ABSTRAK

Tujuan: Untuk mengetahui komposisi fitokimia, aktivitas

antioksidan dan antikanker ekstrak daun etanol dan ekstrak
daun Annona muricata (A. muricata) dari Uganda Timur.

Metode: Penapisan fitokimia dilakukan dengan menggunakan

metode kualitatif standar dan uji Chi-square goodness fit
digunakan untuk menentukan kelimpahan relatif fitokimia
yang berbeda. Aktivitas antioksidan ditentukan dengan
menggunakan metode 2, 2-diphenyl2-picrylhydrazyl dan
pengurangan daya sedangkan aktivitas antikanker in vitro
ditentukan dengan menggunakan tiga garis sel yang berbeda.

Hasil: Penapisan fitokimia ekstrak menunjukkan bahwa

mereka kaya akan senyawa metabolit kelas sekunder seperti
alkaloid, saponin, terpenoid, flavonoid, coumarin dan lakton,
antrakuinon, tanin, glikosida jantung, fenol dan fitosterol.
Total fenolat dalam ekstrak air adalah (683,69-0,09) μg / mL
asam lambung setara (GAE) sementara itu (372,92 - 0,15) μg /
mL GAE dalam ekstrak etanol. Daya pereduksinya adalah
216,41 μg / mL dalam ekstrak air dan 470,51 μg / mL GAE pada
ekstrak etanol. Aktivitas antioksidan in vitro IC50 adalah
2,0456 mg / mL dan 0,9077 mg / mL untuk ekstrak daun etanol
dan air A. muricata. Ekstrak daun etanol dilakukan secara
selektif sitotoksik secara in vitro ke sel tumor (EACC, MDA dan
SKBR3) dengan nilai IC50 masing-masing 335,85 μg / mL,
248,77 μg / mL, 202,33 μg / mL, namun tidak memiliki efek
sitotoksik pada sel limpa normal Data juga menunjukkan
bahwa ekstrak daun air A. muricata tidak memiliki efek
antikanker pada semua konsentrasi yang diuji.
1. Pendahuluan
Kanker adalah penyebab utama kematian dan
morbiditas secara global. Menurut perkiraan terbaru
oleh Organisasi Kesehatan Dunia [1,2], kejadian
kanker tahunan di sub-Sahara
Afrika adalah 551 200 dengan mortalitas 421.000
[3,4]. Sekitar 70% dari semua kematian akibat kanker
terjadi di negara berpenghasilan rendah dan
menengah [3,4].
Agen sasaran molekuler saat ini sedang
dipelajari di semua setting pengobatan termasuk
kemoprevention, yang didefinisikan sebagai
penggunaan agen diet alami atau sintetis nonessential
untuk mengganggu proses karsinogenesis dan untuk
mencegah atau menunda pertumbuhan tumor [5,6].
Metode pengobatan yang tersedia meliputi operasi,
kemoterapi, dan radiasi [7]. Metode pengobatan yang
tersedia saat ini menginduksi efek samping yang
signifikan dan oleh karena itu kebutuhan akan terapi
adjuvant alternatif telah muncul [8].
Produk alami sangat menjadi sumber penting
obat-obatan. Meskipun ada beberapa pendekatan
baru untuk penemuan obat, seperti kimia
kombinatorial dan desain pemodelan molekul
berbasis komputer, tidak satupun dari mereka dapat
menggantikan pentingnya produk alami dalam
penemuan dan pengembangan obat [9,10]. Banyak
obat sintetis menyebabkan efek samping yang parah
yang tidak dapat diterima kecuali sebagai pengobatan
resor terakhir untuk penyakit terminal seperti kanker
dan metabolit yang ditemukan di tanaman obat dapat
menghindari efek samping obat sintetis [11].
Antioksidan adalah kelompok zat yang
berguna untuk melawan kanker dan proses lainnya
yang berpotensi menyebabkan penyakit seperti
aterosklerosis, Alzheimer, Parkinson, diabetes, dan
penyakit jantung [11-13]. Antioksidan bertindak
dengan mencegah timbulnya kanker selama
karsinogenesis, dan pada umumnya bermanfaat bagi
sel. Oksidator merusak makromolekul seperti protein,
lipid, enzim, dan DNA dan untuk melawan radikal ini,
organisme hidup menghasilkan enzim atau
bergantung pada molekul non-enzimatik seperti
sistein, asam askorbat, flavonoid, dan vitamin K untuk
perlindungan [12-14].
Tanaman yang digunakan untuk mengobati
penyakit setua peradaban dan obat tradisional masih
merupakan bagian utama dari perawatan kebiasaan
dari penyakit yang berbeda [7,15,16]. Belakangan ini,
obat rakyat telah mengambil tempat yang penting
terutama di negara-negara berkembang dimana
layanan kesehatan terbatas tersedia. Tidak adanya
evaluasi ilmiah tanaman obat untuk memvalidasi
penggunaannya dapat menyebabkan efek samping
yang serius [7]. Annona muricata (A. muricata) banyak
digunakan dalam pengobatan tradisional kanker di
banyak negara. A. muricata yang biasa dikenal dengan
nama Graviola atau sirsak adalah famili Annonaceae
dan merupakan pohon semi deciduous paling tropis
dengan buah terbesar dari genus Annona [17,18]. Ini
didistribusikan secara luas dan asli ke negara-negara
 subSaharan Afrika. Penelitian sebelumnya telah
menunjukkan anti-hiperglikemia, anti-hiperlipidemia,
antimalaria, anti-parasit, antibakteri, insektisida,
moluska, antivirus dan yang terpenting, sifat
antikanker mereka [19-23].
Obat-obatan herbal kuno mungkin memiliki
beberapa keunggulan dibanding bahan kimia murni
yang dimurnikan [24,25]. Seringkali komponen yang
berbeda dalam ramuan memiliki aktivitas sinergis atau
efek toksik buffer. Oleh karena itu penelitian ini
bertujuan untuk mengetahui komposisi fitokimia,
aktivitas anti-oksidan serta menentukan potensi anti-
kanker in vitro ekstrak daun etanol dan air A. muricata
dari Uganda Timur, sebagai obat alternatif dalam
pencegahan dan pengobatan kanker. dan penyakit
terkait stres oksidatif lainnya.

2. Bahan dan metode

2.1. Pengambilan sampel dan otentikasi
Daun segar A. muricata L. dikumpulkan dari
liar di Uganda Timur di distrik Kaliro dan Kota Iganga
(Gambar 1), selama bulan Agustus 2013. Pabrik
(Gambar 2) diidentifikasi dan diautentikasi di Kebun
Botani Botanical Makerere oleh Ibu Olivia Wanyana
Mangeni. Spesimen voucher diendapkan di herbarium
dengan koleksi nomor GY 021- 10 / 13- MB 300-0007 /
12-001.

