistis untuk mengharapkan untuk dapat
mencocokkan silang secara aman pada kucing anemia, bahkan ketika sampel diambil untuk
pemantauan. Tes pra-transfusi dapat dipengaruhi oleh usia sampel yang digunakan. Sebuah studi
dalam kedokteran kuda melaporkan lebih tinggi terjadinya CM yang tidak kompatibel dengan asam
sitrat dekstrosa yang diawetkan sampel donor sedini 1 minggu setelah pengumpulan; penulis
penelitian tersebut sejauh merekomendasikan sampel donor baru untuk pencocokan silang, tanpa,
bagaimanapun, menyarankan periode waktu yang dapat diterima antara mendapatkan sampel dan
melakukan CM.23,26 Rekomendasi umum dalam kedokteran hewan mengenai usia spesimen untuk
pencocokan silang adalah bahwa mereka harus berusia di bawah 24 jam, dengan pengecualian
segmen unit donor yang mungkin setua unit itu sendiri. Dalam penelitian ini, sampel donor diambil
pada saat donor darah dan diawetkan dengan CPDA-1. Usia sampel donor berkorelasi dengan usia
unit, yang berkisar 0-21 hari (rata-rata 7 hari) dalam penelitian kami.

Karena itu, kami tidak dapat mengecualikan pengaruh penyimpanan yang lebih lama pada hasil CM
kami. Tiga dari pasien dalam penelitian ini didiagnosis dengan FeLV, infeksi yang telah dikaitkan
dengan hasil MCM positif palsu. Dari pasien yang positif FeLV dicocokkan di sini, satu menunjukkan
MCM positif dalam proses pengujian. Tidak mungkin bahwa ini merupakan false-positive, karena
MCM positif tidak terjadi sampai hari ketujuh setelah transfusi awal. Pasien transfusi sering
menerima terapi glukokortikoid dalam dosis imunosupresif ketika penyakit yang mendasari seperti
IMHA, PRCA, leukemia dan sebagainya hadir. Tidak jelas apakah pengobatan tersebut menekan
pengembangan aloantibodi pada pasien yang ditransfusikan. Tujuh dari 20 pasien menerima
pengobatan glukokortikoid, dua di antaranya menunjukkan MCM positif setelah masing-masing
menjalani pengobatan ini selama 8 dan 12 hari. Diperlukan lebih banyak data untuk dapat membuat
klaim mengenai relevansi klinis MCM positif pada kucing yang tertekan imun. Kemanjuran transfusi
ditentukan dengan memeriksa berbagai faktor, yang paling sederhana adalah apakah reaksi transfusi
akut telah terjadi atau tidak. Reaksi transfusi akut tidak diamati pada subjek yang dipelajari di sini.
Kelangsungan hidup RBC juga dapat diukur dengan memeriksa perkembangan Hct pasca transfusi;
sebuah studi tentang transfusi pada kucing melaporkan bahwa pada 43,3% pasien Hct mendekati
nilai yang dihitung sebelum transfusi.2 Dalam penelitian ini, jumlahnya sedikit lebih tinggi yaitu
51,5% untuk populasi penelitian. Kelompok pasien yang menunjukkan MCM positif memiliki tingkat
respons yang lebih rendah (40%), yang mungkin merupakan indikasi keparahan penyakit pada pasien
tersebut; Namun, reaksi transfusi yang tertunda tidak dapat dikesampingkan. Peningkatan
konsentrasi bilirubin dalam darah pasien sebagai parameter yang mengukur hemolisis pasca
transfusi akan membantu dalam menentukan apakah reaksi transfusi tertunda telah terjadi.
