Untuk membuat media TSIA ditimbang bubuk TSI dengan neraca analitik.

Bubuk TSI dimasukkan ke

erlenmeyer lalu dilarutkan dengan aquades. Larutan media dipanaskan dengan menggunkan kompor
listrik dan diaduk hingga larut sempurna. Dicek pH menggunakan pH stick, pH media TSI adalah 7,4.
Media dimasukkan ke tabung reaksi, masing-masing 5 ml dengan menggunakan pipet ukur. Tabung
ditutup dengan kapas berlemak, aluminium foil, dan diikat dengan benang pulung. Larutan media
disterilisasi dengan autoclave. Tabung reaksi diletakkan dalam posisi miring hingga media membeku.
Media siap digunakan.