2.2. Preparasi sampel dan ekstraksi

Daun A. muricata dicuci dengan air dan
dipotong kecil-kecil, pengeringan dilakukan pada suhu
kamar, dan daun keringnya bubuk. Jumlah yang sama
(350 g) daun bubuk diekstraksi menggunakan etanol
dan air suling selama 3 d oleh metode homogenisasi
jaringan tanaman seperti yang telah dijelaskan
sebelumnya [26]. Ekstrak kemudian dipekatkan
dengan menggunakan rotary evaporator dan dry block
heater masing-masing dan disimpan pada suhu -20 ° C
sampai digunakan.

2.3. Bahan kimia, pereaksi dan jalur sel

Semua bahan kimia dan reagen diperoleh dari
pemasok bersertifikat dan merupakan standar analitik
tertinggi. Ehrlich asites sel karsinoma (EACC) telah
diperoleh dari National Cancer Institute, Kairo, Mesir.
Garis sel kanker payudara MDA dan SKBR3 diperoleh
dari Laboratorium Biologi Fisiologi dan Kanker di
Departemen Zoologi Fakultas Sains di Universitas
Kairo.

2.4. Penapisan fitokimia ekstrak

Penapisan fitokimia dilakukan dengan
menggunakan prosedur standar seperti yang telah
dijelaskan sebelumnya. Sampel ekstrak etanol dan air
A. muricata diskrining untuk konstituen phyto berikut:
alkaloid, saponin, terpenoid, flavonoid, coumarin dan
lakton, antrakuinon, tanin, glikosida jantung, fenol dan
fitosterol.

2.5. Penentuan kelimpahan relatif fitokimia

Setelah identifikasi berbagai fitokimia yang
ada di ekstrak daun etanol dan air A. muricata,
kelimpahan relatif fitokimia di masing-masing ekstrak
ditentukan [27]. Hasilnya dianalisis dengan uji Chi fit
square fit antara kelimpahan rendah dan tinggi. Untuk
masing-masing dari sembilan putaran fitokimia, kami
mengalokasikannya sebagai salah satu dari yang tinggi
atau rendah dimana alokasi akhir dari kelimpahan
relatif akan didasarkan. Ho: Konsentrasi fitokimia pada
sampel tidak tinggi atau rendah, sehingga tidak ada
preferensi (rata-rata); H1: Ada perbedaan dalam
konsentrasi fitokimia dalam sampel; α = 0,1, Nilai yang
diharapkan (E) = 4,5, Derajat kebebasan = 1 dan
χ2critical = 2.7055. Semua kondisi uji Chi-kuadrat
dipenuhi, kecuali standar minimum yang diharapkan
sebesar 5, dimana nilai harapan kami adalah 4,5,
karena total kumpulan data untuk setiap uji adalah 9
nilai.

2.6. Penentuan fenolat total

Kandungan fenolik A. muricata ditentukan
[28]. Tepat 20 μL ekstrak diambil dari masing-masing
ekstrak dan ditambahkan ke 1 580 μL air suling. Hal ini
diikuti dengan penambahan 100 μL reagen Folin (1%)
dan dibiarkan selama 2 menit. Kemudian 300 μL
Na2CO3 (7,5%) ditambahkan ke masing-masing
sampel, dicampur secara menyeluruh dan dibiarkan
selama 2 jam pada suhu 20 ° C. Semua hasil dinyatakan
sebagai gallic menggunakan kurva standar asam galat
dan persamaan linier digunakan untuk menghitung
fenol total ekstrak.
2.7. Penentuan daya reduksi
Daya pereduksi ekstrak daun etanol dan air A.
muricata ditentukan [29]. Asam gali digunakan sebagai
standar. Volume 200 μL masing-masing sampel per
ekstrak serta standar pada konsentrasi yang berbeda
diambil secara terpisah dan dicampur dengan 500 μL
buffer fosfat 0,2 mol / L (pH 6,6) dan 500 μL kalium
ferricyanide. Sampel kemudian diinkubasi pada suhu
50 ° C selama 20 menit. Kemudian 500 μL asam
trikloroasetat 10% ditambahkan dan disentrifugasi
pada 6 500 r / menit selama 16 menit. Sekitar 700 μL
supernatan ditambahkan ke 700 μL air suling, 140 μL
klorida klorida yang baru disiapkan, dan dibiarkan
selama 10 menit. Akhirnya, absorbansi diukur pada
700 nm. Kurva standar untuk asam galat dihasilkan
dan persamaan linier digunakan untuk menghitung
daya reduksi ekstrak.

2.8. Kuantifikasi aktivitas antioksidan menggunakan

metode 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH).
Aktivitas pembilasan radikal bebas (RSA)
didahului. Konsentrasi ekstrak yang berbeda-beda (0,
250, 500, 750, 1 000, dan 1 250 μg / mL) digunakan.
Volume 2,5 mL larutan DPPH 0,04% dicampur dengan
0,5 mL semua konsentrasi kedua ekstrak secara
terpisah. Setelah inkubasi 30 menit pada suhu kamar
dalam kegelapan, absorbansi dibaca pada 517 nm
dalam rangkap tiga untuk setiap konsentrasi [30].
Butylated hydroxytoluene (BHT) dan butylated
hydroxylanisole (BHA) digunakan sebagai kontrol
positif. Penghambatan persen pembentukan radikal
bebas dihitung sebagai berikut: RSA (%) = [(Acontrol -
Asample) / (Acontrol)] x100.

2.9. Fraksinasi KLT ekstrak daun etanol dari A.

Muricata.
Ekstrak daun etanol daun A. muricata
difraksinasi menggunakan teknik kromatografi lapis
tipis (KLT). Ekstraknya diaplikasikan pada lembaran
aluminium TLC silika gel 60 F254 (20 伊 20) (Merck,
Darmstadt, Jerman) pada salah satu ekstrem untuk
memisahkan fraksi yang berbeda. Fase bergerak
adalah petroleum eter: etil asetat: asam asetat glasial
(4: 1: 1). Sebelas fraksi digores dan dinamakan sebagai
EEAM1b-EEAM11. Semua fraksi diuji untuk aktivitas
anti-oksidan, mengurangi aktivitas anti-kanker dan
kekuatan.