Sayangnya, parameter ini tidak cukup sering tersedia karena tidak diukur pada interval yang sama
dengan jumlah darah, karena kendala volume pada pasien anemia. Cairan yang diberikan kepada
pasien kami seharusnya tidak memiliki efek pada pengembangan Hct, karena semua pasien
menerima cairan pada atau di bawah tingkat perawatan, kecuali untuk satu pasien dehidrasi parah
yang menerima volume yang lebih tinggi sampai rehidrasi tercapai. Perlu juga dicatat bahwa anemia
regeneratif kuat mungkin telah menyebabkan Hct meningkat lebih dari yang diharapkan dan bahwa
pasien dengan perdarahan berkelanjutan atau hemolisis mungkin telah menunjukkan peningkatan
Hct yang kurang dari yang diharapkan, sedangkan efektivitas transfusi darah dinilai terbaik pada
pasien dengan tidak efektif erythropoiesis. Kumpulan data kecil dari penelitian ini menghalangi
signifikansi statistik; Namun, jumlah kami menunjukkan bahwa peningkatan Hct kurang ditandai
pada pasien dengan MCM positif (Tabel 5), meskipun kami tidak memiliki darah yang tidak sesuai. Ini
adalah hasil yang memerlukan penyelidikan lebih lanjut.

Efek yang mungkin merusak dari beberapa transfusi sel darah merah, karena kemampuan mereka
untuk meningkatkan kemungkinan pembentukan alloantibody, telah dijelaskan untuk manusia.
Dalam penelitian ini, kedua pasien yang menerima lebih dari satu transfusi dan mereka yang
menerima darah lebih dari satu. satu donor juga merupakan mayoritas (3/5) dalam kelompok pasien
dengan MCM positif. Meskipun jumlah kasus kami rendah, hasil seperti itu harus dipertimbangkan
ketika mempertimbangkan manfaat dari beberapa transfusi untuk pasien anemia. Reaksi transfusi
telah dilaporkan terjadi dalam kedokteran hewan meskipun CMs kompatibel. Satu penelitian
melaporkan hal ini untuk pasien kucing dengan terjadinya hemolisis tertunda (n = 2) dan hemolisis
akut (n = 1), 28 dan yang lain menunjukkannya untuk kuda.29 Meskipun demikian, pencocokan
silang tetap satu dari hanya dua pra Metode pengujian transfusi tersedia untuk dokter hewan. Jenis
pencocokan silang yang digunakan dalam kedokteran hewan telah sebagian besar diganti dalam
kedokteran manusia dengan pencocokan silang komputer dan penapisan antibodi yang lebih
sensitif.30 Namun, dalam kedokteran transfusi kucing, tetap merupakan metode yang efektif,
mudah dan relatif ekonomis untuk mendeteksi secara mendalam. ketidakcocokan dalam pengaturan
klinis. Tidak hanya mengatasi ketidakmampuan mengetik darah untuk mendeteksi golongan darah
yang tidak diketahui atau langka seperti yang didefinisikan oleh antigen-Mik, tetapi juga membantu
menemukan pasangan yang cocok untuk pasien yang berisiko membentuk aloantibodi. 15,16, 18
Oleh karena itu, beberapa penulis mengisyaratkan perlunya memperkenalkan crossmatching ke
dalam pengujian pra-transfusi rutin.15,18,31 Keterbatasan penelitian ini terletak pada desain
klinisnya. Menguji kembali hasil kami bukan bagian dari desain penelitian, mengingat bahwa hanya
sampel darah yang tersisa dari pemantauan pasien yang tersedia untuk pencocokan silang. Juga,
pemantauan pasien Hct tidak diikuti sesuai dengan skema yang telah ditentukan dalam penelitian
ini, tetapi lebih pada kebijaksanaan dokter masing-masing pasien; hal yang sama diterapkan pada
keputusan untuk melakukan transfusi. Ini dicontohkan oleh transfusi satu pasien dengan Hct sebesar
23,5%. Pasien ini telah didiagnosis dengan anemia penyakit radang dan oleh karena itu beresiko
memburuk dengan cepat, 32 serta tidak merespon secara memadai terhadap transfusi pertama.