2.10. Aktivitas anti-kanker in vitro dari ekstrak pada sel

tumor EACC.
Media kultur dibuat menggunakan media
RPMI1640 (Gibco, Grand Island, USA), 10% serum
bovine janin yang tidak aktif (Gibco), dan 100 unit / mL
penisilin dan 100 mg / mL streptomisin ditambahkan.
Serangkaian karsinoma ascites Ehrlich telah
digunakan. Sekitar 2 mL media yang mengandung
EACC (sel 2x104) dipindahkan ke dalam satu set
tabung masing-masing, kemudian konsentrasi yang
berbeda dari ekstrak air dan etanol (0, 250, 500, 750,
1 000, dan 1 250 μg / mL) adalah menambahkan.
Tabung diinkubasi pada suhu 37 ° C dengan adanya
CO2 5% (v / v) selama 2 jam [31]. Untuk setiap bahan
yang diperiksa (dan kontrol), tabung uji kecil kering
kering yang baru digunakan dan suspensi sel 10 μL,
garam 80 μL dan pasta trypan blue 10 (60%)
ditambahkan dan dicampur. Kemudian jumlah sel
hidup (non-ternoda) dihitung dengan menggunakan
slide hemocytometer dengan mikroskop (Nikon, TMS).
Konsentrasi ekstrak yang memberikan penghambatan
50% (IC50) dihitung dari grafik yang merencanakan
persentase inhibisi terhadap logaritma konsentrasi
setelah mengubah konsentrasinya.

2.11. MTT untuk sel kanker payudara MDA dan SKBR3

Media kultur disiapkan dengan menggunakan
garam Earle yang dimodifikasi dengan 1,2 g / L sodium
carbonate dan L-glutamine (Gibco, Grand Island, USA),
10% serum bovine janin yang tidak aktif (Gibco), dan
100 unit / mL penisilin dan 100 mg / mL streptomisin
ditambahkan. Efek antikanker dari ekstrak daun etanol
di jalur MDA dan SKBR3 ditentukan oleh uji MTT [32].
Jumlah sel disesuaikan dengan 1 伊 105 sel / 0,1 mL
dan dilapisi 100 μL medium / baik pada 96 sumur
piring (Costar Corning, Rochester, NY). Sel kemudian
diinkubasi dengan adanya berbagai konsentrasi
ekstrak etanol selama 72 jam pada 37 ° C dalam
tripolisat per konsentrasi (750, 500, 250, dan 0 μg /
mL). Larutan sampel kemudian dikeluarkan dan dicuci
dengan larutan penyangga fosfat (pH 7,4). Volume 20
μL / sumur 3- (4,5-dimetil-2-tiazolil) -2,5-diphenyl-
tetrazolium bromida (MTT 0,5%) ditambahkan.
Sampel kemudian diinkubasi selama 4 jam. Jumlah
formazan ditentukan dengan mengukur absorbansi
pada 570 nm menggunakan pembaca pelat ELISA
(pembaca piring mikro universal ELx800, Biotech,
USA). Konsentrasi yang dibutuhkan untuk konsentrasi
inhibisi (IC50) ditentukan secara grafis. % Kematian sel
dihitung dengan menggunakan rumus berikut:%
Kematian sel = (OD Kontrol - OD Sampel) / Kontrol
ODx100.

2.12. Efek sitotoksisitas daun etanol daun A. muricata

pada sel limpa normal
Sel limpa diisolasi dari tikus sehat normal [33].
Limpa sel viabilitas setelah dan sebelum inkubasi
dengan konsentrasi etanol yang berbeda pada suhu 37
° C dengan adanya 5% (v / v) CO2 selama 2 jam
dihitung dengan teknik trypan blue [31]. Semua
konsentrasi diuji dalam rangkap tiga.

2.13. Analisis data

Data kuantitatif dan grafis dianalisis dengan
menggunakan Paket Microsoft Excel. Hasil setiap
rangkaian eksperimen (dilakukan dalam rangkap tiga)
dinyatakan sebagai standar deviasi rata-rata. Data
kualitatif untuk analisis fitokimia dianalisis dengan
menggunakan uji χ2 goodness of fit.
3. Hasil

3.1. Analisis fitokimia ekstrak daun etanol dan air A.

Muricata.
Semua fitokimia yang diuji ada pada kedua
jenis ekstrak daun A. muricata. Kesesuaian χ2 fit test
telah digunakan untuk mengalokasikan kelimpahan
relatif masing-masing fitokimia. Fitokimia dengan nilai
χ2 dihitung (daerah biru) lebih tinggi dari pada χ2kritis
(daerah merah) yang ditetapkan tinggi atau rendah,
bergantung pada jumlah awal sedangkan yang
memiliki nilai χ2 kurang dari χ2kritis diberi kelimpahan
rata-rata seperti ditunjukkan pada Gambar 3 dan 4 di
bawah.

3.2. Senyawa fenolik total (y = 0,0026x + 0,0044)

Jumlah fenolat dalam ekstrak air dihitung
menjadi (683.69 + -0,09) μg / mL asam lambung setara
(GAE) sementara itu (372,92 + -0,15) μg / mL GAE
dalam ekstrak etanol. Nilai ini menunjukkan tingkat
fenolat yang lebih tinggi dalam ekstrak air
dibandingkan dengan ekstrak etanol. Hasil ini
memberikan indikasi tentang efek potensial dari peran
yang dimainkan oleh senyawa fenolik dalam aktivitas
tanaman ini dengan harapan efek yang lebih tinggi
pada ekstrak air dibandingkan dengan ekstrak etanol.

3.3. Mengurangi kekuatan ekstrak dan fraksi (y =

0,0039x)
Kekuatan reduksi ekstrak daun etanol dan air
A. muricata ditentukan oleh hubungan asam gallic dari
kurva standar dengan persamaan linier y = 0,0039x .
Daya pereduksinya adalah 216,41 μg / mL dalam
ekstrak air dan 470,51 μg / mL GAE pada ekstrak
etanol. Jelas bahwa ekstrak air memiliki daya
pereduksi yang lebih tinggi daripada ekstrak etanol.
Demikian pula, kekuatan reduksi fraksi KLT dari
ekstrak daun etanol dibuat seperti di atas. Hasil yang
dinyatakan sebagai μg / mL GAE dicatat sebagai
berikut: EEAM1b (15.77), EEAM2 (1.54), EEAM3 (8.72),
EEAM4 (37.69), EEAM5 (0.77), EEAM6 (3.33), EEAM7
(7.44), EEAM8 5.77), EEAM9 (9.36), EEAM10 (4.36)
dan EEAM11 (0.00). Terbukti bahwa fraksi KLT EEAM4
memiliki daya reduksi tertinggi sedangkan fraksi
EEAM11 tidak melakukan aktivitas penurunan daya.
Meskipun beberapa fraksi memiliki daya reduksi lebih
dari 15 μg / ml GAE, kebanyakan dari mereka
mencatat nilai yang sangat rendah yaitu kurang dari 10
μg / mL GAE.

3.4. Kuantifikasi aktivitas antioksidan dengan

menggunakan metode DPPH
Gambar 5 menunjukkan penurunan
konsentrasi radikal DPPH karena kemampuan
pembilasan konstituen terlarut dalam ekstrak daun
etanol dan air A. muricata. Ada hubungan positif
langsung antara aktivitas antioksidan dan peningkatan
konsentrasi ekstrak. Hubungan ini lebih terasa pada
ekstrak air dibandingkan ekstrak etanol. Akhirnya ada
Yahaya Gavamukulya et al./Asian Pac J Trop Med
2014; 7 (Suppl 1): S355-S363 S359 merupakan daya
antioksidan yang lebih tinggi yang terdaftar pada
ekstrak air dibandingkan dengan ekstrak etanol yang
ditunjukkan oleh nilai IC50 yang dihitung masing-
masing 0,9077 mg / mL dan 2,0456 mg / mL.
Aktivitas antioksidan masing-masing dari 11
fraksi yang diisolasi dari ekstrak daun etanol daun A.
muricata dengan teknik TLC juga ditentukan. Aktivitas
tertinggi dicatat pada fraksi EEAM8 dan aktivitas
terendah dicatat dengan fraksi EEAM2. Persentase
pemulungan radikal pada DPPH masing-masing fraksi
adalah sebagai berikut: kontrol negatif (0%), EEAM1b
(3,95%), EEAM2 (1,09%), EEAM3 (1,91%), EEAM4
(7,28%), EEAM5 (30,34 % EEAM6 (9,52%), EEAM7
(5,2%), EEAM8 (31,16%), EEAM9 (28,98%), EEAM10
(29,52%) dan EEAM11 (15,85%). Hasilnya
menunjukkan aktivitas antioksidan yang relatif rendah
yang dicatat oleh sebagian besar fraksi.

3.5. Aktivitas anti-kanker in vitro ekstrak daun A.

Muricata.
Trypan blue-exclusion assay (TBEA) digunakan
untuk evaluasi aktivitas antikanker ekstrak daun
etanol dan air A. muricata terhadap EACC, dan untuk
sitotoksisitas terhadap sel limpa normal. Sedangkan
uji MTT digunakan untuk evaluasi aktivitas antikanker
ekstrak daun etanol daun A. muricata terhadap dua
garis sel kanker payudara MDA dan SKBR3.
Gambar 6 menunjukkan aktivitas antikanker
ekstrak etanol dan ekstrak daun A. muricata pada
EACC. Aktivitas antikanker minimum yang dapat
dideteksi pada sel EACC diamati pada ekstrak daun
etanol dari A. muricata pada konsentrasi 250 μg / mL,
dengan penghambatan kematian sel 32,9%, dan
mencapai penghambatan maksimum kematian sel
100% pada konsentrasi 750 μg / mL. Ekstrak etanol
dari IC50 ditentukan menjadi 335,85 μg / mL. Di sisi
lain, bagaimanapun, ekstrak daun air A. muricata tidak
berpengaruh pada semua konsentrasi yang diuji.
Gambar 7 menunjukkan aktivitas antikanker
ekstrak etanol dan ekstrak daun A. muricata pada
garis sel MDA sedangkan Gambar 8 menunjukkan
aktivitas antikanker ekstrak daun etanol dari A.
muricata pada garis sel SKBR3. Ada peningkatan
persentase kematian sel secara umum dengan
peningkatan konsentrasi ekstrak etanol. Efek ekstrak
etanol pada dua garis sel kanker payudara manusia
MDA dan SKBR3 diuji pada konsentrasi berkisar antara
250 sampai 750 μg / mL selama 72 jam, dan%
kematian sel diukur dengan uji MTT. Hasilnya
menunjukkan penghambatan dosis bergantung kuat
pada sel yang dirawat. Ekstrak daun etanol kemudian
ditemukan sangat sitotoksik secara in vitro terhadap
dua garis sel kanker payudara manusia MDA dan
SKBR3 (Gambar 7 dan 8) dengan IC50 masing-masing
248,77 μg / mL dan 202,33 μg / mL.
Gambar 9 di bawah ini menunjukkan hasil uji
sitotoksisitas untuk aktivitas ekstrak daun etanol daun
A. muricata pada sel limpa normal dengan
menggunakan TBEA. Tidak ada efek sitotoksisitas yang
terdaftar di seluruh rentang konsentrasi yang
digunakan, menyiratkan bahwa ekstrak tersebut tidak
berpengaruh pada sel normal, dan indikasi selektivitas
tinggi untuk sel target.
 Aktivitas antikanker daun etanol daun TLC
fraksi A. muricata ditentukan. Tiga fraksi EEAM1b,
EEAM2, dan EEAM4 tidak menunjukkan aktivitas.
Fraksi yang tersisa memiliki beberapa aktivitas
antikanker dan empat fraksi menunjukkan lebih dari
50% kematian sel. Kematian sel persentase yang
terdaftar oleh fraksi yang berbeda adalah sebagai
berikut: kontrol negatif (0%), EEAM1b (0%), EEAM2
(0%), EEAM3 (8,5%), EEAM4 (0%), EEAM5 (10%),
EEAM6 (40,2%), EEAM7 (5%), EEAM8 (53,75%),
EEAM9 (76%), EEAM10 (84,5%) dan EEAM11 (64%).
Hasilnya menunjukkan bahwa efek bersih ekstrak
hanya akan disumbangkan oleh beberapa fraksi dalam
ekstrak seperti yang diungkapkan di atas. Sumbangan
ini akan menjadi sinergis atau penghambatan yang
mempengaruhi efek akhir yang didaftarkan oleh
keseluruhan ekstrak secara keseluruhan.
Gambar 10 di bawah menunjukkan
perbandingan antara aktivitas antioksidan
(pengurangan daya dan% RSA) dan aktivitas sitotoksik
(% kematian sel) daun etanol menghasilkan fraksi KLL
A. muricata. Ini menunjukkan kecenderungan umum
dalam hubungan antara dua aspek studi di mana
semua fraksi yang menunjukkan aktivitas antikanker
tinggi memiliki aktivitas antioksidan tinggi (yang
diukur dengan kekuatan reduksi dan uji pemulungan
radikal DPPH), sedangkan kecenderungan sebaliknya
tidak.
4. Diskusi
Skrining fitokimia yang dilakukan pada ekstrak
daun A. muricata menunjukkan adanya kelas senyawa
berikut: alkaloid, flavonoid, terpenoid, koumarin dan
lakton, antrakuinon, tanin, glikosida jantung, fenol,
fitosterol, dan saponin. Mereka hadir di ekstrak daun
etanol dan daun air, namun dengan perbedaan
mencolok dalam kelimpahan relatif mulai dari yang
rendah, rata-rata dan tinggi. Hasil ini sesuai dengan
penelitian sebelumnya yang dilakukan terhadap
ekstrak biji etanol dari A. muricata, dan uji fitokimia
menunjukkan bahwa ekstrak biji sirsak etanol
mengandung senyawa metabolit sekunder: saponin,
alkaloid dan triterpenoid, flavonoid, antrakuinon,
tanin, dan jantung. glikosida Mereka adalah senyawa
kimia pertahanan tanaman yang diproduksi di jaringan
tanaman [17,34].
Ekstraknya ditemukan kaya akan alkaloid yang
memiliki efek farmakologis luas dan karenanya telah
digunakan secara luas sebagai obat-obatan di bidang
medis. Deteksi kadar alkaloid tinggi pada ekstrak daun
A. muricata selanjutnya memperkuat adanya alkaloid
pada spesies ini sebagaimana telah diuraikan oleh
penelitian independen lainnya yang menunjukkan
bahwa di antara unsur kimia yang ditemukan
di A. muricata, alkaloid dan minyak esensial menonjol
[8]. Glikosida jantung adalah molekul yang digunakan
dalam pengobatan gagal jantung [35], maka temuan
ini sesuai untuk digunakan dalam pengobatan
penyakit jantung.
 Umumnya, adanya alkaloid, flavonoid,
terpenoid, coumarin dan lakton, antrakuinon, tanin,
glikosida jantung, fenol, fitosterol, dan saponin
menegaskan bahwa ekstrak daun A. muricata
mengandung molekul yang dikenal luas untuk
digunakan di bidang medis baik secara tradisional
maupun farmasi. Ini akan menjadi indikasi untuk
penggunaan potensinya dalam aktivitas anti-inflamasi,
anti-alergi, antibakteri, dan antivirus, gagal jantung,
antioksidan dan antikanker. Temuan ini menekankan
nilai pengetahuan tradisional dalam penggunaan
tanaman untuk penggunaan obat serta perkembangan
farmasi. Penggunaan A. muricata dalam pengobatan
tradisional divalidasi dengan adanya phytochemical ini
yang diketahui manfaat kesehatannya dan dengan
demikian penelitian lebih lanjut mengenai spesies ini
diperlukan.
Kandungan fenolik dari A. muricata
ditentukan dan semua hasilnya dinyatakan sebagai
GAE. Fenolat khas yang memiliki aktivitas antioksidan
telah ditandai sebagai asam fenolik dan flavonoid
[36,37]. Fenol adalah salah satu senyawa non-
enzimatik yang diperoleh dari sumber alami, yang
mendapat perhatian tinggi karena kemampuan
antioksidannya yang terbukti. Meskipun senyawa
fenolik telah dikaitkan dengan aktivitas antioksidan,
beberapa penelitian telah menekankan kelas tertentu
seperti flavonoid dan tanin [12]. Hasil kami
menunjukkan bahwa ekstrak daun air memiliki
kandungan fenolik total lebih tinggi dibandingkan
ekstrak daun etanol dari A. muricata. Kandungan
fenolik yang lebih tinggi dalam ekstrak air sebagian
akan berkontribusi pada aktivitas antioksidannya yang
lebih tinggi.
Beberapa metode telah dikembangkan untuk
mengukur efisiensi antioksidan sebagai senyawa
murni atau dalam ekstrak. Metode ini berfokus pada
mekanisme yang berbeda dari sistem pertahanan
oksidan yang mengais spesies oksigen aktif dan radikal
hidroksil, menghambat peroksidasi lipid, atau ion
logam pengkelat [29]. Kapasitas reduksi senyawa
dapat menjadi indikator penting aktivitas antioksidan
potensial. Ditemukan bahwa secara umum, daya
dorong ekstrak daun air lebih tinggi daripada ekstrak
daun etanol, memberikan indikasi aktivitas
antioksidan potensial yang lebih tinggi dari ekstrak.
11 fraksi memiliki daya reduksi sangat rendah
masing-masing kurang dari 50 μg / mL GAE. Ini dapat
diterjemahkan ke dalam pengamatan bahwa mungkin
kekuatan reduksi akhir dari ekstrak tersebut adalah
sebagai hasil dari efek gabungan dari masing-masing
senyawa dalam fraksi.
RSA bebas dari ekstrak daun ditentukan. Data
menunjukkan bahwa ekstrak daun air A. muricata
memiliki penghambatan radikal bebas yang lebih
tinggi dengan IC50 0,9077 mg / mL dibandingkan
dengan ekstrak daun etanol dengan IC50 2,0456 mg /
mL. Antioksidan standar BHA dan BHT digunakan
sebagai kontrol positif. Ini RSA gratis dari ekstrak daun
jauh lebih rendah daripada kontrol positif standar,
menyiratkan bahwa ekstrak, pada konsentrasi yang
sama mungkin tidak kompetitif antioksidan kuat.
Bagaimanapun, kemungkinan aktivitas antioksidan
daun ekstrak A. muricata mungkin sama kuatnya
dengan standar BHA dan BHT, mengingat sampel yang
diuji dalam penelitian ini adalah ekstrak kasar,
sedangkan kontrol standar biasanya merupakan
senyawa yang sangat murni.
Hal ini tidak mengherankan bahwa ekstrak
daun air A. muricata memiliki aktivitas antioksidan
yang lebih kuat dibandingkan dengan ekstrak daun
etanol. Ini mengungkapkan bahwa total fenolat dua
kali lipat lebih tinggi pada ekstrak daun air daripada
ekstrak daun etanol, dan fenolat telah lama dikaitkan
dengan aktivitas antioksidan. Demikian pula, ekstrak
daun air telah mengurangi daya hampir dua kali lebih
tinggi dari pada ekstrak daun etanol. Namun secara
umum, aktivitas antioksidan yang relatif kuat
membuat pabrik ini efisien dalam mengelola penyakit
terkait stres oksidatif; Ini bisa menjadi alasan mengapa
obat tradisional digunakan untuk mengelola penyakit
di mana sebagian besar ekstrak air.
Penelitian sebelumnya menunjukkan aktivitas
antioksidan ekstrak kulit metanol dari A. muricata
dengan IC50 (0.22150 依 0,01652) mg / mL, yang jauh
lebih tinggi dari penelitian kita saat ini [12]. Juga dalam
penelitian lain, ekstrak kulit batang etanol dari A.
muricata mencatat nilai IC50 sebagai 0,109 mg / mL
[38]. Perbedaan daya antioksidan dalam hasil yang
dicatat dapat dikaitkan dengan fakta bahwa bagian
tanaman yang berbeda digunakan dalam penelitian
saat ini dan penelitian sebelumnya terkait dengan
perbedaan lokasi geografis, karena kedua penelitian
dilakukan di wilayah yang berbeda. Hasilnya
bagaimanapun setuju dengan Mishra et al. yang
mencatat bahwa ekstrak daun A. muricata memiliki
sifat antioksidan dan moluskisida [8].
Fraksi ekstrak etanolat menunjukkan daya
reduksi relatif rendah kurang dari 50% penghambatan
bahkan pada fraksi yang menunjukkan aktivitas
tertinggi. Hal ini menunjukkan bahwa kemungkinan
aktivitas antioksidan secara keseluruhan dari ekstrak
tersebut adalah sebagai hasil dari kombinasi sinergis
dari aktivitas semua senyawa dalam fraksi, terutama
fraksi EEAM5, EEAM8, EEAM9, EEAM10, dan EEAM11,
yang mencatat aktivitas lebih tinggi dari 15 %.
Hasil ini memberikan kemungkinan
keunggulan terhadap studi lebih lanjut dan
pengembangan produk farmasi dengan sifat
antioksidan dengan menargetkan fraksi yang
menunjukkan aktivitas tertinggi. Hasil penelitian
antikanker menunjukkan bahwa ekstrak daun etanol
memiliki aktivitas antikanker yang sangat tinggi pada
tiga garis sel EACC, MDA dan SKBR3 dengan nilai IC50
yang rendah dan sangat dekat satu sama lain, terlepas
dari perbedaan metode yang digunakan dan
sumbernya. dari sel.
Bagian terpadu dari pengembangan sel kanker
adalah resistensi terhadap kematian sel terprogram
(apoptosis) dan oleh karena itu pembentukan kembali
apoptosis pada sel kanker adalah mekanisme target
untuk agen antikanker [39]. Beberapa produk
plantderived diketahui secara selektif menginduksi
apoptosis
di sel kanker, yang mewakili properti ideal untuk agen
antikanker yang berhasil [7,39]. Studi saat ini
menunjukkan tindakan yang sangat efektif dari ekstrak
daun etanol daun A. muricata dan dapat digunakan
dalam pengelolaan dan pengobatan kanker. Hal ini
sejalan dengan penelitian yang menunjukkan bahwa
setiap ekstrak memiliki aktivitas antikanker dan
sitotoksik jika memiliki nilai IC50 kurang dari 1 000 μg
/ mL setelah 24 jam waktu kontak, dan semakin kecil
nilai IC50 senyawa uji, semakin banyak beracun
senyawa itu [40].
Hasil uji sitotoksisitas pada sel limpa normal
dari ekstrak daun etanol dari A. muricata
menunjukkan selektivitas ekstrak yang sangat tinggi
untuk sel kanker, karena tidak menunjukkan efek pada
sel limpa normal sepanjang rentang konsentrasi yang
diuji. Laju sel limpa 100% diamati pada semua
konsentrasi yang diuji. Selektivitas ekstrak yang tinggi
untuk sel kanker adalah aspek yang sangat penting
untuk penggunaannya dalam pengobatan kanker
karena sel normal tidak akan menjadi sasaran.
Studi saat ini mengkonfirmasikan penelitian
sebelumnya yang menunjukkan bahwa ekstrak A.
muricata telah dilaporkan secara selektif beracun
secara in vitro pada beberapa jenis sel tumor
termasuk: garis sel karsinoma paru, garis tumor
payudara padat manusia, adenokarsinoma prostat, sel
pankreas karsinoma, garis sel adenokarsinoma usus
besar, garis sel adenokarsinoma mammae, sel kanker
hati, garis sel limfoma manusia dan adenokarsinoma
payudara manusia yang resistan terhadap obat [20].
Penelitian terdahulu lainnya juga menunjukkan bahwa
racun tersebut bersifat selektif terhadap berbagai
jenis sel kanker tanpa membahayakan sel sehat
[23,41,42].
Ekstrak air namun tidak menunjukkan efek
selama rentang konsentrasi yang diuji. Ini kurang
menarik aktivitas antikanker dari ekstrak daun air
meskipun memiliki aktivitas antioksidan tinggi dan
mengurangi daya dibandingkan dengan ekstrak etanol
dapat menghasilkan sejumlah teori yang berkaitan
dengan mekanisme tindakan agen antikanker di
tanaman ini yang mungkin berbeda dari Gagasan
umum umum bahwa aktivitas antikanker
berhubungan langsung dengan aktivitas antioksidan.
Hasil kami sesuai dengan penelitian pendahuluan
sebelumnya yang menunjukkan hubungan yang baik
antara khasiat antioksidan ekstrak tanaman dan
potensi antikanker. Semua ekstrak yang memberi
potensi antikanker tinggi memiliki aktivitas
antioksidan tinggi sedangkan kecenderungan
sebaliknya tidak [13].
Dalam kasus ini, kami mengusulkan bahwa
agen antikanker yang hadir dalam ekstrak daun
ethanolik mungkin bertindak dalam mekanisme yang
sangat berbeda dari mekanisme antioksidan.
Senyawa-senyawa yang terkait dengan aktivitas
antikanker ini juga tidak ada dalam ekstrak air dan
tidak mudah dideteksi dengan metode penyaringan
fitokimia yang umum. Penelitian sebelumnya
menunjukkan bahwa A. muricata mengandung banyak
senyawa aktif dan bahan kimia yang merupakan
phytochemicals alami yang dikenal sebagai aseton
annonaceae [22,43], namun tidak ada metode yang
tersedia untuk mengidentifikasi mereka. Beberapa di
antaranya mungkin ada dalam jumlah sangat tinggi
dalam ekstrak etanol, namun tidak ada dalam ekstrak
air, yang menyebabkan perbedaan aktivitas
antikanker. Namun, penelitian lebih lanjut perlu
dilakukan untuk menjelaskan penyebab utama
perbedaan ini.
Aktivitas antikanker dari ekstrak daun etanol
menghasilkan fraksi yang menunjukkan aktivitas
tunggal tertinggi yang disebabkan oleh fraksi EEAM10
pada tingkat sitotoksik lebih dari 80% kematian sel.
Umumnya, empat fraksi menunjukkan aktivitas
antikanker yang sangat baik dengan tingkat sitotoksik
lebih dari 50% kematian sel, dan fraksi ini adalah
EEAM8, EEAM9, EEAM10 dan EEAM11. Fraksi ini
mungkin bertanggung jawab atas aktivitas antikanker
ekstrak etanol yang tertinggi. Senyawa ini mungkin
tidak ada dalam ekstrak air, yang menentukan bahwa
fraksi berada dalam medium polaritas (sifat fase
gerak). Hasil yang menggembirakan yang diperoleh
dari penelitian ini mengenai aktivitas antikanker
ekstrak daun etanol dari A. muricata dan isolasi fraksi
yang paling aktif merupakan langkah penting menuju
pemurnian efektif, karakterisasi prinsip aktif dalam
ekstrak ini dan untuk memahami mekanisme
sitotoksisitas dari ekstrak ini Studi ini menunjukkan A.
muricata adalah antioksidan dan antikanker baru yang
menjanjikan.
 Aktivitas antioksidan in vitro ekstrak daun
etanol dan air daun A. muricata menunjukkan aktivitas
antioksidan yang signifikan dalam ekstrak air dan
dengan demikian potensi penggunaannya dalam
penanganan penyakit terkait oksidatif. Studi kami juga
telah membuktikan bahwa ekstrak daun etanol dari A.
muricata memiliki aksi penghambatan potensial
langsung pada tiga garis sel (EACC, MDA dan SKBR3).
Oleh karena itu, diantisipasi bahwa A.
muricata akan menjadi bahan farmasi yang berguna
untuk mengobati kanker payudara. Empat fraksi KLT
memiliki aktivitas antikanker lebih dari 50%. Ada juga
harapan bahwa tanaman ini sama-sama bersifat
sitotoksik pada jenis kanker lainnya, namun studi lebih
lanjut harus diperluas untuk jalur sel lainnya dan
tingkat molekul diperlukan untuk mengidentifikasi
mekanisme spesifik yang dapat menyebabkan
penghambatan pertumbuhan. Hasil kami juga
menunjukkan bahwa pencantuman ekstrak
antioksidan dan antikanker-kaya atau fraksinya A.
muricata sebagai suplemen makanan memiliki efek
menguntungkan bagi kesehatan manusia. Data dari
pekerjaan saat ini tampak berguna untuk penelitian
lebih lanjut yang bertujuan untuk secara kimia
mengidentifikasi senyawa spesifik yang bertanggung
jawab untuk aktivitas antioksidan dan antikanker A.
muricata.

Konflik penting dari pernyataan.

Kami tidak memiliki konflik penting terhadap
pertanyaan.
Ucapan Terimakasih
Karya ini merupakan bagian dari tesis MSc Y
Gavamukulya dalam Biologi Molekuler dan Bioteknologi
yang didukung oleh Komisi Uni Afrika melalui Universitas
Pan Afrika. Oleh karena itu, penulis berharap untuk
berterima kasih kepada Pan African University dan Komisi
Uni Afrika untuk beasiswa pascasarjana kepada Y
Gavamukulya yang memungkinkan pekerjaan ini
dilakukan melalui dana penelitian siswa pada 2013/2014.
Kami juga berterima kasih kepada Pemerintah Kenya,
Universitas Pertanian dan Teknologi Jomo Kenyatta
(JKUAT) serta Universitas Kairo untuk menjadi tuan rumah
Institut ini, dan sebagian mendanai penelitian ini. Kami
juga berterima kasih kepada Prof. Ahmad Aboul-Enein,
Prof Mona Mostafa Mohamed dan Dr Sharif Ibrahim atas
saran profesional mereka dan juga tim di Universitas Kairo
Research Park, JKUAT, dan Unit Botani Universitas
Makerere.
Daftar Pustaka
[1] World Health Organization. GLOBOCAN 2008: cancer
incidence and mortality worldwide. Geneva: World Health
Organization; 2010. [Online] Available from:
http://www.iarc.fr/en/media-centre/
iarcnews/2010/globocan2008.php [Accessed on 10th
September, 2014]
[2] Atawodi SE. Nigerian foodstuffs with prostate cancer
chemopreventive polyphenols. Infect Agent Cancer 2011;
6(Suppl 2): S9.
[3] Ferlay J, Shin HR, Bray F, Forman D, Mathers C, Parkin DM.
GLOBOCAN 2008 v1.2: Cancer incidence and mortality
worldwide: IARC CancerBase No. 10. Lyon: IARC Press; 2010.
[4] Latosińska JN, Latosińska M. Anticancer drug discovery—
from serendipity to rational design. In: El-Shemy HA, editor.
Drug discovery. Poland: InTech; 2013, p. 35-74.
[5] Shukla Y, Pal SK. Dietary cancer chemoprevention: an
overview. Int J Hum Genet 2004; 4: 265-276.
[6] Alagammal M, Paulpriya K, Mohan VR. Anticancer activity
of ethanol extract of Polygala javana DC whole plant against
Dalton ascites lymphoma. Res J Recent Sci 2013; 2(2): 18-22.
[7] Wamidh HT. Anticancer and antimicrobial potential of
plantderived natural products. In: Rasooli I, editor.
Phytochemicals - bioactivities and impact on health. Croatia:
InTech; 2011.
[8] Mishra S, Ahmad S, Kumar N, Sharma BK. Annona
muricata (the cancer killer): a review. Global J Pharm Res 2013;
2(1): 1613-1618.
[9] Heinrich M, Bremner P. Ethanobotany and
ethanopharmacy-their role for anticancer drug development.
Curr Drug Targets 2006; 7: 239-245.
[10] Thirumal M, Kishore G, Prithika R, Das S, Nithya G. In vitro
anticancer activity of Tecoma stans (L) ethanolic leaf extract on
human breast cancer cell line (MCF-7). Int J Pharm Chem Biol
Sci 2012; 2(4): 488-493.
[11] Valko M, Leibfritz D, Moncol J, Cronin MT, Mazur M,
Telser J. Free radicals and antioxidants in normal physiological
functions and human disease. Int J Biochem Cell Biol 2007; 39:
44-84.
[12] Gomes de Melo J, de Sousa Araújo TA, Thijan Nobre de
Almeida e Castro V, Lyra de Vasconcelos Cabral D, do Desterro
Rodrigues M, Carneiro do Nascimento S, et al. Antiproliferative
activity, antioxidant capacity and tannin content in plants of
semi-arid Northeastern Brazil. Molecules 2010; 15: 8534-8542.
[13] Aboul-Enein AM, Abu-Elalla F, Shalaby EA, El-Shemy HA.
Traditional medicinal plants research in Egypt: studies of
antioxidant and anticancer activities. J Med Plants Res 2012;
6(5): 689-703.
[14] Sies H. Strategies of antioxidant defense. Eur J Biochem
1993; 215: 213-219.
[15] Fabricant DS, Farnsworth NR. The value of plants used in
traditional medicine for drug discovery. Environ Health
Perspect 2001; 109: 69-75.
[16] Alviano DS, Alviano CS. Plant extracts: search for new
alternative to treat microbial diseases. Curr Pharm Biotechnol
2009; 10: 106121.
[17] Ukwubile CA. Phytochemical screening and anti-ovarian
cancer properties of Annona muricata Linn (Annonaceae) seed
ethanol extract. Int J Pharm Front Res 2012; 2: 9-17.
[18] Alawode TT. An overview of the anti-cancer properties of
some plants used in traditional medicine in Nigeria. Int Res J
Biochem Bioinf 2013; 3(1): 7-14.
[19] Khan MR, Kornine K, Omoloso AD. Antibacterial activity
of some Annonaceae. Part I. Fitoterapia 1998; 69(4): 367-369.
[20] Ezirim AU, Okochi VI, James AB, Adebeshi OA, Ogunnowo
S, Odeghe OB. Induction of apoptosis in myelogenous
leukemic k562 cells by ethanolic leaves extract of Annona
muricata L. Global J Res Med Plants Indigen Med 2013; 2(3):
142-151.
[21] Antoun MD, Gerena L, Milhous WK. Screening of the flora
of Puerto Rico for potential antimalarial bioactives. Int J
Pharmacogn 1999; 31(4): 255-258.
[22] Alali FQ, Liu XX, McLaughlin JL. Annonaceous acetogenins:
recent progress. J Nat Prod 1999; 62(3): 504-540.
[23] Hamizah S, Roslida AH, Fezah O, Tan KL, Tor YS, Tan CI.
Chemopreventive potential of Annona muricata L leaves on
chemically-induced skin papillomagenesis in mice. Asian Pac J
Cancer Prev 2012; 13: 2533-2539.
[24] Vickers A. Botanical medicines for the treatment of
cancer: rationale, overview of current data, and
methodological considerations for phase I and II trials. Cancer
Invest 2002; 20: 1069-1079.
[25] Nassr-Allah AA, Aboul-Enein AM, Aboul-Enein KM,
Lightfoot DA, Cocchetto A, El-Shemy HA. Anti-cancer and anti-
oxidant activity of some Egyptian medicinal plants. J Med
Plants Res 2009; 3(10): 799-808.
[26] Tiwari P, Kumar B, Kaur M, Kaur G, Kaur H. Phytochemical
screening and extraction: a review. Int Pharm Sci 2011; 1(1):
98106.
[27] Cai LY, Shi FX, Gao X. Preliminary phytochemical analysis
of Acanthopanan trifoliatus (L.) Merr. J Med Plants Res 2011;
5(17): 4059-4064.
[28] Singleton VL, Orthofer R, Lamuela-Raventos RM. Analysis
of total phenols and other oxidation substrates and
antioxidants by means of Folin-Ciocalteu reagent. In: Packer L,
editor. Methods in enzymology. San Diego: Academic Press
Inc; 1999, p. 152-178.
[29] Dorman HJ, Kosar M, Kahlos K, Holm Y, Hiltunen R.
Antioxidant properties and composition of aqueous extracts
from Mentha species, hybrids, varieties, and cultivars. J Agric
Food Chem 2003; 51: 4563-4569.
[30] Blois MS. Antioxidant determinations by the use of a
stable free radical. Nature 1958; 181: 1199-1200.
[31] Bennett JM, Catovsky D, Daniel MT, Flandrin G, Galton
DA, Gralnick HR, et al. Proposal for the classification of the
acute leukemia. French-American-British (FAB) co-operative
group. Br J Haematol 1976; 33: 451-458.
[32] Denizot F, Lang R. Rapid colorimetric assay for cell growth
and survival. Modifications to the tetrazolium dye procedure
giving improved sensitivity and reliability. J Immunol Methods
1986; 89: 271-277.
[33] Lavelle GC, Sturman L, Hadlow WJ. Isolation of mouse
spleen cells from population with high specific infectivity for
scrapie virus. Infect Immun 1972; 5(3): 319-323.
[34] Komansilan A, Abadi AL, Yanuwiadi B, Kaligis DA. Isolation
and identification of biolarvicide from soursop (Annona
muricata Linn) seeds to mosquito (Aedes aegypti) larvae. Int J
Eng Technol 2012; 12(03): 28-32.
[35] Kashani HH, Hoseini ES, Nikzad H, Aarabi MH.
Pharmacological properties of medicinal herbs by focus on
secondary metabolites. Life Sci J 2012; 9(1): 509-520.
[36] Elalla FMA, Shalaby EA. Antioxidant activity of extract and
semi- purified fractions of marine red macroalga, Gracilaria
verrucosa. Aust J Basic Appl Sci 2009; 3(4): 3179-3185.
[37] Kahkonen MP, Hopia AI, Vuorela HJ, Rauha JP, Pihlaja K,
Kujala TS, et al. Antioxidant activity of plant extracts containing
phenolic compounds. J Agric Food Chem 1999; 47(10): 3954-
3962.
[38] Ahalya B, Ravishankar K, PriyaBandhavi P. Evaluation of in
vitro anti-oxidant activity of Annona muricata bark. Int J Pharm
Chem Biol Sci 2013; 3(2): 406-410.
[39] Joshi B, Li L, Taffe B, Zhu Z, Wahl S, Tian H, et al. Apoptosis
induction by a novel anti-prostate cancer compound, BMD188
(a fatty acid 53 containing hydroxamic acid), requires the
mitochondrial respiratory chain. Cancer Res 1999; 59: 4343-
4355
[40] Hirano K, Budiyanto E, Swastika N, Fujii K. Population
dynamics of the whitefly, Bemisia tabaci (Gennadius)
(Homoptera: Aleyrodidae), in Java, Indonesia, with special
reference to spatiotemporal changes in the quantify of food
resources. Ecological Res 1995; 10: 75-85.
[41] Rieser MJ, Fang XP, Rupprecht JK, Hui YH, Smith DL,
McLaughlin JL. Bioactive single-ring acetogenins from seed
extracts of Annona muricata. Planta Med 1993; 59: 91-92.
[42] Wu FE, Gu ZM, Zeng L, Zhao GX, Zhang Y, McLaughlin JL,
et al. Two new cytotoxic monotetrahydrofuran annonaceous
acetogenins, annomuricins A and B, from the leaves of Annona
muricata. J Nat Prod 1995; 58: 830-836.
[43] Kojima N, Tanaka T. Medicinal chemistry of annonaceous
acetogenins: design, synthesis, and biological evaluation of
novel analogues. Molecules 2009; 14: 3621-3661.
 Dari penelitian yang telah dilakukan maka dapat
disimpulkan bahwa pemberian ekstrak air dan etil asetat
daun sirsak pada dosis 20 mg/kg berat badan
menyebabkan kerusakan hati dan ginjal mencit. Pemberian
fraksi 100% H2O, 20% MeOH:H2O, 50% Prosiding Seminar
Presentasi Artikel Ilmiah Dies Natalis FK Unila ke 13 | Bandar
Lampung Oktober 2015 |7
Muhartono dan Subeki | Penggunaan Ekstrak Daun
Sirsak sebagai Obat Kemoterapi Kanker Payudara
MeOH:H2O, 80% MeOH:H2O, dan 100% MeOH dari
ekstrak air serta 100% CHCl3, 3% MeOH:CHCl3, dan 100%
MeOH dari ekstrak etil asetat tidak mematikan sel
kanker payudara pada mencit, akan tetapi fraksi 20%
MeOH:CHCl3 dan 80% MeOH:CHCl3 dari ekstrak etil asetat
dapat mematikan sel kanker payudara mencit.